PRACIANO, Claudênia Costa. Press imprint smear : um método simples, rápido e de baixo custo no diagnóstico de Leishmaniose cutânea. 2014. 80 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-01-27T11:01:27Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_ccpraciano.pdf: 2009797 bytes, checksum: 917bc1b9cc42e4e9dfece1dd9427da86 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-01-27T11:22:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_ccpraciano.pdf: 2009797 bytes, checksum: 917bc1b9cc42e4e9dfece1dd9427da86 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-27T11:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_ccpraciano.pdf: 2009797 bytes, checksum: 917bc1b9cc42e4e9dfece1dd9427da86 (MD5) Previous issue date: 2014 / The cutaneous leishmaniasis (CL) is the most common form of leishmaniasis, with 1 million new cases per year. Presents a broad clinical spectrum, which may be confused with other diseases that affect the skin. Thus, it is of fundamental importance to rapid and accurate diagnosis of the disease. Parasitological diagnosis is the most used test in laboratory routine, however direct examination generally has low sensitivity. As a result, it becomes necessary to find alternative techniques for the diagnosis of leishmaniasis. This study compared the test press imprint smear with histological examination and immunohistochemistry, for the direct diagnosis of leishmaniasis. Patients with clinical suspicion of LC underwent a sampling from two samples of biopsies from the edge of the lesions, with a punch of 3 mm for the tests: press imprint smear, histological examination and immunohistochemistry. The latter was considered the gold standard test. The press imprint smear consisted in crushing the biopsy fragment between two glass plates under pressure so that the extract (juice) tissue spreads on the surface of the two blades. The smears were stained with Giemsa for the detection of amastigotes. Another fragment was fixed in 10% formalin. From this sample, a blade was used in histology, stained with hematoxylin-eosin, and one for the immunohistochemical test. In total, 78 patients were included with clinical and epidemiological diagnosis of LC. The press imprint smear technique and histologic examination were conducted on the sample of all patients. However, immunohistochemistry was performed in only 73 samples. Seventy-two (98,6%) were positive for leishmania in immunohistochemistry, with sensitivity of 98,6%; the press imprint smear was positive in 48 patients (61,5%), with sensitivity of 58,3%. In the histological examination were identified amastigotes in 35 patients (44,9%), with sensitivity of 45,8%. The press imprint smear was more sensitive than histological examination for the diagnosis of cutaneous leishmaniasis. In addition, a technique is inexpensive and easy to perform. / A leishmaniose cutânea (LC) é a forma mais comum da leishmaniose, com 1 milhão de novos casos por ano. Apresenta um amplo espectro clínico, podendo ser confundida com outras doenças que acometem a pele. Desse modo, é de fundamental importância o diagnóstico rápido e preciso da doença. O diagnóstico parasitológico é o mais utilizado na rotina laboratorial, entretanto o exame direto geralmente apresenta baixa sensibilidade. Em virtude disso, torna-se necessário buscar técnicas alternativas para o diagnóstico das leishmanioses. Neste trabalho, comparou-se o teste do press imprint smear com o exame histológico e a imuno-histoquímica, no diagnóstico direto de leishmaniose cutânea. Pacientes com suspeita clinica de LC foram submetidos à coleta de duas biópsias da borda das lesões, com punch de 3 mm, para a realização dos testes: press imprint smear, exame histológico e imuno-histoquímica. Este último foi considerado o teste padrão ouro. O press imprint smear consistiu em esmagar o fragmento de biópsia entre duas lâminas de vidro sob pressão, de tal modo que o extrato (suco) tissular se espalha na superfície das duas lâminas. Os esfregaços foram corados com Giemsa, para pesquisa de amastigotas. Outro fragmento foi fixado em formalina a 10%. Desta amostra, uma lâmina foi utilizada no exame histológico, corada com hematoxilina-eosina, e outra para o teste de imuno-histoquímica. Ao total, foram incluídos 78 pacientes com diagnóstico clinico-epidemiológico de LC. A técnica do press imprint smear e o exame histológico foram realizados na amostra de todos os pacientes. Entretanto, a imuno-histoquímica foi realizada em apenas 73 amostras. Setenta e dois (98,6%) foram positivos para Leishmania na imuno-histoquímica, com sensibilidade de 98,6%; o press imprint smear foi positivo em 48 pacientes (61,5%), com sensibilidade de 58,3%. No exame histológico foram identificadas amastigotas em 35 pacientes (44,9%), apresentando sensibilidade de 45,8%. Os resultados mostraram que o press imprint smear apresentou maior sensibilidade do que o exame histológico, para o diagnóstico da leishmaniose cutânea. Além disso, é uma técnica de baixo custo e fácil execução.

CORREIA NETO, Cornevile. Produção e purificação parcial de IgY anti-lectina de sementes de Canavalia brasiliensis (ConBr) (Leguminosae) em galinhas poedeiras. 2015. 72 f. Dissertação (mestrado em biotecnologia de recursos naturais)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-03-31T18:35:56Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_ccorreianeto.pdf: 1670684 bytes, checksum: 825c0b40271bc72b068773e82944d3c8 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-18T20:14:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_ccorreianeto.pdf: 1670684 bytes, checksum: 825c0b40271bc72b068773e82944d3c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T20:14:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_ccorreianeto.pdf: 1670684 bytes, checksum: 825c0b40271bc72b068773e82944d3c8 (MD5) Previous issue date: 2015 / Lectins are a group of proteins present in various living organisms, particularly in plants and especially in Leguminosae seeds. Among this family, a species that stands out for having large amount of lectin in the seed is the Canavalia brasiliensis. One approach for the investigation of lectins on biological systems is the detection there of by techniques involving antibody. Such techniques may include from classical immunochemical assays (immunodiffusion, immunoelectrophoresis and rocketimunoeletroforese) to ELISA experiments and advanced microscopy techniques. In this sense, antibodies become biotechnological tools invaluable since they are capable of specifically recognizing epitopes of the target molecules. Immunoglobulins (Igs) are proteins present in high concentration in the blood plasma of mammals. They are vectors of humoral immunity, with the primary function to join the foreign antigens to the individual so as to neutralize them. In the case of poultry the main immunoglobulin class (IgYs) can be found not only in blood, but also in egg yolk. This fact enables fast and efficient purification of these molecules facilitating its use as biotechnological inputs. Thus, this study aimed to produce antibodies against the lectin extracted from Canavalia brasiliensis seed (ConBr) (Fabaceae) in laying hens, implementing production methodology of new biotechnological inputs for the study of lectins. For this laying hens were immunized with 200 or 400μg of lectin Canavalia brasiliensis (ConBr) for 15 weeks at 10-day intervals. Collected eggs from vaccinated birds had their isolated and precipitated yolk in 0-30% fraction with ammonium sulfate for partial purificaçãoo of IgYs. Confirmation of the presence of antibodies was made by immunodiffusion assays agarose gel. The fraction showed 0-30%, from the first week after the immunization, capable of recognizing ConBr IgYs. This profile appeared in all groups over the 15-week experiment. The production of specific IgYs against the lectin from Canavalia brasiliensis (ConBr) proved feasible and remained throughout the experiment, possibly in reasonable quantities. In this sense, IgYs produced in this work provide a powerful biotechnological tool to be made available for future studies. / As lectinas constituem um grupo de proteínas presentes em diversos organismos vivos, sobretudo em vegetais e especialmente em sementes de Leguminosae. Dentre essa família, uma espécie que se destaca por possuir grande quantidade de lectina na semente é a Canavalia brasiliensis. Uma das possíveis abordagens para a investigação de lectinas em sistemas biológicos é a detecção das mesmas através de técnicas que envolvam anticorpos. Tais técnicas podem incluir desde ensaios clássicos de imunoquímica (imunodifusão, imunoeletroforese e rocketimunoeletroforese), até experimentos de ELISA e técnicas avançadas de microscopia. Neste sentido, os anticopos tornam-se ferramentas biotecnológicas de grande valia uma vez que são capazes de reconhecer especificamente epítopos das moléculas alvo. As imunoglobulinas (Igs) são proteínas presentes em grande concentração no plasma sanguíneo de mamíferos. São os vetores da imunidade humoral, tendo como função principal unir-se aos antígenos estranhos ao indivíduo, de modo a neutralizá-los. No caso das aves a principal classe de imunoglobulinas (IgYs) pode ser encontrada não somente no sangue mas também nas gemas dos ovos. Esse fato permite purificação rápida e eficiente dessas moléculas facilitando seu uso como insumos biotecnológicos. Dessa forma, este trabalho teve por objetivo produzir anticorpos contra a lectina extraída da semente de Canavalia brasiliensis (ConBr) (Leguminosae) em galinhas poedeiras, implementando metodologia de produção de novos insumos biotecnológicos para o estudo de lectinas. Para tanto galinhas poedeiras foram imunizadas com 200 ou 400μg da lectina de Canavalia brasiliensis (ConBr) por 15 semanas em intervalos de 10 dias. Ovos coletados das aves imunizadas tiveram suas gemas isoladas e precipitadas na fração 0-30% com sulfato de amônio para a purificação parcial das IgYs. A confirmação da presença dos anticorpos foi feita por ensaios de imunodifusão em gel de agarose. A fração 0-30% apresentou, a partir da primeira semana após a imunização, as IgYs capazes de reconhecer ConBr. Esse perfil se apresentou em todos os grupos ao longo das 15 semanas de experimento. A produção das IgYs específicas contra a lectina de Canavalia brasiliensis (ConBr) se mostrou viável e permaneceu durante todo experimento, possivelmente em quantidades razoáveis. Neste sentido, as IgYs produzidas nesse trabalho constituem uma potente ferramenta biotecnológica a ser disponibilizada para estudos futuros.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2010-03-07T17:17:10Z No. of bitstreams: 1 2009_MarcoAurelioSilvaPeixoto.pdf: 2637387 bytes, checksum: 1a76f8f7944669c1b032e4ab59d38fed (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2010-03-11T13:37:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_MarcoAurelioSilvaPeixoto.pdf: 2637387 bytes, checksum: 1a76f8f7944669c1b032e4ab59d38fed (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-11T13:37:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_MarcoAurelioSilvaPeixoto.pdf: 2637387 bytes, checksum: 1a76f8f7944669c1b032e4ab59d38fed (MD5) Previous issue date: 2009-02-05 / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença parasitária endêmica, principalmente na região Centro-Oeste. A Leishmania é um parasita que através de seus antígenos secretados e não secretados desencadeiam, respectivamente, uma resposta imune predominantemente celular (inata e adquirida) e em menor proporção humoral. Na resposta inata participam o sistema complemento, polimorfonucleares, macrófagos e células natural killer numa resposta inicial. Desta resposta inicial, há produção de citocinas (IL-12 e INF-γ e TNF-α) que ativam linfócitos T CD4+ e T CD8+ para resposta imune celular adquirida. A IL-12 diferencia os linfócitos T CD4 numa resposta Th1, com produção de INF-γ, ativação de macrófagos e resolução da doença. Enquanto, a IL-4 tem efeito reverso direcionando para uma resposta Th2 com diminuição da ativação de macrófagos, prevenindo o dano tecidual e permitindo a persistência do parasita. Foram descritos casos de pacientes com a forma mucosa da LTA do Hospital Universitário de Brasília, analisando dados epidemiológicos, clínico-laboratoriais e correlacionando com os aspectos histopatológicos e imuno-histoquímico (CD45ro, CD4, CD8, CD20, CD15, CD68 e Bcl-2). Perfil mais freqüente dos pacientes: sexo masculino, com média de idade de 50 anos, da região Centro-Oeste, com queixa de obstrução nasal e lesão de mucosa nasal infiltrada com ulceração e perfuração de septo ao exame otorrinolaringológico. A maioria com exames laboratoriais (IFA, inoculação em hamster, cultura, esfregaço e intradermorreação de Montenegro) compatíveis com a doença, sendo que em 44,44% dos casos foi possível a identificação da Leishmania por algum método auxiliar. Na histopatologia, de maneira geral, encontrou-se um infiltrado inflamatório linfohistioplasmocitário, às vezes acompanhado de uma reação granulomatosa com ou sem necrose. As classes histopatológicas encontradas foram: REC (reação exsudativa celular), REN (reação exsudativa necrótica), RENG (reação exsudativa necrótico-granulomatosa) e REG (reação exsudativa granulomatosa), sendo a primeira a mais freqüente (66,67%). Essas classes são estatisticamente significantes (p<0,05) diferentes quando comparadas entre si em relação à quantidade de células positivas na imuno-histoquímica, exceto entre as classes REG e REN (p>0,05). Esse estudo atestou a aplicabilidade e a praticidade do programa UnBVision na análise quantitativa das células nas reações imuno-histoquímicas. Na imuno-histoquímica, os linfócitos T predominaram em relação aos linfócitos B, comprovando que a doença tem reação imune mais celular do que humoral, sendo que dentre os linfócitos T, prevaleceu os linfócitos T CD4+ em relação aos linfócitos T CD8+, exceto em único exemplo de caso REG. Houve expressão considerável de Bcl- 2 no infiltrado inflamatório. Grupos com contato prévio com o antimonial pentavalente e com presença de granulomas ou de Leishmania ao método histopatológico não tiveram significância estatística (p>0,05) para explicar a diferença de número de células positivas para todos os marcadores aplicados no estudo. Em estudos complementares, o uso da imuno-histoquímica para identificar as citocinas e marcadores pró e antiapoptóticos podem contribuir para melhores esclarecimentos da imunopatologia da doença. __________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The American Integumentary Leishmaniasis (AIL) is a parasitic endemic disease, mainly in the Center-West region. Leishmania is a parasite that through its secreted and not secreted antigens trigger, respectively, a predominantly cellular immune response (innate and acquired) and to a lesser extent humoral. In the innate response, complement system, neutrophils, macrophages and natural killer cells work in an initial response. In this initial response, there is production of cytokines (IL-12, INF-γ and TNF-α) that activate T CD4+ and T CD8+ cells for acquired cellular immune response. The IL-12 action differentiates CD4 T cell to Th1 response and production of INF-γ, activation of macrophages and resolution of the disease. While the IL-4 has reverse effect directing to Th2 response with decreased activation of macrophages, this reaction prevents tissue damage and allows the persistence of the parasite. In this study, we have described patients with the mucosal form of AIL, they were treated in the University Hospital of Brasilia, analyzing epidemiological, clinical and laboratory data and correlating with the histopathologic features and the following immunohistochemical antibodies: CD45RO, CD4, CD8, CD20, CD15, CD68 and Bcl-2. Most common profile of patients: male, mean age 50 years, from Center-West region, with complaint of nasal obstruction and injury of nasal mucosa infiltrated with septum ulceration and perforation detected in the otorhinolaryngologic examination. Most of them with laboratory tests (indirect immunofluorescence, inoculation in hamster, smear, culture and Montenegro Skin Test) compatible with the disease, and in 44.44% of the cases it was possible the identification of Leishmania by some auxiliary method. In histopathology, in general, there was an inflammatory infiltrate lynphohistioplasmocitary sometimes accompanied by a granulomatous reaction with or without necrosis. The histopathological grades found were: ECR (exudative cellular reaction), ENR (exudative necrotic reaction), NEGR (necrotic-exudative granulomatous reaction) and EGR (exudative granulomatous reaction), the first one was the most frequent (66.67%) These classes are statistically significant (p <0.05) different when compared to each other with the amount of positive cells in immunohistochemistry, except between ENR and EGR classes (p> 0.05). This study attested the applicability and practicality of the program UnBVision in quantitative analysis of cells in immunohistochemical reactions. In immunohistochemistry, the T cells were predominant on B cells, confirming that the disease as more cellular immune response than humoral, and in T cells, prevailed the CD4+ T on CD8+ T cells, except in only one instance case EGR. There was considerable expression of Bcl-2 in inflammatory infiltrate. In groups with previous contact with pentavalent antimony and presence of granulomas or Leishmania the histopathologic method were not statistically significant (p> 0.05) to explain the difference in the number of positive cells for all markers used in the study. In further studies, the use of immunohistochemistry to identify the cytokines and markers pro and antiapoptosis can contribute to better explanations of the immunopathology of disease.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-19T18:35:46Z No. of bitstreams: 1 2009_FabianaPiraniCarneiro.pdf: 2841587 bytes, checksum: f2b36b2de50c8e23abfe95910cd4e445 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-19T05:11:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_FabianaPiraniCarneiro.pdf: 2841587 bytes, checksum: f2b36b2de50c8e23abfe95910cd4e445 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-19T05:11:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_FabianaPiraniCarneiro.pdf: 2841587 bytes, checksum: f2b36b2de50c8e23abfe95910cd4e445 (MD5) Previous issue date: 2009 / Considerando o papel importante da apoptose e da célula T reguladora (Treg) na modulação da resposta imune, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão de proteínas envolvidas na apoptose e a expressão do fator de transcrição Foxp3 (marcador da célula Treg) em amostras de biópsia das diferentes formas clínicas da LTA (leishmaniose tegumentar americana): leishmaniose cutânea localizada (LCL), leishmaniose disseminada (LD), leishmaniose recidiva cútis (LRC), leishmaniose cutâneo-mucosa (LCM) e a leishmaniose cutânea difusa (LCD). Essa expressão foi correlacionada com dados clínico-laboratoriais, alterações histológicas e tipos celulares constituintes do infiltrado inflamatório. Foi avaliada a expressão imunohistoquímica de marcadores para linfócito T (CD45RO, CD4 e CD8), linfócito B (CD20), neutrófilo (CD15), macrófago (CD68), célula de Langerhans (CD1a), dos marcadores da apoptose (Bcl-2, Bak, Bcl-X, FasL, caspase-3 ativa) e do marcador para célula T reguladora (Foxp3) em 95 amostras de biópsias que foram distribuídas de acordo com as formas clínicas apresentadas pelos pacientes: LCL (n=68), LD (n=3), LRC (n=1), LCM (n=16) e LCD (n=7). Células apoptóticas (positivas para caspase-3 ativa) foram identificadas em apenas 49.33% (37/75) das amostras avaliadas. A maior expressão de caspase-3 ativa foi observada na LCL e houve uma correlação positiva entre a expressão de caspase-3 ativa e a expressão de FasL (r=0,49; p=0,0009; n=43) nesta forma clínica. Estes dados sugerem que a via Fas/FasL seja mediadora da apoptose na LTA e importante na evolução clínica das lesões, já que a LCL é a forma clínica caracterizada pela resolução espontânea das lesões. Houve um desequilíbrio na expressão de membros pró e anti-apoptóticos da família Bcl-2 em macrófagos e granulomas epitelioides, que expressaram Bak, mas não Bcl-2 e Bcl-X. Nas formas amastigotas, a expressão de Bcl-X sugere a possível existência de uma proteína, semelhante à Bcl-X encontrada em organismos multicelulares, mas esse achado deve ser investigado por outros métodos. Células Foxp3+ foram observadas apenas em 39.5% (32/81) das amostras avaliadas. A LCD, apesar de apresentar um menor número de células CD4+, mostrou um número significativamente maior de células Foxp3+ quando comparada com a LCL (p<0,03) e estes resultados podem indicar que o maior número de células Treg na LCD possa estar associado com a hiporresponsividade observada nessa forma clínica. Além disso, a correlação positiva (r=0,6185, p=0,0001, n=64) entre a expressão de Foxp3 e caspase-3 ativa observada na LCL e LCM, sugere que a apoptose possa ser um possível mecanismo de ação das células Treg nestas formas clínicas. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Considering the importance of apoptosis and regulatory T cell (Treg) in modulation of the immune response, our aim was to evaluate the expression of apoptosis-related proteins and Foxp3 (marker of regulatory T cell) in lesions of the different clinical forms of ATL (american tegumentary leishmaniasis): localized cutaneous leishmaniasis (LCL), disseminated leishmaniasis (DL), leishmaniasis recidiva cutis (LRC), mucocutaneous leishmaniasis (MCL) and diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL). To better characterize this expression, we also performed an analysis of histopathological findings and an identification of cell types found in inflammatory infiltrate. We analyzed, by immunohistochemistry, the expression of markers of cell subtypes (CD45RO, CD4, CD8, CD20, CD68, CD15, CD1a), markers of apoptosis (Bcl-2, Bak, Bcl-X, active caspase-3 and FasL) and presence of Foxp3+ cells in 95 biopsy samples that were divided according to the different clinical presentations of ATL: LCL (n=68), MCL (n=16), DCL (n=7), DL (n=3), LRC (n=1). Apoptotic cells (active caspase-3+) were observed in 49.33% (37/75) of the samples and the number of positive cells was low in all clinical forms. Apoptotic (active caspase 3+) cells were more frequent in LCL and a significant positive correlation between the expression of active caspase-3 and FasL was observed in this clinical form. As LCL is the clinical presentation characterized by self-healing evolution, our data suggest the Fas/FasL pathway may be important in clinical evolution of the lesions in ATL. An unbalance in expression of pro-apoptotic and anti-apoptotic members of the Bcl-2 family was observed in vacuolated macrophages and granuloma that expressed Bak but not Bcl-X and Bcl-2. The expression of Bcl-X in amastigote forms suggests a possible existence of counterparts or homologues of the Bcl-X observed in multicellular organisms, but this finding must be investigated by other methods. Foxp3+ cells were observed in 39.5% (32/81) of the samples and the number of positive cells was low in all the clinical forms. DCL (diffuse cutaneous leishmaniasis), even presenting a significantly lower number of CD4+ T cells, showed a higher expression of Foxp3 when compared with LCL and this data suggests that increased number of Treg cells may be associated to the hyporesponsiveness observed in DCL. In LCL and MCL, the number of Foxp3+ cells correlated positively with the number of apoptotic cells (active caspase 3+ cells) indicating that the apoptosis may be a possible mechanism of action of Foxp3+ regulatory T cell in these clinical forms.

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-11T22:55:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MartinezMata_Guillermo_D.pdf: 5085284 bytes, checksum: 173edda03dc15aa9efb05b262cd34e77 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A região bucomaxilofacial é freqüentemente afetada por lesões císticas e tumorais que apresentam características clínicas e histológicas heterogêneas cuja origem está associada a diversos estágios da odontogênese. Entre as lesões císticas mais freqüentes, temos o queratocisto odontogênico (QO), enquanto o cisto odontogênico ortoqueratinizado (COO) é uma lesão rara. O QO apresenta índices de prevalência e recorrência elevados, sendo a terceira lesão cística mais comum na região orofacial, depois dos cistos radicular e dentígero, podendo estar associada à síndrome de Gorlin (QOSG). O fibroma odontogênico central (FOC) é um tumor odontogênico pouco freqüente, com 72 casos relatados na literatura, que afeta mais comumente a região mandibular de mulheres na terceira década da vida. O objetivo deste trabalho foi analisar as características clínicas, radiográficas, histopatológicas e perfil de marcadores de imunohistoquímica em 66 casos de QO solitários, 26 casos de QOSG, oito casos de COO e 10 casos de FOC. As lesões císticas odontogênicas afetaram em 51% dos casos homens e 49% mulheres. A marcação imunohistoquímica do epitélio mostrou positividade para Ck AE1/AE3, Ck 5, Ck 10, Ck 14 e Ck 19 com diferentes intensidades. A expressão de Bcl-2 foi estatísticamente significante maior para QOSG e QO quando comparados com COO. FOC apresentou-se mais comumente no gênero masculino, correspondendo a 70% dos casos, e afetou predominantemente as regiões posteriores da mandíbula (60%). Dois casos de FOC apresentaram-se como lesões híbridas, associados à lesão central de células gigantes (FOC/LCG). Em todos os casos de FOC o epitélio foi imunoreativo para Ck AE1/AE3, Ck 5, Ck 14 e Ck 19. O estroma de FOC foi positivo apenas para vimentina. As citoqueratinas 1, 7, 8 e 18 assim como HHF35, desmina e proteína S-100 foram negativos. A expressão de Bcl-2 nos FOC foi baixa, menor que 1%. Em conclusão QO, QOSG e COO expressaram perfil semelhante de Ck, mas com padrão distinto para Ck5 e Ck14. A expressão de Bcl-2 foi significantemente mais intensa nos QO e QOSG em relação ao COO. O perfil de expressão nas ilhas epiteliais do FOC para citoqueratinas foram semelhante aos QO, mas a expressão de Bcl-2 foi nula nos casos de FOC, o que pode estar relacionado com a menor taxa de recidiva destas lesões odontogênicas. / Abstract: Jaw bones are frequently affected by tumoral and cystic lesions which present heterogeneus clinical and pathological features associated with diverse stages of odontogenesis. These lesions include odontogenic keratocyst (OK) and rarely odontogenic orthokeratinized cyst (OOC). OK presents high recurrence and prevalence index, being the third lesion affecting the jaw bones, preceded only for radicular and dentigerous cyst; could be associated to Gorlin syndrome. Central odontogenic fibroma (COF) is a rare odontogenic tumor, with only 72 cases reported in the English literature, and is more prevalent in the posterior mandibular region of females in the third decade of life. The purpose of this work was to analyze the clinical, radiographic, histologic and immunohistochemistry profile of 66 cases of OK, 26 cases of OKGS, 26 cases of OOC and 10 cases of COF. Cystic lesions were more prevalent in males (51%) than in females (49%). Epithelial tissue of OK was reactive for Ck AE1/AE3, Ck5, Ck10, Ck14 and Ck19. The Bcl-2 and p53 expression was statistically significant for OK and OKGS when compared with OCC. COF was more common in males (70%) than in females (30%), and in the posterior mandibular regions (60%). Two cases were classified as "hybrid lesions" (COF and CGL). Epithelium of COF was reactive for Ck AE1/AE3, Ck5, Ck14 and Ck19. Stromal cells of FOC were positive for vimentin and negative for HHF-35, desmin and S-100 protein. Bcl-2 expression was negative. In conclusion, OK, OKGS and OOC have a similar immunohistochemical profile, although Ck5 and Ck14 present different pattern of expression among OK, OKGS and OOC. Bcl-2 index for OK and OKGS was higher than that of OCC. Epithelial nests of COF were positives for Ck's similarly to OK, OKGS and OOC. The index expression of Bcl-2 in COF was low when compared with that of cystic lesions, and could be related with the low index of recurrence of this tumor. / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador: Antonio Fernando Martorelli de Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T03:51:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Villar_CristinaCunha_M.pdf: 2145979 bytes, checksum: 414c596e1e175f80befbdf1af1b6915d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: As características clínicas, radiográficas, morfométricas e imuno-histoquímicas, bem como, a diminuição dos sinais inflamatórios, a maior prevalência e severidade da doença e as interferências no processo de cura decorrentes dos efeitos do fumo sobre o periodonto são essenciais para estabelecer o diagnóstico e definir a terapia adequada. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a profundidade de sondagem, a posição da crista óssea alveolar e a densidade ótica radiográfica, e quantificar as células inflamatórias e a espessura epitelial, em pacientes fumantes e não fumantes com gengiva clinicamente saudável ou gengivite. Nossos resultados mostraram aumento na espessura da base epitelial e na profundidade de sondagem nos pacientes fumantes, principalmente naqueles com gengivite. Entretanto, não houve diferença estatística significativa no número de células inflamatórias presentes na gengiva marginal, na densidade ótica e na posição da crista óssea alveolar entre pacientes fumantes e não fumantes, independente do estado clínico de saúde. Esses resultados sugerem a necessidade de estudos futuros com populações adultas usuárias de tabaco para a melhor compreensão da influência do fumo na patogênese da doença periodontal / Abstract: The clinic, radiographic, morphometric and immunohistochemical characteristics of the periodontal tissues as well as higher prevalence and severity of the periodontal disease in smokers are essential for its diagnosis and therapy definition. Therefore, the aim of this study was to evaluate the probing depth, the position and the optical density of the alveolar bone crest and quantify the inflammatory cells and the epithelial thickness in smoker and non-smoker patients having clinical heath gingiva or gingivitis. Results, in the present study showed a thicker oral epithelium of the marginal gingival oral epithelium and a deeper probing depth in smokers, especially in those presenting gingivitis. However, there were no statistic difference among the number of inflammatory cells presents in the marginal gingiva, the optical density and position of alveolar bone crest in smokers and non-smokers, regardless of their clinical health status. In conclusion further investigation, using pacients who have been smoking for a longer period of time is necessary for a better understand of the smoking influence on the pathogeneses of periodontal disease / Mestrado / Periodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador : Luiz Paulo Kowalski / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T16:18:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_FabiodeAbreu_D.pdf: 2503179 bytes, checksum: 722daf1d3be424c33b253db4423523fd (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi analisar as características clínicas, histopatológicas e a expressão de marcadores imunohistoquímicos em tumores de glândula submandibular. Foram avaliados 102 tumores, sendo 61 benignos e 51 malignos. Os tumores benignos consistiram de 60 adenomas pleomorfos e 1 adenoma de células basais. Entre os malignos, 23 foram carcinomas adenóide císticos, 16 carcinomas mucoepidermóides, 4 carcinomas espinoce1ulares, 4 adenocarcinomas sem outra especificação, 1 adenocarcinoma de células basais, 1 carcinoma de ducto salivar, 1 mioepitelioma maligno e 1 carcinoma indiferenciado. A idade média dos pacientes com tumores benignos foi de 36,3 anos e 61,7% dos pacientes eram do sexo feminino. Microscopicamente, a maioria dos adenomas pleomorfos apresentava áreas mixocondróides (Subtipo II). Todos os casos foram negativos para Ki-67 e p53. Com relação aos tumores malignos, a idade média foi 55,4 anos e 64,7% dos pacientes eram do sexo masculino. No momento do diagnóstico, 64,7% dos pacientes apresentaram tumores em avançado estádio clínico, 15,7% apresentaram metástases em linfonodos regionais e 7,84% metástases à distância. As sobrevi das global e livre de doença após 10 anos foram de 26,8% e 44,9%, respectivamente. A expressão de PCNA, Ki-67, cerbB-2, CEA e bcl-2 não apresentou associação com as variáveis clínicas e histológicas (p<O,O5). Entretanto, p53 correlacionou com os estádios T e N, morte e sobrevida global (p<0,05). Nossos resultados indicam que adenomas pleomorfos de glândula submandibular apresentam crescimento lento e têm bom prognóstico. Carcinoma adenóide cístico foi o tumor maligno mais freqüente e o prognóstico de tumores malignos em glândula submandibular é desfavorável, principalmente em tumores com avançado estadiamento clínico e que expressaram p53 / Abstract: The aim of this work was to analyze c1inocopathological and immunohistochemical expression in submandibular salivary gland tumors. A total of 112 tumors was evaluated, being 61 benign and 51 malignant. The benign tumors were compose of 60 pleomorphic adenomas and 1 basal cell adenoma. Among the malignancies, 23 were adenoid cystic carcinoma, 16 mucoepidermoid carcinomas, 4squamous cell carcinomas, 4adenocarcinomas NOS, 1 basal cell adenocarcinoma, 1 salivary duct carcinoma, 1 malignant myoepithelioma and 1 undifferentiated carcinoma. The patients with benign tumors presented a mean age of 36.3 years and 61.7% of them were females. Microscopically, most of the pleomorphic adenomas were rich in myxocondroid areas (subtype II) and all cases were negatives for p53 and Ki-67. Considering malignant tumors, the mean age was 55.4 years and 64.7% of the patients were males. At the time of diagnosis, 64.7% of the patients presented tumors in advanced c1inical stage, 15.7% presented regional lymph nodes metastases and 7.84% distant metastases. The expression of PCNA, Ki-67, c-erbB-2, CEA e bc1-2 was not correlated with c1inicopathological features (p<0.05). However, p53 expression was associated with T and N stages, death and overall survival (p<0.05). Our results showed that pleomorphic adenomas of submandibular glands presented low growth rate and good prognosis. Adenoid cystic carcinoma was the most common malignant tumor, and submandibular malignant tumors presented poor prognosis, mainly in tumors with advanced c1inical stage and with p53 expression / Doutorado / Doutor em Biologia e Patologia Buco-Dental

Orientadores: Oslei Paes de Almeida, Luiz Paulo Kowalski / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-02T20:51:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pires_FabioRamoa_D.pdf: 3295691 bytes, checksum: 685546018ecb76eb8fa15840341891db (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O estadiamento clínico e a gradação histológica têm sido relatados como os principais fatores prognósticos em carcinomas mucoepidermóides (CME). O objetivo deste estudo foi avaliar parâmetros clínicos, histopatológicos e imunohistoquímicos como fatores prognósticos em CME. De 1953 a 1997, 173 CME de cabeça e pescoço foram avaliados dos registros do Hospital do Câncer A. C. Camargo, São Paulo, Brasil. Dados clínicos e histopatológicos foram obtidos dos registros dos pacientes e da revisão histopatológica dos casos. Reações imunohistoquímicas contra PCNA, ki-67, p53, c-erbB-2, CEA, bcl-2 e Mel-CAM, e análises de sobrevida univariada e multivariada foram realizadas. Parótidas foram afetadas em 61 casos (35,2%), TNM revelou 50,3% em estádios I ou II, e 45,2% e 36,3% eram CME de baixo e alto grau, respectivamente. Recorrência local e metástases regionais e a distância foram encontradas em 12,7%, 9,8% e 9,2% dos pacientes, respectivamente, e a sobrevida global em 5 anos foi de 70%. Análise univariada de sobrevida revelou que a idade dos pacientes (>40 anos) (p<0.001), gênero masculino (p=0.005), fixação dos tumores (p=0.002), invasão de estruturas adjacentes (p=0.004), T (p<0.001), N (p<0.001), estadiamento clínico (p<0.001) e grau histológico (p<0.001), mostraram-se relacionados a pior prognóstico. CME em submandibular mostrou pior taxa de sobrevida global. Expressão de PCNA (p<0.001), ki-67 (p<0.001) e p53 (p<0.001) mostrou correlação com pior prognóstico e, de forma contrária, a expressão de CEA (p=0.012) e bcl-2 (p<0.001) foi relacionada a melhor prognóstico. Análise multivariada revelou que a idade dos pacientes (>40 anos), fixação dos tumores, T, N e grau histológico mostraram-se fatores prognósticos independentes significantes. Expressão de Mel-CAM mostrou relação inversa com a recorrência local e com metástases regionais e a distância. Diversos achados clínicos e imunohistoquímicos mostraram correlação com prognóstico em CME e também devem ser considerados para o estabelecimento do tratamento / Abstract: Clinical staging and histological grade have been reported as the main prognostic factors in mucoepidermoid carcinoma (MEC). The aim of this study was to report clinical, pathological and immunohistochemical features as prognostic factors in head and neck MEC. From 1953 to 1997, 173 cases of head and neck MEC were retrieved from the files of the A. C. Camargo Cancer Hospital, São Paulo, Brazil. Clinical and histopathological data were obtained from the patients records and from the histological review. Immunohistochemical reactions against PCNA, ki-67, p53, c-erbB-2, CEA, bcl-2 and Mel-CAM, and univariate and multivariate survival analysis were performed. Parotids were affected in 61 cases (35.2%), TNM revealed 50.3% stages I or II and histological grading revealed 45.2% and 36.3% low and high-grade MEC, respectively. Local recurrence, regional and distant metastasis were found in 12.7%, 9.8% and 9.2% of the patients, respectively, and five-year overall survival rate was 70%. Univariate survival analysis revealed that age of the patients (>40 years) (p<0.001), male gender (p=0.005), fixation of the tumors (p=0.002), invasion of the adjacent structures (p=0.004), T (p<0.001), N (p<0.001), clinical stage (p<0.001) and histological grade (p<0.001) were correlated to a worst prognosis. Submandibular cases had the worst survival rates. PCNA (p<0.001), ki-67 (p<0.001) and p53 (p<0.001) expression were also correlated to a worst prognosis and, on the contrary, expression of CEA (p=0.012) and bcl-2 (p<0.001) were correlated to a better prognosis. Multivariate survival analysis revealed that age of the patients (>40 years), fixation of the tumors, T, N and histological grade were independent significant prognostic factors. Mel-CAM expression demonstrated a inversely correlation to local recurrence, regional and distant metastasis. Several clinical and immunohistochemical features were correlated to prognosis in MEC and should be also considered when establishing patient management / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientadores : Irene Lorand-Metze, Jose Vassallo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:14:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Magalhaes_SilviaMariaMeira_D.pdf: 25272418 bytes, checksum: b333ecc950380056cea408dc9a6750f3 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Síndromes mielodisplásicas (SMD) são um grupo heterogêneo de desordens caracterizado por anormalidades na proliferação e maturação dos precursores hematopoéticos, resultando em citopenias periféricas e potencial para transformação leucêmica. Nódulos linfóides (NL) medulares são, em geral, considerados fisiológicos e relacionados à idade. Em pacientes com SMD o seu significadoclínicopermanece obscuro. Nesse estudo, a presença de NL medulares foi investigada em 206 pacientes com SMD. A idade mediana foi de 58,5 anos (15-89). Segundo a classificaçãoFAB, foram avaliados 129 AR, 29 ARSA, 31 AREB/AREB-t, 11 LMMC, 5 variantes hiperfibróticas e 1 caso inclassificável. NL foram observados em 24,8% dos casos (51/206). Em 25 casos foi possível uma análise imunohistoquímica utilizando-se os anticorpos: CD20, CD3, CD45RO e anti-bcl-2. Embora os NL apresentassem, em geral localização central (88,3%) e limites precisos, alguns exibiam posição paratrabecular (3,9%) ou margens imprecisas (13,7%). O aumento nas fibras de reticulina foi evidenciado em 51,1% dos casos. Positividade para CD20 foi detectada em 92,0% das amostras (23/25) com padrão central perinodular ou difuso. Marcação com CD3 e/ou CD45RO foi evidenciada em 48,0% dos casos (12/25). Em 15 pacientes só marcação para células B (13 casos) ou T (2 casos) foi observada e em 10 casos uma população mista de células B e T foi notada. A expressão de bcl-2 foi detectada em apenas 2 casos. A incidência de NL foi alta quando considerada a idade dos pacientes. Quando comparados os grupos com e sem NL não se observou diferença significativa com relação à idade, sexo, contagem de neutrófilos, plaquetas, subtipo FAB, progressão da doença ou sobrevida global. A presença de NL mostrou uma associação significativa com o aumento de fibras de reticulina no tecido hematopoético (P=0,01) e, ainda, com menor dosagem de hemoglobina (p=0,03). A análise multivariada mostrou que hemoglobina e subtipo FAB foram os fatores preditivos de sobrevida mais significativos. Os resultados mostraram que NL em pacientes com SMD têm características morfológicas e imunofenotípicas heterogêneas. Não se observou associação com doença linfoproliferativa. Esses agregados podem representar reatividade a uma estimulação imunológica anormal e persistente e estão, provavelmente, relacionados à alteração da arquitetura medular / Abstract: Myelodysplastic syndromes (MDS) are a heterogeneous group of c10na! disorders characterised by abnormalities in proliferation and maturation of haemopoietic precursors resulting in cytopenias and a preleukaemic state. Bone marrow lYffiphoid nodules (LN) are usually considered to be a physiological feature, closelyrelated to age. In patients with MDS their clinical and biological meaning remain obscure. In the present study the presence of LN in bone marrow biopsy was investigated in 206 patients with MDS. The median age was 58.5 years (range 15-89). According to FAB classification, there were 129 RA, 29 RARS, 31 AREB/AREB-t, 11 Clv1ML,5 hyperfibrotic variants and 1 unc1assifiablecase. Single or multiple LN were present in 24.8% of the cases. Twentyfive specimens were evaluated with a panel of antibodies reactive on routinely processed, paraffin-embedded trephine biopsies: CD20, CD3, CD45RO and anti-bc1-2.Although most LN were centrally located (88.3%), well circumscribed and polYffiorphous, some were paratrabecular (3.9%) or ill defined (13.7%). An increase in reticulin fibres was observed in 51.1% of cases. CD20 positive cells were found in 23/25 (92.0%) of the cases in three distinct pattems: strong central, perinodular and faint diffuse. Positivity with CD3 and/or CD45RO was detected in 12/25 (48.0%) ofthe cases. In 15 patients only B (13 cases) or T cells (2 cases) could be detected whereas in 10 cases a mixture ofB and T cells was noted. Bc1-2 expression was positive in only 2 specimens. The incidence of LN in our MDS patients was unexpectedly high considering the median age of patients. The comparison between patients with and without LN did not reveal statistically significant differences concerning age, sex, neutrophil counts, platelets, FAB subtype, disease progression or overall survival. The presence of LN showed a relationship with an increase in reticulin fibres in the OOematopoietic tissue (p=0.01), and patients with LN exhibited lower haemoglobin values (p=0.03). Multivariate survival analysis showed tOOtOOemoglobinand FAB subtype were the most significant predictors of survival. Our results show that LN in MDS patients OOveheterogeneous characteristics. No association with IYffiphoproliferative disease and no correlation with prognosis were found. These aggregates could be an expression of reactivity to an ongoing persistent and abnormal immune stimulation and are probably related to an altered bone marrow microenvironrnent / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Athanase Billis / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:05:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Meirelles_LucianaRodriguesde_D.pdf: 4191536 bytes, checksum: 4c970a525db8de4e82246f589019ce64 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A atrofia prostática (AP) é uma das lesões que mais se confunde com carcinoma. AP aumenta com a idade e sua etiopatogênese é desconhecida. Isquemia local é um fator que pode ter papel na patogênese da lesão. O presente trabalho teve como objetivos estudar o fluxo sangüíneo, pelo Doppler colorido, de nódulos e/ou áreas suspeitas cujas biópsias tenham mostrado AP como única lesão e comparar a expressão imunoistoquímica dos marcadores de hipóxia tecidual HIF-1a e VEGF entre áreas com AP e áreas de infarto agudo da próstata. O material obtido corresponde a biópsias prostáticas por agulha de 33 pacientes entre 43 e 86 anos (média: 69) com lesões suspeitas ao ultra-som, correspondendo a 40 áreas nodulares. Estudaram-se também 8 pacientes com áreas de infarto agudo em hiperplasia nodular da próstata. A expressão imunoistoquímica do HIF-1a e do VEGF foi quantificada e comparada entre os grupos. AP foi a única lesão presente nas 40 áreas biopsiadas. O fluxo estava ausente em 24/40 (60%), presente em 12/40 (30%) e aumentado em 4/40 (10%). A quantidade de células expressando o HIF-1a e o VEGF foi significativamente maior nas áreas de infarto agudo (p<0,001). Concluímos que a ausência de fluxo em 60% das lesões estudadas e a menor expressão dos marcadores de isquemia tecidual (HIF-1a e VEGF) nas áreas de AP parecem apoiar a isquemia local crônica como um dos importantes fatores na etiopatogênese desta lesão / Abstract: Prostatic atrophy (PA) is one of the most frequent mimics of prostatic adenocarcinoma. The frequency of PA increases with age and its etiopathogenesis is unknown. Local ischemia seems to be a potential factor for its pathogenesis. The aims of this study were to study prostatic blood flow on color Doppler transrectal ultrasound examination of nodules and / or suspicious areas that showed prostatic atrophy as the only diagnosis on biopsy and compare the imunnohistochemical expression of hypoxia induced factors such as hypoxia-inducible factor-1alpha (HIF-1a) and vascular endothelial growth factor (VEGF). between areas of prostatic atrophy and areas of prostatic infarcts. The material was obtained from transrectal prostatic core biopsies of 33 men whose age ranged from 43 to 86 (average 69) years with suspicious lesions on transrectal ultrasound, corresponding to 40 areas. We have also studied 8 patients with prostatic nodular hyperplasia and areas of acute ischemia on biopsy. The expression of HIF-1a and VEGF was analysed and compared between the groups. PA was the only lesion present in all 40 suspicious lesions biopsied at ultrasound. On color Doppler the suspicious areas showed absent flow in 24/40 (60%), present flow in 12/40 (30%), and increased flow in 4/40 (10%) of the lesions. HIF-1a and VEGF were strongly expressed in areas of prostatic infarcts. In contrast, less frequently staining was observed in areas of PA (p<0,001). Absent flow in the majority of the lesions studied (60%) and the weaker expression of HIF-1a and VEGF in atrophic areas may be a further evidence for a possible role of local chronic ischemia in the etiopathogenesis of prostatic atrophy / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas