El cáncer colorrectal (CCR) constituye en la actualidad la neoplasia más frecuente en España. Hasta un 30% de los casos de CCR se incluyen dentro del CCR familiar y alrededor de un 3-5% se deben a mutaciones en genes de elevada penetrancia que siguen una herencia mendeliana Éstos últimos incluyen al CCR hereditario no polipósico: principalmente el Síndrome de Lynch (SL), debido a mutaciones germinales en los genes de sistema reparador de errores (MMR) MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2; y varios síndromes polipósicos, como la poliposis adenomatosa familiar, asociada al gen APC y la poliposis asociada al gen MUTYH. En aproximadamente un 70% de los casos analizados de pacientes con sospecha de SL no se encuentran mutaciones germinales y en torno a un 10% de estos casos, con pérdida de expresión de MLH1 e hipermetilación del promotor de dicho gen en su tumor, se explican por epimutaciones constitucionales en MLH1. No obstante, la prevalencia de este fenómeno en la población general es desconocida. También existen casos de CCR con elevada carga familiar, pero sin alteración del sistema MMR, de los que se desconoce su origen genético (CCR familiar tipo X). Lo mismo ocurre para algunos casos de poliposis adenomatosa con agregación familiar, que no se explican por mutaciones en los genes APC o MUTYH. Recientemente se han descrito dos mutaciones recurrentes en los genes POLE y POLD1 (p.Leu424Val y p.Ser478Asn respectivamente) como responsables de un pequeño porcentaje de estos casos de CCR y poliposis no clasificados pero, debido a la escasez de casos descritos hasta la fecha, fenotipo clínico exacto no se ha definido. Así, los objetivos de este trabajo han sido: en primer lugar, determinar la prevalencia de las epimutaciones constitucionales en MLH1 como una causa de SL en una serie no seleccionada de CCR y compararla con la prevalencia de este fenómeno en una serie seleccionada; y en segundo lugar, analizar la prevalencia de las mutaciones recurrentes en los genes POLE y POLD1 en casos de CCR y poliposis familiar de aparición temprana, sin mutación en los genes responsables de los síndromes de sospecha, y así contribuir a definir el fenotipo clínico asociado a las mutaciones en dichos genes. Se evaluó la prevalencia de epimutaciones constitucionales de MLH1 en una cohorte de CCR no seleccionado, y se comparó con una cohorte de CCR familiar seleccionado. Así, no se detectaron epimutaciones constitucionales en MLH1 en la población no seleccionada. No obstante, el 15,6% de la serie seleccionada fueron positivos para epimutaciones en MLH1. Por otro lado, se realizó la búsqueda de mutaciones recurrentes en POLE y POLD1 en casos de CCR y/o poliposis familiar mediante ensayos de genotipado KASPar y/o secuenciación Sanger. Se identificó la mutación POLE_p.Leu424Val como mutación de novo, ningún caso presentó la mutación POLD1_p.Ser478Asn, pero se identificó una nueva mutación en POLD1: p.Leu474Pro, con patogenicidad sustentada mediante diversas aproximaciones, en una familia de CCR familiar tipo X con también casos de cáncer de endometrio. Así, estos resultados sugieren una prevalencia insignificante de epimutaciones constitucionales en MLH1 en cohortes no seleccionadas de CCR. Así, el análisis de epimutación constitucional en MLH1 debería dirigirse exclusivamente a pacientes que cumplen los criterios revisados de Bethesda y cuyo tumor presente pérdida de expresión y metilación de MLH1. Por otro lado, las mutaciones en POLE y POLD1 explican una pequeña proporción de casos de CCR y poliposis familiar. La secuenciación de al menos estas mutaciones recurrentes debería considerarse en el diagnóstico genético rutinario de los casos con sospecha de CCR o poliposis hereditarios, sin mutaciones en los genes de sospecha clásicos.