ÁVILA, Fábio do Nascimento. Contribuição ao Conhecimento Químico de Plectranthus ornatus Codd. 2015. 151 f. Dissertação (Mestrado em Química)–Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Celia Sena (celiasena@dqoi.ufc.br) on 2017-06-16T18:33:35Z No. of bitstreams: 1 2015_ dis_fnavila.pdf: 8358015 bytes, checksum: 6414d982f4eaeaa80a3994de2cb4d389 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-06-29T20:07:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_ dis_fnavila.pdf: 8358015 bytes, checksum: 6414d982f4eaeaa80a3994de2cb4d389 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T20:07:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_ dis_fnavila.pdf: 8358015 bytes, checksum: 6414d982f4eaeaa80a3994de2cb4d389 (MD5) Previous issue date: 2015 / The present work describes the phytochemical and pharmacological study of aerial parts of Plectranthus ornatus Codd (Lamiaceae), cultivated at Horto de Plantas medicinais da Universidade Federal do Ceara-UFC. P. ornatus is a native plant from India, introduced in Brazil during the age of great navigations and used by the folks as a relief and treatment of digestive and respiratory problems by the name of boldo-gambá, boldo pequeno and novalgina. The hexane extract of aerial parts of P. ornatus were submitted to successively chromatographic process, including High Performance Liquid Chromatography (HPLC), obtained eleven (11) chemical compounds belonging to diterpene class, which five (05) are described for the first time on literature and named as: Methyl-11R-acetoxyneocleroda-3,13E-dien-15-oic, 11R-acetoxy-3,4-dihydroxyneocleroda-13E-en-15-oic acid, 11R-acetoxysolidagonal acid, 11R-acetoxy-solidago-3,15-dioic acid, Pseudo-coleon R and 11R-acetoxyneocleroda-2,4(18), 13E-trien-15-oic acid, together with six (06) known compounds: Plectrornatin A, Coleon R, ent-labd-13-en-8β-ol-15-oic acid, 11R-acetoxy-3β-hydroxyneocleroda-4(18), 13E-dien-15-oic acid and 11R-acetoxy-2-oxo-neocleroda-3,13E-dien-15-oic acid. The structure determination of all secondary metabolites isolated was performed by spectrometric techniques such as hydrogen-1 and carbon-13 nuclear magnetic resonance (1H NMR and 13C one/two- dimensional), infrared spectrometry (IR), high resolution mass spectrometry and comparison with literature data. Cytotoxic activity of compounds was evaluated against four different human cancer cell lines: HCT-116 (colon adenocarcinoma), HL-60 (leukemia), OVCAR-8 (ovarian carcinoma) and SF-295 (glioblastoma). The cell cultures were regularly maintained at logarithmic phase of growth. IC50 values were determined using the MTT assay and measured IC50 values along with 95% confidence. / O presente trabalho intitulado CONTRIBUIÇÃO AO CONHECIMENTO QUÍMICO DE Plectranthus ornatus Codd, descreve o estudo fitoquímico e farmacológico das partes aéreas de P. ornatus Codd (Lamiaceae), cultivado no Horto de Plantas medicinais da Universidade Federal do Ceara-UFC. P. ornatus é uma espécie nativa da índia e introduzida no Brasil no período das grandes navegações, sendo comumente utilizado na medicina popular para o alívio e tratamento de enfermidades relacionadas ao trato digestivo e aparelho respiratório, sob o nome popular de boldo-gambá, boldo pequeno e novalgina. O estudo fitoquímico do extrato hexânico das partes aéreas de P. ornatus foi submetido a inúmeras técnicas cromatográficas, incluindo Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), resultando no isolamento de 11 constituintes químicos pertencentes à classe dos diterpenos, dos quais 05 (cinco) estão sendo relatados pela primeira vez na literatura e nomeados como: 11R-acetoxineocleroda-3,13E-dien-15-oato de metila, Ácido 11R-acetoxi-3,4-dihidroxineocleroda-13E-en-15-óico, Ácido 11R-acetoxisolidagonal, Ácido 11R-acetoxi-solidago-3,15-dióico e Ácido 11R-acetoxineocleroda-2,4(18), 13E-trien-15-óico, juntamente com os metabólitos já conhecidos: Plectrornatina A, Coleon R, Ácido ent-labd-13-en-8β-ol-15-oico, Ácido 11R-acetoxi-3β-hidroxineocleroda-4(18), 13E-dien-15-oico e Ácido 11R-acetoxi-2-oxo-neocleroda-3,13E-dien-15-oico. A determinação estrutural de todos os metabólitos secundários isolados foi realizada através do emprego de técnicas espectrométricas como ressonância magnética nuclear de hidrogênio-1 e carbono-13 (RMN de 1H e de 13C uni e bidimensionais), espectroscopia na região do infravermelho (IV), espectrometria de massas de alta resolução, obtida com ionização por electrospray e comparação com dados da literatura. As moléculas obtidas foram testadas frente à atividade citotóxica contra 04 (quatro) linhagens de células cancerígenas: HCT-116, OVCAR-8, HL-60 eSF-295, utilizando o método de análise colorimétrica baseada na conversão do sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol) - 2,5-difenil-brometo de tetrazolium (MTT) que permite a quantificação indireta da porcentagem de células vivas.

Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2016-09-15T21:49:15Z No. of bitstreams: 1 Rodrigo Tese Final PDF.pdf: 7598532 bytes, checksum: 876426158d6c8f445be96952d8f7c27b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T21:49:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigo Tese Final PDF.pdf: 7598532 bytes, checksum: 876426158d6c8f445be96952d8f7c27b (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / The use of vegetables with medicinal purposes contributes significantly to the care of the primary needs of assistance to health due to difficult access of the population to medical and pharmaceutical assistance, the high cost of manufactured medications and a tendency for people to use natural origin products. However, technical and scientific information about most of them, particularly with respect to the genotoxic potential, are still insufficient so that the use can be considered safe. In this context, the aim of this study was to evaluate the genotoxic effects of boldo extracts (Plectranthus ornatus) and soursop (Annona muricata), through the comet assay and micronucleus test in human lymphocytes with cytokinesis blocking (MNCtB). The tests were performed on human lymphocyte cultures exposed to the extracts in three concentrations: 1.000?g/ml, 500?g/ml and 250?g/ml. Hydrogen peroxide (1mM) was used as a positive control in the comet assay and vincristine sulfate (1mM) in MNCtB. As a negative control, 40% ethanol was used in both tests. The processing of the material for the comet assay and MNCtB was done according respectively to the protocols Tice et al. (2000) and Fenech (1993). The comet assay was performed in five repetitions being computed, in each of them, 100 comets in a total of two blades. For MNCtB three repetitions were performed and 1.000 binucleate lymphocytes were computed per slide. The occurrence of DNA damage (comet assay) did not differ between the cell of the cultures exposed to different concentrations of boldo extracts from each other nor compared to the negative control. Higher occurrence of micronuclei (MNCtB) was observed in the cell of the cultures treated with the extract at concentrations of 1.000?g/ml and 500?g/ml when compared to the negative control (p<0.05) and cultures treated with the extract concentration of 250?g/ml. The soursop extracts at concentrations of 1.000?g/ml to 500?g/ml induced damage occurrence to the DNA significantly higher than that observed in the negative control and cultures treated with extract at a concentration of 250?g/ml (p<0.001). The conditions in which this study was performed, the obtained results allow concluding that: 1) boldo extracts are not effective in inducing DNA damage, but depending on the concentration, they present clastogenic and/or aneugenic effects; 2) soursop extracts induce DNA damage under certain concentrations. The results of this study strongly raise the achievement of other addressing the issue, so that the actual genotoxic potential of vegetables analyzed here can be established. / O uso de vegetais com fins medicinais contribui de forma significativa para o cuidado das necessidades prim?rias de assist?ncia ? sa?de devido ao dif?cil acesso da popula??o ? assist?ncia m?dica e farmac?utica, aos altos custos dos medicamentos industrializados e ? uma tend?ncia das pessoas a utilizarem produtos de origem natural. No entanto, informa??es t?cnico-cient?ficas acerca da maioria deles, particularmente no que tange ao potencial genot?xico, s?o ainda insuficientes para que o uso possa ser considerado seguro. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos genot?xicos de extratos do boldo (Plectranthus ornatus) e da graviola (Annona muricata), atrav?s do ensaio cometa e do teste de micron?cleo em linf?citos humanos com bloqueio da citocinese (MNCtB). Os testes foram feitos em culturas de linf?citos humanos expostas aos extratos em tr?s concentra??es: 1.000?g/ml, 500?g/ml e 250?g/ml. Per?xido de hidrog?nio (1mM) foi utilizado como controle positivo no ensaio cometa e sulfato de vincristina (1mM) no MNCtB. Como controle negativo foi usado o etanol 40% em ambos os testes. O processamento do material para o ensaio cometa e MNCtB foi feito de acordo, respectivamente, com os protocolos de Tice et al. (2000) e Fenech (1993). O ensaio cometa foi realizado em cinco repeti??es, sendo computados, em cada uma delas, 100 cometas em um total de duas l?minas. Para o MNCtB foram realizadas tr?s repeti??es e computados 1.000 linf?citos binucleados por l?mina. A ocorr?ncia de danos ao DNA (ensaio cometa) n?o diferiu entre as c?lulas das culturas expostas ?s diferentes concentra??es dos extratos do boldo entre si e nem quando comparadas ao controle negativo. Maior ocorr?ncia de micron?cleos (MNCtB) foi observada nas c?lulas das culturas tratadas com os extratos nas concentra??es de 1.000?g/ml e de 500?g/ml quando comparadas ao controle negativo (p<0,05) e ?s culturas tratadas com o extrato na concentra??o de 250?g/ml. Os extratos da graviola nas concentra??es de 1.000?g/ml e 500?g/ml induziram ocorr?ncia de danos ao DNA significativamente maior do que o observado no controle negativo e nas culturas tratadas com extrato na concentra??o de 250?g/ml (p<0,001). Nas condi??es em que este estudo foi realizado, os resultados obtidos permitem concluir que: 1) extratos do boldo n?o s?o efetivos em induzir danos ao DNA, mas na depend?ncia da concentra??o apresentam efeitos clastog?nicos e/ou aneug?nicos; 2) extratos da graviola induzem danos ao DNA sob determinadas concentra??es. Os resultados deste estudo suscitam fortemente a realiza??o de outros abordando o tema, para que o real potencial genot?xico dos vegetais aqui analisados possa ser estabelecido.