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Detecção de genes associados à virulência em cepas de Campylobacter jejuni de origem aviária e humana

Lima, Leonardo Moreira January 2016 (has links)
A demanda por carne de frango vem crescendo globalmente, assim como as exigências com relação à qualidade microbiológica do produto final. Associa-se a frequência de Campylobacter spp. em aves às enterites em humanos. O principal reservatório do agente é o trato digestivo de animais de diversas espécies, como aves de corte. Campylobacter spp. possui ampla diversidade genotípica e fenotípica, e apresentam diversos mecanismos de virulência para se aderir e colonizar o epitélio intestinal no hospedeiro. Apesar de o controle sanitário e biossegurança implementados nas granjas refletirem na redução de contaminação das carcaças no matadouro-frigorífico, esses procedimentos não eliminam o Campylobacter completamente das aves, podendo comprometer a qualidade microbiológica do produto final e propiciar casos de toxinfecção de origem alimentar aos consumidores. Esse trabalho tem como objetivo verificar a ocorrência de seis genes de virulência de Campylobacter jejuni em amostras de carcaças de frango e em casos de campilobacteriose em humanos. Foram avaliadas 50 amostras de C. jejuni, das quais 25 eram de origem aviária, provenientes da coleção do Centro de Diagnóstico e Pesquisa em Patologia Aviária (CDPA - UFRGS), e 25 eram de origem humana, cedidas pela Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ). A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para detecção dos genes iam, flaA, cdtA, cdtB, cdtC e wlaN. Das amostras analisadas, 92% (23/25) de origem humana e 88% (22/25) de origem aviária foram positivas para o gene cdtB, 44% (11/25) de origem humana e 84% (21/25) de origem aviária para o gene cdtA; 20% (5/25) de origem humana e 80% (20/25) de origem aviária para o gene flaA; 48% (12/25) de origem humana e 76% (19/25) de origem aviária para o gene cdtC; 16% (4/25) de origem aviária para o gene wlaN e 12% (3/25) de origem humana e 4% (1/25) de origem aviária foram positivas para o gene iam. Em nenhuma das amostras pesquisadas de origem humana (0/25) foi observado o gene wlaN. Com este trabalho concluiu-se que os genes pesquisados podem estar presentes em cepas de C. jejuni provenientes de carne de frango e nas cepas isoladas de casos de infecção alimentar em humanos. Ainda assim, conforme os resultados apresentados, o gene cdtB teve maior frequência nas amostras provenientes de origem humana e aviária. / The demand for poultry meat has increased globally, as well as the microbiologic requirements of the final product. The frequency of Campylobacter spp. in poultry meat has been related to enteritis in humans. The digestive tract of several animals’ species, as poultries, is the main reservatory of the agent. Campylobacter spp. has a wide genotypic and phenotypic diversity, and, in addition to that, it presents several virulence factors which allow to adhere and colonize the intestinal epithelium of the host. Although good hygienic and biosecurity practices employed at poultry farms help to reduce the carcass contamination, these procedures do not completely eliminate Campylobacter spp. at the slaughterhouses and it may affect the microbiologic quality of the final product, which may cause alimentary toxinfection cases. This study aims to verify the occurrence of six virulence genes of Campylobacter jejuni from poultry carcasses samples and campylobacteriosis cases in humans. 50 samples of C. jejuni were evaluated, of which 25 were originated from poultry collected at the Centro de Diagnóstico e Pesquisa em Patologia Aviária (CDPA - UFRGS), and 25 were originated from human samples of the Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ). Polymerase chain reaction (PCR) technique was employed to detect the following genes: iam, flaA, cdtA, cdtB, cdtC and wlaN. In the samples analyzed, 92% (23/25) from human origin and 88% (22/25) from poultry for cdtB gene; 44% (11/25) from human origin and 84% (21/25) from poultry for cdtA gene; 20% (5/25) from human origin and 80% (20/25) from poultry for flaA gene; 48% (12/25) from human origin and 76% (19/25) from poultry for cdtC gene; 16% (4/25) from poultry for wlaN and gene 12% (3/25) from human origin and 4% (1/25) from poultry were positive for iam gene. This study concludes that the researched genes may be present in Campylobacter from poultry meat origin and from isolates of human cases of alimentary toxinfection. However, according to the results found, the cdtB gene had a higher frequency in samples of human and avian origin.
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Perfil microbiológico de ovos sem inspeção veterinária adquiridos em comércio informal do Rio Grande do Sul, Brasil / Microbiological profile of eggs without veterinary inspection acquired in informal trade in Rio Grande do Sul, Brazil

Didoné, Simone Rosa 24 August 2017 (has links)
The per capita eggs consumption in Brazil is increasing at a rate of 148 eggs per person per year in 2010, while in 2015 it have already been reched 191 eggs per person / year. Not only consumption is increasing, but the consumer demand has also increased for eggs produced in less intensive systems, as in the case of backyard eggs. However, in the quest to consume eggs from backyard production systems, some people end up purchasing products without veterinary inspection in the informal trade or even raising the laying hens in their own home. Among foods responsible for food poisoning, eggs are incriminated as major sources of bacterial agents. The objective of this study was to evaluate the microbiological quality of eggs in the informal commerce of Rio Grande do Sul. Samples of 480 eggs (separated in clear, yolk and peel) were processed according to Instrução Normativa Nº. 62 / 2003 and Portaria nº 01/1990, of the Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. All samples reached the recommended level in the law when evaluated the count of aerobic mesophiles, but did not obtain satisfactory results for the requirements regarding the presence of Staphylococcus spp. and total coliforms. In addition to the bacterial count, several enterobacteria were also diagnosed in raw eggs, with Escherichia coli, Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Cedecea sp. and Edwardsiella ictaluri. The external contamination of the egg had significant positive statistical correlation with the bacterial contamination of the white and yolk. Therefore, it was concluded that the eggs sampled showed unsatisfactory results for almost all the quantitative evaluations, being within the norms required only with respect to aerobic mesophiles. Bacteria potentially causing foodborne diseases were evidenced, with special attention to Escherichia coli as the most present in the samples in most cities evaluated. The genus Salmonella spp. was not found in any sample. The presence in high number of Staphylococcus spp. In the clear and yolk demonstrates the need to expand the investigation of this pathogen in food, as there are strong indications of underdiagnosis in both food poisoning and food for human consumption. / O consumo de ovos per capita no Brasil está em um ritmo crescente, no ano de 2010 o mesmo era de 148 ovos por pessoa/ano, ao passo que em 2015 já foi atingido o patamar de 191 ovos por pessoa/ano. Não só o consumo está crescente como também aumentou a demanda dos consumidores para ovos produzidos em sistemas menos intensivos, como no caso dos ovos caipiras. Porém, na busca por consumir ovos oriundos de sistemas de produção caipira, algumas pessoas acabam por adquirir produtos sem inspeção veterinária no comércio informal ou até mesmo criam galinhas poedeiras na sua própria casa. Entre os alimentos responsáveis por intoxicações alimentares, os ovos são incriminados como principais fontes de agentes bacterianos. Com base nesse panorama atual, este trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica dos ovos no comércio informal do Rio Grande do Sul. As amostras de 480 ovos (separadas em clara, gema e casca) foram processadas de acordo com a Instrução Normativa nº 62/2003 e Portaria nº 01/1990, do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Todas as amostras atingiram ao preconizado na lei quanto avaliada a contagem de mesófilos aeróbicos, porém não se obteve resultados satisfatórios para as exigências relativas a presença de Staphylococcus spp. e coliformes totais. Além da contagem bacteriana, também foram diagnosticadas diversas enterobactérias nos ovos crus, estando mais frequentes Escherichia coli, Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Cedecea sp. e Edwardsiella ictaluri. As sujidades externas do ovo tiveram correlação estatística positiva significativa com a contaminação bacteriana da clara e gema. Por conseguinte, concluiu-se que os ovos amostrados apresentaram resultados insatisfatórios para quase todas as avaliações quantitativas, estando dentro das normas exigidas apenas com relação aos mesófilos aeróbicos. Foram evidenciadas bactérias potencialmente causadoras de doenças transmitidas por alimentos, com especial atenção para Escherichia coli como a mais presente nas amostras na maioria das cidades avaliadas. O gênero Salmonella spp. não foi encontrado em nenhuma amostra. A presença em elevado número de Staphylococcus spp. na clara e gema demonstra a necessidade de expansão da investigação desse patógeno em alimentos, pois há forte indícios de subdiagnóstico desse patógeno tanto em intoxicações alimentares quanto em alimentos para consumo humano.

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