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Estudo da infecção e resposta imune a Porphyromonas gingivalis e do perfil imunogenético em mestiços brasileiros portadores de periodontite crônicaTunes, Urbino da Rocha January 2006 (has links)
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Tese_ICS_ Urbino da Rocha Tunes.pdf: 1098875 bytes, checksum: ac782c32d15adc75a543331375ca0baf (MD5) / FAPESB;FBDC;LABIMUNO/ICS/UFBA / Periodontite é uma doença multifatorial que se inicia e é mantida pela agressão das bactérias
periodontopatogênicas do biofilme dental subgengival, cuja forma de manifestação clínica é
dependente do tipo de resposta imuno-inflamatória provocada pela complexa interação patógenohospedeiro.
Dentre essas bactérias, a Porphyromonas gingivalis tem sido associada com o início e
progressão da DP, principalmente em indivíduos adultos. Ademais, há evidências de que variações na
resposta imune do hospedeiro estão, em parte, sob controle genético. Diante disto, foram objetivos do
presente trabalho: ① identificar a presença de Porphyromonas gingivalis no biofilme subgengival; ②
avaliar a produção de IL-10 e IFN-g em cultura de células de sangue total (CCST) sob estímulo com
extrato dessa bactéria, bem como a produção de IgA, IgG e subclasses (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4); ③
avaliar os polimorfismos dos genes das citocinas IL-1b+3953C/T, TNFa-308G/A, IL-6-174G/C, TGF-b1códons 10T/C e
25G/C, IFN-γ+874T/A e IL-10-1082G/A,-819C/T,-592C/A, e do HLA-DR, -DQ, associando esses achados com a
periodontite crônica severa. Oitenta e quatro indivíduos não-fumantes, idade de 30 a 50 anos, de ambos
os gêneros, foram selecionados para o estudo: 43 pacientes com periodontite crônica severa
constituíram o grupo caso (PCS) e 41 pacientes sem periodontite, o grupo controle (NP). Parâmetros
clínicos periodontais foram avaliados. Amostras do biofilme subgengival foram coletadas para
identificação da presença de P.gingivalis, usando-se a técnica da reação em cadeia da polimerase
(PCR). Para identificação dos polimorfismos citados, foi extraído o DNA genômico de amostras de
sangue periférico, sendo a genotipagem realizada também pela PCR. Dos voluntários selecionados,
levando em conta o leucograma respectivo, CCST foi realizada com amostras sangüíneas de 35
indivíduos, 18 do grupo PCS e 17 do grupo NP, estimulada com antígenos bacterianos. As
concentrações das citocinas nos sobrenadantes e das imunoglobulinas séricas foram determinadas
utilizando-se o teste ELISA. A análise estatística foi realizada usando os testes t-student, Mann-
Whitney, Teste de Correlação de Spearman e Teste Exato de Fisher. Foi detectada a presença de
P.gingivalis em 29 (67,4%) dos pacientes do grupo PCS enquanto que a presença deste
periodontopatógeno não foi observada em nenhum dos indivíduos do grupo NP. Os antígenos testados
induziram altas concentrações de IL-10, e baixa de IFN-γ, especialmente P.gingivalis. CCST do grupo
PCS apresentou significativamente (p<0,05) maior produção de IL-10, do que do grupo NP, quando foi
estimulada com LPS de E.coli e extrato de P.gingivalis. Quanto à resposta imune humoral, os níveis
séricos de IgG, IgG1, IgG4 (p£0,001) e IgG2 (p£0,05) anti-P.gingivalis foram significantemente mais
elevados no grupo PCS em comparação ao grupo NP. Nos polimorfismos estudados foram encontradas
diferenças estatisticamente significativas nas freqüências alélicas, genotípicas e fenotípicas entre os
indivíduos do grupo PCS e NP em relação ao gene da IL-1b+3953(C/T); o genótipo homozigoto para o
alelo 1 (CC), fenótipo previsto como baixo produtor, teve freqüência significativamente maior
(p=0,03) no grupo NP (81,48%) do que no PCS (65%); inversamente, e com tendência de significância
estatística (p=0,08), o alelo 2 da IL-1b+3953(T), fenótipo previsto como alto produtor, estava associado
mais ao grupo PCS (21,25%) do que ao NP (10,53%). Foi também observada uma freqüência
significativamente maior (p<0,05) do alelo HLA-DQB1*05 nos indivíduos do grupo NP em relação ao
grupo PCS. A produção elevada de IL-10 e baixa de IFN-γ na CCST estimulada com extrato bruto de
P.gingivalis dos pacientes do grupo PCS, bem como elevados níveis de IgG4 anti-Pg, podem sugerir
que este periodontopatógeno desvia a resposta imune para um perfil Th2. Por sua vez, os resultados
dos polimorfismos sugerem que o genótipo homozigoto para o alelo 1 (CC) da IL-1b+3953(C) pode ser
um fator de proteção, assim como o alelo HLA-DQB1*05, e que o alelo 2 IL-1b+3953(T) pode ser um
fator de risco para o desenvolvimento da periodontite crônica severa, em mestiços brasileiros.
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