Orientador : Oswaldo E. S. Godinho / Tese (doutorado) - Universidade Estadualde Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-14T04:08:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Masini_JorgeCesar_D.pdf: 8391257 bytes, checksum: 4be916bacf947a467761b487fc345b5b (MD5) Previous issue date: 1990 / Doutorado

Orientador: Antonio Jose de Almeida Meirelles / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-20T16:37:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Coimbra_JaneSeliadosReis_D.pdf: 3606824 bytes, checksum: 558a1c36c54851474a8b41a0cf5cac48 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Sistemas aquosos bifásicos compostos por 14% de polietileno glicol 1550 e 18% de fosfato de potássio, pH 7, foram empregados para a separação de biomoléculas por meio da extração líquido-líquido em uma unidade horizontal do tipo Gt-aesser, operada continuamente e em modo contracorrente. O desempenho do equipamento foi caracterizado a partir da análise de distribuição de tempos de residência, do coeficiente de mistura axial nas fases ricas em polietileno glicol e em sal, dos estudos do "hold up" da fase polimérica e da transferência de massa. As características hidrodinâmicas descritas para os sistemas orgânicos tradicionais foram reproduzidas nos experimentos com sistemas aquosos bifásicos. Na faixa de velocidades de agitação estudada, de 3 rpm a 9 rpm, os dois líquidos se dispersaram mutuamente, não formando fases contínua e dispersa distintas. Os tempos de residência médios foram de 60 min e de 90 min para as fases polimérica e salina, respectivamente. O estudo da transferência de massa foi fundamentado na partição das proteínas soro de queijo, a-Iactoalbumina e ß-lactoglobulina, com uso na formulação de suplemento alimentar para lactentes, gestantes e pacientes que recebem medicamentos por via parenteral. O processamento visou isolar a ß-lactoglobulina, identificada como o principal componente alergênico do leite bovino. As condições operacionais mais favoráveis à separação das proteínas foram velocidade de rotação de 3 rpm e baixas relações de vazão entre as fases. A quantidade de proteínas de soro em pó, tratada diariamente, foi de aproximadamente 600 g. A (lactoalbumina foi concentrada na fase polimérica e a ß-lactoglobulina permaneceu na fase salina, sendo assim satisfatoriamente separadas em fases distintas / Abstract: The isolation and purification of a-Lactalbumin and p-Lactoglobulin from whey were studied using an aqueous two-phase system based on polyethylene glycol and potassium phosphate. Continuous extraction experiments were canied out in a Graesser Raining Bucket Contactor. The perfonnance was characterized by detennining the axial mixing coefficients and counter current mass transfer of ß-Lactalbumin). The influence of rotor speed, phase ratio and phase velocity on the axial mixing coefficient was analyzed applying a dispersion mo del to the residence time distribution experiments. The mean residence time was 60 min for the PEG rich-phase and 90 min for the salt-rich phase. When dissolving dly whey powder in the salt-rich phase of the system a-Lactalbumin was extracted to the polyethyIene glycol-rich phase, whereas ß-Lactoglobulin predominantly remained in the bottom phase, making the process suitable for the removal of the major antigen, ß-Lactoglobulin. The mass transfer in the two-phase system was determined from the steady state data of Lactalbumin extraction. On the basis of a diffusion model, the efficiency of the counter current extraction under different process conditions was calculated from these measurements. More than 600g of dry whey proteins could be processed per day in the small scale Graesser Contactor employed. / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos

Orientador: Admar Costa de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:19:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Domene_SemiramisMartinsAlvares_M.pdf: 4132226 bytes, checksum: c8db434e1d8167dd3de2a698e7397b0a (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estudar o valor nutricional da proteína de ervilha (Pisura sativum, L.), feijão- comum (Phaseolus vulgaris, L), feijão-de-corda (Vigna unguículata, L.Walp.) e grão-de-bico (Cicer arietinum, L.), através do uso do nitrogênio 15(15N) como marcador. Para que fosse incorporado à proteína, procedeu-se o plantio de sementes de cultivares puros dos grãos, em canteiro experimental que recebeu adubação de (NH4¬SO4) enriquecido com 10,0 átomos de 15N Por cento. A utilização de cultivares puros e a homogeneidade de tratos culturais permitiram a eliminação de variáveis como características genéticas e condições ambientais que interferem nos resultados de avaliação química e nutricional dos grãos. As sementes obtidas foram analisadas quanto à composição centesimal e de aminoácidos, cozidas e liofilízadas, e o material obtido foi empregado como fonte protéica na formulação de dietas para ratos albinos Wistar, em ensaio randomizado. O grupo controle recebeu dieta contendo caseina comercial como fonte protéica, e outro grupo recebeu dieta aprotéica. Os animais foram mantidos em condições controladas de temperatura e ciclos de luz, submetidos a jejum de 24 horas seguido de um período de 48 horas para adaptação ás dietas, com alimento e água ad líbitum, em gaiolas de crescimento. Em seguida, foram transferidos para gaiolas metabólicas onde permaneceram por 4 dias, com coleta de fezes a cada 24 horas. Fez-se determinação 15 de nitrogênio total bem como de N nas fezes produzidas durante o período de adaptação e nas fezes e urinas do período de balanço, bem como controle do ganho de peso e ingestão de dieta. As determinações químicas mostraram que, dentre as leguminosas estudadas, o grão-de-bico apresenta teores de proteína bruta 25 % menores do que as demais, e cerca de 300 % mais lípides totais. A composição em aminoácidos demonstrou que a ervilha apresenta o menor teor de sulfurados, resultando no mais baixo valor de escore químico. Os resultados dos ensaio biológicos foram submetidos a Análise de Variância de uma via. Pôde-se estabelecer relação entre ganho de peso e retenção de nitrogênio expressa por regressão linear positiva e moderada, com coeficiente de correlação de 0,7616 (p < 0,01). A expectativa de que o período de 48 horas subseqüente ao jejum fosse suficiente para a adaptação dos animais às dietas foi confirmada pela estabilização dos níveis de excreção de nitrogênio endógeno, que apresentaram acelerada diminuição neste período e em seguida não diferiram durante o período de balanço (p < 0,05), descrevendo uma regressão potencial negativa e forte, com coeficientes sempre superiores a 0,9500 (p < 0,01). A quantificação do nitrogênio endógeno pela aplicação do isótopo demonstrou que os animais alimentados com dietas de leguminosas cozidas excretam cerca de 2 a 2,5 vezes mais material endógeno do que os animais em dieta aprotéica. Conseqüentemente, os indicadores de qualidade protéica obtidos através da correção pelo uso do isótopo resultam em valores sempre superiores aqueles obtidos através da correção pela dieta aprotéica; apesar disto, nem sempre há diferença significativa entre os mesmos, A análise dos indicadores destaca o desempenho do feijão-de-corda, que apresenta os melhores valores de Digestibilidade, Valor Biológico e Utilização Liquida da Proteína. / Abstract: The aim of this work was to study the value of the protein of the pea (Pisum sativum, L.), the common bean (Phaseolus vulgaris, L.), the cow pea (Vigna unguiculata, L. Walp.) and the chick, pea (Cicer arietinum, L) , by the way of the use of nitrogen 15 (15N) as a tracer. In order to be incorporated to the protein, seeds from pure varieties of grainswere planted in experimental patches wich received fertilizing of (NH4)2SO4 enriched with 10,0 atoms of 15N %. The use of pure varieties and the homogeneity of the culture treatment made it possible to eliminate variables such as genetical characteristics and environmental conditions wich interfered in the results of the chemical and nutritional valuation of the grains. The seeds wich were obtained were analised in relation to the proximate composition and of amino acids, cooked and freeze dried and the material obtained was used as a source of protein in the composition of diets for albino Wistar rats in a randomized assay. The control group received a diet containing commercial casein as a source of protein and another group received a diet without protein. The animals were mantained in controlled conditions of temperature and cycles of light, submitted to a 24 hour- fasting and followed by a 48 hour period to get adapted to the diets, with food and ater ad libitum in growth cages. Right after, they were transfered to metabolic cages where they remained for 4 days, with feces collect at each 24 hours. A determination of total nitrogen and N was made in the feces from the both periods and in the urine obtained in the balance period, as well as the control of weight gain and the ingestion of diet. The chemical determinations showed that among the studied leguminous, the chick pea presented content of crude protein 2 5% lower than the others and around 3 00% more total lipids. The composition of amino acids showed that the pea presented the least content of sulphur containing ones, resulting in the lowest value of chemical score. The results of the biological assays were submitted to one way analisys of variance (ANOVA). It was possible to estabilish a relation between the weight gain and the retention of nitrogen expressed by positive and moderate linear regression, with a correlation coefficient of 0,7616 (p < 0,01). The presumption that the period of 4 8 hours following the fasting would be enough for the adaptation of the animals to the diets was confirmed by the stabilization of the levels of excretion of endogenous nitrogen wich presented an acelereted decrease in this period and after did not differ during the balance period (p < 0,05), showing a strong and negative potential regression with coefficients always over 0,9500 fp < 0,01). The quantification of endogenous nitrogen by applying the isotope showed that the animals fed with cooked leguminous diets excreted around 2 to 2,5 times more endogenous material than the animals on diets without protein. Consequently, the indicators of protein quality obtained through the correction by the use of isotope, resulted in values always superior to those obtained by the correction of diet without protein; nevertheless, not always are there significant differences among them. The analisys of indicators point out the performance of the cowpea wich presented the best values of digestibility, biological value and net protein utilization. / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador : Edison Jose Geromel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-16T13:28:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nunes_MariaLucia_M.pdf: 3490470 bytes, checksum: 6b0d7a83532edb7fa9c23a8300864203 (MD5) Previous issue date: 1981 / Resumo: Concentrado protéico de pescado com boas propriedades funcionais foram elaborados a partir de carne de híbrido de tilápia (macho de Sarotherodon hornorum x fêmea de Sarotherodon nitoliticus) através de modificação das proteínas por hidrólise parcial com bromelina e complexação com hexameta fosfato de sódio. Os controles não sofreram modificações. Após a extração dos lipídios com etanol a 50-60ºC, hidrolisado e controle foram submetidos aos seguintes tratamentos: com e sem lavagem com água e neutralização. Todos os produtos elaborados preencheram as especificações químicas e microbiológicas da OMS/FAO/UNICEF para concentrado protéico de pescados tendo sido enquadrado's tipo B quanto ao teor de lipídios. O rendimento dos controles foi de 10,8% com base no peso de carne triturada e desossada e 7,3% com base no peso do peixe inteiro. Para os hidrolisados, estes rendimentos foram de 5,0 e 3,4%, respectivamente. Todos os produtos apresentaram uma coloração areia com exceção do hidrolisado lavado e neutralizado que mostrou uma coloração amarela. Tanto o controle lavado como o hidrolisado lavado e neutralizado apresentaram um aspecto poroso e leve odor a peixe enquanto que os produtos não lavados e não neutralizados apresentaram o aspecto de um pó fino com leve odor a álcool. As propriedades funcionais dos produtos não lavados e não neutralizados se apresentaram superiores ás dos produtos que foram submetidos àqueles tratamentos. A solubilidade de todos os produtos variou em função do pH apresentando um grande aumento em meio alcalino onde a solubilidade em água foi maior que em solução salina. Com as modificações introduzidas nas proteínas, obteve-se melhor solubilidade, dispersibilidade em água, capacidade emulsificante, estabilidade emulsificante e, em maior grau, formação e estabilidade de espuma. Não foram observadas grandes diferenças na capacidade de gelificação entre os hidrolisados e os controles enquanto que a capacidade absorção de água mostrou-se menor nos hidrolisados. A melhoria das propriedades funcionais observadas nos produtos modificados sugere que os hidrolisados assim elaborados possam ser incorporados em sistemas alimentícios tais como em substituição parcial da albumina do ovo elaboração de produtos emulsificados e como base na preparação de bebidas protéicas / Abstract: Fish protein concentrate showing good functional properties were produced from the flesh of tilapia hibrids (Sarotherodon hornorum males x Sarotherodon niloticusfemales) through modification of the proteins by partial hydrolysis with bromelain and complexation with sodium hexameta phosphate. Controls were not submitted to modifications. Following lipid extraction with ethanol at 50 - 60°C, hydrolysates and controls were submitted the following treatments: part of the material was both washed with water and neutralized and part was not. All products met both chemical microbiological specifications of WHO/FAO/UNICEF for fish protein concentrate. The products were classified as type B with regard to lipid content. The following yields were observed with respect the weight of both deboned fish flesh and whole fish: a) controls: 10.8% and 7.3%, respectively, b) hydrolysates: 5.0% and 3.4%, respectively. All products showed a color ressembling sand. The exception was the yellowish color exhibited by the product that had been submitted to washing and neutralization. Both the controls that had been washed and the hydrolysates that had been washed and neutralized assumed the aspect of a porous material and exibited slight fish ofor. The products that had not been neither washed nor neutralized had the aspect of a finer powder with a slight ethanol odor. Functional properties of the products that had neither been washed nor neutralized were superior to those of the products that were submitted to these operations. Solubility of all products changed with pH. In the alkaline range, solubility was greater than in the acidic side the solubility in water being much higher than in 0,6 N Nacl solution. With the modifications introduced in the proteins, the following functional properties were improved solubility, dispersibility, emulsifying capacity, emulsion stability and, to a higher degree, foam formation and stability. Gelling properties of controls and hydrolysates were similar. Water absorption was higher in the controls than in the hydrolysates. The improvement of functional properties observed in the products that had been submitted to the modifications suggests that hydrolysates prepared as in present work could be incorporated in food systems in applications such as partial replacement of egg albumin, in the formulation of emulsian praducts or in the formulation of milky beverages / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Aloisio Jose Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-16T18:06:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mello_JuliaGeracilade_M.pdf: 1913502 bytes, checksum: 0e0c19651a37aaecd4315a0f67aab376 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: O presente trabalho constou do estudo de algumas carateristicas bioquímicas e utricionais das proteinas da farinha desengordurada de amêndoa de babaçu (FDAB). A FDAB estudada apresentou a seguinte composição cente simal - umidade: 9.4; proteina (Nx6.25): 21.6; gordura: 0.3; fibras: 20.2; cinzas: 5.1 e carboidratos: 43.4. Procurou-se investigar a solubilidade dos componentes nitrogenados da FDAB, tendo-se verificado solubilidade mínima em pH entre 3.0 e 4.0 e máxima em pH 11.1. Nas condições empregadas o tempo ideal de extração foi de 30 minutos, obtendo-se máxima extractabilidade após 4 extrações sucessivas. A relação ideal de amostra: solvente foi de 1:25, tendo os solventes água, NaCl e NaOH extraído 25.8, 52.3, e 77.31, respectivamente. Estudou-se também o efeito da celulase de Aspergillus niger no rendimento da extração das proteinas da FDAB, tendo-se verificado um incremento da ordem de 1 a 4 vezes nas quantidades de proteinas extraídas. As frações albumina, globulina e glutelina obtidas através do fracionamento das proteinas da FDAB foram estudadas por eletroforese em gel de poliacrilamida. Foram obtidos 10 componen tes para a fração albumina, 11 para a fração globulina e 1 para a fração glutelina. A composição de amino ácidos das proteinas da FDAB indicou como amino ácidos limitantes a lisina e a treonina, utilizando-se como base para comparação o padrão de referencia da FAO (1973). A avaliação nutricional foi realizada através de deter minação do NPR, que apresentou o valor de 2.4 para a FDAB pura, sendo significativamente inferior ao efeito da caseína ao nível de 11 de probabilidade. Para as dietas suplementadas o efeito me dio da D-L-Treonina foi significativamente superior ao efeito me dio da L-Lisina ao nível de 51 de probabilidade. Utilizou-se também larvas de Chrysomya chlorpyga para a avaliação da qualidade proteica da FDAB, tendo-se verificado efeito positivo da adição dos amino ácidos limitantes a FDAB / Abstract: In the present work some nutritional and biochemical properties of the defatted "babaçu" flour (FDAB) were studied. The proximate composition of the FDAB was as follows: moisture: 9.4; protein (Nx6.25): 21.6; fat: 0.3; fiber: 20.2; ash: 5.1; and carbohydrates 43.4. Investigation of the solubility of the nitrogenous components showed minimum at pH between 3.0 and 4.0 and a maximum at pH 11.1. Under the experimental conditions maximal yield of nitrogenous compounds was obtained with four 30 minute extractions. Distilled water, NaCl solutions and NaOH solutions extracted 25.8 , 52 . 3 and 77.3% of the total nitrogen, respectively, at an ideal sample: solvent ratio of 1:25. The effect of Aspergillus niger cellulase on the extraction yield of nitrogenous compounds was studied. When the extraction was performed in the presence of Aspergillus niger cellulase the yield was improved by a factor of 4. The crude protein extract was fractionated by classical separation methods into albumins, globulins and glutelins. PAGE studies of these fractions revealed the presence of 10 bands for the albumin, 11 for the globulin and 1 for the glutelin fractions. Amino acid determination of FDAB proteins indicated that the amino acids lysine and threonine are the first and the second most limiting, respectively, according to the FAO reference standard of 1973. Biological evaluation with rats showed that the proteins of FDAB without any amino acid supplementation was significantly lower (NPR = 2.4) than the casein (NPR = 3,78) at the 1% probability level. In diets supplemented with either lysine or threonine, NPR values obtained for threonine were higher (probability level 5%) than those for lysine.Biological evaluation with larvae of Chrysomya chlorpyga. confirmed the results obtained by the rat bioassays , showing the improvement of the efficiency of the protein when supplemented with the limiting amino acids / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Frederick Carl Strong III / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Tecnologia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-17T04:19:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maimone_PedroTheis_M.pdf: 1419269 bytes, checksum: b2e54df8f518e13e47cdbe88e60a0788 (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: Algumas publicações recentes descrevem métodos rápidos (por exemplo 4-6 minutos de aquecimento com agitação) de determinação de proteína em trigo e farinha de soja desengordurada, utilizando a reação do biureto, seguidas de colorimetria ou espectrofotometria 0 método depende do aquecimento a 60 ou 70°C durante curto espaço de tempo, com a finalidade de acelerar a dissolução e a formação de complexo. Os resultados dependem, criticamente, do tempo de agitação e da temperatura. Suspeitou-se que, elevando-se a temperatura com a finalidade de abreviar o tempo de reação, atingir-se-ia o ponto em que pudesse ocorrer desnaturação e hidrólise da proteína. Conseqüentemente, procedeu-se a um estudo destes fatores. Os produtos empregados em primeiro lugar foram um concentrado protéico de soja do comércio e trigo integral. Escolheram-se os reagentes de Deacon (sulfato cúprico e NaOH 0,5 M em isopropanol. a 30%) devido ã facilidade de remoção do excesso de cobre por filtração. Observou-se que ã temperatura de 45°C e acima, foi impossível obter absorbância constante em função do tempo. Os melhores resultados foram obtidos a 40°C. A constância foi boa a temperatura ambiente e a 30°C, mas as absorbâncias foram menores que as obtidas a 40°C. Baseados nos resultados obtidos, estabeleceu-se um procedimento geral para grãos de cereais, que emprega os reagentes de Deacon, agitação a 40ºC durante 30 minutos, filtração e medição da absorbância a 550 nm contra um "branco" contendo a amostra, mas não o cobre. 0 método foi testado em várias amostras de arroz integral-e brunido. As amostras foram também analisadas pelo método de microkjeldahl para determinação dos teores de nitrogênio. 0 coeficiente de correlação entre o método espectrofotométrico e o método de Kjeldahl foi 0,999 e o erro padrão da estimativa de linha -de regressão foi de 0,019 unidades de absorbância / Abstract: A number of recent publications have described rapid methods (e.g. 4-6 minutes, exclusive of measurement) for determining-protein in wheat and defatted soy meal using the biuret reaction and colorimetry or spectrophotometry. All depend on heating to 60° or 70° for a short, timed period to hasten dissolution and complex formation. Results are critically de pendent on time of agitation and temperature. It was suspected that, in raising the temperature in order to shorten reaction time, the point had been reached where protein denaturation and hydrolysis may be occurring. Consequently a study of these factors was undertaken. Materials used first were a commercial soy protein concentrate and whole wheat. The reagents of Deacon (copper sulfate -and 0.5 M NaOH in 30% isopropanol) were chosen because of the ease of removal of excess copper by filtration. It was found that at temperatures of 45° and above, it was impossible to obtain absorbance that was constant with time. Best results-were obtained at 40°. At room temperature and 30°, constancy was good, but absorbances remained less than those obtained at 40°. From the experience of these results, a general procedure for cereal grains was devised, consisting of use of Deacon's reagents, agitation for 30 minutes at 40°, filtration, and measurement of absorbance at 550 nm against a blank containing-sample but no copper. It was tested on a series of samples -of brown rice and milled rice. They were also analyzed for total nitrogen by the microkjeldahl method. The coefficient-of correlation between the spectrophotometry method and the Kjeldahl method was 0.999 and standard error of estimate of the regression line was 0.019 in absorbance units / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Valdomiro Carlos Sgarbieri / Tese (Doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-20T00:00:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antunes_PedroLuiz_D.pdf: 6962035 bytes, checksum: 4d22d455cb8cf05f73e34970f0032f62 (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: Neste trabalho foram estudados parâmetros físicos e químicos, fatores antinutricionais, fracionamento das proteínas, enriquecimento com metionina, efeito do tratamento térmico e das condições de estocagem nas características culinárias e nutricionais das proteínas do feijão Rosinha G2 (Phaseolus vulgaris, L), cultivado no Instituto Agronômico de Campinas. A partir do feijão integral, que continha 26% de proteínas, foram preparadas seis frações: isolado protéico total, albuminas, globulinas, sólidos solúveis em água, insolúveis e material dialisável, contendo 82, 70, 90, 50, 15 e 20% de proteínas, respectivamente. A composição em aminoácidos, exceto do material do dialisável, foi semelhante, apresentando teor baixo de metionina (média de 0 84g/16g N} e alto de lisina (média de 7,9g/16gN). O tratamento térmico reduziu a lisina disponível em todas as amostras, apresentando um decréscimo mais acentuado na farinha integral que, após uma. hora a 121°C, passou de 6,0 a 3,5g/16gN. Os fatores antinutricionais- os inibidores de tripsina e de quimotripsina e a hemaglutinina. - foram detectados em todas as frações, com a albumina apresentando a maior atividade, ou seja, 376 e 115 unidades de tripsina e quimotripsina respectiva¬mente, inibidas por miligrama de proteína e hemaglutinação com 0,12µg de proteínas por mililitro. A resistência térmica desse fatores foi pequena - menos de 10 minuto em água fervente para o feijão inteiro. Entretanto, no extrato aquoso, exceto para a hemaglutinina, que deu reação negativa após 5 minutos, houve uma ati¬vação que permaneceu acima de 100% por mais de 2 horas de fervura e, mesmo após uma hora de autoclavagem a l2loC, não houve inativação completa. A digestibilidade in vitro das frações cruas foi baixa, cerca de 45%, porém quando o feijão foi autoclavado a 121°C por 15 minutos, elevou-se a 79% para a fração globulina, 63% para a albumina e 66% para o isolado total. A digestibilidade no feijão integral foi de 61%. Para as frações isoladas e para o feijão integral a digestibi1idade in vivo apresentou-se superior à in vitro. Todas as amostras quando cruas, mesmo com adição de metionina ou extração com etanol a 70%, foram tóxicas, provocando 100% de letalidade nos ratos entre 3 e 23 dias. Entretanto, quando o feijão foi macerado por 12 horas e aquecido em água fervente por 2 1/2, 5, 10, 15 e 30 minutos apresentou valores de PER 0,9, 1,0, 1,2, 1,0 e 0,7, respectivamente. Feijão integral, albuminas, globulinas e isolado total, autoc1avados por 71/2 minutos a 121°C, apresentaram valores de PER 0,60, 0,72, 0,59 e 0,68, respectivamente. Essas mesmas amostras, quando adicionadas de 3% de metionina em base protéica, tiveram seus valores de PER elevados para 2,5, 4,0, 4,3 e 4,4., respectivamente. Feijão estocado nas condições ambientais do laboratório por 18 meses resultou em decréscimo do PER de 1,3 para valor negativo, elevando-se a 2,5 com a adição de metionina. O efeito das condições de estocagem sobre parâmetros físico-químicos, culinários e nutricionais do feijão mostrou que quanto maiores o tempo, a temperatura e a umidade relativa, maiores foram os prejuízos. O feijão foi estocado por 6 meses em três condições: l2°C e 52% de umidade relativa (UR); ambiente (2-25°C) e 65-70% de UR e estufa a 370C e 76% de UR, tendo este último apresentado a depreciação mais acentuada de suas características originais. Nessas condições o PER caiu de 1,0 para 0,1; a disponibilidade biológica da metionina de 46 para 28% e da cisteína de 52 para 30%; o tempo de cocção elevou-se de 60 para 240 minutos e a textura de 238 para-mais de 500kg-força, pelo processo de extrusão no Instron. O estudo da incorporação de metionina no feijão em grãos pelo processo de maceração, mostrou que a melhor foi aquela em que ele permaneceu por uma hora a 50°C em condição solução a 5% de metionina, elevando o conteúdo desta de 1,5 para 24g/l6gN. O feijão tratado nessas condições e misturado com feijão testemunha, na proporção de 1:7, tinha valor para metionina de 3g/l6g N. A análise sensorial dessa mistura não apresentou diferença estatística para preferência de odor e gosto em relação ao testemunha (p=0,05). A avaliação nutricional dessa mistura mostrou que o PER do feijão testemunha elevou-se de 0,9 para 2,4 e 1,3, quando o mesmo foi cozido com e sem água de maceração, respectivamente. A absorção biológica da metionina incorporada ao feijão por maceração foi de 100%, enquanto que a da metionina contida originalmente no mesmo foi de apenas 55,8%. / Abstract: Percent composition, toxicity, effect of heat-treatment on the inactivation of toxic components and on the improvement of nutritional value of the raw bean (Phaseolus vulgaris, L.), variety Rosinha G2 was studied. The above investigation was extended also to different fractions obtained from the integral flour, i.e., total protein isolate, albumin, globulin, total water soluble solids, water insoluble solids and the total dialyzable solids. Influence of the storage conditions and addition of free methionine on the biological value of the bean proteins, as well as on the organoleptic and cooking properties of the bean kernels was also studied. The integral flour contained 26% protein (dry basis) and the above mentioned fractions 82, 70, 90, 50, 15 and 20%, respectively. The a¬mino acid composition was similar in all materials being, characterized by a low content of sulfur-containing amino acids 0.84g/16g N of methionine, and 0.54g/16g N of cyteine and a high content of lysine (7.9g/16g N). Heat-treatment reduced available lysine from 6.0 to 3.5g/16g N. The activity of the antinutritional factors (trypsin, chymotrypsin inhibitors and phytohemagglutinin) was highest in the a1bumin fraction, where 376 units of trypsin and 115 units of chymotrypsin were inhibited per mi1igram of protein. Hemagg1utination occurred with 0.12µg protein per milliliter. Heat resistance of hemagglutinins was low (5-l0min at 97°C). The trypsin and chymotrypsin inhibitors were easily inactivated in the whole bean (10min at 97°C) whereas in aqueous solu¬tion the heat resistance was very high; one hour at l2l°C not being sufficient' for their complete inactivation. The digest¬ibility of the bean protein increased significantly with heat treatment particularly for the isolated protein fractions reaching values as high as 80%. In the integral flour the di¬gestibility remained low (61%) even after heat-treatment. Short heat-treatment (5-l0min, l2l°C) improved the protein nutritive value, whereas treatment beyond 10min in an autoclave was detrimental to the nutritive value, even though these treat¬ments were not sufficient to completely eliminate the activity of the known antinutritional factors. Unheated material killed all the experimental rats in a period ranging from three to twenty three days. Storage of the beans under different condition ad¬versely affected the biological value of the proteins. The e¬ffect was greater as the storage temperature and humidity in¬creased. The conditions used were: l2°C and 52% R.H., 22-25/C and 65-70% R.H. and 37°C at 76% R.H. during six months. At 37°C and 76% R.H., the PER value dropped from 1.0 to 0.1 while the available methionine decreased from 46 to 28% and available cysteyne from 52 to 30%. For the same sample the cooking time increased from 60 to 240min and the texture, extrusion in the Instron, from 238 to over 500kg-force. Percentage of hard shell kernels increased only for the sample stored at environmental conditions of the laboratory (22-25°C and 65-70% H.R.). Incorporation of methionine (3% of the protein) raised PER of the bean to the level of 2.5 even in beans that previously stored for six months. Addition of methionine the were to the isolated protein fractions had still a much greater effect raising the PER values from 0.72, 0.59 and 0.68 to 4.0, 4,3, and 4.4 for the albumin, globulin and total protein isolate , respectively. A set of conditions was established to introduce methionine to the whole bean by infusion. The best approach was to soak the bean in a5% methionine solution (1:2 ratio) at 50°C for 1 hour. By this procedure the methionine content of the bean was increased from 1.5 to 24g methionine per l00g bean protein. The infused beans when mixed with the non-infused ones at a 1:7 ratio gave a product with approximately 3g methionine per 100g bean protein with a PER of 2.4. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-18Bitstream added on 2014-06-13T19:19:08Z : No. of bitstreams: 1 camargo_fb_me_sjrp.pdf: 735046 bytes, checksum: 0006322f87ae9a50e39b65b0a2d314c9 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A tuberculose é uma doença infecciosa que representa um dos principais problemas sociais, econômicos e de saúde pública do mundo. Muitos antígenos potentes demonstraram proteção contra tuberculose nos modelos experimentais e o mais recentemente estudado é a heat shock protein Hsp65 kDa de Mycobacterium leprae. Situações como altas temperaturas, presença de radicais livres e deficiências nutricionais levam ao aumento da produção das Heat Shock Proteins (Hsp´s). A principal função das Hsp´s é manter a estrutura e função das proteínas e, conseqüentemente, preservar as funções celulares essenciais, agindo como chaperonas moleculares. A Hsp65 de Mycobacterium leprae é altamente imunogênica, acarretando em infecções micobacterianas, reações humorais e celulares por parte do hospedeiro. Além disso, foi evidenciada que a Hsp65 de M. leprae apresenta uma possível atividade de oligopeptidase. Dessa forma, esse projeto teve como alvo principal a expressão e purificação da Hsp65 de M. leprae em grau de pureza e quantidade adequada para realizar estudos estruturais. Devido ao uso de condições desnaturantes para a solubilização da proteína, o espectro de Dicroísmo Circular (CD) foi utilizado para analisar a presença de estrutura secundária. Com o objetivo de investigar a estrutura terciária da Hsp65 (Cpn 60-2), a técnica de Espalhamento Dinâmico de Luz (DLS) foi realizada tendo sido observado que a solução apresenta-se monodispersa com um raio hidrodinâmico médio de 10 nm, caracterizando um estado trimérico. A tentativa de cristalização dessa amostra está em andamento e sob intensa observação. Algumas outras condições estão em fase de refinamento na tentativa de se conseguir cristais difratáveis para os estudos estruturais. Além do projeto principal,... / Tuberculosis is an infectious disease that represents one of the most important social, economic and health problems in the world. Many antigens have demonstrated strong protection against tuberculosis in experimental models and the most recent antigen studied for the development of a vaccine againt tuberculosis is the Hsp65 kDa heat shock protein from Mycobacterium leprae.The production of heat shock proteins (Hsp) is greatly enhanced by stress stimuli such as high temperatures, presence of free radicals and nutricional deficiencies. The main function of Hsp's is to preserve the structure and function of proteins and, consequently, the essential cellular functions, acting as molecular chaperones. The M. leprae Hsp65 has been identified as a remarkable immunodominant antigen, since it estimulates humoral immune response and activation of T cells in the host during this bacterial infection. In addition, it was demonstrated that this protein presents a possible enzymatic activity. This project aims at expression, purification and further structural studies of the M. leprae Hsp65. During this project, pure protein was obtained in high amounts. Due to the use of chaotropic agent for resolubilization of the protein present in inclusion bodies far-UV CD studies were accomplished aiming to observe the presence of secondary structures. DLS studies were also carried out to determine the oligomeric state of this Hsp65 (Cpn 60-2), showing that the protein solution was monodisperse with an approximate radius of 10 nm (trimer). Attempts to obtain mono crystals of this sample are currently in progress and under intense observation. Some other refinement conditions are in process in order to obtain crystals suitable for structural studies. The work conducted in parallel with the NUDEL protein (nuclear distribution element-like) was...(Complete abstract click electronic access below)

Orientadores: Elias Basile Tambourgi, Benicio Barros Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:42:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_LucianaAlvesde_D.pdf: 2730922 bytes, checksum: 043b150df202da459362945b5d5b9777 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Nos últimos anos, os sistemas de duas fases aquosas (SDFAs) têm encontrado aplicações nas diferentes áreas da biotecnologia, especialmente no que se refere à utilização de sistemas alternativos e de baixo custo. Dessa forma é que o sistema constituído de polissacarídeo da goma de cajueiro e polietilenoglicol foi utilizado, no presente trabalho, para o cultivo do fungo Penicillium janthinellum e produção de xilanase. Inicialmente, foram avaliados cinco resíduos agroindustriais (bagaço de cana, casca de mandioca, casca de aveia, sabugo e casca de mi1ho) como indutores para a produção desta enzima. Estes resíduos foram hidrolisados e suas frações líquidas foram utilizadas para o cultivo. A cinética de crescimento do P. janthinellum foi acompanhada para todos os resíduos durante 12 dias. O sabugo de milho e a casca de aveia foram os melhores indutores da xilanase. De posse dos me1hores resíduos, procedeu-se um planejamento, no intuito de determinar as variáveis mais importantes, tanto para fermentação convencional como para a extrativa. O planejamento fracionário em dois níveis procurou avaliar a influência das seguintes variáveis: resíduo agroindustrial, tempo de cultivo, pH inicial, agitação, temperatura e composição do sistema de duas fases aquosas. A maior produção de xilanase no meio convencional foi de 142, 85 U/mL para o hidrolisado de aveia. Isto significou um aumento de 2,58 vezes em relação ao obtido anteriormente sem o estudo das variáveis. A xilanase produzida durante a fermentação extrativa no sistema PEG/polissacarideo da goma do cajueiro concentrou-se na fase superior. O maior valor da produção de xilanase na fase superior e seu rendimento foram 160,7 U/mL e 97%, para o hidrolisado de aveia no sistema PEG 8000/ goma. Assim, o crescimento do P.janthinellum e a produção de xilanase no SDFA foram superiores quando comparados ao sistema convencional. A atividade máxima da enzima no SDFA foi obtida no quinto dia, enquanto que para o meio controle esta foi encontrada no sexto dia / Abstract: In recent years, aqueous two-phase systems (ATPS) have found applications in several biotechnology areas, specially when utilizing altemative low-cost biphasic system. Therefore, in the present work, the aqueous two-phase system based on cashew-nut tree gum and polyethylene glycol was used for Penicillium janthinellum cultivation and xylanase production. lnitially five agricultural wastes (sugar cane bagasse, cassava peel, oat husk corn cob and corn husk) were evaluated for xylanolytic enzymes production by P. janthinellum. These residues were hydrolyzed and their liquid fractions used for cultivation; Growth kinetic was accomplished for all residues during twelve days. Corn cob and oat husk were the best inducers of xylanase. A factorial design was performed using corn cob and oat husk, which intended to determine the most important variables for conventional and extractive fermentation. Two level fractional factorial design evaluated the influence of the following variables: agro-industrial residue, cultivation time, pH initial, agitation, temperature and composition of aqueous two-phase system. The highest xylanase production was 142.85 U/mL in conventional medium of oat husk hydrolyzate. This mean an increase of 2.58 folds when compared to that obtained previously. Xylanase produced during extractive fermentation partitioned into the upper phase. The highest xylanase production in upper phase and its yield were 160.7 U/mL and 97%, respectively, using PEG 8000/gum with oat husk. P. janthinellum growth and enzyme production in ATPS was superior to that conventional system. Maximum xylanase activities were obtained on the 5th day for ATPS and on the 6th day for control medium / Doutorado / Sistemas de Processos Quimicos e Informatica / Doutor em Engenharia Química

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / En este trabajo de investigación y, en el marco de un estudio estructural y funcional del citoesqueleto celular, se procedió a purificar las proteínas: tubulina, actina, tau y MAP-2. Las tres primeras proteínas se obtuvieron de cerebros de bovino frescos obtenidos en el matadero de SOFACAR S.A. Por otra parte, la actina fue purificada a partir de músculo de pollo. Una vez purificadas las proteínas y conocida su concentración, fueron caracterizadas por medio de electroforesis en PAGE, teñidos con azul de coomassie para ver su grado de pureza y también fueron inmunocaracterizadas, para su identificación molecular. Cada proteína se concentró y guardó a –80ºC hasta su uso. Posteriormente se realizaron experimentos de cinética de polimerización in vitro de microtúbulos y microfilamentos, en cuatro ensayos distintos, pero comparativos entre sí, utilizando para ello métodos turbidimétricos en los cuales se registraron las lecturas de los cambios de absorbancia bajo condiciones de pH y temperatura conocidas. Los dos primeros tenían como proteína base la tubulina (1,8mg/ml) a la cual se adicionó una de las diferentes MAPs. En un caso se incubó en presencia de tau (0,3mg/ml) y se registraron los cambios en absorbancia. En otro ensayo se adicionó MAP-2 (0,3mg/ml) a la tubulina pura incubada y se registró la cinética de polimerización. Ambas lecturas se realizaron a 340nm. Otros ensayos se realizaron con actina (0,4mg/ml), que fue incubada en primer lugar en presencia de tau y luego con MAP-2, registrándose los cambios de absorbancia a 232nm de longitud de onda constante. Los valores obtenidos en cada lectura fueron graficados en función del tiempo. Las curvas obtenidas fueron comparadas entre sí, para establecer las diferencias y semejanzas entre ellas. Durante los experimentos de cinética de polimerización, se tomaron alícuotas de cada ensayo a distintos tiempos, para luego procesar estas muestras y observarlas al microscopio electrónico, de modo de corroborar la curva de cinética respectiva con las estructuras formadas. Estas se analizaron comparativamente con los controles y entre sí. Por otra parte, se procedió a analizar las microfotografías obtenidas al incubar los microfilamentos con los microtúbulos preformados en presencia de tau o de MAP-2, para observar la presencia de interacciones macromoleculares entre las estructuras. Estos estudios se orientaron a reproducir in vitro un sistema de polimerización y depolimerización de las estructuras del citoesqueleto, de modo de aproximarse y comprender el proceso celular que ocurre normalmente en la célula, además de observar la participación de las MAPs en la formación y regulación de este sistema, y la interacción entre las macromoléculas que se forman, microtúbulos y microfilamentos. De lo expuesto, se verificó la reproducibilidad de la formación en condiciones in vitro de estructuras filamentosas y por medio del estudio comparativo de las MAPs se determinó que la proteína tau fue más eficiente que MAP-2 en promover la polimerización de estructuras del citoesqueleto, así como también se corroboró que ambas MAPs disminuyen fuertemente la concentración crítica necesaria tanto de tubulina como de actina en sus respectivos procesos de polimerización. En cuanto a las reacciones supramoleculares, al analizar las imágenes en microscopía electrónica se verifico la existencia de interacciones entre ambos componentes del citoesqueleto, observándose pequeños filamentos que conectan ambas macromoléculas, correspondientes a las MAPs estudiadas