Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2015-11-30T16:56:25Z No. of bitstreams: 2 Tese - Sheyla Maria Rondon Caixeta BONFIM - 2014.pdf: 8198505 bytes, checksum: 0f84b8e65f24477c5179e31a085ce655 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-12-01T06:39:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Sheyla Maria Rondon Caixeta BONFIM - 2014.pdf: 8198505 bytes, checksum: 0f84b8e65f24477c5179e31a085ce655 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-01T06:39:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Sheyla Maria Rondon Caixeta BONFIM - 2014.pdf: 8198505 bytes, checksum: 0f84b8e65f24477c5179e31a085ce655 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-06-06 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Paracoccidioides is a fungal human pathogen that causes systemic mycosis paracoccidioidomycosis (PCM). Infection occurs via inhalation of fungal propagules by the host and macrophages are important in the initial contention of the fungus through innate mechanisms. In this study, analysis of proteomic profile of yeast cells of Paracoccidioides, isolate Pb18, recovered from infection in macrophages J774 A1 so as to identify molecules that are expressed in this condition and could represent targets for new antifungal therapies. The analysis of differential protein expression could be detected 181 proteins with induction of expression and decreased expression was observed in 245 proteins in Pb18. The data show up regulation of proteins involved in the processes on the alternative carbon metabolism such as gluconeogenesis, beta-oxidation of fatty acids and amino acids catabolism. Proteins with decreased levels of expression include those related to protein synthesis and glycolysis. Aditionally proteins involved in oxidative stress response and cell defense exhibit increased levels of expression such as superoxide dismutase, heat shock proteins, cytochrome c peroxidase and thioredoxins. A mutant was generated to assess the importance of the enzyme cytochrome c peroxidase during infection suggesting involvement in a complex system of protection against oxidative stress, reinforcing role in the survival of the fungus. The proteomic profile of Paracoccididioides sp in response to internalization in macrophages, first described, reflects significant remodeling of fungal metabolism against oxidative stress and highlighting the versatility of the fungus to adapt to the hostile environment of the macrophage seeking new strategies survival. / O fungo Paracoccidioides é um patógeno humano causador da micose sistêmica paracoccidioidomicose (PCM). A infecção ocorre através da inalação de propágulos do fungo pelo hospedeiro e os macrófagos são importantes na contenção inicial do fungo por meio de mecanismos inatos. Neste estudo realizamos a análise do perfil proteômico de células leveduriformes de Paracoccidioides, isolado Pb18, recuperadas da infecção em macrófagos J774 A1 para identificar moléculas que são expressas nesta condição e poderiam representar alvos para novas terapias antifúngicas. Nas análises de expressão diferencial de proteínas foi possível detectar 181 proteínas com indução da expressão e a diminuição da expressão foi observada em 245 proteínas em Pb18. Os dados obtidos revelam a regulação positiva de proteínas nos processos envolvidos no metabolismo alternativo do carbono como gliconeogênese, beta-oxidação de ácidos graxos e catabolismo de aminoácidos. As proteínas com diminuição nos níveis de expressão incluem aquelas relacionadas à glicólise e síntese proteica. Ainda proteínas envolvidas na resposta ao estresse oxidativo e defesa celular apresentam aumento nos níveis de expressão tais como superóxido dismutase, proteínas de choque térmico, tioredoxinas e citocromo C peroxidase. Um mutante foi gerado para avaliar a importância da enzima citocromo c peroxidase durante a infecção sugerindo o envolvimento em um complexo sistema de proteção contra o estresse oxidativo, reforçando papel na sobrevivência do fungo. O perfil proteômico de Paracoccididioides spp em resposta à internalização em macrófagos, descrito pela primeira vez, reflete significativo remodelamento do metabolismo do fungo frente ao estresse oxidativo e ressalta a versatilidade do fungo em adaptar-se ao ambiente hostil do macrófago buscando novas estratégias de sobrevivência.