Dans le cadre d'infections ostéo-articulaire (IOA), l'utilisation de matériels étrangers peut, en cas de contamination, aboutir à la formation d'un biofilm associé à un risque plus important d'échec du traitement et de récidive. Les bactéries sous forme de biofilm sont en effet protégées de l'action du système immunitaire et ont une tolérance plus importante aux antibiotiques. A l'heure actuelle, l'activité des antibiotiques est déterminée par la CMI (Concentration Minimale Inhibitrice), mais cette valeur ne tient pas compte de la forme sessile des bactéries. C'est pourquoi, la société BioFilm Control a développé un nouveau test, l'Antibiofilmogramme®, permettant de déterminer la CMI biofilm (CMIb) reflétant la capacité préventive des antibiotiques sur l'installation des microorganismes en biofilm. L'objectif de ma thèse a été dans un premier temps de participer à la démonstration de la valeur clinique de ce nouveau test dans le cadre des IOA à Staphylococcus aureus. Nous avons pu mettre en place un recueil prospectif et réaliser les premiers essais in vitro. Nos résultats obtenus pour la cloxacillin ont pu par la suite être confirmés sur un modèle in vivo d'infection sur matériel. Dans un second temps, nous avons pu caractériser la capacité de formation de biofilm des souches cliniques en fonction des profils de résistance obtenus en Antibiofilmogramme®. Nous avons pu mettre en évidence des profils différents liés à la clonalité des souches. Enfin, nous avons pu mettre au point une nouvelle méthode de rinçage et de quantification des biofilms pour les modèles en microplaque via l'utilisation de vapeur. Cette approche simple améliore grandement la reproductibilité des résultats et préserve l'intégrité structurelle des biofilms / In the context of Bone and Joint Infections (BJIs), the orthopedic devices are preferential surface for microorganisms to adhere and form biofilm associated with high rates of failures and relapses. Within biofilm, bacteria are protected from the host immune response and are able to survive in the presence of high concentration of antibiotics. The standard Minimal Inhibitory Concentration (MIC) informs on the antibiotic susceptibility of planktonic bacteria, but is not suited for biofilm. The company BioFilm Control developed a new test named Antibiofilmogram® which measures early-stage biofilm growth in presence of antibiotics, and provides a biofilm Minimal Inhibitory Concentration (bMIC). The aim of my PhD research was first to take part in the demonstration of the clinical value of this new test for Staphylococcus aureus BJIs. We established a prospective collection of data and strains and realized the first in vitro assays. Our results for cloxacillin were confirmed in an in vivo model of catheter-associated infection. Second, we characterized the biofilm formation capacity of various clinical isolates based on the Antibiofilmogram® resistance profile. We showed that the biofilm formation capacity is correlated with clonal lineage. Finally, we were able to develop a new method of washing and quantifying biofilms for microplate system using steam. This simple approach preserves the biofilm integrity and lead to highly reproducible data