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Cultivo in vitro e atividade de enzimas envolvidas na oxidação de explantes de Tapeinochilos ananassae (Hassak) K. Schum

SOUTO, Nise de Fátima Coutinho 11 August 2008 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-29T15:35:21Z No. of bitstreams: 1 Nise de Fatima Coutinho Souto.pdf: 727551 bytes, checksum: 95ee1193333767288a6ff7225ee4caf5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-29T15:35:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nise de Fatima Coutinho Souto.pdf: 727551 bytes, checksum: 95ee1193333767288a6ff7225ee4caf5 (MD5) Previous issue date: 2008-08-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The in vitro culture is a tool of great importance in the production of seedlings of the fitossanitary quality. The Tapeinochilos ananassae (Hassk) K. Schum is a tropical species that has a great acceptance in the world of floriculture market and presents, in the Brazilian Northeast, fitossanitary problems in which the Rhabdovirus is highlighted. In the present work, aiming to assess the establishment and development of various explants in the in vitro culture of T. ananassae, including the study of biochemical and anatomical variables. For this, lateral buds and mature zygotic embryos were inoculated in MS medium, full or reduced to its half ionic strength, using three sources of antioxidants: ascorbic acid, activated charcoal and PVP, in the concentrations 0,25g.L-1; 3,0g.L-1 and 0,5g. L-1. The ½MS culture medium supplemented with 3,0g. L-1 activated charcoal promoted a higher rate of success in the establishment of zygotic embryos. The plants formed from the culture of embryos were propagated by nodal segments in different concentrations of BAP and GA3: ½MS; ½MS + 0,5mg.L-1 GA3; ½MS + 1,0mg.L-1 GA3; ½MS + 0,5mg.L-1 BAP; ½MS + 0,5mg.L-1 BAP + 0,5mg.L-1 GA3; ½MS + 0,5mg.L-1 BAP + 1,0mg.L-1 GA3; and showed better development when cultivated in ½MS medium free from growth regulators. The lateral buds had not shown morfogenetic development under the conditions of study, besides a large phenolic oxidation had been seen, regardless of the culture medium that had been used, and a high level of microbial contamination, especially bacterial, when buds that had come from basal branches are used. In the enzymatic analysis of lateral buds that were cultivated in vitro in a process of oxidation, had been realized that the activity of peroxidase had declined through the time, suggesting the loss of organogenetic potential, but the activity of polyphenoloxidase had tended to increase during the oxidation process of explants. / O cultivo in vitro é uma ferramenta de grande importância na produção de mudas com qualidade fitossanitária. O Tapeinochilos ananassae (Hassk) K. Schum é uma espécie tropical com grande aceitação no mercado floricultor mundial. No Nordeste brasileiro, vem enfrentando sérios problemas fitossanitários causados principalmente pelo Rhabdovirus. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o estabelecimento e desenvolvimento de diferentes explantes no cultivo in vitro de T. ananassae, incluindo o estudo de variáveis bioquímicas e anatômicas. Para isso, gemas laterais e embriões zigóticos maduros foram inoculados em meio MS completo ou reduzido à metade da força iônica, utilizando três fontes de antioxidantes: ácido ascórbico, carvão ativado e PVP, nas concentrações 0,25g L-1; 3,0g L-1 e 0,5g L-1. O meio de cultivo ½MS suplementado com 3,0g. L-1 de carvão ativado promoveu um maior índice de sucesso no estabelecimento de embriões zigóticos. As plantas formadas a partir da cultura de embriões foram propagadas por segmentos nodais em diferentes concentrações de BAP e GA3: ½MS; ½MS+0,5mg.L-1 GA3; ½MS+1,0mg. L-1 GA3; ½MS+0,5mg.L-1 BAP; ½MS+0,5mg.L-1 BAP+0,5mg.L-1 GA3; ½MS+0,5mg.L-1 BAP+1,0mg.L-1 GA3. O meio de cultivo constituído de ½ dos sais MS e isento de reguladores de crescimento mostrou-se mais adequado para o cultivo de segmentos nodais de T. ananassae. As gemas laterais não apresentaram desenvolvimento morfogênico nas condições de estudo deste trabalho. Além disso, foi observado grande oxidação fenólica, independentemente do meio de cultivo utilizado, e elevado índice de contaminação microbiana, sobretudo bacteriana, quando do uso de gemas advindas de ramos basais. Nas análises enzimáticas das gemas laterais cultivadas in vitro em processo de oxidação, percebeu-se que a atividade da peroxidase decaiu ao longo do tempo, sugerindo a perda do potencial organogenético; já a atividade da polifenoloxidase tendeu a aumentar ao longo do processo de oxidação dos explantes.

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