Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O cÃncer à uma doenÃa que afeta cada vez mais um nÃmero maior de pessoas em todo o mundo. As terapias atuais utilizadas para o tratamento do cÃncer sÃo ainda insatisfatÃrias. Produtos naturais tÃm sido avaliados para seleÃÃo de compostos ativos, capazes de reduzir os tumores malignos de uma forma mais eficiente e com menos efeitos indesejÃveis. O polissacarÃdeo sulfatado extraÃdo da alga Champia feldmannii (Cf-PLS) foi testado para avaliaÃÃo do seu potencial antitumoral e imunoestimulante. AlÃm disso, foram feitos testes de toxicidade do fÃgado, rins e baÃo apÃs o tratamento com Cf-PLS. Os resultados demonstraram que Cf-PLS nÃo apresenta citotoxicidade in vitro, mas à capaz de reduzir o tumor Sarcoma 180 implantado em camundongos em 48,16% e 48,62% nas doses de 10 e 25mg/kg, respectivamente, e reduz 68,32% quando adiministrado juntamente com 5-Fluorouracil (5-FU). As anÃlises do fÃgado e rins revelaram que houve certa toxicidade no rim, com Ãreas de necrose tubular aguda na maior dose. Os testes da perfusÃo renal revelaram que Cf-PLS causa aumento da pressÃo de perfusÃo, resistÃncia vascular renal, ritmo de filtraÃÃo glomerular e fluxo urinÃrio, alÃm da excreÃÃo de sÃdio, cloreto e potÃssio. NÃo houve alteraÃÃes nos percentuais de transporte totais ou tubular proximais de sÃdio, cloreto ou potÃssio. Houve discreta deposiÃÃo protÃica nos glomÃrulos e tÃbulos renais. NÃo houve alteraÃÃes nas anÃlises bioquÃmicas e os testes hematolÃgicos revelaram uma leucopenia causada por 5-FU, entretanto esta foi revertida pelo tratamento com Cf-PLS. TambÃm foi demonstrado que Cf-PLS age como agente imunoestimulante e imunomodulador, aumentando a produÃÃo de anticorpos totais e especÃficos contra Cf-PLS e OVA, aumentando tambÃm a polpa branca e o nÃmero de megacariÃcitos nos baÃos dos animais tratados e induzindo a migraÃÃo de neutrÃfilos para a cavidade peritoneal de camundongos. Pode-se concluir que Cf-PLS apresenta atividade antitumoral e que isso pode estar relacionado com suas propriedades imunoestimulantes. / Cancer is a desease that occurs in a larger number of people each year. The therapies used to treat it are still not satisfatory. Natural products have been studied to select new compounds capable of reducing tumours and with fewer side effects. The sulfated polysaccharide isolated from the seaweed C. feldmannii (Cf-PLS) was investigated for its antitumor and immunostimulating properties and also for the toxicological aspects related to Cf-PLS treatment. The Cf-PLS did not show any significant in vitro cytotoxic effect, but showed a strong in vivo antitumor effect. The inhibition rates of sarcoma 180 tumor development were 48.16 % and 48.62% at the doses of 10 and 25 mg/kg, respectively, and 68.32% when treated together with 5-fluorouracil (5-FU). The histopathological analysis of liver and kidney showed that the kidneys were affected by Cf-PLS-treatment, presenting some focal areas of acute tubular necrosis at the higher dose. Cf-PLS caused considerable changes in renal physiology, as shown by an increase in parameters such as perfusion pressure, renal vascular resistance, glomerular filtration rate, urinary flow and sodium, chloride and potassium excretion. Neither enzymatic activity of alanine aminotransferase, urea nor creatinin levels were significantly altered. In hematological analyses, leucopeny was observed after 5-FU treatment, but this effect was prevented when the treatment was associated with the Cf-PLS. It was also demonstrated that Cf-PLS acts as an immunomodulatory agent, raising the production of specific antibodies, and also increasing the production of OVA-specific antibodies. In addition, it induced a discreet increase of the white pulp and nest of megakaryocytic in spleen of treated mice and the neutrophil migration to the intraperitoneal cavity of mice. In conclusion, Cf-PLS has some interesting antitumour activity that could be associated with its immunostimulanting properties.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A aquicultura à uma das atividades produtoras de alimento que mais cresce a nÃvel mundial e o cultivo de camarÃes marinhos apresentou a maior taxa de crescimento mÃdia nos Ãltimos 50 anos. A busca por produÃÃo, muitas vezes, requer um incremento na densidade utilizada, levando os indivÃduos cultivados a condiÃÃes de estresse e ao surgimento de doenÃas oportunistas. O uso de imunoestimulantes na aquicultura, entre eles os polissacarÃdeos sulfatados (PS), tem resultado em um aumento na resistÃncia dos animais a patÃgenos e a situaÃÃes de estresse. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos PS de Spirulina platensis em pÃs-larvas (PLâs) e juvenis do camarÃo branco Litopenaeus vannamei, por meio de banhos de imersÃo. A administraÃÃo do PS para as PLâs de L. vannamei foi realizada nas concentraÃÃes de 0 (controle); 50; 100 e 200 mg L-1, duas horas antes da avaliaÃÃo da resistÃncia das mesmas ao teste do estresse salino. Os juvenis de L. vannamei foram expostos, durante trÃs horas, aos PS de S. platensis nas concentraÃÃes de 0 (controle); 60; 120 e 240 mg L-1 seguida da coleta da hemolinfa para a anÃlise dos seguintes imunoparÃmetros: contagem total (CTH) e diferencial (CDH) de hemÃcitos, concentraÃÃo protÃica no soro, atividade da fenoloxidase (PO), atividade da α2-macroglobulina (α2-M) e atividade hemaglutinante do soro. ApÃs o teste do estresse salino, foi observado que as PLâs expostas aos PS na concentraÃÃo de 100 mg L-1 apresentaram uma tendÃncia de maior sobrevivÃncia, mas nÃo houve diferenÃa significativa entre os tratamentos. Com relaÃÃo aos imunoparÃmetros, a CTH foi reduzida quando os animais foram expostos aos PS e nas concentraÃÃes mais altas a CTH voltou aos valores normais. Porem, nÃo houve diferenÃa significativa entre os tratamentos e o controle. No entanto, a diferenÃa significativa foi observada entre os tratamentos que foram expostos ao PS. O nÃmero de hemÃcitos granulares (HG) apresentou uma tendÃncia de queda na concentraÃÃo de 60 mg L-1 e, com o incremento da concentraÃÃo de PS, os valores de HG tambÃm tenderam a aumentar, porÃm nÃo houve diferenÃas significativas em relaÃÃo ao controle. No entanto, foi observada diferenÃa significativa entre as contagens de HG nas concentraÃÃes de 60 e 240 mg L-1. A atividade da PO foi significativamente reduzida na concentraÃÃo de 60 mg L-1 o que pode estar relacionado ao baixo valor de CTH como tambÃm à elevada atividade do inibidor de protease α2-M. A atividade da PO voltou a ser semelhante à obtida no controle com o aumento da concentraÃÃo de PS para 120 mg L-1 e foi novamente reduzida na maior concentraÃÃo (240 mg L-1). A atividade do inibidor de protease α2-M foi significativamente elevada quando os animais foram expostos aos PS nas concentraÃÃes de 60 e 240 mg L-1, enquanto essa atividade se manteve semelhante ao controle na concentraÃÃo de 120 mg L-1. Dessa forma, nÃo houve necessidade de regulaÃÃo do sistema proPO, quando os camarÃes foram expostos à concentraÃÃo intermediÃria dos PS de S. platensis. A administraÃÃo dos PS de S. platensis aos camarÃes L. vannamei foi capaz de modular a resposta imunolÃgica desses animais de maneira diferente, dependendo da concentraÃÃo utilizada. Com a realizaÃÃo deste experimento pode-se concluir que a concentraÃÃo intermediÃria de 120 mg L-1 foi a mais eficiente, jà que manteve os nÃveis de hemÃcitos circulantes e as atividades basais da PO e α2-M. / Aquaculture is the food-producing activity that presented the fastest grow the worldwide and the cultivation of marine shrimps had the highest average growth rate over the past 50 years. The search for growing up the production, obtained through the increase on the density, carrying the animals on condition stress and the appearance of diseases. The use of immunostimulants on aquaculture, like the sulfated polysaccharides (SP), resulted in an enhancement of the animalâs resistance against pathogenic microorganism and stress situations. The aim of this study was to evaluate the effect of the SP of Spirulina platensis in post-larvae (PL's) and juvenile of the white shrimp Litopenaeus vannameithrou gh immersion baths. The administration of the SP to L. vannameiâs PL's was performedat concentrations of 0 (control), 50, 100 and 200 mg L-1, two hours before the evaluation of their resistance to the salt stress test. The juveniles of L. vannamei were exposed for three hours to the SP of S. platensisat concentrations of 0 (control), 60, 120 and 240 mg L-1 followed by a hemolymph collection for analysis of the following immune parameters: haemocytes total (THC) and differential (DHC) counts, serum protei n concentration, activity of phenoloxidase (PO), activity of α2-macroglobulin (α2-M) and serum hemagglutinating activity. After the salt stress test it was observed that the PLâs that were exposed to the SP at a concentration of 100 mg L -1 showed a tendency of a higher survival rate but there was not any significant difference between the treatments. Regarding the immune parameters, THC was reduced when the animals were exposed to the SP, while the exposure of shrimp to higher concentrations of PS resulted in normal values of the THC. However, no significant differen cebetween treatments and control. But, the significant difference(p≤0.05) was observed between the treatments that were exposed to PS. The number of granular haemocytes (GH) showed adownward trend in the concentration of 60 mg L -1 and, with increasing concentration of SP, the values of HG also tended to increase, but without significant differences compared to that of the control. However, significant differences were observed between the number of HG at concentrations of 60 and 240 mg L - 1. The PO activity was significantly reducedat a concentration of 60 mg L - 1 which may be related to the low value of THC as well as the high activity of the protease inhibitor α2 -M. The PO activity was again similar to that obtained in control with increasing concentration of SP to 120 mg L -1 and was further reduced in the highest concentration (240mg L-1). The activity of the protease inhibitor α2-M was significantly higher when the shrimps were exposed at concentrations of 60 e 240 mg L -1, while this activity was similar to that of control at a concentration of 120 mg L -1. Thus, there was no need for regulation of the proPO system, when the shrimp were exposed to an intermediate concentration of SP of S. platensis. The administration of SP of S. platensis to shrimps L. vannamei was able to modulate the immune response of these animals in different forms depending on the concentration used. So analyzing the results it is possibl e to conclude that the intermediate concentration of 120 mg L -1 was the most efficient, since it maintained the levels of circulating hemocytes and the basal activities of PO and α 2 -M.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / This work reports the preparation and characterization of collagen-sulfated polysaccharide films and applications in coating of cardiovascular prostheses. The films were prepared by adding the sulfated polysaccharide solution on soluble collagen (0, 5, 10, 20 and 25 %). The blends of collagen-sulfated polysaccharide were casted in acrylic molds, and dried at low temperature. The physico-chemical properties of collagen-sulfated polysaccharide films, were studied using infrared spectroscopy that showed absorptions typical of collagen and sulphated polysaccharide; the thermal analysis (DSC) showed that the structural integrity of collagen was unmodified during the extraction process and the polysaccharide present in the samples did not decrease the thermal stability of the collagen, which was higher for the concentrations of 20 %. In the thermal analysis (DTG), the addition of the polysaccharide caused a small decrease of the stability of thermal degradation and when was adding 5 % of the sulfated polysaccharide to the collagen, a reduction in its stability occurs, however, in the concentrations of 10, 20 and 25 %, the stability of thermal degradation of the film increased. In the impedance spectroscopy, the results are associated possibly, to the interactions between the macromolecules. The blood compatibility was analyzed by platelet adhesion and the results showed that the films possess hemocompatibility and antitrombogenic properties. / Este trabalho aborda sobre o preparo e a caracterizaÃÃo de filmes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado e sua aplicaÃÃo para revestimento de prÃteses vasculares. Os filmes foram obtidos a partir da mistura de soluÃÃo de colÃgeno e polissacarÃdeo sulfatado, nas concentraÃÃes 0, 5, 10, 20 e 25 % do polissacarÃdeo. As soluÃÃes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado foram formatadas em moldes de acrÃlico em condiÃÃes de baixa umidade e temperatura. A caracterizaÃÃo fÃsico-quÃmica dos filmes de colÃgeno-polissacarÃdeo sulfatado foi estudada por espectrometria no infravermelho que mostraram bandas tÃpicas do colÃgeno e bandas tÃpicas do polissacarÃdeo sulfatado; a anÃlise tÃrmica por DSC mostra que a integridade estrutural do colÃgeno foi preservada no processo de extraÃÃo e que a adiÃÃo do polissacarÃdeo nas amostras nÃo diminuiu a estabilidade tÃrmica do colÃgeno tendo sido maior na concentraÃÃo de 20 %. Na anÃlise tÃrmica por DTG, a adiÃÃo do polissacarÃdeo causa um pequeno decrÃscimo da estabilidade de degradaÃÃo tÃrmica e ao adicionarmos 5 % do polissacarÃdeo sulfatado ao colÃgeno, ocorre uma reduÃÃo em sua estabilidade, porÃm, a partir daÃ, nas concentraÃÃes 10, 20 e 25 %, a estabilidade de degradaÃÃo tÃrmica do filme vai aumentando. Na espectroscopia de impedÃncia, os resultados estÃo associados, possivelmente, a interaÃÃes entre as macromolÃculas. A compatibilidade sangÃÃnea foi analisada por adesÃo de plaquetas e os resultados mostraram que os filmes possuem hemocompatibilidade e propriedades antitrombogÃnicas.