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Investigação da atividade antifúngica, mecanismo de ação e análise do perfil proteico de Trichophyton rubrum E Microsporum canis frente a derivados de Piper umbellatum

Freitas, Jolindo Alencar [UNESP] 02 July 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-02. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:14:08Z : No. of bitstreams: 1 000858759_20171201.pdf: 302844 bytes, checksum: fc41d8545291484b9429470ec145989a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Piper umbellatum L. Miq. é uma planta pertencente à família Piperaceae encontrada em todas as regiões do Brasil e tradicionalmente usada para diversas enfermidades e afecções. O trabalho visou estudar a atividade antifúngica de P. umbellatum frente a isolados clínicos de Microsporum canis e Trichophyton rubrum, por meio da determinação da concentração inibitória mínima (CIM). O estudo fitoquímico dos extratos hexânico e etanólico de partes aéreas de Piper umbellatum levou ao isolamento de 2 substâncias, a sesamina e o 4-nerolidicatecol (4NC). Frente a M. canis, o extrato etanólico apresentou CIM de 39,1 μg/mL, o hexânico apresentou CIM de 1250 μg/mL, enquanto os extratos clorofórmico e acetato de etila apresentaram CIMs de 78,13 μg/mL, sendo 16 μg/mL para o fluconazol como controle positivo para ambos os fungos. O fracionamento do extrato etanólico levou à obtenção da fração 11 que apresentou o melhor valor de CIM entre as frações, de 9,77 μg/mL para o M. canis. O 4NC foi obtido desta fração 11 e apresentou os melhores CIMs observado deste estudo, de 2,4 μg/mL para M. canis e 4,88 μg/mL, para T. rubrum. Após tratamento com 4NC, Microsporum canis demonstrou uma alteração no perfil proteico avaliado por SDS-PAGE, com o aparecimento de bandas de aproximadamente 139 e 30 kDa entre as proteínas intracelulares e de 35 e 15 kDa entre as extracelulares, bandas que foram analisadas por LC-MS/MS (MALDI-TOF/TOF). O extrato etanólico não demonstrou citotoxicidade a 500 μg/mL, enquanto o 4NC apresentou valores de IC50 de 18,3 e 31,5 μg/mL frente às linhagens de Hep G2 e MRC-5. / Piper umbellatum L. Miq. is a plant belonging to the Piperaceae family found in all regions of Brazil and traditionally used for various diseases and disorders. This work evaluates the antifungal activity of P. umbellatum against clinical isolates of Microsporum canis and Trichophyton rubrum by the determination of minimal inhibitory concentration (MIC).The phytochemical study of hexane and ethanol extracts of the aerial parts of Piper umbellatum led to the isolation of two substances, sesamin and 4-nerolidylcatechol (4NC). When tested against M. canis, the ethanol extracts showed MIC value of 39.06 μg/mL meanwhile the chloroform and ethyl acetate extracts showed MICs value of 78.13 μg/mL and the hexane extract showed MIC of 1250 μg/mL, the MIC value of fluconazole used as control was 16 μg/mL. The fractionation of the ethanol extract led to obtain of fraction 11 that presented the best MIC between the fractions, of 9.77 μg/mL to M. canis. 4NC was obtained from fraction 11 and presented the best MIC in this study, 2.44 μg/mL for M. canis and 4.88 μg/mL, for T. rubrum. M. canis showed a change in the protein profile in SDS-PAGE after treatment with 4NC, with the appearance of bands of approximately 139 and 30 kD intracellular protein and 35 and 15 kDa in extracellular protein, each of those bands was analyzed through LC-MS/MS (MALDI-TOF/TOF). The ethanolic extract wasn‟t citotoxic until 500 μg/mL, while 4NC presented IC50 values of 18.3 and 31.5 μg/ml to Hep G2 and MRC-5 cell lines. / FAPESP: 13/10578-0
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Relação entre caracteres agronômicos e anatômicos em milho

Nascimento Júnior, Ivanildo Ramalho do [UNESP] 18 September 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-09-18. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:50:56Z : No. of bitstreams: 1 000865165.pdf: 1294485 bytes, checksum: 7e667ea47519143baa495bc33a9fc769 (MD5) / Aspectos agronômicos como produtividade, estatura da planta, altura de inserção da espiga, suscetibilidade ao acamamento e quebramento do colmo apresentam herança quantitativa, sendo altamente influenciados pelo ambiente, o que dificulta a obtenção de genótipos superiores através da seleção direta desses caracteres. Já as estruturas anatômicas são mais estáveis e a sua avaliação, além de simples e de baixo custo, pode ser feita em estágios precoces da planta, diferente dos aspectos agronômicos que há necessidade de espera para que sejam expressos e assim avaliados. Sendo assim objetivou-se identificar a existência de associações entre os caracteres anatômicos da raiz, colmo e folha, e agronômicos em variedades de milho. Foram realizados estudos de parâmetros genéticos, correlação genotípica, correlação canônica, análise de fatores e de trilha através dos caracteres agronômicos (altura da planta, altura de inserção da espiga, posição relativa da espiga, acamamento, quebramento de planta e produtividade de grãos), anatômicos da raiz (área total da raiz, área do cilindro central, espessura da epiderme, espessura da exoderme, espessura do parênquima cortical, espessura da endoderme, número de vasos do metaxilema, área do floema, espessura do córtex e área do metaxilema), do colmo (área média do xilema, área média do floema, área média dos feixes vasculares e o números de feixes vasculares) e da folha (espessura das células buliformes, espessura da epiderme adaxial, espessura da epiderme abaxial, espessura do mesofilo, área do xilema, área do floema, área do esclerênquima, área média dos feixes vasculares). No estudo de associações entre os caracteres anatômicos da raiz e agronômicos observou-se através da análise da correlação canônica a existência de relação entre a altura de planta e os caracteres anatômicos área total da raiz, área do cilindro central, espessura... / Agronomic aspects such as productivity, plant height, the ear height, susceptibility to lodging and stem breakage have quantitative inheritance, being highly influenced by the environment, making it difficult to obtain superior genotypes through direct selection of these characters. The anatomical structures are more stable and their assessment, beyond simple and low cost, can be held in the early stages of the plant, different from the agronomic aspects that need to wait for it to be expressed and evaluated. Therefore, the objective of this work was to identify the associations between the anatomical characteristics of root, stem and leaf, and agronomic in maize varieties. Studies of genetic parameters, genotypic correlation, canonical correlation, factors analysis and path analysis across the agronomic characters (plant height, ear height, ear placement, lodging, plant breakage and grain yield), anatomic root (total área of root, central cylinder area, epidermal thickness, exodermis thickness, cortical parenchyma thickness, endoderm thickness, number of metaxylem vessels, phloem area, cortex thickness and metaxylem area), the stem (average area of xylem, average area of phloem, average area of vascular bundles and number of vascular bundles) and the leaf (bulliform cells thickness, adaxial epidermis thickness, abaxial epidermis thickness, mesophyll thickness, xylem area, phloem area, sclerenchyma area, average area of vascular bundles) were performed. In the study of associations between the anatomical characters of root and agronomic observed through the canonical correlation analysis the existence of relationship between plant height and anatomical characters total area of root, central cylinder area, cortex thickness and cortical parenchyma thickness. In the study of associations between the anatomical characters of stem and agronomic, based on factors analysis, strong association between number of vascular bundles, plant height ...
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Investigação da atividade antifúngica, mecanismo de ação e análise do perfil proteico de Trichophyton rubrum E Microsporum canis frente a derivados de Piper umbellatum /

Freitas, Jolindo Alencar. January 2015 (has links)
Orientador: Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Coorientador: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Ana Helena Januario / Banca: Tais Maria Baub / Resumo: Piper umbellatum L. Miq. é uma planta pertencente à família Piperaceae encontrada em todas as regiões do Brasil e tradicionalmente usada para diversas enfermidades e afecções. O trabalho visou estudar a atividade antifúngica de P. umbellatum frente a isolados clínicos de Microsporum canis e Trichophyton rubrum, por meio da determinação da concentração inibitória mínima (CIM). O estudo fitoquímico dos extratos hexânico e etanólico de partes aéreas de Piper umbellatum levou ao isolamento de 2 substâncias, a sesamina e o 4-nerolidicatecol (4NC). Frente a M. canis, o extrato etanólico apresentou CIM de 39,1 μg/mL, o hexânico apresentou CIM de 1250 μg/mL, enquanto os extratos clorofórmico e acetato de etila apresentaram CIMs de 78,13 μg/mL, sendo 16 μg/mL para o fluconazol como controle positivo para ambos os fungos. O fracionamento do extrato etanólico levou à obtenção da fração 11 que apresentou o melhor valor de CIM entre as frações, de 9,77 μg/mL para o M. canis. O 4NC foi obtido desta fração 11 e apresentou os melhores CIMs observado deste estudo, de 2,4 μg/mL para M. canis e 4,88 μg/mL, para T. rubrum. Após tratamento com 4NC, Microsporum canis demonstrou uma alteração no perfil proteico avaliado por SDS-PAGE, com o aparecimento de bandas de aproximadamente 139 e 30 kDa entre as proteínas intracelulares e de 35 e 15 kDa entre as extracelulares, bandas que foram analisadas por LC-MS/MS (MALDI-TOF/TOF). O extrato etanólico não demonstrou citotoxicidade a 500 μg/mL, enquanto o 4NC apresentou valores de IC50 de 18,3 e 31,5 μg/mL frente às linhagens de Hep G2 e MRC-5. / Abstract: Piper umbellatum L. Miq. is a plant belonging to the Piperaceae family found in all regions of Brazil and traditionally used for various diseases and disorders. This work evaluates the antifungal activity of P. umbellatum against clinical isolates of Microsporum canis and Trichophyton rubrum by the determination of minimal inhibitory concentration (MIC).The phytochemical study of hexane and ethanol extracts of the aerial parts of Piper umbellatum led to the isolation of two substances, sesamin and 4-nerolidylcatechol (4NC). When tested against M. canis, the ethanol extracts showed MIC value of 39.06 μg/mL meanwhile the chloroform and ethyl acetate extracts showed MICs value of 78.13 μg/mL and the hexane extract showed MIC of 1250 μg/mL, the MIC value of fluconazole used as control was 16 μg/mL. The fractionation of the ethanol extract led to obtain of fraction 11 that presented the best MIC between the fractions, of 9.77 μg/mL to M. canis. 4NC was obtained from fraction 11 and presented the best MIC in this study, 2.44 μg/mL for M. canis and 4.88 μg/mL, for T. rubrum. M. canis showed a change in the protein profile in SDS-PAGE after treatment with 4NC, with the appearance of bands of approximately 139 and 30 kD intracellular protein and 35 and 15 kDa in extracellular protein, each of those bands was analyzed through LC-MS/MS (MALDI-TOF/TOF). The ethanolic extract wasn‟t citotoxic until 500 μg/mL, while 4NC presented IC50 values of 18.3 and 31.5 μg/ml to Hep G2 and MRC-5 cell lines. / Mestre
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Caracterização da composição química dos óleos essenciais de Lychnophora pinaster Mart. em função da sazonalidade /

Silva, Paulo Sérgio Siberti da, 1988- January 2013 (has links)
Orientador: Marcia Ortiz Mayo Marques / Banca: Elizabeth Orika Ono / Banca: Paulo Roberto Hrihorowitsch Moreno / Resumo: Avaliou-se a influência da sazonalidade no rendimento e composição química dos óleos essenciais de Lychnophora pinaster. O material vegetal foi coletado em Carrancas e Ingaí, Minas Gerais, no verão, outono, inverno e primavera de 2012. Foram utilizadas três populações nativas, denominadas Serra Branca, Serra do Salto (provenientes de Carrancas) e Serra da Arnica (Ingaí). Foram amostrados 25 acessos por população e os óleos essenciais das folhas extraídos por hidrodestilação e a análise da composição química conduzida em CG-EM. A sazonalidade não exerceu influência no rendimento médio de óleo essencial das populações Serra Branca e Serra do Salto e destas, Serra do Salto apresentou em todas as estações do ano maior rendimento médio (0,43% a 0,61%). Para Serra da Arnica observou-se estatisticamente influência da sazonalidade no rendimento médio de óleo essencial no inverno (0,79%). Os óleos essenciais das três populações apresentaram as mesmas substâncias, cujas majoritárias foram o trans-cinamato de metila e o trans-cariofileno. Serra Branca apresentou em todas as estações a maior proporção relativa média de trans-cariofileno (16,01% a 23,1%), alfa-humuleno (4,64% a 6,7%), óxido de cariofileno (4,79% a 5,76%) e cedr-8-(15)-en-9-alfa-ol (1,98% a 2,73%). Nesta população, os acessos que mais se correlacionaram com o acúmulo das substâncias com maior proporção relativa média, nas quatro estações foram: Pop 101, Pop 103 e Pop 125 (óxido de cariofileno), Pop 113 e Pop 123 (trans-cariofileno e alfa-humuleno) e Pop 112 e Pop 119 (trans-cinamato de metila). Serra do Salto apresentou a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The influences of seasonality on the yield and the chemical composition of the essential oils from Lychnophora pinaster were evaluated. The plant material was collected in the regions of Carrancas and Ingaí, State of Minas Gerais, Brazil, during the whole year of 2012. Three native populations were sampled: Serra Branca, Serra do Salto (Carrancas), and Serra da Arnica (Ingaí) - a total sample of 75 plants (25 for each population). The essential oils were extracted by hydro-distillation and the analyses of chemical composition were made by GC-MS. The seasonality did not present a significant effect on the average essential oil yield of the Carrancas populations - Serra do Salto showed the highest values on essential oil production (0.43% to 0.61%). For the population of Serra da Arnica, the seasonality presented significant influence on essential oil yield and the winter sample showed the highest values in this population (0.79%). Chemically all populations presented the same composition and the main substances were trans-methyl cinnamate and trans- caryophyllene. The Serra Branca population presented the highest relative proportion of trans-caryophyllene (16.01% to 23.1%), alpha-humulene (4.64% to 6.7%), caryophyllene oxide (4.79% to 5.76%) and cedr-8-(15)-en-9-alpha-ol (1.98% to 2.73%). In this population the plants with highest correlation with the accumulation of main substances during the whole year were Pop-101, Pop-103... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Produtividade e perfil químico de óleo essencial de acessos de Varronia curassavica Jacq. em diferentes horários de coleta e período sazonal /

Marques, Ana Paula da Silva, 1986. January 2016 (has links)
Orientador: Filipe Pereira Giardini Bonfim / Coorientador: Marcia Ortiz Mayo Marques / Banca: Luiz Fernando Rolim de Almeida / Banca: André Reiko Oliveira Higuti / Resumo: Nativa da Mata Atlântica, Varronia curassavica Jacq. é uma espécie vegetal arbustiva, pertencente à família Boraginaceae, utilizada na medicina popular no combate à inflamações, úlceras, artrite, como também por seus efeitos anti-inflamatório, analgésico, cicatrizante e de combate à febre. Seu papel medicinal se dá em virtude da ação terapêutica de seu óleo essencial, que é produzido e armazenado em seus tricomas glandulares, que recobrem a superfície foliar. Este estudo teve por objetivo caracterizar o rendimento e o perfil do óleo essencial de quatro acessos de V. curassavica Jacq. em diferentes horários do dia e da sazonalidade, de forma facilitar o planejamento do manejo de acordo com o perfil e rendimento de óleo desejado, bem como identificar possíveis variações de perfil entre os acessos. O material vegetal trabalhado foi oriundo de diferentes estados brasileiros, entre eles, Bahia, São Paulo, Rio de Janeiro e Piauí, porém cultivados na cidade de Botucatu/SP, e o sistema de extração de óleo essencial utilizado foi o de hidrodestilação em aparato Clevenger. Somente as folhas foram utilizadas no preparo das amostras. Os tratamentos de horário de coleta em cada estação foram: 06h, 09h, 12h, 15h e 18h, contando com quatro repetições cada. Para avaliar o efeito de sazonalidade, amostras foram colhidas dentro dos horários na primavera, verão, outono e inverno, 15 dias após o início da estação. O rendimento foi calculado com base na massa seca das amostras e os dados foram submetidos à análise estatística de variância, além de regressão e teste de médias quando necessário. Os dados demonstram a ocorrência de diferentes rendimentos de óleo essencial entre os acessos no decorrer do dia e nas estações do ano. Sendo que o acesso que mais se destacou em rendimento durante o ano foi o nativo da Bahia. Os horários de maiores rendimentos de óleo ... / Abstract: Native of the Atlantic Forest, Varronia curassavica Jacq. it's a shrubby plant species belonging to the Boraginaceae family, used in folk medicine to fight inflammation, ulcers, arthritis, as well as for its anti-inflammatory, analgesic, healing and anti-fever. His medical paper occurs due to the therapeutic action of the essential oil, that is produced and stored in their glandular trichomes, that covers your foliar surface. This research project aimed to characterize the yield and essential oil profile of four accesses V. curassavica Jacq. at different harvesting daytime at each season, in order to facilitate the planning of management according to the profile and yield of desired oil, as well as identify possible variations profile among accesses. Plant materials worked are from different Brazilian states, including Bahia, São Paulo, Rio de Janeiro and Piauí, but growning in the city of Botucatu/SP, and the essential oil extraction system used to hydrodistillation was Clevenger apparatus. Only the leaves were used to prepare the samples. The harvesting schedule treatments at each season were: 06h, 09h, 12h, 15h and 18h, with four replications each. To evaluate the effect of seasonality samples were collected in the spring, summer, autumn and winter, 15 days after the start of season. The yield was calculated based on the dry weight of the samples and the data were subjected to statistical analysis of variance, and regression and factor analysis when necessary, in Assistat software. The data demonstrate the occurrence of different essential oil yield between accesses throughout the day and the seasons. The access that stood out in income during the year was the native of Bahia. From the chemical analysis of the essential oil composition, we can see that accesses worked have different chemical profiles, occurring greater compositional similarity between the southeastern access, and that the ... / Mestre

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