Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV09MA028.pdf: 2290145 bytes, checksum: 8275dcf2e9bbdf08c5a2fbc8e089132e (MD5) Previous issue date: 2009-12-08 / The apple is one of the most important of temperate fresh fruit in both international and national levels, and for this reason has great economic importance in the country. Santa Catarina, Rio Grande do Sul, Parana and Sao Paulo are the biggest county apple producer, respectively. One factor that most compromise the apple production culture is called summer diseases that cause fruit rot, including the white rot (Botryosphaeria dothidea, sin. B. berengeriana ), bitter rot (Colletotrichum gloeosporioides, C. acutatum ), and Bull s eye rot (Cryptosporiopsis perennans).In this group of diseases, "Bull s eye rot" is causing increasing losses in Brazil, Argentina and Chile. The first finding of brown Bull s eye rot in Brazil happened in the growing seasons of 1995 and 1996 in apple cultivars Fuji and Golden Delicious, harvested in orchards of Tainhas, Caxias do Sul, Vila Oliva and Vacaria in Rio Grande do Sul and Fraiburgo in Santa Catarina, being the causal agent identified in the CBS as Cryptopsporiopsis perennans. Nowadays it is observed that isolates associated with the disease are similars morpho-physiological and genetic, suggesting the existence of other (s) kind (s). In order to correctly identify the etiologic agent, isolates from commercial orchards in the states of SC and RS, classified by analysis of the ITS-rDNA, group I (CP5, CP9 and CP11) and group II (CP1, CP2, CP3, CP4, CP6, CP7, CP8, C10) by the Canadian Agricultural and Agri-Food Canada, were evaluated morpho-physiological by its growth in culture media (PDA, V8 AEM), spore size (length and width), life cycle for obtaining the sexual phase, pathogenicity on fruits (with and without injury) and enzimatic activitie (lipase, protease, amylase, DNase, RNase and Pectolytic pH5 and pH7) and susceptibility to temperature (3, 4, 5, 30 and 31 ° C ). The experimental design was completely randomized and data were analyzed for contrast and comparison test of averages Tukey 5%. There was a great variability between isolates. They showed different morpho-physiological and significant differences, and the variable that most influenced the differentiation was the effect of temperature of 5 º C in the growth or not of the isolates. Isolates CP8 and CP5, considered standards of the group I and II, respectively, are different between each other and different from other isolates and were analyzed by the CBS, as representatives of other species. / A maçã é a fruta de clima temperado mais importante entre as comercializada como fruta fresca, tanto no contexto internacional quanto nacional, e por este motivo possui grande importância socioeconômica no país. Dentre os estados produtores do Brasil, destacam-se Santa Catarina, Rio Grande do Sul, Paraná e São Paulo. Um dos fatores que mais compromete o aumento da produção desta cultura são as chamadas doenças de verão que causam podridões de frutos, entre elas a podridão branca (Botryosphaeria dothidea, sin. B. berengeriana), a podridão amarga (Colletotrichum gloeosporioides, C. acutatum), e a podridão olho-de-boi (Cryptosporiopsis perennans). Neste grupo de doenças, a podridão olho-de-boi vem causando perdas crescentes no Brasil, Argentina e Chile. A primeira constatação da podridão olho-de-boi no Brasil aconteceu nos ciclos vegetativos de 1995 e 1996 em maçãs das cultivares Fuji e Golden Delicious, colhidas em pomares dos Municípios de Tainhas, Caxias do Sul, Vila Oliva e Vacaria no Rio Grande do Sul e em Fraiburgo em Santa Catarina, sendo o agente causal identificado pela sua morfologia no Instituto de Micologia da Holanda (CBS) como Cryptopsporiopsis perennans. Atualmente observa-se que isolados associados à doença apresentam grande variabilidade morfofisiológicas e genética, sugerindo a existência de outra(s) espécie(s). Com o objetivo e identificar a correta etiologia do agente causal, isolados de pomares comerciais dos estados de SC e RS, classificados por análise da região ITS-rDNA, em grupo I (Cp5, Cp9 e Cp11) e grupo II (Cp1, Cp2, Cp3, Cp4, Cp6, Cp7, Cp8, C10) pelo Instituto Canadense, foram avaliados morfo-fisiologicamente quanto ao crescimento em meios de cultura (BDA, AEM eV8), tamanho de esporos (comprimento e largura), ciclo biológico para obtenção da fase sexuada, patogenicidade em frutos (com e sem ferimento) e atividade enzimática (lipolítica, proteolítica, amilolítica, DNAse, RNase e pectolítica pH5 e pH7) e susceptibilidade a temperaturas (3, 4, 5, 30 e 31ºC). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e os dados foram submetidos à análise de contraste e teste de comparação de médias Tukey 5. Verificou-se uma grande variabilidade entre os isolados de cada grupo. Verificou-se diferenças morfo-fisiológicas significativas e a variável que mais influenciou na diferenciação dos grupos foi o efeito da temperatura de 5ºC no crescimento ou não dos isolados. Os isolados Cp8 e Cp5, considerados padrões do grupo I e II, respectivamente, são diferentes entre si e diferentes dos outros isolados e foram analisados pelo Instituto de Micologia da Holanda (CBS), como representantes de outras espécies

Orientador: Maria Ligia Rodrigues Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T18:07:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_Walcianeda_M.pdf: 828879 bytes, checksum: 887dfe68d9499873f1fa12e23a404abd (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Insetos fitopatógenos e outros animais utilizam enzimas digestivas tais como as amilases e proteases para processar nutrientes obtidos de plantas necessários ao seu desenvolvimento. A broca-da-cana Diatraea saccharalis é a principal praga da cana-de-açúcar no Brasil e em outros países da América do Sul. Plantas sintetizam uma variedade de moléculas incluindo inibidores de proteinases (IPs) para se defenderem contra o ataque de insetos. Os IPs são polipeptídios hábeis em se ligar às enzimas proteolíticas localizadas no intestino médio dos insetos, tornando-as inativas por inibição competitiva. Esse processo leva a uma redução da disponibilidade de aminoácidos para a síntese protéica, e desta maneira, uma redução no crescimento e desenvolvimento. A predominância de enzimas digestivas do tipo serino-proteinases na broca-da-cana motivou a descoberta de IPs com a capacidade de reduzir seu processo digestivo. Neste trabalho, um inibidor purificado das sementes de Adenanthera pavonina ¿ ApTI foi utilizado em bioensaios, e sua atividade tóxica sobre D. saccharalis foi determinada. A ingestão de ApTI resultou em uma redução significativa na sobrevivência e peso larval. Para examinar o efeito da proteína sobre o inseto, a atividade das proteinases intestinais das larvas que se alimentaram em dieta livre do inibidor e alimentadas em dieta contendo o inibidor a 0,05% foi comparada através de ensaios enzimáticos e eletroforese em géis de atividade enzimática. As larvas de quarto ínstar alimentadas em dieta contendo ApTI apresentaram uma diminuição na atividade tríptica do intestino e das fezes, confirmado por ensaios enzimáticos e na eletroforese de atividade. Os resultados de utilização da dieta apresentaram redução na eficiência de conversão do alimento ingerido (ECI) e do alimento digerido (ECD) e aumento no custo metabólico (CM). Além disso, a atividade tríptica das larvas que se alimentaram em dieta com ApTI foi sensível à inibição por ApTI. Esses resultados sugerem que ApTI possui efeitos anti-metabólicos quando ingeridos por D. saccharalis / Abstract: Phytophatogous insects and other animals use digestive enzymes, such as amylases and proteinases to process the nutrients obtained from the plants necessary for their development. The sugarcane borer Diatraea saccharalis is the major pest of sugarcane in Brazil and other South American countries. Plants synthesize a variety of molecules, including proteinase inhibitors (PIs), to defend themselves against attack by insects. PIs are polypeptides that are able to bind to insect midgut proteolytic enzymes, rendering them inactive by competitive inhibition. This process leads to a limitation of essential amino acids in protein synthesis, and thus, to reduction in growth and development. The predominance of sugarcane-borer digestive serine proteinases has motivated the discovery of PIs with the ability to reduce the digestion process. In this report, the pure inhibitor from seeds of Adenanthera pavonina ¿ ApTI was used in bioassay and its toxic activity on D. saccharalis was determined. The ingestion of ApTI did result in a significant reduction in larval survival and weight. To examine the protein effects on insect, the midgut proteinases of D. saccharalis larvae reared on artificial PI-free diet and on a diet containing ApTI at 0.05% were compared by using enzymatic assays and polyacrilamide gel electrophoresis. The fourth instar larvae reared on diet containing ApTI showed a decrease in tryptic activity of gut and faeces, as confirmed by enzymatic assays and by polyacrilamide gel eletrophoresis. The results from dietary utilization experiments realized with D. saccharalis larvae presented a reduction in efficiency of conversion of ingested food (ECI) and digested food (ECD) and an increase in metabolic cost (CM). In addition, the tryptic activity in ApTI-fed larvae was sensitive to ApTI. These results suggest that ApTI have a potential antimetabolic effect when ingested by D. saccharalis / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2018-03-05T13:57:00Z No. of bitstreams: 1 PGPV10MA231.pdf: 289994 bytes, checksum: f6f6518eed8d4a3460fcad5b1cca7663 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-05T13:57:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV10MA231.pdf: 289994 bytes, checksum: f6f6518eed8d4a3460fcad5b1cca7663 (MD5) Previous issue date: 2010-05-28 / Capes / Brazil is one of the main world producers of fruit, but much of the production is lost due to the high incidence of postharvest rots. The control with fungicides has been suffering restrictions by consumers and fruit importing countries. The benefits and viability of hot water spraying and UV-C radiation was shown in other countries and in Brazil to control rots caused by Botryosphaeria dothidea and Penicillium expansum on apples. This project aimed to assess the effect of heat treatment and/or UV-C radiation to control at postharvest bull’seye rot caused by Cryptosporiopsis perennans on apples, and to evaluate equipments for the implementation of these treatments. In the laboratory, the sensitivity of conidia of the pathogen to heat treatment was evaluated at temperatures of 28, 45, 50 and 55ºC, for 15 and 30 seconds, and to UV-C radiation at doses of 0.018 x 104, 0.037 x 104, 0.075 x 104, 0.150 x 104, 0.375 x 104, 0.750 x 104, 1.500 x 104 and 3.000 x 104 ergs mm-2. There was a reduction of more than 99% in the viability of conidia of C. perennans treated at or above 50°C for 15 seconds, and with UV-C radiation at doses 0.75 x 104 ergs mm-2. The combinations between heat treatment exposure time and UV-C radiation were also evaluated on apples inoculated with C. perennans in an experimental packing line. In this case, the spraying of hot water at 50°C for 15 seconds, and the treatment with UV-C radiation at the dose of 0.375 x 104 ergs mm-2, were effective in controlling the epiphytic population of C. perennans on 'Gala', 'Fuji' and 'Pink Lady' apples. Apples inoculated and naturally infected with the pathogen, after different periods of cold storage under controlled atmosphere (CA), were assessed for the effects of physical treatments to control bull's-eye rot in a commercial packing line. On 'Fuji' apples, stored for one, four and eight months under CA, and 'Gala', stored for five months under CA, the spraying of hot water at 50ºC for 12 seconds and/or treatment with UV-C radiation at 0.0069 x 104 ergs mm-2 reduced in more than 45% the incidence of bull's-eye rot. Therefore, the physical treatments tested reduced the postharvest losses on apples caused by bull’s-eye rot, providing competitiveness gain to the industry / O Brasil é um dos principais produtores mundiais de frutos, mas grande parte da produção é perdida devido à elevada incidência de podridões pós-colheita. O controle com fungicidas vem sofrendo restrições pelos consumidores e pelos países importadores de frutos. O benefício e a viabilidade do uso da aspersão do fruto com água aquecida e da radiação UV-C foi demonstrada no exterior e também no Brasil no controle de podridões em maçãs causadas por Penicillium expansum e Botryosphaeria dothidea. Este projeto visou determinar o efeito do tratamento térmico e/ou com radiação UV-C para o controle pós-colheita da podridão olho-de-boi em maçãs, causada por Cryptosporiopsis perennans, e avaliar equipamentos para a execução destes tratamentos. Em laboratório, foi avaliada a sensibilidade dos conídios do patógeno ao tratamento térmico nas temperaturas de 28, 45, 50 e 55ºC, por 15 e 30 segundos, e à radiação UV-C, nas doses de 0,018 x 104, 0,037 x 104, 0,075 x 104, 0,150 x 104, 0,375 x 104, 0,750 x 104, 1,500 x 104 e 3,000 x 104 ergs mm-2. Ocorreu redução superior a 99% na viabilidade dos conídios de C. perennans tratados com temperatura igual ou superior a 50ºC por 15 segundos, e com radiação UV-C na dose igual ou superior a 0,75 x 104 ergs mm-2. Posteriormente, foram avaliadas combinações de tempos de exposição ao tratamento térmico e à radiação UV-C em maçãs previamente inoculadas com C. perennans numa linha de seleção experimental. Neste caso, a aspersão de água aquecida, na temperatura de 50ºC por 15 segundos, e o tratamento com radiação UV-C, na dose de 0,375 x 104 ergs mm-2, mostraramse eficientes no controle da população epífita de C. perennans em maçãs 'Gala', 'Fuji' e 'Pink Lady'. Por fim, avaliou-se o efeito dos tratamentos, aplicados numa linha de seleção comercial, na incidência da podridão olho-de-boi em maçãs inoculadas e com infecção natural, com diferentes períodos de armazenamento em condição de atmosfera controlada (AC). Em maçãs 'Fuji' armazenadas por um, quatro e oito meses em AC, e 'Gala' armazenada por cinco meses em AC, o uso da aspersão de água aquecida a 50ºC durante 12 segundos e/ou da radiação UV-C na dose de 0,0069 x 104 ergs mm-2 reduziu em mais de 45% a incidência da podridão olho-de-boi. Assim, os tratamentos físicos testados reduzem as perdas pós-colheita ocasionadas pela podridão olho-de-boi em maçãs, proporcionando ao setor ganho em competitividade

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV07MA022.pdf: 293867 bytes, checksum: 7be800f613b76704595bb5911a0eeab8 (MD5) Previous issue date: 2007-02-26 / The apple culture has great social and economic importance for the South region of Brazil and in the 2003/04 crop season produced approximately 970,000 tons. During the 1995/96 crop season, a diferente symptom from the mosto f symptoms observed in apple fruit and branches were evidenced in Rio Grande do Sul and Santa Catarina orchards. After etiological studies, it was determined the occurrence of fungus Cryptosporiopsis perrennans. This pathogen can cause rota round of 15% on storage apples and for the time been there is few studies about the patogen and the epidemiology of disease. The purpose of this work was to study the development and the production of C. perennans spores over diferente cultures medium with and without fungicides, and to determinethe effect of temperature and humidity periods over the Bull s eye roto n Fuji apple. The experiments carriedout were the following: a) evaluatoon of the effect of potato-dextrose-agar (PDA), malt extract (MEM) and V8 juice (V8) médium on the development and production of spores by 9 isolates of C. perennans; b) evaluation of sensibility in vitro of C. perennans to six diferente concentrations of the fungicides captan, cooper hidroxide, dithianon, mancozev and trifloxistrobin diluted in PDA; c) evaluation of incidence and severity of the Bull eye s rot when Fuji apples inoculated with C. perennans had been submited to diferente combinations of humidity and temperature periods. The results showedthat the medium AEM and V8 promoted better stimulus to mycelium growth and that five C. perennans isolates produced more spores when cultivated in V8 and four isolates in MEM. The diferente fungicides tested were eficiente to control C. perennans micelial growth, however the most promising results were obtained the fungicides dithianon and mancozeb. Higher incidence and severity of the Bull eye s roto n Fuji apples were obteined with 20 hours of incubation at 22°C / A cultura da macieira tem grande importância sócio-econômica para a região sul do Brasil tendo atingido no ciclo 2003/04 aproximadamente 970.000 toneladas. Nos ciclos vegetativos de 1995 e 1996, um sintoma diferente daqueles relatados até então no Brasil em frutos e ramos da macieira foi constatado em pomares do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina. Após o estudo de sua etiologia, identificou-se a ocorrência do fungo Cryptosporiopsis perennans. Este patógeno pode causa podridões ao redor de 15% das maçãs no armazenamento e, no presente, há poucos estudos que contribuam ao conhecimento do patógeno ou à epidemiologia da doença. Este trabalho visou estudar o crescimento micelial e a produção de conídios de isolados de C. perennans em meios de cultura com e sem fungicidas e determinar o efeito de temperaturas e períodos de umidade na infecção de maçãs Fuji . As ações conduzidas foram: a) determinação os efeitos dos meios de cultura batata-dextrose-ágar (BDA), ágar-extrato-de-malte (AEM) e ágar-sucoV8 (V8) no crescimento micelial e produção de conídios de nove isolados de C. perennans; b) avaliação a sensibilidade in vitro de C. perennans a seis concentrações dos fungicidas captan, hidróxido de cobre, dithianon, mancozeb e trifloxistrobin incorporados ao meio de cultura BDA; c) avaliação da incidência e severidade da podridão olho-de-boi em maçãs Fuji inoculadas com C. perennans e submetidas a diferentes combinações de períodos de umidade e temperatura. Os resultados mostraram que o maior estímulo ao crescimento do micélio do patógeno foi induzido pelos meios de cultura AEM e V8 e que cinco dos nove isolados avaliados produziram maior quantidade de conídios quando cultivados em suco V8 e quatro em AEM. Todos os fungicidas apresentaram-se eficientes para o controle do crescimento micelial de C. perennans quando comparados a testemunha, porém os resultados mais promissores foram obtidos com os fungicidas dithianon e mancozeb. A temperatura e período de incubação que proporcionaram maior índice de incidência e severidade da podridão olho-de-boi em frutos de maçã cv. Fuji, foram de 22°C com 20 horas de incubação