published_or_final_version / Anatomy / Master / Master of Philosophy

Thesis (M. Phil.)--University of Hong Kong, 1995. / Includes bibliographical references (leave 177-200).

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-26T10:32:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martinez_MarisolMartinez_D.pdf: 11593706 bytes, checksum: 9204e3ab03e2563ba5f0fa74b21ca2e2 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os tumores odontogênicos (TO) são um grupo heterogêneo de lesões derivadas de tecidos dentários, que ocorrem nos ossos gnáticos e tecidos adjacentes. Os TO são raros, na grande maioria benignos, representando menos de 4% de todos os espécimes recebidos em laboratórios de patologia bucal. Os TO malignos frequentemente apresentam dificuldades para diagnóstico e correta classificação, com vários pontos ainda não bem esclarecidos. O objetivo desse trabalho foi comparar as características clínicas, histológicas e imunohistoquímicas do carcinoma ameloblástico (CA) e fibrosarcoma ameloblástico (FSA) e dos seus respectivos correspondentes benignos ou seja ameloblastoma (AM) e fibroma ameloblástico (FA). O carcinoma escamocelular intra-ósseo primário (CEIP) também foi comparado com carcinoma escamocelular de mucosa bucal (CEMB). Foi avaliada a expressão imunohistoquímica de citoqueratinas 5, 7, 8, 14, 19, marcadores de proliferação celular Ki-67, p53, p63 e moléculas de adesão celular CD138 (Syndecan), E-cadherin e ?-catenin. Os resultados mostraram que o CA expressaram mais altos níveis Ki-67, p53 e p63 do que AM por tanto, poderiam ser usados como marcadores para diferenciar essas duas lesões. A expressão de CKs 5 e 19 foram alteradas com relação ao padrão observado em AM, pelo que alterações genéticas de essas proteínas poderiam estar presentes nas células malignas. CK19 pode ser um bom marcador para tumores odontogênicos benignos como AM mas não em malignos pois a expressão nestes é variável. Nas moléculas de adesão celular particularmente CD138 não foi observada diminuição da expressão em AC comparada com AM. As características histológicas assim como o perfil imunohistoquímico do CEMB e CEIP foram similares, por tanto, sugere-se que as características clínicas e radiográficas sejam os principais parâmetros para ser considerados no diagnóstico. Nos casos de fibroma ameloblástico (FA) e fibrosarcoma ameloblástico (AFS) a expressão de CKs foi similar em intensidade e localização e Ki-67 em FSA foi mais alto comparado com FA enquanto que p53 foi negative e ambas lesões. A expressão das moléculas de adesão foi similar em ambas lesões sendo mais intensa com CD138. Finalmente, foram ilustradas as características clínicas e histopatológicas de um caso de fibroodontoma ameloblástico pigmentado e um caso de CEIP originado a partir da transformação maligna de um queratocisto / Abstract: Odontogenic tumors correspond to a heterogenous group of lesions derived from dental tissues, involving the jaws and adjacent tissues. OT are rare, the majority benign, representing less than 4% of all specimens of an oral pathology laboratory. OTs frequently present difficulties for the correct diagnosis and classification, with various points yet to be clarified. The objective of this study was to analyze the clinical, histological and the expression of immunohistochemical markers in malignant odontogenic tumors and the benign counterparts. We assessed CK5, 7, 8, 14, 19, Ki-67, p53, p63, CD138 (Syndecan), E-cadherin and ?-catenin expression by immunohistochemistry in 15 and 9 cases of ameloblastoma (AM) and ameloblastic carcinoma (AC) respectively. Dez cases of primary intraosseous squamous cell carcinoma (PIOSCC), 9 cases of squamous cell carcinoma of mouth (OSCC), 8 cases of ameloblastic fibroma and ameloblastic fibrosarcoma (AFS). Also, these were compared expression patterns between these groups. In summary, Ki-67, p53 and p63 expression were higher in AC than in AM and could be used as markers of malignant transformation of AM. CKs 5 and 19 expression in AC are altered in relation to the pattern found in AM, also CK19 is a good marker for benign odontogenic tumors as AM. Our results do not permit to confirm that expression of CD138, is decreased in AC in relation to AM. The histological features as well as the immunohistochemical profile of OSCC and PIOSCC were similar, therefore, suggests that the clinical and radiographic features are the main parameters to be considered for diagnosis. In both AF and AFS the CKs expression in odontogenic islands was similar in intensity and localization, except CK7 that in most cases of AF was focally positive, while in AFS most cases were negative. Ki-67 proliferative index was higher in AFS that in AF, and p53 was negativo in both lesions. Expression of adhesion molecules was similar in AF and AFS, being most intense for CD138 / Doutorado / Patologia / Doutora em Estomatopatologia

A moesina, uma das proteínas do complexo ERM (ezrina, radixina e moesina), está envolvida nos processos de migração e invasão tumoral, participando da dinâmica do citoesqueleto na movimentação celular associada à ativação da GTPase Rho-A. O objetivo desse estudo foi avaliar a correlação da imunoexpressão da moesina e da Rho-A em tumores odontogênicos benignos, diagnosticados no Serviço de Anatomia Patológica da Faculdade de Odontologia de Bauru (USP), no período de 1963 a 2009. Um total de 45 tumores odontogênicos benignos incluindo 7 ameloblastomas, 8 tumores odontogênicos adenomatóides, 19 tumores odontogênicos queratocísticos, 2 cistos odontogênicos ortoqueratinizantes, 1 tumor odontogênico epitelial calcificante, 2 fibromas ameloblásticos, 4 fiboodontomas ameloblásticos e 2 tumores odontogênicos císticos calcificantes, foram avaliados quanto a expressão imunohistoquímica da moesina e da Rho-A pelas células odontogênicas. A correlação entre as expressões membranosa e citoplasmática da moesina e da Rho-A pelo epitélio odontogênico nos diferentes tumores foi avaliada pelo teste de correlação de Spearman, com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram uma forte expressão membranosa de moesina e citoplasmática de Rho-A em 66,7% e 62,2% dos tumores odontogênicos benignos, respectivamente. Houve uma correlação positiva e estatisticamente significativa entre a expressão membranosa e citoplasmática da moesina (ρ=0,000) e de Rho-A (ρ=0,048) nos tumores. Entretanto, não houve correlação entre as expressões demoesina e de Rho-A nos tumores odontogênicos benignos. Estes resultados comprovam que a moesina e a Rho-A são fortemente expressas pelo epitélio odontogênico neoplásico e, sugerem que ambas proteínas provavelmente participamdo crescimento e expansão local destes tumores odontogênicos benignos. / The moesin, one of the proteins of the ERM complex (ezrin, radixin and moesin), is involved in the migration and tumor invasion processes participating in the cytoskeleton dynamics in cell movement associated with the activation of the GTPase Rho-A. The aim of this study was to evaluate the immunoexpression orrelation of moesin and Rho-A in benign odontogenic tumors, diagnosed at the Bauru School of Dentistry Oral Pathology Biopsy Service of the University of São Paulo in the period of 1963-2009. A total of 45 benign odontogenic tumors including 7 ameloblastomas, 8 adenomatoid odontogenic tumors, 19 keratocystic odontogenic tumors, 2 orthokeratinized odontogenic cyst, 1 calcifying epithelial odontogenic tumor, 2 ameloblastic fibroma, 4 ameloblastic fibroodontoma and 2 calcifying cystic odontogenic tumors, were evaluated for immunohistochemical expression of moesin and Rho-A by odontogenic cells. The correlation between the membranous and cytoplasmic expression of moesin and Rho-A by the odontogenic epithelium in different tumors was evaluated by the Spearman correlation test, with a significance level of 5%. The results showed strong membranous expression of moesin and cytoplasmic expression of Rho-A in 66.7% and 62.2% of the benign odontogenic tumors, respectively. There was a positive and statistically significant correlation between membranous and cytoplasmic expression of moesin (ρ=0.000) and Rho-A (ρ=0.048) in the tumors. However, there was no correlation between the expression of moesin and Rho-A in benign odontogenic tumors. These results show that the moesin and Rho-A are strongly expressed by neoplastic odontogenic epithelium and suggest that both proteins probably participate in the growth and local expansion of these benign odontogenic tumors.

A relação da podoplanina com a proliferação celular tem sido demonstrada, porém ainda é tema de controvérsia. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão da podoplanina em ameloblastomas e remanescentes de epitélio odontogênico (REO) de folículos pericoronários de dentes não-irrompidos e verificar a relação da imunomarcação da podoplanina com a proliferação celular. A amostra incluiu 33 pacientes submetidos à biópsia incisional ou à exérese de ameloblastomas e 32 folículos de pacientes submetidos à extração de dentes não-irrompidos. Todos os espécimes selecionados foram corados pela técnica imuno-histoquímica com os anticorpos anti-podoplanina e anti-Ki-67. A expressão da podoplanina foi avaliada por um método semi-quantitativo de escores. Já o índice de proliferação celular foi obtido pela porcentagem de células positivas (no mínimo 500 células/ameloblastoma e todas as células do REO foram avaliadas). Todos os ameloblastomas apresentaram imunomarcação pela podoplanina nas células periféricas. Nas células centrais, a expressão foi ausente ou fraca. Nos REO, a podoplanina apresentou expressão predominantemente nas células em contato com o tecido conjuntivo. A expressão membranosa da podoplanina foi superior nos ameloblastomas em relação aos REO (!=0,001). Também houve diferença significante entre a imunomarcação citoplasmática e membranosa da podoplanina nos REO (!=0,001). A expressão do Ki-67 foi mais acentuada nos ameloblastomas do que nos REO (!<0,001). A correlação entre a expressão citoplasmática (r= -0,15, != 0, 396) e membranosa (r= 0,00, != 0, 989) da podoplanina e do Ki-67 nos ameloblastomas não foi estatisticamente significante, tampouco entre a imunomarcação citoplasmática (r= 0,15, != 0, 421) e membranosa (r= -0, 09, ! = 0, 629) da podoplanina e do Ki-67 nos REO. Os resultados sugerem que não há associação da podoplanina com a proliferação celular e reforçam a necessidade da elucidação do papel desta proteína em tumores odontogênicos benignos. / The association between podoplanin and cellular proliferative activity has been demonstrated but is still source of debate. The aim of this study was to investigate the expression of podoplanin in ameloblastomas and remnants of odontogenic epithelium (ROE) from dental follicles of unerupted teeth and verify the relation between the podoplanin expression and proliferative activity of the odontogenic cells. Thirty-three patients submitted to the incisional biopsy or resection of ameloblastoma and 32 patients submitted to the extraction of unerupted tooth were selected for analysis. Archived paraffin-embedded ameloblastomas and dental follicles specimens were sectioned and stained with anti-human podoplanin and anti-Ki-67 antibodies. The podoplanin expression by odontogenic epithelial cells was evaluated using a score method and the Ki-67 labelling index was obtained by the percentage of positive odontogenic cells (at least 500 cells/ameloblastoma and all ROE cells). All ameloblastomas showed podoplanin expression in ameloblast-like cells of the epithelial islands. Weak or absent immunostaining was observed in the central cells resembling stellate reticulum. Podoplanin expression in ROE was mainly found in the cells in contact with the connective tissue. Membranous expression of podoplanin in ameloblastomas was stronger than its expression in ROE (!=0.001). Statistically significant difference between cytoplasmic and membranous expression of podoplanin in ROE was observed (!=0.001). The index of cellular odontogenic proliferative activity, verified by Ki-67 expression, was highest in ameloblastomas when compared with ROES (!<0.001). No statistically significant correlation between podoplanin and cellular odontogenic proliferative activity in ameloblastomas and dental follicles was found (!>0.05). These results support the evidence that there is no connection between podoplanin expression and odontogenic cellular proliferative activity in ameloblastomas and reinforce that the exact role of this protein in benign odontogenic tumor needs to be elucidated.

Resumo: O tumor odontogênico adenomatóide (TOA) é um tumor benigno composto de epitélio odontogênico com uma variedade de padrões arquiteturais histológicos, embebido em um estroma de tecido conjuntivo maduro e caracterizado por um crescimento lento, porém progressivo. O tumor odontogênico epitelial calcificante (TOEC) é definido como uma neoplasia odontogênica epitelial localmente invasiva, caracterizada pela presença de material amilóide que pode se tornar calcificado. Ambos recentemente reclassificados pela Organização Mundial da Saúde como tumores de epitélio odontogênico, com estroma fibroso maduro e sem ectomesênquima odontogênico. Com o objetivo de contribuir para o estabelecimento de tratamentos e prognósticos mais precisos, através de um melhor entendimento do comportamento biológico destes tumores, este estudo se propôs aavaliar o potencial proliferativo dos dois tumores que por vezes apresentam aspectos histológicos coincidentes, utilizando a técnica histoquímica do AgNOR e a imunohistoquímica de evidenciação de PCNA, P53 e Ki-67. Foram utilizados 5 espécimes de cada tumor. A análise comparativa dos resultados quantitativos/ qualitativos da histoquímica de evidenciação das NORs e dos resultados imunohistoquímicos para os três anticorpos estudados confirmam o comportamento patológico neoplásico benigno do tumor odontogênico adenomatóide e do tumor odontogênico epitelial calcificante. Foi observada distribuição positiva do PCNA nas células epiteliais das áreas sólidas e adenomatóides do TOA e nas áreas sólidas de células epiteliais poliédricas do TOEC, o que permite sugerir estes sítios como os responsáveis pelo crescimento dos respectivos tumores. / Abstract: The adenomatoid odontogenic tumor (OAT) is a benign tumor composed of odontogenic epithelium in a variety of histoarquitectural patterns, embedded in a mature connective tissue stroma and characterized by slow but progressive growth. The calcifying epithelial odontogenic tumor (CEOT) is defined as an epithelial odontogenic neoplasia locally invasive, characterized by the presence of amiloyd material that may become calcified. Both were recently reclassified by World Health Organization as tumors of odontogenic epithelium, with mature fibrous stroma without odontogenic ectomesenchyme. With the aim of contributing to the achievement of more precise treatments and prognosis, based on a better understanding of the biological behavior of these tumors, this study proposed evaluation of the proliferative potential of both tumors that sometimes present similar histological patterns, using AgNOR histochemistry and imunohistochemical expression of PCNA, P 53 and Ki- 67. There were analyzed 5 specimens of each tumor. Comparative analysis of quantitative/qualitative results of the NORs staining and the histochemical expression results of the antibodies studied confirm the benign neoplastic pathological behavior of the AOT and CEOT and the positive expression of PCNA distributed among epithelial cells of solid nodules and adenomatoid structures of AOT and among the polyhedral epithelial CEOT cells allowed suggest these sites as the responsible ones for respective tumoral growth. / Orientador: Marcelo Macedo Crivelini / Coorientador: Ana Maria Pires Soubhia / Banca: Alvimar Lima de Castro / Banca: Luis Antonio de Assis Taveira / Banca: Mireile São Geraldo dos Santos Souza / Banca: Symonne Pimentel Castro de Oliveira Lima Parizotto / Doutor

Tumores odontogênicos constituem grupo abrangente de afecções tumorais, sendo ameloblastomas e tumores odontogênicos queratocísticos as lesões benignas de maior frequência, cujas características biológicas são pouco conhecidas. Objetivo do presente estudo foi avaliar o perfil imuno-histoquímico das proteínas pRB e p53 em ameloblastoma e tumor odontogênico queratocístico. Foram avaliadas amostras de material parafinado de 21 casos de ameloblastoma e de 20 casos de tumor odontogênico queratocístico para ensaio de imuno-histoquímica com os anticorpos anti-pRB e anti-p53. A contagem da imuno-marcação foi realizada a partir de fotografias de alta resolução processadas no software ImageJ para quantificação manual em campo de 1000 células. A localização da imuno-marcação para ambos anticorpos foi semelhante, sendo em ameloblastomas predominantemente nas células da periferia e, em tumores odontogênicos queratocísticos, nas camadas suprabasais. Quantitativamente, as porcentagens de células marcadas foram estatisticamente maior nos ameloblastoma para anti-p53 (p=0,01) e maior nos tumores odontogênicos queratocísticos para anti-pRB (p=0,04). Não houve correlação estatística entre a porcentagem de células marcadas para anti-p53 e anti-pRB nos ameloblastomas, porém, esta correlação foi positiva e moderada nos tumores odontogênicos queratocísticos (r=0,537; p=0,018). Nota-se ligeira diferença na quantificação das imuno-marcações para o anti-p53 e anti-pRB. Tais resultados devem ser ponderados pela reduzida casuística, porém, sugerem perfis distintos em mecanismos biológicos determinantes para ambos os tumores. / Odontogenic tumors are a comprehensive group of tumor diseases, being ameloblastomas and keratocystic odontogenic tumors the most frequent benign odontogenic tumors. Their biological characteristics are little unknown. The aim of present study was to evaluate the immunohistochemical profile of pRB and p53 proteins in 21 cases of ameloblastomas and 20 cases of keratocystic odontogenic tumors for anti-pRB and anti-p53 antibodies. The quantification of immunostaining was performed manually with high-resolution photographs processed in the ImageJ software to quantify positive cells in a 1000 cells-field. The location of immunostaining for both antibodies was similar. In ameloblastomas, positive cells are located mainly in the peripheral layers, whereas in keratocystic odontogenic tumors the positive cells are located in the suprabasal layers. Quantitatively, the percentage of labeled cells was statistically higher in ameloblastomas for anti-p53 (p = 0.01) and higher in keratocystic odontogenic tumors for anti-pRB (p = 0.04). There was no statistical correlation between the percentage of labeled cells to anti-p53 and anti-pRB in ameloblastomas, however, its correlation was positive and moderate in keratocystic odontogenic tumors (r = 0.537; p = 0.018). It is possible to identify a slight difference in immuno-quantification for anti-p53 and anti-pRB among these lesions. These results must be pondered by the small sample, however, is suggests a different profile in a preponderant key biological mechanisms for odontogenic tumors.

A moesina, uma das proteínas do complexo ERM (ezrina, radixina e moesina), está envolvida nos processos de migração e invasão tumoral, participando da dinâmica do citoesqueleto na movimentação celular associada à ativação da GTPase Rho-A. O objetivo desse estudo foi avaliar a correlação da imunoexpressão da moesina e da Rho-A em tumores odontogênicos benignos, diagnosticados no Serviço de Anatomia Patológica da Faculdade de Odontologia de Bauru (USP), no período de 1963 a 2009. Um total de 45 tumores odontogênicos benignos incluindo 7 ameloblastomas, 8 tumores odontogênicos adenomatóides, 19 tumores odontogênicos queratocísticos, 2 cistos odontogênicos ortoqueratinizantes, 1 tumor odontogênico epitelial calcificante, 2 fibromas ameloblásticos, 4 fiboodontomas ameloblásticos e 2 tumores odontogênicos císticos calcificantes, foram avaliados quanto a expressão imunohistoquímica da moesina e da Rho-A pelas células odontogênicas. A correlação entre as expressões membranosa e citoplasmática da moesina e da Rho-A pelo epitélio odontogênico nos diferentes tumores foi avaliada pelo teste de correlação de Spearman, com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram uma forte expressão membranosa de moesina e citoplasmática de Rho-A em 66,7% e 62,2% dos tumores odontogênicos benignos, respectivamente. Houve uma correlação positiva e estatisticamente significativa entre a expressão membranosa e citoplasmática da moesina (&#x3C1;=0,000) e de Rho-A (&#x3C1;=0,048) nos tumores. Entretanto, não houve correlação entre as expressões demoesina e de Rho-A nos tumores odontogênicos benignos. Estes resultados comprovam que a moesina e a Rho-A são fortemente expressas pelo epitélio odontogênico neoplásico e, sugerem que ambas proteínas provavelmente participamdo crescimento e expansão local destes tumores odontogênicos benignos. / The moesin, one of the proteins of the ERM complex (ezrin, radixin and moesin), is involved in the migration and tumor invasion processes participating in the cytoskeleton dynamics in cell movement associated with the activation of the GTPase Rho-A. The aim of this study was to evaluate the immunoexpression orrelation of moesin and Rho-A in benign odontogenic tumors, diagnosed at the Bauru School of Dentistry Oral Pathology Biopsy Service of the University of São Paulo in the period of 1963-2009. A total of 45 benign odontogenic tumors including 7 ameloblastomas, 8 adenomatoid odontogenic tumors, 19 keratocystic odontogenic tumors, 2 orthokeratinized odontogenic cyst, 1 calcifying epithelial odontogenic tumor, 2 ameloblastic fibroma, 4 ameloblastic fibroodontoma and 2 calcifying cystic odontogenic tumors, were evaluated for immunohistochemical expression of moesin and Rho-A by odontogenic cells. The correlation between the membranous and cytoplasmic expression of moesin and Rho-A by the odontogenic epithelium in different tumors was evaluated by the Spearman correlation test, with a significance level of 5%. The results showed strong membranous expression of moesin and cytoplasmic expression of Rho-A in 66.7% and 62.2% of the benign odontogenic tumors, respectively. There was a positive and statistically significant correlation between membranous and cytoplasmic expression of moesin (&#x3C1;=0.000) and Rho-A (&#x3C1;=0.048) in the tumors. However, there was no correlation between the expression of moesin and Rho-A in benign odontogenic tumors. These results show that the moesin and Rho-A are strongly expressed by neoplastic odontogenic epithelium and suggest that both proteins probably participate in the growth and local expansion of these benign odontogenic tumors.

Tumores odontogênicos constituem grupo abrangente de afecções tumorais, sendo ameloblastomas e tumores odontogênicos queratocísticos as lesões benignas de maior frequência, cujas características biológicas são pouco conhecidas. Objetivo do presente estudo foi avaliar o perfil imuno-histoquímico das proteínas pRB e p53 em ameloblastoma e tumor odontogênico queratocístico. Foram avaliadas amostras de material parafinado de 21 casos de ameloblastoma e de 20 casos de tumor odontogênico queratocístico para ensaio de imuno-histoquímica com os anticorpos anti-pRB e anti-p53. A contagem da imuno-marcação foi realizada a partir de fotografias de alta resolução processadas no software ImageJ para quantificação manual em campo de 1000 células. A localização da imuno-marcação para ambos anticorpos foi semelhante, sendo em ameloblastomas predominantemente nas células da periferia e, em tumores odontogênicos queratocísticos, nas camadas suprabasais. Quantitativamente, as porcentagens de células marcadas foram estatisticamente maior nos ameloblastoma para anti-p53 (p=0,01) e maior nos tumores odontogênicos queratocísticos para anti-pRB (p=0,04). Não houve correlação estatística entre a porcentagem de células marcadas para anti-p53 e anti-pRB nos ameloblastomas, porém, esta correlação foi positiva e moderada nos tumores odontogênicos queratocísticos (r=0,537; p=0,018). Nota-se ligeira diferença na quantificação das imuno-marcações para o anti-p53 e anti-pRB. Tais resultados devem ser ponderados pela reduzida casuística, porém, sugerem perfis distintos em mecanismos biológicos determinantes para ambos os tumores. / Odontogenic tumors are a comprehensive group of tumor diseases, being ameloblastomas and keratocystic odontogenic tumors the most frequent benign odontogenic tumors. Their biological characteristics are little unknown. The aim of present study was to evaluate the immunohistochemical profile of pRB and p53 proteins in 21 cases of ameloblastomas and 20 cases of keratocystic odontogenic tumors for anti-pRB and anti-p53 antibodies. The quantification of immunostaining was performed manually with high-resolution photographs processed in the ImageJ software to quantify positive cells in a 1000 cells-field. The location of immunostaining for both antibodies was similar. In ameloblastomas, positive cells are located mainly in the peripheral layers, whereas in keratocystic odontogenic tumors the positive cells are located in the suprabasal layers. Quantitatively, the percentage of labeled cells was statistically higher in ameloblastomas for anti-p53 (p = 0.01) and higher in keratocystic odontogenic tumors for anti-pRB (p = 0.04). There was no statistical correlation between the percentage of labeled cells to anti-p53 and anti-pRB in ameloblastomas, however, its correlation was positive and moderate in keratocystic odontogenic tumors (r = 0.537; p = 0.018). It is possible to identify a slight difference in immuno-quantification for anti-p53 and anti-pRB among these lesions. These results must be pondered by the small sample, however, is suggests a different profile in a preponderant key biological mechanisms for odontogenic tumors.

Thesis (M.D.S.)--University of Hong Kong, 2005.