Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo895_1.pdf: 2338866 bytes, checksum: b0579d16e31ce4eb83ec3e3b93a96401 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / O objetivo desse estudo foi caracterizar bactérias causadoras de infecção hospitalar que apresentam resistência aos dois principais grupos de antibióticos que afetam a síntese da parede celular representados pelos glicopeptídeos e ß-lactâmicos. Neste, reportamos o isolamento e caracterização das primeiras amostras de Enterococcus faecalis resistentes ao glicopeptideo vancomicina (VRE) no Nordeste do Brasil e isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae resistentes aos antibióticos ß-lactâmicos envolvidos em episódios de infecções hospitalar. Estes isolados foram testados quanto a susceptibilidade aos antimicrobianos de escolha. Os enterococos foram tipificados por meio de macro-restrição do DNA cromossomal e analisados quanto a presença dos genes de resistência e de elementos genéticos móveis. Os isolados apresentaram resistência a múltiplos antimicrobianos e apenas um perfil genético foi encontrado, sugerindo a disseminação de uma linhagem clonal entre os pacientes infectados, também a presença específica do gene vanA e do elemento de transposição Tn1546-like associado a plasmídios mostram capacidade de disseminação dos mecanismos de resistência aos glicopeptídeos por meio de processos de conjugação genética entre as bactérias. Os isolados de K. pneumoniae foram tipificados por ribotipagem e analisados quanto a presença dos genes de resistência e de elementos genéticos móveis. Os isolados apresentaram o fenótipo de ESBL, ou seja, produtoras de ß-lactamases de espectro ampliado. Este fenótipo foi associado a presença dos genes blaTEM, blaCTX-M e blaSHV tanto no cromossomo como em plasmídios naturais dos isolados. Estes genes foram detectados em diferentes associações, como genes únicos (25,5%), duplos (41,8%) e triplos (32,7%). A presença dos três genes no mesmo isolado foi detectada em percentuais superiores àqueles relatados na literatura. Em adição, foram também detectadas as presenças do integron de classe 1 carreando outros genes de resistência, gerando o fenótipo de co-resistência dessas bactérias a outros antimicrobianos. A detecção de várias linhagens clonais mostra o surgimento de vários eventos de resistência ou a transferência dos marcadores genéticos entre as bactérias. Assim, os resultados puderam mostrar o crescimento da disseminação dos elementos genéticos de resistência bacteriana a antibióticos entre isolados de bactérias causadoras de infecção hospitalar, diminuindo, assim, as possibilidades terapêuticas para o tratamento dessas infecções

Orientador: Wanderley Dias de Silveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T20:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nogueira_PauloAfonso_M.pdf: 3891118 bytes, checksum: e03c193618fbebfaddb23db4a4558aa2 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Esta dissertação teve como objetivo principal estudar as linhagens de Escherichia coli uropatogênicas que representam a forma mais frequente de infecções extraintestinais em mamíferos. Dezoito cepas uropatogênicas de E. coli, isoladas no Hospital de Clínicas da UNICAMP, foram utilizadas para o estudo comparativo de características genéticas associadas à patogenicidade. Estes ensaios genéticos compreenderam a expressão de fímbrias, a adesão em células uroepiteliais, produção de hemolisinas, análises eletroforéticas de proteínas de superfície e de membrana em géis de poliacrilamida/SDS, presença de plasmídios e produtos de reação da técnica de PCR - DNA Fingerprinting (RAPD). Dentre os resultados obtidos destacam-se: 1) a capacidade da maioria das cepas uropatogênicas em aderir a células uroepiteliais; 2) a presença de plasmídios de diferentes pesos moleculares em praticamente todas as cepas; 3) não uniformidade na expressão de determinados fatores de virulência, como por exemplo, fímbrias e hemolisinas; 4) similaridade em todos os perfis eletroforéticos de proteínas de membrana; e 5) classificação das linhagens em grupos determinados com base nos perfis eletroforéticos de proteínas de superfície; 6) a diferenciação das linhagens através da técnica de PCR - DNA Fingerprinting com o primer utilizado não foi possível / Abstract: This work had as main objective to study Uropathogenic Escherichia coli strains, that represent the most frequent form of extraintestinal infection in mammalian species. Eighteen uropathogenic E. coli strains isolated at the Medical School of Universidade Estadual de Campinas were utilized for comparative studies of genetic characteristics associated to the pathogenecity. The genetic traits comprised expression of fimbriae, intensity of adhesion on uroepithelial cells, production of hemolysins, electrophoretic analysis of surface and outer membrane proteins in SDS/PAGE, presence of plasmids and products of PCR - DNA Fingerprinting (RAPD). Among the obtained strains we could detach: 1) capacity of the majority of strains to adhere to uroepithelial cells; 2) presence of plasmids with different molecular weights in all strains; 3) differences at the expression of virulence factors as fimbriae and hemolisins; 4) similarity of outer membrane proteins in profile SDS/PAGE; 5) classification of the strains in groups according to the electrophoretic profile of surface proteins; and 6) the differenciation of strains through PCR ¿ DNA - Fingerprinting was not possible / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas