Inaugural dissertation (Ph. D.)--Königl. Christian-Albrechts-Universität zu Kiel. / Includes bibliographical references.

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Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-10-05T20:39:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Leydianne Leite de Siqueira Patriota Queiroz.pdf: 1890707 bytes, checksum: 03464b332cc53d519ebcbeca1662febe (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-11-14T20:11:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Leydianne Leite de Siqueira Patriota Queiroz.pdf: 1890707 bytes, checksum: 03464b332cc53d519ebcbeca1662febe (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-14T20:11:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Leydianne Leite de Siqueira Patriota Queiroz.pdf: 1890707 bytes, checksum: 03464b332cc53d519ebcbeca1662febe (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / CNPq / Microgramma vacciniifolia (Polypodiaceae, Pteridophyta) é uma planta epífita que possui propriedades medicinais, por exemplo, no tratamento de infecções respiratórias. Lectinas de origem vegetal são capazes de exercer ação imunomoduladora sobre células do sistema imune de mamíferos, através da interação com receptores de superfície celular. Esta dissertação descreve a purificação e caracterização de uma lectina a partir das frondes de M. vacciniifolia (MvFL), assim como a avaliação da sua toxicidade e efeito imunomodulador sobre células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) humano. Extrato proteico foi obtido por homogeneização do pó das frondes secas em NaCl 0,15 M (10%, p/v) por 16 h a 25ºC. MvFL foi isolada a partir do extrato através de cromatografia de gel filtração em coluna de Sephadex G-75 seguida de cromatografia de troca iônica utilizando a matriz DEAE-Sephadex A25. A homogeneidade de MvFL foi avaliada por eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) em condições nativas para proteínas básicas ou ácidas. MvFL foi caracterizada quanto a especificidade de ligação a carboidratos, massa molecular nativa, ponto isoelétrico (pI), composição em subunidades, presença de glicosilação e similaridades na sua estrutura primária com outras proteínas vegetais. A estabilidade da lectina em diferentes valores de pH (3,0–9,0) e após aquecimento a diferentes temperaturas (30–100°C) foi avaliada por ensaio de hemaglutinação e espectrometria de fluorescência. Adicionalmente, MvFL foi avaliada quanto à atividade inibitória de tripsina. Citotoxicidade foi investigada através da avaliação da indução de apoptose/necrose em PBMCs tratados com MvFL (6,25–50μg/mL). A atividade imunomoduladora de MvFL (12,5 μg/mL) sobre PBMCs foi avaliada através da determinação dos níveis de citocinas, quimiocinas e óxido nítrico (NO). Diferenciação e ativação de células T também foram investigadas. MvFL foi isolada com elevada atividade hemaglutinante específica (10.240) e elevado fator de purificação (3.413). Ela foi revelada como uma glicoproteína de pI 4,51 e massa molecular nativa de 54 kDa, sendo composta por 3 subunidades distintas. Espectrometria de massas de peptídeos derivados da hidrólise de MvFL por tripsina revelou similaridades (cobertura de sequência de 32%) com a estrutura primária de uma proteína vegetal ligadora de RNA de Theobroma cacao. A atividade hemaglutinante da lectina foi inibida apenas por glicoproteínas (fetuína e ovoalbumina). O aquecimento de MvFL não afetou a atividade hemaglutinante nem promoveu desenovelamento da lectina. Tanto a atividade hemaglutinante quanto a conformação da lectina variaram dependendo do pH do meio, sendo MvFL menos ativa em pH alcalino. A lectina apresentou atividade inibidora de tripsina (3360,1 U/mg) e não apresentou toxicidade para PBMCs nas concentrações de 6,25 a 25 μg/mL. A lectina promoveu um aumento na produção de TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 e NO, bem como estimulou a diferenciação e ativação de linfócitos T CD8+. MvFL não alterou a produção das quimiocinas testadas. Em conclusão, as frondes de M. vacciniifolia contêm uma proteína termoestável e multifuncional, com atividades lectínicas e inibidora de tripsina, baixa toxicidade para linfócitos, ação imunomoduladora sobre PBMCs, induzindo predominantemente uma resposta Th1, e capaz de promover ativação e diferenciação de linfócitos humanos. / Microgramma vacciniifolia (Polypodiaceae, Pteridophyta) is an epiphytic plant that has medicinal properties, for example, in the treatment of respiratory infections. Lectins of plant origin are able to exert immunomodulatory action on cells from mammalian immune system by interacting with cell surface receptors. This work describes the purification and characterization of a lectin from the M. vacciniifolia fronds (MvFL), as well as the evaluation of its toxicity and immunomodulatory effect on human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). Protein extract was obtained by homogenizing the powder of dried fronds in 0.15 M NaCl (10%, w/v) for 16 h at 25°C. MvFL was isolated from the extract by gel filtration chromatography on Sephadex G-75 column followed by ion exchange chromatography using the DEAE-Sephadex A25 matrix. The homogeneity of MvFL was evaluated by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) under native conditions for basic or acidic proteins. MvFL was characterized in terms of carbohydrate specificity, native molecular mass, isoelectric point (pI), subunit composition, presence of glycosylation and similarities in its primary structure with plant proteins. The stability of the lectin at different pH values (3.0-9.0) and after heating at different temperatures (30-100°C) was evaluated by hemagglutination assay and fluorescence spectrometry. Additionally, MvFL was evaluated for trypsin inhibitory activity. Cytotoxicity was investigated by evaluating the induction of apoptosis/necrosis in PBMCs treated with MvFL (6.25–50 μg/mL). Immunomodulatory activity of MvFL (12.5 μg/mL) on PBMCs was assessed by determining the levels of cytokines, chemokines and nitric oxide (NO). Differentiation and activation of T cells were also investigated. MvFL was isolated with high specific hemagglutinating activity (10,240) and purification factor (3,413). It was revealed as a glycoprotein with pI 4.51 and native molecular weight of 54 kDa, being composed of three distinct subunits. Mass spectrometry of peptides derived from the hydrolysis of MvFL by trypsin revealed similarities (32% sequence coverage) with the primary structure of a RNA-binding protein from Theobroma cacao. The hemagglutinating activity of MvFL was inhibited only by glycoproteins (fetuin and ovalbumin). Heating of MvFL did not affect hemagglutinating activity or promote lectin unfolding. Both the hemagglutinating activity and the conformation of the lectin varied depending on the pH of the medium, with MvFL being less active at alkaline pH. The lectin showed trypsin inhibitory activity (3,360.1 U/mg) and no toxicity to PBMCs at concentrations of 6.25 to 25 μg/mL. The lectin promoted an increase in the production of TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 and NO, as well as stimulated the differentiation and activation of T CD8+ lymphocytes. MvFL did not alter the production of the chemokines tested. In conclusion, the fronds of M. vacciniifolia contain a thermostable and multifunctional protein with lectin and trypsin inhibitor activities, low toxicity to lymphocytes, immunomodulatory action on PBMCs, inducing predominantly a Th1 response, as well as able to promote differentiation and activation of human lymphocytes.

Hypolepis Bernh. é um gênero sub-cosmopolita com ca. 80 táxons, e com pouquíssimos estudos taxonômicos. O presente trabalho trata da revisão taxonômica das espécies ocorrentes na América do Sul, incluindo a Ilha de Cocos (Costa Rica). O mesmo se desenvolveu, principalmente, através do estudo morfológico dos tipos nomenclaturais e de exsicatas oriundas de herbários europeus, sul-americanos e de um neo-zeolandês. Algumas espécies também foram estudadas em campo. Para a América do Sul (incl. Cocos) são aqui reconhecidas 27 espécies, e um total de 31 táxons (espécies, subespécies e variedades). Destas, 11 representam novidades nomenclaturais: H. acantha Schwartsb., H. bogotensis var. glabra H. Karst. ex Schwartsb. & J. Prado, H. flexuosa var. zimmerae Schwartsb. & J. Prado, H. galapagensis Schwartsb. & J. Prado, H. Krameri Schwartsb. et al., H. Paulistana Schwartsb. & J. Prado, H. Pedropaloensis Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. poeppigiana (Mett.) Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. pradoana Schwartsb., H. Stolonifera var. nebularis Schwartsb., e H. Trinationalis Schwartsb. Grande parte dos táxons foram re-circunscritos, especialmente H. Flexuosa Sodiro var. flexuosa, H. Mitis Kunze ex Kuhn, H. Poeppigii (Kunze) R.A. Rodr., H. Repens (L.) C. Presl, H. Rigescens (Kunze ex Mart.) T. Moore, e H. Stolonifera Fée var. stolonifera. Foram reconhecidos oito padrões biogeográficos para os táxons: \"neotropical\", \"circum-caribenho\", \"circum-amazônico\", \"Monte Roraima\", \"andino\", \"ilhas\", \"sul-brasileiro\", e \"austral\". Altitudes mínimas e máximas parecem ser fortes fatores limitantes de distribuição. O tratamento taxonômico apresenta chaves de identificação, sinonímias, tipificações, descrição dos táxons, mapas de distribuição, ilustrações, material examinado, e comentários taxonômicos e/ou nomenclaturais. Em adição, são apresentadas breves discussões morfológicas, ecológicas, biogeográficas, de conceitos específicos e infra-específicos de alguns táxons, e de grupos informais de espécies; além de pranchas com secções anatômicas de quatro espécies. / Hypolepis Bernh. is a sub-cosmopolitan genus with ca. 80 taxa, and with few taxonomic studies. The present work deals with the taxonomic revision of the South American species, including the Cocos Island (Costa Rica). It has been based, mainly, on the morphological study of nomenclatural types and exsiccates from European, South American, and New Zealand herbaria. Some species were also studied in nature. For South America (incl. Cocos Island), 27 species are here recognized, and a total of 31 taxa (species, subspecies, and varieties). Among these, 11 represent nomenclatural novelties: H. acanthi Schwartsb., H. bogotensis var. glabra H. Karst. ex Schwartsb. & J. Prado, H. flexuosa var. zimmerae Schwartsb. & J. Prado, H. galapagensis Schwartsb. & J. Prado, H. Krameri Schwartsb. et al., H. Paulistana Schwartsb. & J. Prado, H. Pedropaloensis Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. poeppigiana (Mett.) Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. pradoana Schwartsb., H. Stolonifera var. nebularis Schwartsb., and H. Trinationalis Schwartsb. Most taxa were re-circunscribed, especially H. Flexuosa Sodiro var. flexuosa, H. Mitis Kunze ex Kuhn, H. Poeppigii (Kunze) R.A. Rodr., H. Repens (L.) C. Presl, H. Rigescens (Kunze ex Mart.) T. Moore, and H. Stolonifera Fée var. stolonifera. Eight bio-geographical patterns were recognized: \"Neotropical\", \"circum-Caribbean\", \"circum-Amazonian\", \"Mount Roraima\", \"Andean\", \"islanders\", \"southern Brazilian\", and \"Austral\". Minimum and maximum elevations seem to be strong limiting factors of distribution. The taxonomic treatment presents keys to taxa, synonymies, typifications, taxa description, distribution maps, illustrations, studied material, and taxonomic and/or nomenclatural comments. In addition, it is presented short discussions about morphology, ecology, bio-geography, specific/infra-specific concepts of some taxa, and informal groups of species; also, plates with anatomical sections of four species.

Hypolepis Bernh. é um gênero sub-cosmopolita com ca. 80 táxons, e com pouquíssimos estudos taxonômicos. O presente trabalho trata da revisão taxonômica das espécies ocorrentes na América do Sul, incluindo a Ilha de Cocos (Costa Rica). O mesmo se desenvolveu, principalmente, através do estudo morfológico dos tipos nomenclaturais e de exsicatas oriundas de herbários europeus, sul-americanos e de um neo-zeolandês. Algumas espécies também foram estudadas em campo. Para a América do Sul (incl. Cocos) são aqui reconhecidas 27 espécies, e um total de 31 táxons (espécies, subespécies e variedades). Destas, 11 representam novidades nomenclaturais: H. acantha Schwartsb., H. bogotensis var. glabra H. Karst. ex Schwartsb. & J. Prado, H. flexuosa var. zimmerae Schwartsb. & J. Prado, H. galapagensis Schwartsb. & J. Prado, H. Krameri Schwartsb. et al., H. Paulistana Schwartsb. & J. Prado, H. Pedropaloensis Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. poeppigiana (Mett.) Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. pradoana Schwartsb., H. Stolonifera var. nebularis Schwartsb., e H. Trinationalis Schwartsb. Grande parte dos táxons foram re-circunscritos, especialmente H. Flexuosa Sodiro var. flexuosa, H. Mitis Kunze ex Kuhn, H. Poeppigii (Kunze) R.A. Rodr., H. Repens (L.) C. Presl, H. Rigescens (Kunze ex Mart.) T. Moore, e H. Stolonifera Fée var. stolonifera. Foram reconhecidos oito padrões biogeográficos para os táxons: \"neotropical\", \"circum-caribenho\", \"circum-amazônico\", \"Monte Roraima\", \"andino\", \"ilhas\", \"sul-brasileiro\", e \"austral\". Altitudes mínimas e máximas parecem ser fortes fatores limitantes de distribuição. O tratamento taxonômico apresenta chaves de identificação, sinonímias, tipificações, descrição dos táxons, mapas de distribuição, ilustrações, material examinado, e comentários taxonômicos e/ou nomenclaturais. Em adição, são apresentadas breves discussões morfológicas, ecológicas, biogeográficas, de conceitos específicos e infra-específicos de alguns táxons, e de grupos informais de espécies; além de pranchas com secções anatômicas de quatro espécies. / Hypolepis Bernh. is a sub-cosmopolitan genus with ca. 80 taxa, and with few taxonomic studies. The present work deals with the taxonomic revision of the South American species, including the Cocos Island (Costa Rica). It has been based, mainly, on the morphological study of nomenclatural types and exsiccates from European, South American, and New Zealand herbaria. Some species were also studied in nature. For South America (incl. Cocos Island), 27 species are here recognized, and a total of 31 taxa (species, subspecies, and varieties). Among these, 11 represent nomenclatural novelties: H. acanthi Schwartsb., H. bogotensis var. glabra H. Karst. ex Schwartsb. & J. Prado, H. flexuosa var. zimmerae Schwartsb. & J. Prado, H. galapagensis Schwartsb. & J. Prado, H. Krameri Schwartsb. et al., H. Paulistana Schwartsb. & J. Prado, H. Pedropaloensis Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. poeppigiana (Mett.) Schwartsb. & J. Prado, H. Rugosula subsp. pradoana Schwartsb., H. Stolonifera var. nebularis Schwartsb., and H. Trinationalis Schwartsb. Most taxa were re-circunscribed, especially H. Flexuosa Sodiro var. flexuosa, H. Mitis Kunze ex Kuhn, H. Poeppigii (Kunze) R.A. Rodr., H. Repens (L.) C. Presl, H. Rigescens (Kunze ex Mart.) T. Moore, and H. Stolonifera Fée var. stolonifera. Eight bio-geographical patterns were recognized: \"Neotropical\", \"circum-Caribbean\", \"circum-Amazonian\", \"Mount Roraima\", \"Andean\", \"islanders\", \"southern Brazilian\", and \"Austral\". Minimum and maximum elevations seem to be strong limiting factors of distribution. The taxonomic treatment presents keys to taxa, synonymies, typifications, taxa description, distribution maps, illustrations, studied material, and taxonomic and/or nomenclatural comments. In addition, it is presented short discussions about morphology, ecology, bio-geography, specific/infra-specific concepts of some taxa, and informal groups of species; also, plates with anatomical sections of four species.

The mainly tropical genus Lygodium differs from other ferns in that the fronds are indeterminate and are vine-like. A single species, L. palmatum is native in temperate North America. The temperate Asian L. japonicum is naturalized throughout much of the southeastern United States. About twenty years ago, L. microphyllum was introduced into South Florida and is now naturalized in several counties. The present study documents differences among spores and their generation, development of sporophytes from the fertilized egg, and in flavonoid chemistry. Hybridization experiments showed a strong possibility for cross fertility between species. Experiments with prothallial development and differentiation revealed that environment influenced variation and gametangium formation. Greater similarity in sporophyte developmental stages and in frond phytochemistry show that the native L. palmatum is phenetically closer to the tropical L. microphyllum than to L. japonicum. All three species are clearly distinct at all levels examined.

Thesis (Ph.D.)--Ohio University, November, 2007. / Title from PDF t.p. Includes bibliographical references. Also available online via OhioLINK's ETD Center: http://www.ohiolink.edu/etd/view.cgi?ohiou1188579264

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-16Bitstream added on 2014-06-13T21:04:03Z : No. of bitstreams: 1 capretz_rl_dr_rcla.pdf: 3353928 bytes, checksum: 7e9219802799c05db6d9550923870f72 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / No presente estudo é descrita uma floresta do Eopermiano do Norte do Gondwana, dominada por pteridófitas arborescentes, gimnospermas, licófitas e esfenófitas. Esta rica assembléia fossilífera localiza-se no Monumento Natural das Árvores Fossilizadas do Tocantins (MNAFTO), na Bacia do Parnaíba, Norte do Brasil. Dois aspectos se destacam: a abundância dos fitofósseis e seu excepcional nível de preservação. Os vegetais fósseis guardam semelhanças com aqueles do mesmo período em Chemnitz (Alemanha), na Província Euroamericana, e com a Flora Gondvânica, na Bacia do Paraná (Brasil), entre outros. A análise dos padrões de orientação de 178 caules, junto com observações geológicas, sugere paleocorrentes no sentido Oeste-Leste predominantemente, originadas durante tempestades de monções, com área-fonte muito distante a Oeste, talvez em um contexto de leque aluvial distal. A vegetação das margens dos principais canais fluviais e suas planícies de inundação era dominada por pteridófitas arborescentes no estrato superior da floresta (dossel), com licófitas, esfenófitas e outras pteridófitas menores ocupando o estrato inferior (sub-bosque). Gimnospermas ocupavam regiões mais distantes das margens dos canais. A comparação entre pteridófitas arborescentes permianas (do MNAFTO) com pteridófitas arborescentes atuais (em remanescentes de Floresta Ombrófila Densa Submontana) permitiu discutir nichos ecológicos ocupados por estas plantas, a estrutura da floresta em ambos os casos, e a inferência da altura verdadeira dos fitofósseis, em uma aplicação inédita de técnicas alométricas a estudos paleontológicos / This present study describes a Lower Permian forest in Northern Gondwana, composed by tree ferns, gymnosperms, lycophytes and sphenopsids. This fossil assemblage is located at Tocantins Fossil Trees Natural Monument (MNAFTO) at Parnaíba Basin, Northern Brazil. There are two remarkable aspects: the abundance of fossils and their exceptional level or preservation. The vegetation is similar to the plant fossils found at Chemnitz (Germany), to Euroamerican Flora sites, and to Gondwanian Flora at Paraná Basin (Brazil), among others. Orientation pattern analyses of 178 stems with geological observations suggest paleocurrents in West-East direction, in monsoon storms. The source area should be at West, several quilometers away, probably in a distal alluvial fan context. The forest in the margins of main fluvial channels was occupied by tree ferns at canopy, and lycophytes, sphenopsids and other small ferns at understory. Gymnosperms probably lived in more distant areas from the fluvial channels. The comparison between fossil tree ferns (from MNAFTO) and modern tree ferns (in Submontane Tropical Rain Forest remnants at the present) allowed discussions about ecological niche, forest structure and estimations of real height of fossil tree ferns, in a new way to apply allometric techniques to paleontological studies