Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-10-19T13:48:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 763255 bytes, checksum: 11f247d451047f658af1c92d00bd40d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-19T13:48:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 763255 bytes, checksum: 11f247d451047f658af1c92d00bd40d7 (MD5) Previous issue date: 2015-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Fitonematoides são patógenos de difícil manejo, extremamente importantes para a agricultura mundial. Entre as medidas de manejo utilizadas, o controle biológico tem ganhado espaço, principalmente pela maior conscientização acerca dos malefícios causados pelos nematicidas químicos à saúde humana e ao meio ambiente. No presente trabalho, avaliou-se a compatibilidade entre o fungo nematófago Pochonia chlamydosporia e isolados bacterianos obtidos em raízes de plantas antagonistas no manejo de Meloidogyne javanica em casa de vegetação, bem como a utilização de substrato sólido para a multiplicação do isolado bacteriano selecionado para o controle de nematoides. Testando o efeito de Pochonia chlamydosporia, Gracilibacillus dipsosauri e de um condicionador de solo organo-mineral no controle de Meloidogyne javanica em tomateiro, observou-se que na interação dos três tratamentos, e na interação entre G. dipsosauri e P. chlamydosporia, a redução no número de galhas radiculares causadas pelo nematoide foi de 48 e 41% respectivamente. Os tratamentos com G. dipsosauri e P. chlamydosporia + Ribumin proporcionaram redução de 26 e 21% no número de ovos respectivamente. A interação entre o fungo nematófago e a rizobactéria foi positiva para o controle do nematoide, apesar do fato de G. dipsosauri ter inibido o crescimento do fungo P. clamydosporia em até 30% em teste in vitro. Avaliando o controle de M. javanica em tomateiro com bactérias endofíticas, observou-se que dos 51 isolados obtidos, 18 foram eficientes em reduzir o número de galhas de M. javanica, resultando em 51 a 75% de controle em relação à testemunha. Cinco isolados reduziram o número de massas de ovos de 65 a 75% em relação ao tratamento testemunha. Os tratamentos com os isolados Cs-2, Cs-12 e Mc-3 causaram 22, 24 e 27% de imobilidade nos J2 de M. javanica respectivamente. Os isolados Cs-2, Cp-5 e Mc-3, quando aplicados via irrigação do solo, reduziram em até 46% o número de galhas de M. javanica. Além disso, o isolado Mc-3 mostrou-se eficiente também na microbiolização de sementes, reduzindo grandemente a multiplicação do nematoide no interior das raízes. O fungo P. chlamydosporia não produziu compostos antibióticos contra os isolados bacterianos testados e os isolados Cs-2, Cs-12, Cp-1 e Mc-3 foram os que apresentaram maior compatibilidade nos testes de antibiose, efeito dos compostos voláteis e confrontação direta realizados in vitro. Quando aplicados via microbiolização de sementes, observou-se que o tratamento com a bactéria Mc-3 proporcionou redução de 23% no número de ovos do nematoide. A combinação da bactéria Cs-2 com Pc-10 proporcionou redução de 31% e a combinação das três bactérias com P. chlamydosporia proporcionou redução de 37%. Na aplicação via irrigação, Pc-10 isoladamente reduziu o número de galhas em 33% e quando associado a Mc-3, em 30%. Já quanto ao número de ovos por sistema radicular, as reduções foram de 64, 60 e 49% quando o solo foi tratado com Mc-3, Pc-10 e na interação de ambos, respectivamente. Por fim, nos testes para produção de esporos do isolado Mc-3 (Bacillus sp.) em meio sólido, observou-se que a aplicação de 100 mL de água nos sacos contendo 300g de arroz em pré autoclavagem, seguido da aplicação de suspensão bacteriana e incubação por 5 dias a 30° é eficiente em produzir C esporos de Mc-3, gerando em média 1 x 109 esporos por grama de arroz. A adição de meios de cultura líquidos à suspensão bacteriana pós autoclavagem não resultou em aumento da produção. Já a aplicação de doses crescentes de farelo de soja ao arroz, mostrou que a aplicação de 10-20 g de farelo de soja por saco, proporciona aumento da produção de esporos de Mc-3. / Plant-parasitic nematodes are unwieldy pathogens, extremely important for global agriculture. Among the management measures used, biological control has gained ground, mainly due to increased awareness of the harm caused by chemical nematicides to human health and the environment. In this study, were evaluated the compatibility between the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia (Pc-10) and bacteria isolated from nematode-antagonistic plant roots in the management of Meloidogyne javanica in the greenhouse, and the use of solid substrate for multiplication of selected bacterial isolate for the control of nematodes. Testing the effect of Pochonia chlamydosporia, Gracilibacillus dipsosauri and an organo-mineral soil conditioner in the control of Meloidogyne javanica in tomato plants, it was observed that the interaction of the three treatments, and the interaction between G. dipsosauri and P. chlamydosporia, reduction the number of root galls caused by the nematode was 48 and 41%, respectively. Treatments with G. dipsosauri and P. chlamydosporia + soil conditioner resulted in the reduction of 26 and 21% of the number of eggs, respectively. The interaction between the nematophagous fungi and rhizobacteria was positive for controlling nematode, despite the fact that G. dipsosauri inhibited the growth of the fungus P. clamydosporia by 30% in vitro test. Evaluating the control of M. javanica in tomato with endophytic bacteria, it was observed that from the 51 isolates obtained, 18 were effective in reducing the number of galls caused by M. javanica, resulting in 51-75% control when compared to the control treatment. Five isolates reduced the number of egg masses from 65 to 75% when compared to the control treatment. The treatments with the isolates Cs-2, Cs-12 and Mc-3 caused 22, 24 and 27% in immobility J2 of M. javanica respectively. The isolates Cs-2, Cp-5 and Mc-3, when applied via irrigation of the soil, reduced the number of galls of M. javanica by 46%. Furthermore, the isolate Mc-3 was also efficient when used through seed treatment, greatly reducing nematode multiplication in the roots. The fungus P. chlamydosporia did not produce antibiotic compounds against the bacterial isolates, and Cs-2, Cs-12, Cp-1 and Mc-3 isolates had the highest compatibility with the fungus in antibiosis, effect of volatile compounds and direct confrontation tests, performed in vitro. When applied to seeds, it was observed that treatment with Mc-3 bacterium gave 23% of reduction in the number of nematode eggs. The combination of Cs-2 bacteria and Pc-10 gave a reduction of 31%, and combining the three bacteria with P. chlamydosporia gave 37% reduction. When the antagonists where applied through soil irrigation, the number of galls caused by M. javanica was reduced by 33 and 30% for Pc- 10 alone and in combination with Mc-3, respectively. As for the number of eggs per root system, the reductions were 64, 60 and 49% when the soil was treated with Mc-3, Pc-10 and the interaction of both, respectively. Finally, in tests for the production of the Mc-3 (Bacillus sp.) spores in solid state fermentation, we observed that the application of 100 ml of water in bags containing 300g of pre- autoclaved rice, followed by the application of bacterial solution and incubated for 5 days at 30° is effective in producing Mc-3 spores, generating an average C of 1 x 109 spores per gram of rice. The addition of liquid culture media after autoclaving the bacterial solution did not result in increased production. The application of increasing doses of soybean meal into the rice showed that the application of 10-20 g of soybean meal provides increases in the production of Mc-3 spores.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-17T11:09:23Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 508100 bytes, checksum: 6edd668b30bf2762181cf01456fd64d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T11:09:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 508100 bytes, checksum: 6edd668b30bf2762181cf01456fd64d7 (MD5) Previous issue date: 2002-03-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Uma amostra de solo com alto teor de matéria orgânica foi dividida em frações de 1 kg e estas foram submetidas ao tratamento térmico em autoclave (120°C/1 h), em forno de microondas (4min) ou não tratadas (natural). Raízes de Mucuna aterrima, Crotalaria juncea, Tagetes erecta e Lycopersicon esculentum foram maceradas em liquidificador, peneiradas e os sucos resultantes foram adicionados, separadamente, aos três tipos de solo, aguardando-se 24h a 28°C. Isolados bacterianos foram obtidos por diluição serial como descrito por ROMEIRO (2001), a partir de suspensão aquosa de cada substrato, obtendo-se 78 isolados de rizobactérias. As rizobactérias foram submetidas à seleção massal em que sementes de tomate foram microbiolizadas por imersão em suspensão de propágulos de cada uma das culturas, semeadas e o solo foi infestado com M. javanica. Dos 78 isolados, 56 reduziram o número de galhas e 22 não apresentaram diferença significativa em relação ao controle. Quanto ao número de ovos presentes nas raízes, 26 isolados ocasionaram a redução, 43 não diferiram do controle e nove estimularam a formação. O isolado UFV-6 reduziu o número de galhas em maior proporção (80%) ao passo que o isolado UFV-8 foi o mais eficiente na redução do número de ovos (83%). Ambos os isolados foram provenientes do tratamento térmico de solo em microondas acrescidos do suco de raízes de T. erecta e de M. aterrima, respectivamente. Em contraposição, o isolado UFV-48 foi o mais deletério. Os dez isolados mais promissores foram reavaliados, em recipientes maiores pela inoculação com 1000 ovos de M. javanica por tubete e com 10 repetições. Não foi encontrada diferença no que tange ao número de galhas, mas os isolados UFV-41 e UFV-8 foram os mais eficientes em reduzir o número de ovos (35,3% e 35,0%, respectivamente). Os isolados UFV-29 e UFV-31 permitiram o aumento do número de ovos. Para investigar se o tipo de substrato pode potencializar a capacidade antagonista dos isolados UFV-8 e UFV-57 a M. javanica, comparou-se solo de terriço de mata com solo de barranco, com 15 repetições por tratamento. Os isolados reduziram galhas em 34,9% e 36,4% no solo de terriço e 41,5% e 35,3% em solo de barranco, respectivamente, não apresentando diferença significativa quanto ao tipo de substrato. Avaliou-se também a inibição da eclosão de juvenis in vitro. Os isolados mais eficientes na inibição de eclosão foram UFV-6 e UFV-53 reduzindo a eclosão em 64,9% e 85,7% respectivamente. / Five 1-kg samples of organic soil were autoclaved at 120°C for 1 hour, five were microwaved in a 660 watts and 2450Hz microwave oven at full power for 4 minutes, and five were not heat-treated. Roots of Mucuna aterrima, Crotalaria juncea, Tagetes erecta and Lycopersicon esculentum were macerated, separately, in 1000 mL of tap water in a blender at low speed for 30 seconds, sieved, and each of the resulting juices, or just tap water (control treatment) was poured on one of the treated and non-treated soil, inside of a plastic bag (5x3 factorial design). Each plastic bag was closed and vigorously shaken to mix the juice with the soil, and placed in the incubator at 28°C for 24 hours. Seventy eight bacterial isolates were obtained from all the soils by serial dilution. The screen of isolates for the biocontrol of Meloidogyne javanica was made by allowing tomato seeds to soak in water suspension of each bacterial isolate sowing them in substrate inside plastic tubes in the greenhouse, and inoculating the resulting seedlings with nematode eggs. Fifty six isolates promoted reduction of the number of root galls compared to the control treatment (seeds soaked in distilled water). Twenty six isolates promoted reduction of the number of nematode eggs per root system. The isolate UFV-6 was the most effective in reducing the number of galls (80% less than the control), and UFV-8 was the most effective in reducing egg numbers (83% reduction). Both isolates came from microwaved soil, but the UFV-6 was isolated from soil amended with T. erecta root juice and the UFV-8 from soil amended with M. aterrima root juice. The UFV-48, isolated from non-heated soil amended with tomato root juice was the most deleterious, increasing the number of eggs in 134,3% compared to the control treatment. The ten most effective isolates were re-evaluated in larger recipients (400 mL plastic pots) by the inoculation with 1,000 M. javanica eggs per plant (one plant/pot) and 10 replicates per treatment. There was no statistical difference among treatments for the number of galls, but the number of eggs was reduced in 35,3% and 35% by the UFV-41 and the UFV-8, respectively. The isolates UFV-29 and UFV-31 promoted increase in the number of eggs. In order to investigate if the substrate type has influence in the performance of the rhizobacteria, two effective isolates, the UFV-8 and the UFV-57 were tested in a highly organic soil and in a B horizon soil, with 15 replicates. They promoted gall reductions of 34,9% and 36,9% in the organic soil and 41,5% and 35,3% in the B horizon soil, respectively. Both treatments differed from the control, but did not differ from each other. The effect of ten good candidates and ten deleterious ones on the M. javanica egg hatch was evaluated in vitro. The UFV-6 and UFV-53 were the most effective, reducing egg hatch in 64,9% and 85,7%, respectively.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luciana Villanova Obici.pdf: 1177002 bytes, checksum: 01dddf93e43aa5c55d8bd97f82de407d (MD5) Previous issue date: 2009-08-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to evaluate Arachis pintoi, Canavalia ensiformis and Stylosanthes Campo Grande legumes cultivation over nematodes in naturally infested soils with a history of sugarcane crop. For this, naturally infested silt loam and clay loam soils were distributed into pots being transplanted two maize seedlings in order to facilitate nematode multiplication. After 60 days, plants aerial part was discarded and initial nematode population determined by assessing nematodes number (in the soil and roots). Legume seedlings were transplanted into the pots where remained for three or four months, analyzing again, the same nematodes populations. Maize was used as susceptible control. Finally, two sugarcane seedlings were transplanted into each pot, in order to assess the residual effect of the plants over nematodes in soil, by using the same parameters. Pratylenchus zeae and Helicotylenchus dihystera were present in analyzed samples. The results obtained showed that, regardless of soil type and cultivation time spent in pot, the three legume species were efficient for controlling P. zeae, with an outstanding effect even after 120 days of subsequent sugarcane cultivation. Canavalia ensiformis allowed increasing of H. dihystera population, whereas the other legumes caused its reduction. The conducted work allowed concluding that the three tested legumes may be used to P. zeae control. However, more studies need to be performed in relation to its effect, and in particular for C. ensiformis, over H. dihystera / O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o cultivo das leguminosas Arachis pintoi, Canavalia ensiformis e Stylosanthes Campo Grande sobre os nematoides em solos naturalmente infestados com histórico de cultivo de cana-de-açúcar. Para isto, um solo franco siltoso e um solo franco argiloso, naturalmente infestados, foram distribuídos em vasos, nos quais foram transplantadas duas plântulas de milho, para possibilitar a multiplicação dos nematoides. Após 60 dias, a parte aérea das plantas foi descartada e determinou-se a população inicial, por contagem dos nematoides (no solo e raízes). Plântulas das leguminosas foram transplantadas para vasos, onde permaneceram durante três ou quatro meses, avaliando-se novamente as populações de nematoides. Foi utilizado milho como testemunha suscetível. Por fim foram transplantadas duas plântulas de cana-de-açúcar para cada vaso, com o intuito de avaliar o efeito residual das leguminosas sobre os nematoides no solo, analisando-se os mesmos parâmetros. Nas amostras avaliadas registrou-se a presença de Pratylenchus zeae e Helicotylenchus dihystera. Os resultados obtidos mostraram que, independente do tipo de solo e do tempo de cultivo, as três espécies de leguminosas foram eficientes na redução de P. zeae, com efeito ainda pronunciado após 120 dias do cultivo subsequente da cana-de-açúcar. Canavalia ensiformis possibilitou o aumento populacional de H. dihystera, enquanto as outras duas leguminosas promoveram a sua redução. O trabalho realizado permitiu concluir que as três leguminosas testadas poderão ser utilizadas no controle de P. zeae. No entanto, mais estudos terão que ser realizados relativamente ao seu efeito, e em particular de C. ensiformis sobre H. dihystera

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-12T14:32:01Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 542283 bytes, checksum: cd1ed1637b5061fa4b2058e4939d7e3c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-12T14:32:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 542283 bytes, checksum: cd1ed1637b5061fa4b2058e4939d7e3c (MD5) Previous issue date: 2001-03-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Com o objetivo de estudar o efeito do parental suscetível e a genética da resistência de ‘Criollo de Morelos 334’ (CM334) a P. capsici por meio de análise mendeliana e mapeamento de QTLs (“Quantitative trait loci”), duas linhagens, L-3436 e L-3513, e um cultivar, California Wonder (CW), foram utilizados em cruzamentos com CM334. Experimentos de inoculação com suspensões de zoósporos aplicadas ao solo ou atomizadas na parte aérea das plantas confirmaram a resistência de CM334 e revelaram o seguinte gradiente de suscetibilidade, do mais para o menos suscetível: L-3513 > CW > L-3436. Em experimentos de inoculação via solo, esse mesmo gradiente foi observado para os híbridos F1 entre CM334 e esses três parentais bem como para as respectivas gerações F2 e retrocruzamentos, evidenciando a importância do parental recorrente no melhoramento para incorporação de resistência a P. capsici. Segregações observadas em inoculações em bandejas não puderam ser explicadas por nenhum dos modelos genéticos sugeridos previamente para a resistência de CM334 a P. capsici. Em plantas inoculadas individualmente em copos plásticos de 500 mL, entretanto, os resultados ajustaram-se a um modelo de herança com dois genes dominantes independentes para o cruzamento entre L-3436 e CM334, cada um herdado de um dos parentais, sugerindo que as condições de inoculação tem grande efeito sobre os resultados. Uma população de 114 plantas F2 do cruzamento entre L-3436 e CM334 foi utilizada para a análise de ligação a partir de 174 marcadores RAPD (“Random Amplified Polymorphic DNA”), distribuídos em dois mapas contendo cada um apenas marcadores em fase de acoplamento, com cobertura total de pelo menos 497 cM. As 114 famílias F3 colhidas nessas plantas foram utilizadas para a avaliação de resistência no colo e raízes em três experimentos independentes, apresentando distribuições aproximadamente contínuas de valores de porcentagem de sobrevivência. Algumas famílias transgressivas foram mais resistentes que CM334. A análise de QTLs revelou regiões significativamente associadas a resistência em pelo menos dois experimentos nos grupos de ligação 2C e 2L, 4L, 10C, 11C e 11L, explicando individualmente de 9,4 a 24% da variância fenotípica de acordo com a análise de regressão linear simples ou de 9,2 a 65,4% de acordo com o mapeamento de intervalo no programa MAPMAKER/QTL 1.1. Outras quatro regiões foram significativas em apenas um dos experimentos. Detectaram-se QTLs originários de CM334 e de L-3436, confirmando a contribuição de ambos os parentais para a resistência. Várias plantas resistentes da população de mapeamento puderam ser selecionadas com base nos fenótipos moleculares dos marcadores significativos nos grupos 2C, 11L, 4L e 10C. / In order to evaluate the effect of different genetic backgrounds on the resistance to P. capsici, to study the inheritance of the resistance and to identify QTLs contributing to resistance, two bell pepper lines, L-3513 and L-3436, and one cultivar, California Wonder (CW), were crossed to one line of the resistant Capsicum annuum introduction ‘Criollo de Morelos 334’ (CM334). The resistance of CM334 was confirmed in inoculations made by distributing zoospore suspensions near the base of the plants or by spraying them on the leaves and stems. A gradient of susceptibility with L-3513 > CW > L-3436, from the most to the least susceptible, was observed among the other parents. The same gradient was observed on the F1 hybrids between CM334 and these three varieties and also on the corresponding F2 and backcrosses, showing the importance of the recurrent parent on breeding for resistance to P. capsici. Segregation ratios observed in experiments in plastic trays did not fit to any of the inheritance models previously proposed to explain the genetics of the resistance of CM334 to P. capsici. When plants were inoculated individually in plastic pots of 500 mL, an inheritance model with two dominant genes, each one inherited from one of the parents, explained the results observed for the cross L-3436 x CM334, suggesting that inoculation conditions have a great effect on the results. A mapping population of 114 F2 plants from the cross L-3436 x CM334 was used for linkage analysis of 174 RAPD (Random Amplified Polimorphic DNA) markers, which were separated in two coupling-phase maps covering 497 cM of pepper genome. Root and crown resistance of each of the 114 F2 plants from the mapping population was evaluated in three independent inoculations of the respective selfed F3 lines, resulting in nearly continuous frequency distributions for values of percent of survival. Transgressive F3 lines showing percents of survival higher than that observed in CM334 were detected. QTL analysis uncovered regions consistently contributing to resistance in linkage groups 2C e 2L, 4L, 10C, 11C e 11L, each explaining alone 9,4 to 24% of total phenotypic variance according to simple regression analysis or 9,2 to 65,4% according to interval analysis performed by MAPMAKER/QTL 1.1. QTLs from L-3436 and CM334 were detected, confirming the important contribution of both parents to the resistance. Many resistant plants from the mapping population could be selected by their molecular phenotype for significative markers on linkage groups 2C, 11L, 4L e 10C.