Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-07-07T15:17:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1426708 bytes, checksum: 2063d3c7a5e9d1b781abd3858a26d5f6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-07T15:17:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1426708 bytes, checksum: 2063d3c7a5e9d1b781abd3858a26d5f6 (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O ácido cinâmico (AC) e o cinamato de metila (CM) são compostos de estruturas similares que tem despertado interesse de grupos de pesquisa devido às suas amplas funções terapêuticas. Assim, torna-se importante estudar a interação destes compostos com a albumina do soro bovino (BSA), uma vez que essa proteína é uma importante molécula carreadora no sangue e é também um agente interfacial em produtos alimentícios. Neste trabalho, foi estudada, em nível molecular, a interação entre BSA e AC ou CM (em pH 3.5, 5.0 e 7.4) usando espectroscopia de fluorescência, nanocalorimetria diferencial de varredura e medidas de tensão interfacial, tamanho e potencial zeta. As constantes de interação de AC/CM-BSA foram na ordem de 10 4 L.mol -1 e a estequiometria de formação dos complexos foram de acordo com a proporção 1:1 de proteína/ligante no pH 7.4. Nesta condição, a formação dos complexos CA-BSA foi regida por interações hidrofóbicas (ΔH° = 14.44 kJ.mol -1 ) devido a repulsão eletrostática entre a BSA carregada e AC. Nos pH 3.5 e 5.0 a formação dos complexos teve contribuição entálpica (ΔH° -29.81 kJ.mol -1 at pH 3.5 and -21.12 kJ.mol -1 at pH 5.0). A presença de sulfato de amônio (pH 7.4) não teve influência no termo entrópico, mas levou a uma redução de ΔH° (ΔH° = -17.84 kJ.mol -1 ). Estudos calorimétricos indicaram que o pH desempenha um papel importante na conformação da proteína, já que em condição ácida a proteína estava desnaturada. Quando a BSA foi desnaturada, continuou formando complexo com AC, mas os valores de ΔG° se tornaram menos negativos. Foi verificada que a presença de AC ou CM não afetou os valores de eq em todos os pH estudados. Foi verificado também que a interação da proteína com CM foi mais favorável (ΔG° AC-BSA = -26.53 kJ;mol -1 and ΔG° CM-BSA = -30.32 kJ.mol -1 no pH 7.4 e 25 °C) que com AC e foi dirigida pela entalpia (ΔH° CM = -8.71 kJ.mol -1 no pH 7.4) provavelmente porque CM não é ionizável e é mais hidrofóbico. A presença de sulfato de amônio quase não alterou os valores de ΔH° (-8.71 kJ.mol -1 , -19.32 kJ.mol -1 , -11.32 kJ.mol -1 , -14.06 kJ.mol -1 , -1.95 kJ.mol -1 para 0, 1, 10, 50 e100 mM, respectivamente) e TΔS° (21.64 kJ.mol -1 , 11.29 kJ.mol -1 , 23.06 kJ.mol -1 , 17.95 kJ.mol -1 , 28.4 kJ.mol -1 para 10, 50 e 100 mM, respectivamente). Esses dados contribuem para o conhecimento sobre as interações AC/CM-BSA e, desta forma, para futuras aplicações nas áreas alimentícia e farmacêutica. / Cinnamic acid (AC) and methyl cinnamate (CM) are compounds with similar structures that have attracted interest of researches because of its larger therapeutic functions. Thus, is important to study its interaction with bovine serum albumin (BSA), once this protein is an important molecule career in blood and also is an interfacial agent in food products. For this paper, it was studied at molecular level the interaction between BSA and AC or CM (at pH 3.5, 5.0 and 7.4) using fluorescence spectroscopy, differential scanning nanocalorimetry and interfacial tension analysis, size and zeta potential measurements. AC/CM-BSA binding constants (K b ) were in order of 10 4 L.mol -1 and complexes formation stoichiometry according with 1:1 protein/binding proportion at pH 7.4. At this condition, AC-BSA complex formation was driven by hydrophobic interactions (ΔH° = 14.44 kJ.mol -1 ) due to electrostatic repulsion between charged BSA and AC. At pH 3.5 and 5.0 complexes formation had enthalpic contribution (ΔH° - 29.81 kJ.mol -1 at pH 3.5 and -21.12 kJ.mol -1 at pH 5.0). Ammonium sulfate presence (pH 7.4) had no influence in entropic term but lead to ΔH° decrease (ΔH°= -17.84 kJ.mol -1 ). Calorimetric studies indicated that pH plays an important role in protein conformation, since at acid condition protein was denatured. When BSA was denatured, it also formed complex with AC, but ΔG° values became less negative. It was verified that AC or CM presence did not affect eq values in all studied pH. Also, it was verified that protein interaction with CM was more favorable (ΔG° AC-BSA = -26.53 kJ;mol -1 and ΔG° CM-BSA = - 30.32 kJ.mol -1 at pH 7.4 and 298.15 K) than with AC and it was enthalpically driven (ΔH° CM = -8.71 kJ.mol -1 at pH 7.4) probably because CM is not ionizable and it is more hydrophobic. Ammonium sulfate presence almost did not change ΔH° values (-8.71 kJ.mol -1 , -19.32 kJ.mol -1 , -11.32 kJ.mol -1 , -14.06 kJ.mol -1 , - 1.95 kJ.mol -1 for 0, 1, 10, 50 and 100 mM, respectively) and TΔS° values (21.64 kJ.mol -1 , 11.29 kJ.mol -1 , 23.06 kJ.mol -1 , 17.95 kJ.mol -1 , 28.4 kJ.mol -1 for 10, 50 and 100 mM, respectively). These data contributed to knowledge about AC/CM- BSA interactions and for future applications in food and pharmaceutical areas.

This study aimed to evaluate the oxidative status and electrophoresis of sheep experimentally infected with Haemonchus contortus and supplemented with selenium and copper. We used 28 Corriedale and Texel crossbred lambs were divided into four groups with seven animals each: G1 consisted of animals infected with larvae of G2 were infected with larvae in lambs supplemented with 0.2 mg / kg body weight (LW) of sodium selenite intramuscular (IM), G3 were infected with larvae and supplemented with 3.5 mg / kg BW of copper by subcutaneous (SC); G4 consisted of animals infected with larvae and supplemented with 0.2 mg / kg BW IM sodium selenite and 3.5 mg / kg LW SC copper. All groups were infected orally with 500 L3 larvae of Haemonchus contortus per animal every other day for a period of twenty days from the day zero. The blood samples used for biochemical analysis were collected on days zero (T0), 20 (T1), 40 (T2), 60 (T3) and 80 (T4) by jugular venipuncture using vacutainer tubes®. Weights and determination of eggs per gram of feces of animals occurred in these experimental times. The gradual increase in catalase and TBARS values in all groups showed oxidative stress and inflammation due to parasitic infection. There was an increased activity of GSH-Px in G2 at T0, T1 and T4 as compared to G1 and T4 when compared with G3. Selenium supplementation promoted a greater antioxidant activity in parasitized animals. The use of copper caused an increase in weight gain of experimental animals. The use of sodium selenite associated with copper was more effective in increasing levels of total protein, albumin and gamma globulin in T4, which were also obtained the lowest FEC and worm burden. / O presente trabalho teve como objetivo avaliar o perfil oxidativo e de proteínas séricas de cordeiros experimentalmente infectados com Haemonchus contortus e suplementados com selênio e cobre. Foram utilizados 28 cordeiros mestiços Corriedale e Texel, alocados em quatro grupos experimentais com sete animais cada: G1-animais infectados; G2-infectados e suplementados com 0,2 mg/kg de peso vivo (PV) de selenito de sódio por via intramuscular (IM); G3-infectados e suplementados com 3,5 mg/kg PV de cobre por via sub-cutânea (SC); G4-infectados e suplementados com 0,2 mg/kg PV de selenito de sódio IM e 3,5 mg/kg PV de cobre SC. A infecção foi realizada por via oral, com 500 larvas L3 de Haemonchus contortus por animal a cada dois dias, durante vinte dias a partir do dia zero. As amostras sanguíneas utilizadas para as análises bioquímicas foram coletadas nos dias zero (T0), 20 (T1), 40 (T2), 60 (T3) e 80 (T4) por venopunção da jugular utilizando-se tubos vacutainer®. Nestes mesmos períodos foram realizadas pesagens e a determinação dos ovos por grama de fezes dos animais. O aumento gradativo nos valores de TBARS e catalase em todos os grupos demonstrou estresse oxidativo e processo inflamatório em decorrência da parasitose. Houve um aumento na atividade da GSH-Px nos cordeiros suplementados com selênio no T0, T1 e T4 em relação ao grupo controle e no T4 quando comparado com o G3. A suplementação com o selênio promoveu uma maior ação antioxidante nos animais parasitados. O uso do cobre causou um incremento no ganho de peso dos animais experimentais. A utilização de selenito de sódio associado ao cobre demonstrou maior eficácia em aumentar os níveis de proteínas totais, albumina e gamaglobulina nos ovinos ao final do experimento (T4), quando também foram obtidos os menores valores de OPG e carga parasitária.

Aflatoxins are metabolites from fungi, that may be injurious to animal health, resulting in reduced production and affecting poultry industry by decrease the growth rate and worsening feed conversion. A study was carried out to evaluate the electrophoresis profile of serum protein in broilers fed with diets containing aflatoxins and natural clinoptilolite clay. A total of 528 male broilers Ross were used, distributed in 6 treatments with 4 replications each: T1 control (without aflatoxins or clinoptilolite), T2 5ppm of aflatoxins, T3 0.25% of clinoptilolite, T4 5ppm of aflatoxins and 0.25% of clinoptilolite, T5 0.5% of clinoptilolite and T6 5ppm of aflatoxins and 0.5% of clinoptilolite. The broilers were placed in 24 boxes and submitted to treatments from 1 to 42 days, when they were slaughtered. Were analyzed the total proteins, albumin fractions, alpha 1, alpha 2, beta and gamma. The aflatoxins decreased (P<0.05) total protein, albumin, and globulins (alpha and beta fractions). However, no effect (P<0.05) of aflatoxins was observed about gamma fraction. The clinoptilolite no modify (P<0.05) the serum proteins. Related to control, broilers fed with diets containing aflatoxins and clinoptilolite presented low (P<0.05) levels of total protein, albumin, and globulins (alpha and beta fractions). In conclusion, aflatoxins change the electrophoresis profile and clinoptilolite is not able to protect against this change / Aflatoxinas são metabólitos de fungos, que podem causar danos à saúde do animal, resultando em redução da produção e afetando à indústria avícola, pela diminuição da taxa de crescimento e péssima conversão alimentar. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o perfil eletroforético das proteínas séricas de frangos de corte alimentados com dietas contendo aflatoxinas e/ou argila clinoptilolita natural. Foram utilizados 528 frangos de corte, machos, da linhagem Ross, distribuídos em 6 tratamentos com 4 repetições cada: T1 testemunha (ração sem aflatoxinas ou clinoptilolita), T2 ração com 5ppm de aflatoxinas, T3 ração com 0,25% de clinoptilolita, T4 ração com 5ppm de aflatoxinas e 0,25% de clinoptilolita, T5 ração com 0,5% de clinoptilolita e T6 ração com 5ppm de aflatoxinas e 0,5% de clinoptilolita. Os animais ficaram alojados em 24 boxes, e submetidos aos tratamentos do 1º ao 42º dia, quando foram sacrificados. Foram analisadas as proteínas totais, as frações albumina, alfa 1, alfa 2, beta e gama. Com exceção das médias da fração gama, o teste de Tukey revelou diferenças significativas (P<0,05) nas médias de todas as proteínas totais e frações protéicas nos tratamentos onde as aflatoxinas estavam presentes. A ação das aflatoxinas nas proteínas totais ocorre na síntese de albumina e globulinas (frações alfa e beta). As gamaglobulinas não são afetadas pelas aflatoxinas. Em relação ao controle, as aves alimentadas com dietas com aflatoxinas e clinoptilolita apresentaram baixos (P<0,05) níveis de proteína total, albumina e globulinas (alfa e beta). Conclui-se que as aflatoxinas alteram o perfil eletroforético e a clinoptilolita adicionada na ração, não é capaz de evitar essa alteração

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-10-13T21:33:03Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adriana Pereira Mundim Guedes - 2013.pdf: 2999561 bytes, checksum: 755cb864a8446e6ff5c334be00ea5367 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-16T18:47:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adriana Pereira Mundim Guedes - 2013.pdf: 2999561 bytes, checksum: 755cb864a8446e6ff5c334be00ea5367 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-16T18:47:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adriana Pereira Mundim Guedes - 2013.pdf: 2999561 bytes, checksum: 755cb864a8446e6ff5c334be00ea5367 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-09-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Motivated by the perspective of ruthenium complexes to be used in cancer treatment, our research group has tested the hipotesis that some complexes of Ru (III) are able to interact with serum proteins, particularly albumin and transferrin. The Complex cis- [RuCl2(NH3)4]Cl (CTRu(III)) have been tested against different kind of tumor cells, obtaining good results. Starting from promising results obtained with this compound, subsequent studies are required to understanding the mechanism by which it exerts specificity for tumor cells. In this article, we report the first application of absorption UV-Vis, Fluorescence and Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy, to study the complex CTRu(III) interaction with human serum albumin (hsA) and bovine serum albumin (bsA). Fluorescence measurements revealed strong proteinsbound complex with Ksv of 1.32 x 105 and 3.71 x 105 for hsA and bsA, respectively. EPR spectra from mono-nuclear Ru(III) complexes in buffer, showed a significant decrease in the overall signal intensity following the first aquation step, is consistent with the formation of oxo-bridged Ru(III) dimers. EPR spectra revealed that the BSA very rapid binding to the protein via covalent binding through ligand-exchange with protein side chains, likely with histidine imidazoles. On the other hand, the complex binds non-covalently in hsA, probably as a product of the oligomerization of the complex in hemin-biding pocket. Furthermore, two species are slowly formed by covalent binding of the complex with the histidine residues, producing a species of axial symmetry and the other rhombic symmetry. These bonds seem to arise from the interaction of the complex with the histidine residue located in the binding Sudlow’s site II. / Motivado pela perspectiva de complexos de rutênio podem ser utilizados no tratamento do câncer, o nosso grupo de pesquisa testou a Hipótese que alguns complexos de Ru (III) são capazes de interagir com as proteínas do soro, particularmente albumina e transferrina. O complexo de cis-[RuCl2(NH3)4]Cl (CTRu(III)) foi testado contra diferentes tipos de células tumorais, obtendo bons resultados. A partir de resultados promissores obtidos com este composto, estudos subsequentes são necessários para a compreensão do mecanismo pelo qual ele exerce sua especificidade para células de tumor. Neste artigo, apresentamos a aplicação de espectroscopia de absorção UV-vis, fluorescência e ressonância paramagnética eletrônica (RPE), para estudar a interação do complexo CTRu(III) com albumina sérica humano (hsA) e a albumina sérica bovina (bsA). Medidas de fluorescência revelaram uma forte ligação do complexo com as proteínas com Ksv de 1,32 x 105 e 3,71 x 105 para hsA e bsA, respectivamente. Espectros de RPE de complexos de Ru (III) mono-nucleares em tampão mostraram um decréscimo significativo na intensidade do sinal global após a primeira passo de aquação, que é consistente com a formação de dímeros de oxo complexos de Ru (III). Os espectros de RPE revelaram que a ligação à bsA é muito rápida, a ligação covalente à proteína ocorre através de troca dos ligantes com cadeias laterais de proteínas, provavelmente com o imidazol da histidina. Por outro lado, o complexo se liga não covalentemente na hsA, provalente como produto da oligomerização do complexo no bolso de ligação hemin. Além disso, duas espécies são formadas lentamente por ligação covalente do complexo com os resíduos histidina, produzindo uma espécie de simetria axial e a outra de simetria rômbica. Essas ligações parecem surgir pela interação do complexo com o resíduo histidina localizado no sítio de ligação Sudlow II.