CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / This paper describes the reinvestigation phytochemical of the fixed constituents present in the roots and stems of the species Capraria biflora, of the family Scrophulariaceae, as well as research on the chemical composition of essential oil extracted from the leaves and evaluates the larvicidal activity against Aedes aegypti larvae. The study of the essential oil resulted in the identification of seven constituents among which six are sesquiterpene compounds. The essential oil was tested for larvicidal activity and showed a moderate activity, with LC50 = 73.39. Chromatographic studies on silica gel, petroleum ether extract of the roots and ethanol of stems, allowed the isolation and characterization of four compounds: the naphthoquinone biflorin, the sesquiterpene caprariolide B, sugar D-mannitol and iridoid miopoclorin, unprecedented in kind. The structure of the compounds was performed by spectrometric techniques: infrared (IR), mass spectrometry (MS) and nuclear magnetic resonance of hydrogen (1H) and carbon-13 (13C NMR), including two-dimensional techniques (COSY, HSQC and HMBC) and comparison with data reported in the literature. / Este trabalho descreve a reinvestigaÃÃo fitoquÃmica dos constituintes fixos presentes nas raÃzes e no caule da espÃcie Capraria biflora, pertencente à famÃlia Scrophulariaceae, bem como a investigaÃÃo da composiÃÃo quÃmica do Ãleo essencial extraÃdo das folhas e avaliaÃÃo da atividade larvicida contra larvas do Aedes aegypti. O estudo do Ãleo essencial resultou na identificaÃÃo de sete constituintes dentre os quais, seis sÃo compostos sesquiterpÃnicos. O Ãleo essencial foi submetido ao teste de atividade larvicida e apresentou uma atividade moderada, com CL50=73,390. Estudos cromatogrÃficos em gel de sÃlica, do extrato Ãter de petrÃleo das raÃzes e etanÃlico do caule, permitiram o isolamento e caracterizaÃÃo de quatro compostos: a naftoquinona biflorina, o sesquiterpeno caprariolÃdeo B, o aÃÃcar manitol e o iridÃide miopoclorin, inÃdito na espÃcie. A elucidaÃÃo estrutural das substÃncias foi realizada atravÃs de tÃcnicas espectromÃtricas: infravermelho (IV), espectrometria de massa (EM) e ressonÃncia magnÃtica nuclear de hidrogÃnio (RMN 1H) e de carbono-13 (RMN 13C), incluindo as tÃcnicas bidimensionais (COSY, HSQC e HMBC) e comparaÃÃo com dados registrados na literatura.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Euphorbiaceae is a family of plants that have more than 8000 species with over 300 genera, widely distributed in tropical and temperate regions worldwide. Despite the wide distribution of this family, many species have never been studied in the chemical point of view. One of these species is Croton jacobinensis, restricted to Brazilian semi-arid region, known popularly as marmeleiro-branco. To contribute to the chemical knowledge of this species the woody of the roots of this plant was subjected to a cold extraction with a mixture of dichloromethane / methanol (2:3). The extract obtained after liquid-liquid extraction and concentration was subjected to successive chromatographic treatments on silica gel resulted in isolation and characterization of the mixture of steroid β-sitosterol and stigmasterol, and three diterpenes, two of the basic skeleton of the class crotofolano, one of them being registered as crotofolina E and the other character unpublished. The other diterpene isolated belong to the class of labdane and is also unprecedented in the literature. For the isolation of secondary metabolites usual chromatographic techniques were employed as thin layer chromatography, filtration chromatography and flash chromatography. Structure determination of non-volatile constituents was achieved by the use of techniques: Infrared (IR), mass spectrometry (MS) and Nuclear Magnetic Resonance of Hydrogen-1 and Carbon-13 (1H and 13C NMR uni and bidimensional) and comparison with literature data. / Euphorbiaceae à uma famÃlia de plantas que possui mais de 8 mil espÃcies com mais de 300 gÃneros, amplamente distribuÃdas em regiÃes tropicais e temperadas de todo o mundo. Apesar da larga distribuiÃÃo desta famÃlia, muitas espÃcies nunca foram estudadas no ponto de vista quÃmico. Uma destas espÃcies à o Croton jacobinensis, restrita ao semi-Ãrido brasileiro, conhecido popularmente por marmeleiro-branco. Visando contribuir para o conhecimento quÃmico desta espÃcie, o lenho das raÃzes desta planta foi submetido a uma extraÃÃo a frio com a mistura de diclorometano/metanol (2:3). O extrato obtido apÃs extraÃÃo lÃquido-lÃquido e concentraÃÃo foi submetido a sucessivos tratamentos cromatogrÃficos em gel de sÃlica resultando no isolamento e caracterizaÃÃo da mistura dos esterÃides β-sitosterol e estigmasterol e de trÃs compostos diterpÃnicos: dois de esqueleto bÃsico da classe crotofolano, sendo um registrado como crotofolina E e o outro de carÃter inÃdito. O outro diterpeno isolado pertence à classe dos labdanos e tambÃm à inÃdito na literatura. Para o isolamento dos metabolitos secundÃrios foram empregadas tÃcnicas cromatogrÃficas usuais como cromatografia em camada delgada, cromatografia filtrante e cromatografia relÃmpago. A determinaÃÃo estrutural dos constituintes nÃo volÃteis isolados foi realizada atravÃs da utilizaÃÃo das tÃcnicas de: Infravermelho (IV), espectrometria de massa (EM) e RessonÃncia MagnÃtica Nuclear de HidrogÃnio-1 e Carbono-13 (RMN 1H e 13C uni e bidimensionais), alÃm de comparaÃÃo com dados descritos na literatura.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O presente trabalho descreve o estudo da espÃcie botÃnica Cissus verticillata (Vitaceae) conhecida como âinsulina vegetalâ que à utilizada popularmente como anti-diabÃtica. AtravÃs de cromatografia gravitacional utilizando gel de sÃlica como fase estacionÃria foi isolado um constituinte esterÃidal, β-Sitosterol a partir do extrato hexÃnico dos talos e do extrato hexÃnico das folhas foi isolado um Ãlcool primÃrio conhecido como n-tetracosanol e um triterpeno chamado 3β-taraxerol. Em adiÃÃo, foram efetuadas algumas reaÃÃes clÃssicas para obtenÃÃo de derivados, inclusive com o objetivo de comparar a atividade biolÃgica desses derivados com a do constituinte original. Assim, foram realizados testes de atividade anticolinesterÃsica do constituinte original e dos produtos das reaÃÃes de acetilaÃÃo, formilaÃÃo e oxidaÃÃo. O estudo do extrato hexÃnico dos talos e das folhas de C. verticillata L. apÃs saponificaÃÃo com KOH/MeOH seguida de metilaÃÃo, forneceu uma mistura de Ãsteres metÃlicos que foram identificados por CG/EM. Os principais componentes foram o Ãcido hexadecanÃico, Ãcido 9,12 octadecadienÃico, Ãcido octadecanÃico, Ãcido eicosanÃico, Ãcido docosanÃico. Na caracterizaÃÃo dos metabÃlitos secundÃrios isolados, assim como, de seus produtos reacionais, foram empregadas tÃcnicas espectromÃtricas de anÃlise de ressonÃncia magnÃtica nuclear (RMN) de 1H e 13C, infravermelho (IV) e espectrometria de massa (EM). / The presente work describe the results of chemical study of Cissus verticillata (Vitaceae), plant known as insulin and commonly used as anti-diabetic. Using column chromatography on silica gel from the hexane extract of the stems was isolated a steroid (β-sitosterol), while the hexane extract of leaves provided an alcohol (tetracosonol) and a pentaciclic triterpene (3β-taraxerol). In addition, from the original constituents, using classical chemical reactions (acetylation, oxidation and formulation), derivatives were prepared in order to compare the original constituents with the derivatives with respect to anticholinesterase activity. We also studied the composition of fatty acids present in the hexane extract of the stems through the process of saponification followed by methylation and analised using gas chromatography coupled to mass spectrometry. All compounds original constituents and derivatives) were characterized by spectrometric methods, nuclear magnetic resonance (NMR) 1H and 13C, infra-red and mass spectroscopic.

O câncer representa uma das principais causas de morte no mundo. De acordo com a Organização Mundial da Saúde (OMS) surgem, a cada ano, nove milhões de casos e cerca de cinco milhões de pessoas morrem em consequência da doença. Apesar do aprimoramento nos métodos de diagnóstico, muitos tipos de câncer ainda são diagnosticados em fase avançada, assim os tratamentos convencionais são apenas paliativos. Muitos medicamentos rotineiramente utilizados em tratamento quimioterápico são oriundos de produtos naturais e o Brasil dispõe de uma ampla diversidade de plantas, as quais são úteis como fonte de pesquisa para a identificação de novos compostos com atividade antitumoral. O objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial antitumoral de nove espécies de plantas coletadas na Mata Atlântica da região sul de Minas Gerais, sendo elas: Duguetia lanceolata (folhas), Trichilia emarginata (folhas), Miconia willdenoii (folhas), Allophylus racemosus (folhas e galhos), Metrodorea stipularis (folhas), Mollinedia widgrenii (folhas), Casearia arborea (folhas), Acacia polyphylla (folhas) e a Casearia sylvestris (folhas). Os resultados mostraram que o extrato obtido a partir das folhas de Casearia sylvestris foi potencialmente ativo contra cinco linhagens diferentes de células derivadas de cânceres humanos: A549 (adenocarcinoma pulmonar), MCF7 (adenocarcinoma mamário), HepG2 (hepatocarcinoma), U251 MG (glioblastoma), HT144 (melanoma). Assim sendo, o extrato bruto dessa espécie foi fracionado por extração líquido-líquido a fim de selecionar as frações enriquecidas com substâncias bioativas. As frações acetato de etila e hexânica (substâncias de média e baixa polaridade) mostraram promissoras nos resultados dos ensaios bioguiados, sendo que a fração acetato foi selecionada para isolamento de substâncias com potencial antitumoral. Após Cromatografia em Coluna e Cromatografia Líquida foi possível o isolamento da casearina D. A mesma foi submetida aos testes biológicos e verificou-se que tem potencial antitumoral sobre as linhas de hepatocarcinoma e adenocarcinoma pulmonar. / Cancer has emerged as a major cause of morbidity and mortality in recent times. According the report from the World Health Organization (WHO), there were 9 million deaths with 5 million new cases of cancer for wear. Unfortunately, many cases are still diagnosed at advanced stages when treatment options are only palliative. Many medications routinely used in chemotherapy are derived from natural products, and Brazil has a wide diversity of plants, which are useful as a source of research for the identification of new compounds with antitumor activity. The aim of this study was to evaluate the anti-tumor potential of nine species of plants collected in the Atlantic Forest in the southern region of Minas Gerais, which are: Duguetia lanceolata (leaves), Trichilia emarginata (leaves), Miconia willdenoii (leaves), Allophylus racemosus (leaves and branches), Metrodorea stipularis (leaves), Mollinedia widgrenii (leaves) and Casearia arborea (leaves), Acacia polyphylla (leaves), Casearia sylvestris (leaves). The results showed that the extract obtained from Casearia sylvestris leaves were potentially active against five different strains derived from human cancer cells: A 549 (lung adenocarcinoma), MCF 7 (breast carcinoma), HepG2 (hepatocellular carcinoma), U251 MG (glioblastoma) HT 144 (melanoma). Thus, the crude extract of this species was fractionated by liquid-liquid extraction in order to select the fractions enriched with bioactive substances. The ethyl acetate fraction (medium polarity substance) showed a higher antitumor activity and was selected for isolation for the isolation of substances with antitumor potential. After column chromatography, liquid chromatography has been possible to isolate the casearin D. The same was subjected to biological tests and have found that antitumor potential on the lines of hepatocellular carcinoma and lung adenocarcinoma. / Programa Institucional de Bolsas de Pós-Graduação - PIB-PÓS

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Este trabalho relata o estudo quÃmico do extrato hexÃnico e etanÃlico do caule de Senna cana H.S Irwin & Barneb, popularmente conhecida no Nordeste como candieiro preto e SÃo JoÃo, coletada em MucugÃ-BA. O estudo do Ãleo fixo do caule de Senna. cana resultou na identificaÃÃo de oito Ãcidos graxos, totalizando 83,13% da composiÃÃo do Ãleo fixo. Destacaram-se como componentes majoritÃrios os Ãcidos graxos dos Ãcidos saturados: palmÃtico (26,83%), lignocÃrico (18,60%) e o nonadecanÃico (11,18%). O tratamento cromatogrÃfico dos extratos hexÃnico e etanÃlico do caule da Senna cana, possibilitou o isolamento e caracterizaÃÃo de duas antraquinonas 1,8-diidroxiladas, crisofanol e fisciona, de um Ãcido carboxÃlico de cadeia longa denominado de Ãcido triacontanÃico e de dois triterpenos lupeol e friedelina, bem como a mistura β-sitosterol e estigmasterol. O potencial farmacolÃgico e biolÃgico de Senna cana, foi investigado atravÃs de ensaios de atividade antioxidante, anticolinesterÃsica e larvicida. Das amostras analisadas, o extrato etanÃlico foi o que apresentou melhor resultado, com o I.V 39,61%. As determinaÃÃes estruturais foram realizadas atravÃs de anÃlises espectroscÃpicas, tais como: espectroscopia na regiÃo do infravermelho, de ressonÃncia magnÃtica nuclear de hidrogÃnio-1 e carbono-13, espectrometria de massas e comparaÃÃo com dados da literatura. / This paper reports the chemical study of the hexane and ethanol extracts from the Senna cana H.S Irwin & Barneby, called in the Northeast of Brazil as "Candieiro preto" and "SÃo JoÃo", collected in MucugÃ-BA. The study of the fixed oil of the stem of Senna cana resulted in the identification of eight fatty acids, amounting to 83.13% of fixed oil composition. Stood out as the major components of fatty saturated acids: palmitic (26.83%), lignoceric (18.60%) and nonadecanoic (11.18%). The chromatographic treatment of the hexane and ethanol extracts of the stem from the Senna cana, allowed the isolation and characterization of two dyhydroxylated 1,8-anthraquinones, chrysophanol and physcion, a long chain carboxylic acid named triacontanoic acid, two triterpenes called lupeol and friedelin and the mixtures β-sitosterol and stigmasterol. The pharmacological and biological potencial from Senna cana was investigated by antioxidant activity, anticholinesterase and larvicide tests. The ethanol extract showed the best result with 39.61% IV. The structural determination was performed using spectroscopic analysis, such as infrared spectroscopy, hydrogen-1 and carbon-13 nuclear magnetic resonance, mass spectrometry and comparison with the results founded on the literature.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Um meio de se evitar a oxidaÃÃo excessiva das cÃlulas e, assim, evitar doenÃas contra o cÃncer à a ingestÃo de substÃncias chamadas antioxidantes. A mangiferina, tem apresentado um grande potencial antioxidante, bem como o noratiriol, sua aglicona. Daà surge a justificativa para se buscar fontes naturais dessas substÃncias. Foram isolados cerca de 30 g de mangiferina da Mangifera indica atravÃs de extraÃÃo a frio com etanol. Com ela foram feitos testes de conversÃo em noratiriol atravÃs de biotransformaÃÃo porÃm, mostrando resultados negativos. Foram analisadas por HPLC os extratos metanÃlicos obtidos à quente de Maclura tinctoria estando o noratiriol presente apenas no caule que foi quantificado dando um valor de 1,56 % de noratiriol em massa. Um estudo paralelo foi realizado com a raiz da Mangifera indica que tambÃm apresentou noratiriol, pela primeira vez na espÃcie, porÃm em pequena quantidade que pela quantificaÃÃo apresentou um valor de 0,0035 % de noratiriol em massa. Foram identificadas mais 14 substÃncias neste extrato por padrÃes de HPLC como o Ãcido gÃlico, Ãcido gÃlico glicosilado, Ãcido 3,4-dihidroxibenzÃico, metil galato, iriflofenona-3-C-β-glicosÃdeo, iriflofenona-3-C-(2-O-p-hidroxibenzoil)-β-D-glicosÃdeo, iriflofenona-3-C-(2-O-galoil)-β-D-glicosÃdeo, mangiferina, isomangiferina, 6-O-(p-hidroxibenzoil)mangiferina, metil mangiferina, naningerina, maclurina 3-C-(2-O-galoil)-β-D-glicosÃdeo e taxifolina.

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lt;p align="justify"gt; A água tem influência direta sobre a saúde, a qualidade de vida e o desenvolvimento do ser humano. Cerca de um quarto dos 4,8 bilhões de pessoas dos países em desenvolvimento não possuem acesso a fontes de água adequadas. Carvalho (1983), Silva e Araújo (2003), e outros, citam percentuais de contaminação por coliformes totais e fecais em água de cisterna que chegam a 91%. O presente estudo teve como objetivo, avaliar a eficiência do clorador simplificado por difusão na desinfecção da água utilizada para consumo humano, e para isso, fez-se análise microbiológica da água de 30 residências, correspondendo a 48% das existentes na bacia hidrográfica do Ribeirão do Laje, em Caratinga, MG localizadas à jusante do distrito de Santa Luzia, que utilizam água sem tratamento, captada de cisterna ou diretamente de nascente. Constatou-se que 90% das amostras analisadas estavam contaminadas com coliformes totais. Observou-se que a totalidade das amostras de água captadas de nascente estavam contaminadas por coliformes totais. Nenhuma captação de nascente está satisfatoriamente protegida. Quanto às cisternas, somente 28,6% possuem revestimento, 59% não possui tampa adequada, em 33% ocorre entrada de água de enxurrada no interior da cisterna, 43% estão distante de cursos d’água, e a média de distância das que estão próximas é de 12 metros, o que mostrou ser o mais provável fator de contaminação da água. Constatou-se que 70% dos entrevistados desconhecem normas básicas de construção e manutenção de cisternas. Segundo a percepção dos moradores entrevistados cuja escolaridade média de 3,2 anos de estudo, todos classificam a água consumida como sendo “excelente” ou “boa”, mas, contraditoriamente, 77% acreditam haver microorganismos patogênicos na água que consomem. Em 47% das residências pesquisadas não havia filtro doméstico para água. Implantou-se o clorador em 10 cisternas que apresentaram contaminação por coliformes, e observou-se que em três análises microbiológicas subseqüentes (10, 20 e 33 dias após implantação), não houve detecção de coliformes totais e fecais nas amostras. O teor de cloro ativo liberado pelo clorador ficou sempre abaixo de 0,2 mg L-1, e mesmos com teores menores que 0,1 mg L-1 não houve detecção de coliformes. Segundo a percepção dos moradores entrevistados, o clorador não interfere significativamente no paladar e cheiro da água, o que não desestimula seu uso. Concluiu-se neste estudo, que o clorador simplificado por difusão é um método eficiente, simples, de baixo custo, e que deve ter sua utilização estimulada junto à população que não tem acesso à água tratada, aspecto que em muito contribuirá para que se reduzam os riscos de transmissão de doenças de veiculação hídrica.lt;/pgt; / lt;p align="justify"gt; The present study it has as objective, to evaluate the efficiency of the clorador simplified for diffusion in the disinfection of the water used for human consumption, and for this, microbiological analysis of the water of 30 residences became, corresponding 48% of the existing residences in the hidrográfica basin of the Ribeirão do Laje, in Caratinga – MG located to the ebb tide of the district of Luzia Saint, that use water without treatment, caught of watering hole or spring. One evidenced that 90% of the analyzed samples were contaminated with total coliformes. It was observed that the totality of spring the caught water samples was contaminated by total coliformes. No apitation of spring satisfactorily is protected. How much to watering holes, 29% only they possess covering, 59% does not possess adjusted cover, in 33% occurs entered of torrent water in the interior of the watering hole, 43% are distant of courses d’água, and the distance average to that they are next is of 12 meters, what it showed to be the most likely factor of contamination of the water. One evidenced that 70% of the interviewed ones are unaware of basic norms of construction and maintenance of watering holes. According to perception of the interviewed inhabitants whose average escolaridade of 3,2 years of study, 100% classifies the consumed water as being “excellent” or “good”, but, contraditoriamente, 77% believe to have pathogenic microorganisms in the water that consume. In 47% of the searched residences it did not have domestic filter for water. The clorador in 10 watering holes was implanted that had presented contamination for coliformes, observed it that in three subsequent microbiological analyses (10, 20 and 33 days after implantation), did not have detention of total and fecais coliformes in the samples. The set free active chlorine text for the clorador was always below of 0,2 mg L-1, and same with 0,1 lesser texts that mg L-1 did not have detention of coliformes. According to perception of the interviewed inhabitants, the clorador does not intervene significantly with the palate and smells of the water, what it does not discourage its use. It was concluded in this study, that the clorador simplified for diffusion is an efficient, simple method, of low cost, and that it must have its use stimulated together to the population that does not have access to the treated water, aspect that in very will contribute so that the risks of transmission of illnesses of hídrica propagation are scrumbled.lt;/pgt;

Os fungos endofíticos têm sido cada vez mais pesquisados como fonte de moléculas bioativas. Neste trabalho, foram isolados fungos endofíticos de uma árvore produtora de compostos medicinais, Handroanthus impetiginosus, com o objetivo de verificar se produziam metabólitos com atividade biológica e de identificar as espécies fornecedoras de princípios bioativos. Todas as 148 cepas isoladas foram triadas segundo a atividade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus ATCC 6538, Candida albicans ATCC 10231 e Escherichia coli ATCC 25922 pelo método do ágar em bloco. Dentre essas, cinco fungos foram submetidos a fermentação em pequena escala, em caldo Czapek, durante 15 dias, a 28°C, tanto sob agitação quanto em modo estático. Ao final desse período, as culturas foram filtradas e submetidas a extração líquido-líquido. Os extratos obtidos foram avaliados quanto à capacidade de inibir o crescimento dos micro-organismos patogênicos citados anteriormente, por teste de difusão em ágar e determinação da concentração inibitória mínima (CIM). As menores faixas de CIM observadas foram 125-250 μg.mL-¹, de Alternaria alternata, e 250-500 μg.mL-¹, de Lasiodiplodia sp. Também avaliou-se o efeito sobre a viabilidade de linhagens celulares derivadas de câncer humano de mama (MCF-7), fígado (HepG2) e pulmão (A549). Os extratos de A. alternata e de Lasiodiplodia sp. reduziram a menos que 10% a viabilidade das células tumorais MCF-7 e HepG2. O primeiro também reduziu a menos que 5% a viabilidade de células A549. Por isso, tais fungos endofíticos foram submetidos a fermentação submersa em maior escala. O extrato de Alternaria alternata e algumas de suas frações reduziram expressivamente a viabilidade das três linhagens celulares testadas. Dentre tais frações, a F3 se destacou por apresentar menores valores de IC50 para MCF-7 e HepG2 (10,28±5,22 e 9,75±1,31 μg.mL-¹, respectivamente) do que o fármaco cisplatina (21,12±1,56 e 27,15±1,73 μg.ml-¹, respectivamente). O fracionamento dos extratos por cromatografia em coluna e cromatografia líquida de alta eficiência permitiram o isolamento de dois compostos, provenientes de A. alternata, e de um produzido por Lasiodiplodia sp. Tais amostras foram analisadas por ressonância magnética nuclear, e foi identificado o composto 4-hidróxi-benzaldeído no extrato de A. alternata. Ficou comprovado que os extratos de fermentação de fungos endofíticos isolados de H. impetiginosus exerceram importante atividade biológica, reduzindo a viabilidade de células derivadas de câncer de mama, fígado e pulmão. / Endophytic fungi have been prospected as source of active metabolites. In this work, endophytic fungi had been isolated from a tree that produces medicinal compounds, Handroanthus impetiginosus, in order to check if they produce biological active metabolites and to identify the biologically active species. All the 148 strains isolated were screened by agar piece method to investigate their antibiotic activity against Staphylococcus aureus ATCC 6538, Candida albicans ATCC 10231 e Escherichia coli ATCC 25922 . Among them, five endophytic fungi were fermented on small scale. The fermentation was performed in a Czapek broth, for 15 days, 28oC, under either stirring or static conditions. After this period, the cultures were filtered and subjected to liquid-liquid extraction. The obtained extracts were tested against the microorganisms mentioned above and the cancer cells MCF-7, HepG2 and A549. The lowest minimum inhibitory concentrations (MIC) exhibited were 125-250 μg.mL-¹ (from Alternaria alternata) and 250-500 μg.mL-¹ (from Lasiodiplodia sp.) both against S. aureus . Two extracts appreciably reduced tumor cells viability and, therefore, these endophytic fungi were fermented on large scale. The extract from A. alternata significantly reduced the viability of all three cell lines tested to less than 10% and its chemical study was biomonitored. One of its fractions, F3, exhibited lower IC50 against MCF-7 and HepG2 (10.28±5.22 and 9.75±1.31 μg.mL-¹, respectively) than cisplatin, a pharmaceutical compound commercially available (21.12±1.56 and 27.15±1.73 μg.mL-¹, respectively). The extract from Lasiodiplodia sp. diminished the viability of MCF-7 and HepG2 cells to less than 10%. The partitioning of the extracts by column chromatography and high performance liquid chromatography provided two isolated compounds from A. alternata and one from Lasiodiplodia sp. The samples were analyzed by nuclear magnetic resonance technique and the compound 4-hydroxybenzaldehyde was identified for A. alternata extract. The fermentation extracts of endophytic fungi from H. impetiginosus exhibited relevant biologic activity reducing the viability of cells derived from breast, liver and lung cancer. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Estratégias guiadas por genoma foram utilizadas a fim de examinar o potencial biossintético de microorganismos da classe Betaproteobacteria no âmbito de Produtos Naturais. Uma estratégia capaz de ser expandida para todos os tipos de microorganismos foi criada para estimar as reações enzimáticas das Peptideo Sintetases Não Ribossomais a fim de sistematizar a e analisar suas similaridades biossintéticas. Todas as bases de dados e software user-friendly foram adotadas a fim de tornar esta estratégia simples e mais abrangente. Elas foram NCBI, KEGG, NORINE, antiSMASH, Cystoscape, Gitools, MEGA e Clustal. Os resultados tornaram possível a criação de uma stratégia, chamada XPAIRT (eXPAndable Identification of amino acids in nonRibosomal peptides Tendencies) correlacionando pares de peptídeos e seus genomas similares via Jaccard Index e filogenia. Neste contexto, espécies Betaproteobacteria mostraram sintetizar produtos naturais seguindo certa similaridade biossintética na montagem de monômeros para a construção do esqueleto peptídico. Subunidades estruturais tais como asp.ser e orn.ser foram amplamente encontradas. Essas similaridades foram correlacionados gerando índice de similaridade entre espécies e sua distribuição entre genomas semelhantes, que foram nomeados como contribuíntes. Quanto maior a identidade genômica de um cluster de gene biossintético para um produto natural de forma geral, maior a chance de um contribuínte expressar pares similares relativos ao cluster em questão. A partir de análises de contagem de clusteres de genes biossintéticos, pôde-se eleger microorganismos promissores para isolamento de amostras ambientais. Essas análises mostraram que espécies do gênero Burkholderia são as mais promissoras quando comparadas a todos os genomas disponíveis da subclasse Betaproteobacteria. Análises genômicas da espécie padrão do gênero, Burkholderia thailandensis mostraram que cromossomos 1 e 2, em comparação a uma cepa produtora de antibióticos padrão, S. coelicolor, não apresentarem mesmas informações para biossíntese de compostos, mas apresentam similaridades de classes, sendo elas, Terpenos, T1PKS, Bacteriocinas e Peptídeos Não Ribossomais. Todos os resultados não tiveram correlações com os clusteres de S. coelicolor evidenciando que B. thailandensis apresenta-se promissora para a descoberta de novos compostos. Como espécies do gênero Burkholderia foram o principal alvo neste trabalho, um método guiado por genoma foi desenvolvido para isolar tanto quanto possível cepas de amostras ambientais. O método levou em consideração as necessidades básicas de um microorganismo para sobreviver: a) o tipo de microbioma que os microorganismos de interesse se encontram, analizados através de resultados de metagenômica, b) resistência à antibióticos e metais, c) capacidade de metabolizar compostos com papel biológico, d) crescimento celular e nutrientes, e e) variações de pH e crescimento celular. Todas as análises foram cruzadas e os melhores candidatos à composição de meios de culturas celular específicos para o isolamento de microorganismos do gênero Burkholderia foram selecionados. A estratégia foi bem-sucedida para diversos tipos de amostras. Estes experimentos excepcionais demonstraram a eficácia na resolução de problemas químico-biológicos auxiliando a análise posterior de novos produtos naturais. / Genome-guided strategies were applied to examine Betaproteobacteria species potential for the biosynthesis of nonribosomal peptides. A generalizable strategy was created to track similarities in enzymatic reactions of nonribosomal peptides synthetases in order to organize their capability of assembling monomers building the peptides backbones. Databases and user-friendly software were adopted making this strategy a comprehensive one. Databases and software adopted, as well as, NCBI, KEGG, NORINE, antiSMASH, Cystoscape, Gitools, MEGA e Clustal were used for this purpose. Betaproteobacteria species showed to possess biosynthetic similarities in assembling monomers for the peptide backbone of a nonribosomal peptide. These evidences were correlated giving similarities indexes between species and their distribution between similar genomes. Predictions were fragmented in several ways, for example, monomers, pairs and triads. Correlation analyses displayed that pairs it is the best way of tracking similarities. This result turned possible to create a strategy, named XPAIRT (eXPAndable Identification of amino acids in nonRibosomal peptides Tendencies) correlating pairs of peptides and their similar genomes via Jaccard Index and phylogeny. Thought these investigations it was noticed that Betaproteobacteria species generally assemble asp.orn and orn.ser, mainly Burkholderia species, among other pairs of peptides. Further analysis showed that species from the genera Burkholderia are the most promising ones due to their Biosynthetic Gene Cluster counting for all available Betaproteobacteria genomes. These species were further analyzed and a standard strain, Burkholderia thailandensis, was used to the identification of intraspecific variation for their biosynthetic potential. A specific study on Biosynthetic Gene Cluster variation was proceeded for discovering disparities between chromosomes 1 and 2, and a standard antibiotic producer strain, S. coelicolor. Results showed that B. thailandensis have different possibilities for biosynthesizing natural products. Even thought, common classes of compounds such as, Terpenes, Bacteriocins, T1PKS and Nonribosomal Peptides were identified for all strains. As Burkholderia species were the main target in this work, a genome-guided method was developed for isolating as much strains as possible from environmental samples. This very method took into account the basic needs for a microorganism to survive: a) the type of microbiome that microorganisms of interest coexist, analyzed through metagenomics, b) resistance to antibiotics and metals, c) ability to metabolize compounds with biological role, d) cell growth related to different nutrients, and e) cell growth under pH variations. The strategy was successful for diverse types of samples. These exceptional experiments are part of a novel way of working with Natural Products, using genomic, bioinformatics and visual statistical analysis in order to access common characteristics and uniqueness of species guiding the search of medically relevant natural products. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES