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Síntese de análogos de âncora de GPI: uma contribuição para a descoberta de novos alvos moleculares de Trypanosoma cruzi / Synthesis of GPI anchor analogues to support the discovery of new molecular targets of Trypanosoma cruzi

Morotti, Ana Luisa Malaco 11 December 2018 (has links)
Âncoras de glicosilfosfatidilinositol (GPI) são estruturas essenciais para a ancoragem de glicoconjugados e proteínas na superfície celular de protozoários. Trypanosoma cruzi produz uma gama de estruturas únicas de GPI, as quais ancoram mucinas e trans-sialidases, que participam de processos envolvidos na interação entre parasita e hospedeiro. Afim de estudar a biossíntese de âncora de GPI de T. cruzi e possivelmente utilizá-la como um potencial alvo anti-T.cruzi, este trabalho visa sintetizar análogos de âncoras de GPI e analisar o potencial destas moléculas como substratos da via biossintética de GPIs. Neste contexto, um pseudo-dissacarídeo 31 foi sintetizado através de O-glicosilação entre os doadores derivados de azido-glicopiranosídeo (32 ou 33a-d) e o acceptor de mio-inositol (34), preparados a partir de cloridrato de glucosamina (35) e metil-?-D-glucopiranósido (36), respectivamente, usando proteção/desproteção ortogonais. Cinco diferentes dadores de glicosídicos (32 e 33a-d) foram preparados para investigar a influcia dos seus grupos protetores na estereoselectividade da reações de O-glicosilação na presença de diferentes solventes para estudar o favorecimento da configuração ?, presente em GPIs. Ademais, a síntese do aceptor de mio-inositol 34 foi realizada em 12 etapas pela estratégia do rearranjo Ferrier para formar um derivado de ciclitol, além de diversas proteções/desproteções, funcionalizado que permite a introdução regiosselectiva da unidade de azido glicose (32-33a-d) e uma porção de fosfolípido no seu C-1 e posições C-6, respectivamente. Assim, O-glicosilação entre doador 33c e o acceptor 34, foi realizada utilizando TMSOTf como promotor para originar o composto 31c com boa estereoseletividade para ?, com elevado rendimento (~70%). Após a dealilação de 31c, a porção fosfodiéster contendo uma cadeia C-8 (87), preparada pela abordagem do H-fosfonato, foi anexada ao pseudo-dissacarídeo para gerar, após desprotecção global, o composto alvo 30a. A mesma estratégia sintética foi aplicada ao preparo do composto 91 contendo uma cadeia lateral alquil-naftil (90) que está em últmas etapas de desproteção para gerar o composto final 30c. Atualmente, o composto 30a está sendo testado como substrato da biossíntese de âncoras de GPI em membranas microssomais de Euglena gracilis, uma alga unicelular não patogênica, que pode potencialmente ser utilizada como modelo para parasitas humanos filogeneticamente relacionados. Após a incubação do potencial substrato de GPI 30a com membranas microssomais de E. gracilis para geração de metabólitos, será realizada análise do extrato por LC-MS e, eventualmente, isolamento dos produtos formados para posterior caracterização. Os produtos que apresentarem atividade como substrato ou como inibidores da biossíntese de GPI em E. gracilis serão também ensaiados na membrana microsomal do T. cruzi. / Glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchors are essential molecules to attach glycoconjugates and proteins in protozoan\'s cell surface. Trypanosoma cruzi produces a range of unique GPI structures that anchor mucins and trans-sialidases which participate in important processes involved in the interaction between parasite and host. As an effort to study T. cruzi GPI anchor biosynthesis and possibly use it as a potential target for an antichagasic drug, this work aims to synthesize GPI anchor analogs (labelled or not) and analyze the potential of these molecules as substrates in the GPI biosynthetic pathway. In this context, a pseudo-disaccharide 31 was synthesized by O-glycosylation reaction between azide glycosyl donors (32 or 33a-d) and myo-inositol acceptor (34), prepared from glucosamine (35) hydrochloride and methyl ?-D-glucopyranoside (36), respectively, using orthogonal protection/ deprotection. Five different glycosyl donors (32 and 33a-d) were prepared to investigate the influence of their protective groups on the stereoselectivity of the O-glycosylation reaction in the presence of different solvents to afford the required GPI ?-linkage. In addition, the synthesis of the myo-inositol acceptor 34 was achieved using several protection/deprotection steps, besides the Ferrier rearrangement, to form a functionalized cyclitol derivative that enables the regioselective introduction of the azide glycoside unit and phospholipid moiety on its C-1 and C-6 positions, respectively. Then, O-glycosylation of acceptor 34 with donor 33c was accomplished in diethyl ether, using TMSOTf as promoter to give exclusively ?-anomer 31c in high yield. After deallylation of 31c, the phosphodiester moiety bearing an octyl chain (87), prepared by the H-phosphonate approach, was appended to the pseudo-disaccharide to yield, after deprotection, target compounds 30a. The same synthetic strategy was applied to the preparation of 30c, even though in the protective form, compound 91 bearing an alkyl-naphthyl side chain (90). Currently, compound 30a is being tested as substrates of GPI anchor biosynthesis in Euglena gracilis cell membranes, a non-pathogenic unicellular algae, which may potentially be used as a model for phylogenetically related human parasites. After incubation of the potential GPI substrate 30a with E. gracilis microsomal membranes for generation of metabolites, the analysis by LC-MS and, eventually, isolation of the products will be performed for further characterization. Products that show any substrate or inhibitory activities will be also assayed in T. cruzi microsomal membrane.
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AVICULTURA DE CORTE BRASILEIRA: DESEMPENHO RECENTE E COMPETITIVIDADE INTERNACIONAL / BRAZILIAN BROILER PRODUCTION: CURRENT PERFORMANCE AND INTERNATIONAL COMPETITIVENESS

Bertoglio, Oscar 18 August 2006 (has links)
Many productive sectors, like the Brazilian broiler one, have increased along the last decades. Taking into account meaningful changes related to the organization of agroindustrial systems since the 1960s, besides the increasing industrial investments into the process, Such sectors have improved due to technological development which helped them to succeed in international markets. Until the mid- 1980s, the Brazilian broiler sector had almost its whole production internally consumed. In this sense, investors started to consider broiler production as an alternative business worthy of huge investments. Such activity was spread and developed over many countries, especially in The United States, France, and more recently in China, which prompted the level of competitiveness among worldwide producers. In this way, there is a need of deep evaluation concerning the Brazilian broiler production chances of competitiveness into the international market. Studies have shown that the growth of Brazilian broiler exports is linked to comparative advantages, highly influenced by public politics or artificial international competitive practices. Bearing this in mind, this research aims at evaluating Brazilian broiler production performance, from such analysis it is possible to demonstrate rates showing comparative/competitive advantages into the Brazilian sector. Besides that, this study also considers the kind of incomes such activity has received or if it has been developed according to the theory of comparative advantages In order to meet these objectives, it is necessary, firstly, to evaluate the performance of the main elements into the broiler production process, such as production, consumption, exports, imports, in comparison to worldwide data. Secondly, following the Policy Analysis Matrix methodology, rates will be shown in order to point level of broiler production economic viability, protective/ deprotective levels as its establishment all over the world. The detailed analysis points out i) the Brazilian broiler activity has shown increasing development according to the various rates; ii) In Brazil, such activity has developed above the international average, which reflects into its participation into the international market; iii) Brazil is the third biggest producer of broiler in the world and its main exporter, responsible for 40 % of the whole exports in 2005; iv) the growth of Brazilian participation is linked to comparative advantages; v) the current international and national politics have caused a deprotective consequence into the Brazilian sector which privilege other countries such as the United States. Even though, the Brazilian productive can still be internationally competitive; vi) with the reduction into protective measures in relation to other markets, Brazil can prevail with its broiler production targeted at international market / A partir das relevantes transformações na organização dos sistemas agroindustriais, ocorridas a partir da década de 60, juntamente com a crescente participação do capital industrial nesse processo, muitos setores produtivos, entre eles o setor avícola de corte brasileiro, lograram expressivas taxas de crescimentos ao longo das últimas décadas. Isso só foi possível porque tais setores experimentaram crescentes ganhos tecnológicos reunindo as pré-condições para, também, conquistar mercados externos. Especificamente ao setor avícola de corte brasileiro, tem-se que até meados da década de 80, quase a totalidade da produção era absorvida internamente. Diante disso, os investidores perceberam que a atividade avícola de corte representava uma importante alternativa de remuneração de capitais e com isso, a partir de vultosos investimentos, a atividade se desenvolveu e se consolidou em diversos países do mundo, com destaque para os Estados Unidos e França, e mais recentemente a China, elevando o grau de competição entre os diversos produtores mundiais. Diante disso, surge à necessidade de avaliar, com mais profundidades, quais as reais possibilidades do setor brasileiro competir em âmbito mundial. É recorrente na literatura especializada uma questão: o crescimento da participação das exportações da avicultura brasileira no total exportado pelo resto do mundo se deve às vantagens comparativas reais? ou a atividade se desenvolve na alavanca de políticas públicas que protejam os produtores brasileiros? ou então, de práticas que garantam competitividade internacional de forma artificial? Nesse sentido, o objetivo deste estudo é avaliar o desempenho da atividade avícola de corte no Brasil, e a partir daí construir indicadores que demonstrem ou refutem as vantagens comparativas/competitivas do setor brasileiro. É de interesse desse estudo, também, avaliar em que grau o setor da avicultura de corte brasileira recebeu incentivos ou desincentivos para a prática da atividade, ou se ela se desenvolve seguindo os preceitos da teoria das vantagens xiv comparativas. No desafio de atingir os objetivos propostos, é avaliado, inicialmente, o desempenho dos principais elementos dentro da atividade, como produção, consumo, exportação, importação, sempre confrontando com o desempenho dessa atividade em nível mundial. Numa segunda etapa, utilizando a metodologia denominada Matriz de Análise Política (MAP), são construídos indicadores que avaliam os graus de lucratividade/rentabilidade da atividade, o grau de proteção/desproteção que o setor possui, assim como os reais níveis em que a atividade é protegida/desprotegida em âmbito mundial. As principais constatações feitas, após uma análise detalhada do que foi proposto foram: i) a atividade da avicultura de corte brasileira apresentou crescimentos expressivos nos diversos indicadores avaliados; ii) no Brasil a atividade cresceu bem acima da média mundial, conseguindo aumentar sua participação no cenário internacional; iii) o Brasil figura como terceiro maior produtor mundial e principal exportador, detendo 40% das exportações totais no ano de 2005; iv) o aumento de participação no cenário mundial se deu a partir de vantagens comparativas reais; v) as políticas em vigor, em nível nacional e internacional geram desproteção ao setor brasileiro e conseqüentemente proteção a outros países produtores, especificamente, Estados Unidos, mesmo assim, esse ramo produtivo brasileiro consegue ser competitivo em âmbito internacional; vi) a partir da redução das proteções em outros mercados, o Brasil tem condições de consolidar-se, ainda mais, como grande produtor e exportador de carne de frango, em nível mundial

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