Memoria para optar el título de Bioquímico / Mientras los mecanismos de resistencia al cobre han sido ampliamente estudiados en bacterias, se tiene escasa información sobre los mecanismos de resistencia al cobre en arqueas. Recientemente se ha identificado un grupo de genes (cop) de resistencia al cobre, altamente conservado en las arqueas del orden Sulfolobales. Este grupo de genes incluye un regulador transcripcional específico de arqueas (copR), una metalochaperona de cobre (copT) y un transportador de cationes ATPasa tipo P (copA). Otro posible mecanismo de resistencia al cobre en Sulfolobales comprendería a los polifosfatos (poliP). Los poliP son moléculas lineales presentes en todos los seres vivos y que cumplen diversas funciones celulares. El modelo que vincula los poliP con la resistencia a cobre propone una disminución de poliP mediada por la exopolifosfatasa (PPX), enzima que degradaría el gran polímero hasta fosfato inorgánico (Pi), el cual podría unirse a cobre para ser finalmente expulsado hacia el periplasma o al medio extracelular por transportadores específicos. Recientemente nuestro laboratorio ha logrado generar una cepa de Sulfolobus solfataricus recombinante con niveles deficientes de poliP, con el fin de evaluar el efecto de su carencia en distintos fenómenos, entre ellos la resistencia a cobre. Basados en estudios transcripcionales realizados mediante la técnica PCR en tiempo real, determinamos que la inducción de la expresión de copA en respuesta a cobre ocurre más tempranamente en células carentes de poliP, comparadas con células que poseen este polímero. Una explicación a este fenómeno sería que en ausencia de poliP, el modelo que vincula los poliP con el eflujo de cobre no sería operativo. En consecuencia, el sistema cop debería ser activado más tempranamente para compensar la carencia de poliP. Con el objetivo de profundizar en el conocimiento que se tiene sobre los poliP y su relación con la resistencia a cobre en S. solfataricus, analizamos la expresión diferencial de proteínas en células carentes de poliP y en células expuestas a cobre. De esta forma, mediante la técnica de proteómica cuantitativa ICPL determinamos que en carencia de poliP las células de S. solfataricus sobreexpresaron proteínas involucradas en la degradación de glucógeno y ácidos grasos, junto a aquellas que remueven especies reactivas del oxígeno (ROS). Por otro lado, algunas de las proteínas que disminuyeron sus niveles en carencia de poliP están involucradas en la gluconeogénesis y el ciclo del glioxilato. Estos resultados en conjunto, sugieren que los poliP podrían desempeñar un papel energético en S. solfataricus, ya que al parecer, en su ausencia se favorecen las vías catabólicas. La sobreexpresión de proteínas que remueven ROS sugiere un mayor estado de estrés oxidativo en las células S. solfataricus poliP-. Adicionalmente, los experimentos de proteómica cuantitativa nos permitieron determinar que en presencia de cobre, las células de S. solfataricus poliP+ sobreexpresan proteínas involucradas en el ciclo del TCA, en la degradación y plegamiento de proteínas, la reparación del ADN y en la degradación del ARN. Estos resultados sugieren que la presencia de cobre podría provocar daño a tanto a nivel de proteínas, como de ácidos nucleicos en las células de S. solfataricus. El aumento en los niveles de algunas proteínas involucradas en el ciclo del TCA puede relacionarse con el ATP y el poder reductor que las células necesitan para enfrentar una situación de estrés (ej: proteólisis, plegamiento de proteínas). Finalmente, las células carentes de poliP y expuestas a cobre aumentaron los niveles de algunas proteasas, de proteínas que forman parte de la cadena transportadora de electrones y de proteínas que participan en la remoción de ROS, como la peroxiredoxina y la superóxido dismutasa (SOD). Si bien la peroxiredoxina se aumentó sus niveles en todas las condiciones de estudio, la SOD sólo lo hizo cuando las células de S. solfataricus carentes de poliP, fueron expuestas a cobre. En conjunto estos resultados sugieren un mayor nivel de estrés oxidativo en las células S. solfataricus poliP- expuestas a cobre y un papel energético de los poliP. Dentro de las proteínas que disminuyeron sus niveles, encontramos proteínas ribosomales. Esto podría incidir directamente en la síntesis proteica, disminuyendo la capacidad de las células de S. solfataricus poliP- de hacer frente a una situación de estrés / While copper resistance mechanisms have been widely studied in bacteria, there is little information about copper resistance mechanisms of Archaea. Recently, a highly conserved group of genes (cop) related to the resistance to copper was identified in some species of Sulfolobales. This group of genes consists of an archaeal-specific transcriptional regulator (copR), a putative metallochaperone (copT) and a P-type cation-transporting ATPase (copA). Another potential mechanism involved in copper resistance of Sulfolobales would involve inorganic polyphosphates (polyP). PolyP is a linear polymer present in all organisms and performs a wide variety of functions. The model that links polyP with resistance to copper suggests that the exopolyphosphatase (PPX) mediates the degradation of polyP to inorganic phosphate (Pi) which could eventually join copper and be finally ejected to the periplasm or to the extracellular medium by specific transporters. Recently, our laboratory has generated a recombinant Sulfolobus solfataricus strain deficient in polyP levels, in order to evaluate the role of its deficiency in various phenomena, including copper resistance. Based on transcriptional studies carried out through real-time PCR, we determined that the induction of the expression of copA in response to copper occurs earlier in cells lacking polyP, than those possessing the polymer. One explanation for this phenomenon could be that, in the absence of polyP, the model linking polyP to copper efflux would not be operational. As a consequence, the cop system should be activated earlier to compensate for the lack of polyP. To gain insight into polyP and its relationship to copper resistance in S. solfataricus, we studied the differential expression of proteins in cells lacking polyP and in cells exposed to copper. Thus, quantitative proteomics studies (ICPL) showed that in the absence of polyP S. solfataricus cells overexpresses proteins involved in: the degradation of glycogen and fatty acids, and in the removal of reactive oxygen species (ROS). On the other hand, some of the proteins that decreased their levels are involved in gluconeogenesis and the glyoxylate cycle. These results suggest that polyP could play an energetic role in the cell considering that the lack of this polymer, upregulated proteins involved in catabolic pathaways. The upregulation of proteins involved in removal of ROS suggests the presence of a higher level of oxidative stress in S.solfataricus poliP- cells. Further, ICPL experimentas allowed us to determine that in the presence of copper, S. solfataricus polyP+ cells overexpress proteins involved in: the TCA cycle, the degradation and folding of proteins, DNA repairing, and in RNA degradation. These results suggest that the presence of copper could cause damage to both proteins and nucleic acids from S. solfataricus cells. The up-regulation of some TCA proteins could be related with the ATP levels and reducing power that cells need to face a stress situation (e.g. proteolysis, folding of proteins). Finally, when cells lacking polyP were exposed to copper, there was an overexpression of proteases, electron transport chain proteins, and proteins involved in ROS removal (peroxiredoxin and SOD). Although peroxiredoxin was overexpress in all our study conditions, SOD was only up-regulated when S. solfataricus polyP- cells were exposing to copper. These findings may reflect a higher oxidative stress in cells lacking polyP and also suggest an energetic role of polyP. Some of the proteins that decreased their levels were ribosomal proteins. This could directly affect protein synthesis and therefor the ability of S. solfataricus polyP- cells to respond to a stressing situation

MELO, A. D. Q. Estudo da Utilização de Coacervatos de Polifosfato de Sódio na obtenção de Materiais com Nanoparticulas Metálicas e Magnéticas. 2011. 87 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2014-10-15T19:59:44Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_adqmelo.pdf: 1627477 bytes, checksum: 9dcc16ecd61e460ef5a107c04f073034 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-04-23T20:11:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_adqmelo.pdf: 1627477 bytes, checksum: 9dcc16ecd61e460ef5a107c04f073034 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-23T20:11:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_adqmelo.pdf: 1627477 bytes, checksum: 9dcc16ecd61e460ef5a107c04f073034 (MD5) Previous issue date: 2011 / The preparation of nanoparticles of silver in sol of polyphosphate of sodium (solution and coacervate) is boarded considering excellent experimental parameters in the stage of metallic synthesis of nanoparticles of magnetic silver and nanoparticles of iron. For nanoparticles of silver the following experimental parameters had been evaluated: i) the effect of the concentration of the solution of poliphosphate of sodium in function of the silver concentration, II) more good molar reason agent reducer/silver with intention to optimize the best condition of attainment of nanoparticles, III) the effect of pH and IV) effect of the temperature in the behavior of nanoparticles. Additionally, the photoirradiation was tested the preparation of nanoparticles of silver for an alternative route that excuses the addition of reducing chemical agents. The preparation of nanoparticles magnetic followed the described procedure in the literature that is based on the co-precipitation. The following stage dealt with the attainment of coacervates with nanoparticles considering alterations in the traditional methodology of attainment of the coacervates for incorporation of nanoparticles. The influence of the type of cátion and anion in the structure of the salt that interacts with the polyphosphate chain was evaluated. For the both proposals it was possible to get metallic coacervates with nanoparticles of silver and magnetic coacervates with nanoparticles of iron. The size of metallic and magnetic particles in the coacervate was esteem through the refinement of the espectrum of X-Ray Diffraction with the aid of the equation of Schereer and showed to be agree with the presence of nanoparticles. For characterization of the systems vibrational, spectroscopic in the region of infrared was used, electronic spectroscopy, thermogravimetric methods, scanning eletronic microscopy, Mössbauer spectroscopy and analyses reological. / A preparação das nanopartículas de prata nos sóis de polifosfato de sódio (solução e coacervato) é abordada considerando parâmetros experimentais relevantes na etapa de síntese de nanopartículas metálicas de prata e nanopartículas magnéticas de ferro. Para as nanopartículas de prata os seguintes parâmetros experimentais foram avaliados: i) o efeito da concentração da solução de polifosfato de sódio em função da concentração de prata, ii) melhor razão molar agente redutor/prata com o intuito de otimizar a melhor condição de obtenção das nanopartículas, iii) o efeito do pH e iv) efeito da temperatura no comportamento das nanopartículas. Adicionalmente, foi testada a preparação de nanopartículas de prata por uma rota alternativa a fotoirradiação que dispensa a adição de agentes químicos redutores. A preparação das nanopartírculas magnéticas seguiu o procedimento descrito na literatura que é baseado na co-precipitação. A etapa seguinte tratou da obtenção de coacervatos com as nanopartículas considerando alterações na metodologia tradicional de obtenção dos coacervatos para incorporação das nanopartículas. A influência do tipo de cátion e ânion na estrutura do sal que interage com a cadeia de polifosfato foi avaliada. Para as ambas propostas foi possível obter coacervatos com nanopartículas metálicas de prata e coacervatos com nanopartículas magnéticas de ferro. O tamanho das partículas metálicas e magnéticas nos coacervato foi estimado através do refinamento dos difratogramas de raios-x com o auxílio da equação de Schereer e mostrou ser condizente com a presença de nanopartículas. Para caracterização dos sistemas utilizou-se espectrocopia vibracional da região do infravermelho, espectroscopia eletrônica, análise termogravimétrica, microscopia eletrônica de varredura, espectroscopia Mossbauer e análises reológicas.

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-09-11. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:50Z : No. of bitstreams: 1 000830006.pdf: 730884 bytes, checksum: 20157f8995fcdebc6b576341400dedde (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de trimetafosfato de sódio (TMP) associado ao fluoreto (F) sobre a solubilidade da hidroxiapatita (HA), bem como as propriedades físicas e químicas da HA depois de um ciclo de pH. O pó de HA sintética (1,0 g; n= 6) foi misturado com soluções de TMP nas concentrações de 0; 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 e 10%, associadas ao F nas concentrações de 0, 100, 250 e 500 ppm F, durante 2 min. A suspensão foi filtrada e o precitado foi seco por 24 horas a 37°C e moído. Depois do tratamento, as amostras de HA tratada foram submetidas a um ciclo de pH. As amostras de HA ciclada foram caracterizadas por energia dispersiva de raios-X (EDX), espectroscopia de infravermelho (FTIR) e difração de raios-X (DRX). Depois, as concentrações de F solúvel em base e em ácido, cálcio (Ca) e fósforo (P) foram determinadas na HA ciclada, assim como as concentrações de P e F no sobrenadante. Os dados de F, Ca, P e proporção molar Ca/P na HA, e F e P no sobrenadante foram submetidas à Análise de Variância e teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Houve uma redução do tamanho dos cristais de HA com o aumento da concentração de TMP. A HA tratada com 500 ppm F e TMP a 1% produziu uma HA com cristalitos de tamanho maiores. O FTIR mostrou uma redução na intensidade das bandas de fosfatos e carbonato quando comparado à HA sintetizada. As maiores proporções Ca/P foram observadas na HA tratada com TMP entre 0,4% e 1% quando combinado com 250 ppm F, e entre 0,4% e 2% em associação com 500 ppm F (p<0,05). Um aumento na concentração de TMP levou a uma redução na incorporação de F solúvel em ácido na estrutura do cristal para todos os grupos, nas duas situações (depois do tratamento e depois do ciclo de pH) (p<0,05). Adicionalmente... / The aim of this study was to evaluate the effect of different concentrations of sodium trimetaphosphate (TMP) associated with fluoride (F) on hydroxyapatite (HA) solubility, as well as in chemical and physical properties of HA after a pH-cycle. Synthetic HA powder (1.0 g; n= 6) was mixed with solutions of TMP at 0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0 and 10%, associated with fluoride at 0, 100, 250 and 500 ppm F, during 2 min. The suspension was filtered and the precipitates were dried for 24 h at 37°C and grinded. After the treatment, HA samples were submitted to a pH-cycle. Post-cycled HA samples were analyzed by energy-dispersive X-ray spectroscopy (EDX), infrared spectroscopy (FTIR) and X-ray diffraction (XRD). Afterwards, the concentration of alkali and acid soluble F, Ca and P were determined in post-cycled HA, as well as P and F in the supernatant. The data of F, Ca, P, Ca/P ratio of HA, and F and P in the supernatant were submitted to ANOVA and Student-Newman-Keuls' test (p<0.05). A reduction of the size of the HA crystallites was seen with increasing TMP concentrations in the solutions. HA treated with 500 ppm F and 1% TMP produced an HA with crystallites of larger size. The FTIR showed a reduction in the bands corresponding to phosphates and to carbonate for all groups when compared to the HA synthetized. The highest Ca/P ratios were observed for HA treated with TMP concentrations between 0.4% and 0.8% when combined with 250 ppm F, and between 0.4% and 2% in association with 500 ppm F (p<0.05). The increase of TMP led a reduced acid-soluble F incorporation in HA for all groups, both immediately after treatment and after the pH cycle (p<0.05). Additionally, the increase in TMP concentrations led to higher P adsorption to HA for the 0 and 100 ppm F solutions, but lower for... / FAPESP: 12/05116-4

Orientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Coorientador: Juliano Pelim Pessan / Banca: Cristina Antoniali Silva / Banca: João Carlos Silos Moraes / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de trimetafosfato de sódio (TMP) associado ao fluoreto (F) sobre a solubilidade da hidroxiapatita (HA), bem como as propriedades físicas e químicas da HA depois de um ciclo de pH. O pó de HA sintética (1,0 g; n= 6) foi misturado com soluções de TMP nas concentrações de 0; 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 e 10%, associadas ao F nas concentrações de 0, 100, 250 e 500 ppm F, durante 2 min. A suspensão foi filtrada e o precitado foi seco por 24 horas a 37°C e moído. Depois do tratamento, as amostras de HA tratada foram submetidas a um ciclo de pH. As amostras de HA ciclada foram caracterizadas por energia dispersiva de raios-X (EDX), espectroscopia de infravermelho (FTIR) e difração de raios-X (DRX). Depois, as concentrações de F solúvel em base e em ácido, cálcio (Ca) e fósforo (P) foram determinadas na HA ciclada, assim como as concentrações de P e F no sobrenadante. Os dados de F, Ca, P e proporção molar Ca/P na HA, e F e P no sobrenadante foram submetidas à Análise de Variância e teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Houve uma redução do tamanho dos cristais de HA com o aumento da concentração de TMP. A HA tratada com 500 ppm F e TMP a 1% produziu uma HA com cristalitos de tamanho maiores. O FTIR mostrou uma redução na intensidade das bandas de fosfatos e carbonato quando comparado à HA sintetizada. As maiores proporções Ca/P foram observadas na HA tratada com TMP entre 0,4% e 1% quando combinado com 250 ppm F, e entre 0,4% e 2% em associação com 500 ppm F (p<0,05). Um aumento na concentração de TMP levou a uma redução na incorporação de F solúvel em ácido na estrutura do cristal para todos os grupos, nas duas situações (depois do tratamento e depois do ciclo de pH) (p<0,05). Adicionalmente... / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of different concentrations of sodium trimetaphosphate (TMP) associated with fluoride (F) on hydroxyapatite (HA) solubility, as well as in chemical and physical properties of HA after a pH-cycle. Synthetic HA powder (1.0 g; n= 6) was mixed with solutions of TMP at 0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0 and 10%, associated with fluoride at 0, 100, 250 and 500 ppm F, during 2 min. The suspension was filtered and the precipitates were dried for 24 h at 37°C and grinded. After the treatment, HA samples were submitted to a pH-cycle. Post-cycled HA samples were analyzed by energy-dispersive X-ray spectroscopy (EDX), infrared spectroscopy (FTIR) and X-ray diffraction (XRD). Afterwards, the concentration of alkali and acid soluble F, Ca and P were determined in post-cycled HA, as well as P and F in the supernatant. The data of F, Ca, P, Ca/P ratio of HA, and F and P in the supernatant were submitted to ANOVA and Student-Newman-Keuls' test (p<0.05). A reduction of the size of the HA crystallites was seen with increasing TMP concentrations in the solutions. HA treated with 500 ppm F and 1% TMP produced an HA with crystallites of larger size. The FTIR showed a reduction in the bands corresponding to phosphates and to carbonate for all groups when compared to the HA synthetized. The highest Ca/P ratios were observed for HA treated with TMP concentrations between 0.4% and 0.8% when combined with 250 ppm F, and between 0.4% and 2% in association with 500 ppm F (p<0.05). The increase of TMP led a reduced acid-soluble F incorporation in HA for all groups, both immediately after treatment and after the pH cycle (p<0.05). Additionally, the increase in TMP concentrations led to higher P adsorption to HA for the 0 and 100 ppm F solutions, but lower for... / Mestre

Orientadores: Fernando Galembeck, Elizabeth Fatima de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-21T17:17:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Masson_NancyCristina_M.pdf: 5042756 bytes, checksum: 5701ff18599d4eff4bece73f9386107f (MD5) Previous issue date: 1996 / Mestrado

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-09-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:50Z : No. of bitstreams: 1 000828991.pdf: 1650989 bytes, checksum: 4e399312a262297cd8127550caef31c4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo avaliou o efeito do trimetafosfato de sódio (TMP) e hexametafosfato de sódio (HMP) associados ou não ao fluoreto (F) na dissolução e estrutura da hidroxiapatita (HA). Para tanto, o estudo foi dividido em três subprojetos. Nos subprojetos 1 e 2, o pó de HA sintética (n=6) foi tratado com soluções contendo entre 0 e 10% de TMP associado a 0, 100, 250, 500 (Subprojeto 1) e a 0, 1100, 4500 e 9000 ppm F (Subprojeto 2), sendo submetido a um ciclo de pH. As concentrações de F alcáli- e ácido solúvel, cálcio (Ca) e fósforo (P) foram determinadas na HA, e as de P e F no sobrenadante. As amostras foram analisadas pela espectroscopia no infravermelho (FTIR), difração de Raios-X (DRX) e espectroscopia de energia dispersiva (EDX). No Subprojeto 3, discos de HA foram empregados para avaliar a taxa de dissolução da mesma utilizando o sistema pHstat. Estes foram tratados com soluções contendo 1100 ppm F, 1 e 8% de HMP ou TMP e 1100 ppm F associado com 1 e 8% de HMP ou TMP, totalizando 9 grupos (n=8). A influência da película salivar também foi avaliada. Discos de HA foram mantidos em saliva humana previamente ao tratamento com água deionizada e 1100 ppm F associado com 1 e 8% de HMP ou TMP, totalizando 5 grupos (n=8). A taxa de dissolução pós-tratamento foi determinada a partir de 3 medidas consecutivas a cada 30 min. Os dados foram submetidos a ANOVA, teste de Student-Newman-Keul's e coeficiente de correlação de Pearson (Subprojetos 1 e 2) e a ANOVA e testes de Fisher e Holm-Sidak (Subprojeto 3) (α=0,05). Valores de proporção Ca/P maiores foram observados para as soluções fluoretadas quando comparados à solução sem F e TMP, sendo os mesmos dependentes da proporção F:TMP (p<0,05). A deposição do F álcali-solúvel foi diretamente relacionada com as concentrações de TMP nas soluções... / This study evaluated the effect of sodium trimetaphosphate (TMP) and sodium hexametaphosphate (HMP) associated or no with fluoride (F) on the structure and dissolution of hydroxyapatite (HA). For this purpose, the study was divided into three subprojects. In Subprojects 1 and 2, synthetic HA powder (n=6) was treated with solutions containing TMP varying at 0-10% associated with 0, 100, 250, 500 (Subproject 1) and 0, 1100, 4500 and 9000 ppm F (Subproject 2) and submitted to a pH cycle. Afterwards, alkali- and acid soluble F, Ca and P were determined in/on HA, and P and F in the supernatants. Samples were analyzed by infrared spectroscopy (FTIR), X-ray diffraction (XDR) and energy-dispersive X-ray spectroscopy (EDX). In Subproject 3, HA discs were used to assess the dissolution rate of HA using a pHstat system. HA discs were treated with 1100 ppm F, 1% and 8% of HMP or TMP and 1100 ppm F associated with 1% and 8% of HMP or TMP, totaling 9 groups (n=8). The influence of a salivary pellicle on HA dissolution was also assessed. HA discs were kept in pooled human saliva before treatment with deionised water and 1100 ppm F associated with 1% and 8% of HMP or TMP, totaling 5 groups (n=8). The post-treatment dissolution rate was determined from three consecutive 30-min assays. Data were submitted to ANOVA, Student-Newman-Keuls' test and Pearson's correlation coefficient (Subprojects 1 and 2), and to ANOVA and Fisher and Holm- Sidak methods (Subproject 3) (α=0.05). Ca/P ratios values were higher for the fluoride solutions when compared with the no F and TMP groups and dependent of the F:TMP ratio used (p<0.05). The overall trend was that alkali-soluble F deposition was directly related to TMP concentrations in the treatment solutions, while acidsoluble incorporation was inversely related to TMP... / FAPESP: 11/17234-9

Orientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Coorientador: Juliano Pelim Pessan / Banca: Robson Frederico Cunha / Banca: Douglas Roberto Monteiro / Banca: Marília Afonso Rabelo Buzalaf / Banca: João Carlos Silos Moraes / Resumo: Este estudo avaliou o efeito do trimetafosfato de sódio (TMP) e hexametafosfato de sódio (HMP) associados ou não ao fluoreto (F) na dissolução e estrutura da hidroxiapatita (HA). Para tanto, o estudo foi dividido em três subprojetos. Nos subprojetos 1 e 2, o pó de HA sintética (n=6) foi tratado com soluções contendo entre 0 e 10% de TMP associado a 0, 100, 250, 500 (Subprojeto 1) e a 0, 1100, 4500 e 9000 ppm F (Subprojeto 2), sendo submetido a um ciclo de pH. As concentrações de F alcáli- e ácido solúvel, cálcio (Ca) e fósforo (P) foram determinadas na HA, e as de P e F no sobrenadante. As amostras foram analisadas pela espectroscopia no infravermelho (FTIR), difração de Raios-X (DRX) e espectroscopia de energia dispersiva (EDX). No Subprojeto 3, discos de HA foram empregados para avaliar a taxa de dissolução da mesma utilizando o sistema pHstat. Estes foram tratados com soluções contendo 1100 ppm F, 1 e 8% de HMP ou TMP e 1100 ppm F associado com 1 e 8% de HMP ou TMP, totalizando 9 grupos (n=8). A influência da película salivar também foi avaliada. Discos de HA foram mantidos em saliva humana previamente ao tratamento com água deionizada e 1100 ppm F associado com 1 e 8% de HMP ou TMP, totalizando 5 grupos (n=8). A taxa de dissolução pós-tratamento foi determinada a partir de 3 medidas consecutivas a cada 30 min. Os dados foram submetidos a ANOVA, teste de Student-Newman-Keul's e coeficiente de correlação de Pearson (Subprojetos 1 e 2) e a ANOVA e testes de Fisher e Holm-Sidak (Subprojeto 3) (α=0,05). Valores de proporção Ca/P maiores foram observados para as soluções fluoretadas quando comparados à solução sem F e TMP, sendo os mesmos dependentes da proporção F:TMP (p<0,05). A deposição do F álcali-solúvel foi diretamente relacionada com as concentrações de TMP nas soluções... / Abstract: This study evaluated the effect of sodium trimetaphosphate (TMP) and sodium hexametaphosphate (HMP) associated or no with fluoride (F) on the structure and dissolution of hydroxyapatite (HA). For this purpose, the study was divided into three subprojects. In Subprojects 1 and 2, synthetic HA powder (n=6) was treated with solutions containing TMP varying at 0-10% associated with 0, 100, 250, 500 (Subproject 1) and 0, 1100, 4500 and 9000 ppm F (Subproject 2) and submitted to a pH cycle. Afterwards, alkali- and acid soluble F, Ca and P were determined in/on HA, and P and F in the supernatants. Samples were analyzed by infrared spectroscopy (FTIR), X-ray diffraction (XDR) and energy-dispersive X-ray spectroscopy (EDX). In Subproject 3, HA discs were used to assess the dissolution rate of HA using a pHstat system. HA discs were treated with 1100 ppm F, 1% and 8% of HMP or TMP and 1100 ppm F associated with 1% and 8% of HMP or TMP, totaling 9 groups (n=8). The influence of a salivary pellicle on HA dissolution was also assessed. HA discs were kept in pooled human saliva before treatment with deionised water and 1100 ppm F associated with 1% and 8% of HMP or TMP, totaling 5 groups (n=8). The post-treatment dissolution rate was determined from three consecutive 30-min assays. Data were submitted to ANOVA, Student-Newman-Keuls' test and Pearson's correlation coefficient (Subprojects 1 and 2), and to ANOVA and Fisher and Holm- Sidak methods (Subproject 3) (α=0.05). Ca/P ratios values were higher for the fluoride solutions when compared with the no F and TMP groups and dependent of the F:TMP ratio used (p<0.05). The overall trend was that alkali-soluble F deposition was directly related to TMP concentrations in the treatment solutions, while acidsoluble incorporation was inversely related to TMP... / Doutor

Doctor en Ciencias con mención en Microbiología Facultad de Ciencias

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:42Z : No. of bitstreams: 1 000830067.pdf: 686939 bytes, checksum: 46eeca21ac0dfe7e427e217e49e52195 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Estudos recentes demonstraram que dentifrícios com concentração reduzida de fluoreto (DCRF, 550 μg F/g) suplementados com cálcio ou fosfato apresentam efetividade clínica semelhante à de um dentifrício convencional (DC, 1100 μg F/g). Entretanto, o mecanismo pelo qual estes compostos atuam nos processos de des- e remineralização ainda é incerto. O presente estudo avaliou a concentração de F e Ca no fluido do biofilme formado in situ sob desafio cariogênico após o uso de dentifrícios fluoretados, suplementados ou não com trimetafosfato de sódio (TMP) ou glicerofosfato de cálcio (CaGP). Voluntários (n=12) foram aleatoriamente divididos em 5 grupos, de acordo com os seguintes dentifrícios: Placebo (sem F, TMP ou CaGP), DC, DCRF sem suplementação (550F) e DCRF suplementado com 1% TMP (550F-TMP) ou 0,25% CaGP (550F-CaGP). Em cada fase, os voluntários utilizaram um dispositivo palatino contendo 4 blocos de esmalte bovino. O desafio cariogênico foi realizado com solução de sacarose 30%, 6 vezes ao dia. Na manhã do 8º dia, o biofilme foi coletado 1h e 12h após a escovação e desafio cariogênico. As análises de F e Ca foram realizadas com eletrodo invertido após tamponamento com TISAB III e por espectrofotometria (Arsenazo III), respectivamente. Os dados foram submetidos a ANOVA a 2 critérios (medidas repetidas) e teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Uma relação dose-resposta entre as concentrações de F nos dentifrícios e no fluido do biofilme foi verificada. Diferenças significativas foram observadas nas concentrações de F no fluido do biofilme apenas 1 hora após o uso dos dentifrícios Placebo, 550F e DC, sem diferenças significativas entre 550F, 550F-CaGP e 550F-TMP. Não houve um padrão definido para as concentrações de Ca no fluido do biofilme, sendo os maiores valores observados para o Placebo e 550F-CaGP. Conclui-se... / Recent studies demonstrated that low fluoride dentifrices (LFD, 550 μg F/g) supplemented with calcium or phosphate have a similar effectiveness to a conventional dentifrice (CD, 1100 μg F/g). However, the mechanisms by which these compounds act on the de- and remineralization processes remain unclear. The present study evaluated fluoride (F) and calcium (Ca) concentrations in the biofilm fluid formed in situ under cariogenic challenge after using F dentifrices, supplemented or not with sodium trimetaphosphate (TMP) or calcium glycerophosphate (CaGP). Volunteers (n=12) were randomly divided into 5 groups according to the following toothpastes: Placebo (no F or CaGP, TMP), CD and LFD with no supplementation (550F) or supplemented with 1% TMP (550F-TMP) or 0.25% CaGP (550F-CaGP). In each phase, volunteers wore palatal appliances containing 4 bovine enamel blocks. The cariogenic challenge was produced using a 30% sucrose solution, 6 times a day. On the morning of the 8th day, biofilm samples were collected 1h and 12h after brushing and cariogenic challenge. F and Ca analyzes were performed with the inverted electrode after buffering with TISAB III and using the Arsenazo III method, respectively. Data were submitted to 2-way ANOVA (repeated measures) and Student-Newman-Keuls test (p<0.05). A dose-response relationship was verified between F concentrations in the dentifrices and those in the biofilm fluid. Significant differences were observed among Placebo, 550F and CD only 1 h after brushing, without statistical differences among 550F, 550F-TMP and 550F-CaGP. No defined trend was observed among the groups regarding Ca concentrations in the biofilm fluid, with the highest values found for Placebo and 500F-CaGP. It was concluded that the anticaries effects of LFDs supplemented with CaGP or TMP cannot be related to an increased availability of F and Ca in the biofilm fluid

Orientador: Juliano Pelim Pessan / Coorientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Cristiane Duque / Banca: Thiago Cruvinel da Silva / Resumo: Estudos recentes demonstraram que dentifrícios com concentração reduzida de fluoreto (DCRF, 550 μg F/g) suplementados com cálcio ou fosfato apresentam efetividade clínica semelhante à de um dentifrício convencional (DC, 1100 μg F/g). Entretanto, o mecanismo pelo qual estes compostos atuam nos processos de des- e remineralização ainda é incerto. O presente estudo avaliou a concentração de F e Ca no fluido do biofilme formado in situ sob desafio cariogênico após o uso de dentifrícios fluoretados, suplementados ou não com trimetafosfato de sódio (TMP) ou glicerofosfato de cálcio (CaGP). Voluntários (n=12) foram aleatoriamente divididos em 5 grupos, de acordo com os seguintes dentifrícios: Placebo (sem F, TMP ou CaGP), DC, DCRF sem suplementação (550F) e DCRF suplementado com 1% TMP (550F-TMP) ou 0,25% CaGP (550F-CaGP). Em cada fase, os voluntários utilizaram um dispositivo palatino contendo 4 blocos de esmalte bovino. O desafio cariogênico foi realizado com solução de sacarose 30%, 6 vezes ao dia. Na manhã do 8º dia, o biofilme foi coletado 1h e 12h após a escovação e desafio cariogênico. As análises de F e Ca foram realizadas com eletrodo invertido após tamponamento com TISAB III e por espectrofotometria (Arsenazo III), respectivamente. Os dados foram submetidos a ANOVA a 2 critérios (medidas repetidas) e teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Uma relação dose-resposta entre as concentrações de F nos dentifrícios e no fluido do biofilme foi verificada. Diferenças significativas foram observadas nas concentrações de F no fluido do biofilme apenas 1 hora após o uso dos dentifrícios Placebo, 550F e DC, sem diferenças significativas entre 550F, 550F-CaGP e 550F-TMP. Não houve um padrão definido para as concentrações de Ca no fluido do biofilme, sendo os maiores valores observados para o Placebo e 550F-CaGP. Conclui-se... / Abstract: Recent studies demonstrated that low fluoride dentifrices (LFD, 550 μg F/g) supplemented with calcium or phosphate have a similar effectiveness to a conventional dentifrice (CD, 1100 μg F/g). However, the mechanisms by which these compounds act on the de- and remineralization processes remain unclear. The present study evaluated fluoride (F) and calcium (Ca) concentrations in the biofilm fluid formed in situ under cariogenic challenge after using F dentifrices, supplemented or not with sodium trimetaphosphate (TMP) or calcium glycerophosphate (CaGP). Volunteers (n=12) were randomly divided into 5 groups according to the following toothpastes: Placebo (no F or CaGP, TMP), CD and LFD with no supplementation (550F) or supplemented with 1% TMP (550F-TMP) or 0.25% CaGP (550F-CaGP). In each phase, volunteers wore palatal appliances containing 4 bovine enamel blocks. The cariogenic challenge was produced using a 30% sucrose solution, 6 times a day. On the morning of the 8th day, biofilm samples were collected 1h and 12h after brushing and cariogenic challenge. F and Ca analyzes were performed with the inverted electrode after buffering with TISAB III and using the Arsenazo III method, respectively. Data were submitted to 2-way ANOVA (repeated measures) and Student-Newman-Keuls test (p<0.05). A dose-response relationship was verified between F concentrations in the dentifrices and those in the biofilm fluid. Significant differences were observed among Placebo, 550F and CD only 1 h after brushing, without statistical differences among 550F, 550F-TMP and 550F-CaGP. No defined trend was observed among the groups regarding Ca concentrations in the biofilm fluid, with the highest values found for Placebo and 500F-CaGP. It was concluded that the anticaries effects of LFDs supplemented with CaGP or TMP cannot be related to an increased availability of F and Ca in the biofilm fluid / Mestre