De nombreuses pathologies sont à l’origine de perte de substance des parties molles à la fois cutanée représentant un enjeu de santé publique.Egalement de nombreux mécanismes lésionnels sont à l’origine du stress oxydatif pouvant altérer ces parties molles. L’avenir de la chirurgie reconstructrice sera de promouvoir des thérapies cellulaires autologues permettant la régénération tissulaire cutanée, musculaire et nerveuse tout en luttant contre le stress oxydatif.Les cellules souches mésenchymateuses d’origine adipeuse (ASC) représentent une source de cellules multipotentes plus faciles à isoler que celles de la moelle osseuse. En effet, les cellules souches localisées dans le tissu en cours de cicatrisation ont un rôle immunomodulateur, et améliore la trophicité par un effet pro-angiogénique, chimio-attractant, anti-fibrotique et anti-inflammatoire.Nos travaux précédents tendaient à montrer que l’association du plasma riche en plaquettes aux ASC en injection sous cutanée semblait améliorer la cicatrisation cutanée dans le modèle murin par un effet potentialisateur du PRP sur les ASC en stimulant leurs sécrétions de facteurs pro-angiogéniques (VEGF) et pro-inflammatoires (IL6) tout en augmentant leur survie.Notre hypothèse est que le plasma riche en plaquettes potentialise les CSM en milieu lésé ou en cas de stress en améliorant leur survie, le pourvoir angiogénique et chémoattractant.Nous objectif est d’évaluer l’association des ASC et du plasma riche en plaquette dans la régénération cutanée.Dans un premier temps, nous étudierons cette interaction en in vitro. Puis, nous développerons des modèles murins de perte de subtance cutanée pour étudier cette nouvelle association en injection locale pour la régénération tissulaire. / Many diseases are the cause of soft tissue loss involving the skin.Also many injuries are the cause of oxidative stress that can lead to lesions of soft tissues. The future of the reconstructive surgery will promote autologous cell therapy for skin, muscular and nervous regeneration.The adipose derived stem cells (ASC) are a source of multipotent cells, which are easier to isolate than the bone marrow. Indeed, ASCs have an immunomodulatory role, and improve the trophism by a pro-angiogenic, chemoattractant, anti-fibrotic and anti-inflammatory effect.Our previous studies tended to show that the sub cutaneous injection of a combination of platelet-rich plasma with the ASCs seemed to improve wound healing in a mouse model, thank to a potentiating effect of PRP on ASC which stimulates the secretion of pro-angiogenic factors (VEGF ) and pro-inflammatory (IL-6) while increasing the survival of ASCs.Our hypothesis is that PRP potentialize the CSM in stressed condition or in skin wound and allows the improvement of the CSM survival, the angiogenic and chemoattraction power.Our aim is to assess the association of ASCs with PRP for skin regeneration.First, we will study this in vitro interaction. Then we will develop an animal model of oxidative stress skin to study this new local injection of association of ASCs with PRP for tissue regeneration.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2007. / Bibliogr.: f. 71-89. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

Cette recherche visait à étudier l'impact des facteurs de croissance (FC) libérés dans les surnageants de plasmas riches en plaquettes (PRP) sur la prolifération des cellules endothéliales et à optimiser le potentiel mitogénique des PRP. Des anticorps spécifiques dirigés contre les FC d'intérêt ont été ajoutés aux surnageants de PRP et l'effet des neutralisations a été déterminé dans un modèle in vitro de prolifération des cellules endothéliales. En parallèle, nous avons déterminé le potentiel mitogénique de combinaisons de FC recombinants, supplémentés ou non de surnageants de PRP. Bien que les facteurs Epidermal Growth Factor (EGF), basic Fibroblast Growth Factor et Vascular Endothelial Growth Factor soient hautement mitogéniques pour les cellules endothéliales, seul EGF semble être libéré à des concentrations suffisantes pour engendrer un effet significatif sur la division cellulaire. Cette étude a également permis de démontrer que les surnageants de PRP sont hautement mitogéniques, et l'ajout de FC n'a pas permis d'optimiser cet effet.

Le plasma riche en plaquettes (PRP) représente une nouvelle modalité de traitement visant à améliorer le taux de succès des greffes osseuses. Les objectifs de cette étude consistaient à établir un modèle animal afin de quantifier l'effet des PRP activés sur la guérison osseuse initiale et mature in vivo et de caractériser l'effet de l'activation des PRP sur la libération des facteurs de croissance VEGF, PDGF, TGF-0 et IL-ip et sur la division des cellules endothéliales. Des PRP humains, préparés à partir de sang prélevé chez quatre donneurs, furent greffés dans défauts osseux trans-crâniens pratiqués chirurgicalement chez 24 rats athymiques. Les analyses micro-tomographiques assistées par ordinateur réalisées indiquent qu'en moyenne, il n'y a aucune différence significative dans la formation osseuse in vivo lorsque des PRP activés sont greffés dans des défauts crâniens comparés à un défaut contrôle. Cependant, il existe une corrélation entre la formation osseuse et la présence de certains facteurs de croissance libérés par les PRP, tels que VEGF et PDGF.

Cette recherche visait à étudier les interactions cellules-cellules qui interviennent entre les cellules du PRP, les cellules endothéliales et les ostéoblastes dans un modèle de co-culture in vitro. Ainsi, des quantités de PRP ou de surnageants de PRP, activés par l'ajout de TRAP-6 ou non, ont été ajoutées à des cellules endothéliales ou des ostéoblastes, séparés par une membrane semi-perméable et la prolifération cellulaire mesurée par une méthode colorimétrique. Les résultats obtenus montrent que les surnageants de PRP et les PRP sont mitogéniques pour les cellules endothéliales et pour les ostéoblastes en mono-culture. Cependant, l'effet mitogénique en co-culture n'est observé qu'en présence de surnageant de PRP et ce, uniquement sur la croissance des cellules endothéliales, suggérant un mode de régulation de la division cellulaire distinct de ces deux lignées cellulaires.

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