Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-10-19T15:50:16Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3871598 bytes, checksum: d01a66b461589ef1a7e72331c344dede (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-19T15:50:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3871598 bytes, checksum: d01a66b461589ef1a7e72331c344dede (MD5) Previous issue date: 2014-12-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neste trabalho, utilizamos pinçamento óptico com espectroscopia de força para caracterizar a influência do intercalante brometo de etídio em moléculas de DNA, condensadas por espermina. Os experimentos foram conduzidos em duas etapas. Primeiro, verificamos a capacidade do brometo de etídio em impedir a formação de condensados de DNA por adição de espermina, em segundo lugar, verificamos se seria possível ocorrer intercalação do brometo de etídio em moléculas de DNA previamente condensadas por espermina. Realizamos também o mesmo tipo de experimento, mas agora fazendo análises através de eletroforese em gel de agarose, para fins comprobatórios dos resultados obtidos com espectroscopia de força. Tais análises nos permitiram verificar que o brometo de etídio, quando previamente adicionado na solução contendo DNA, impede que molécula de espermina condense o DNA. Os resultados obtidos nos mostraram que o oposto não ocorre, ou seja, o brometo de etídio tem pouca influência sobre condensados de DNA previamente formados por ação de espermina. / In this work, we use with optical clamping force spectroscopy to characterize the influence of the intercalator ethidium bromide in DNA molecules condensed by spermine. The experiments were conducted in two stages. First, we checked the ability of ethidium bromide to prevent the formation of condensed DNA by addition of spermine, end second we investigate the possibility of the intercalation of ethidium bromide in DNA molecules condensed by spermine previously. We also performed the same type of experiment, but now doing analysis by electrophoresis on agarose gel, for evidentiary purposes the results obtained from force spectroscopy. Such analysis allowed us to verify that ethidium bromide when previously added in the solution containing DNA prevents spermine to condense DNA molecule. The result showed that the opposite does not occurs, i.e.,ethidium bromide has little influence on pre-condensed DNA formed by the action of spermine.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-12-17T15:08:02Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 828791 bytes, checksum: 0117b659682df22a53ef07aea17eea74 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-17T15:08:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 828791 bytes, checksum: 0117b659682df22a53ef07aea17eea74 (MD5) Previous issue date: 2014-12-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neste trabalho foi caracteizado o efeito do intercalante brometo de etídio (EtBr) no processo de condensação de DNAs utilizando espectroscopia de força e eletroforese em gel. Testamos o agente de condesação conhecido como PEG (polietileno glicol), um polímero neutro, que promove a ψ-condensação do DNA. Foram realizadas duas sequências diferentes de experimentos. Na primeira sequência, as moléculas de DNAs dispersas em solução são primeiramente complexadas com o intercalante EtBr, e, em seguida, o agente de condensação é adicionado à amostra com a finalidade de se avaliar os efeitos do intercalante no impedimento da condensação dos DNAs. Na segunda sequência do experimento, as moléculas de DNAs são primeiramente condensadas, e, em seguida, o intercalante é adicionado à amostra a fim de verificar a sua influência sobre os DNAs previamente condensados. Os resultados obtidos com as duas diferentes técnicas experimentais utilizadas concordam muito bem, indicando que o intercalante EtBr pode prejudicar a ψ-condensação dos DNAs. E o mais interessante, o EtBr é bastante eficiente em intercalar os DNAs ψ-condensados. / In this study effect of intercalating ethidium bromide (EtBr) in the condensation process using DNAs force spectroscopy and gel electrophoresis was characterized. We tested the condensing agent PEG (polyethylene glycol), a neutral polymer, which promotes ψ-condensation of DNA. Sequences of two different experiments were performed. In the first sequence, the DNA molecules dispersed in solution are first complexed with the intercalator EtBr, and then, the condensing agent is added to the sample in order to evaluate the effects of intercalator in the hindrance of condensation of DNA. In the second sequence of the experiment, the molecules of DNA are first condensed, and the the intercalant, is added to the sample in order to check its influence on the previously condensed DNA. The results obtained with two different experimental techniques agree very well, indicating that the intercalator EtBr can impair ψ-condensation of DNA. And interestingly, the EtBr is quite efficient in the intercalating ψ-condensed DNA. / Autor não enviou o arquivo PDF, como solicitado por e-mail em 13/10/2015.