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Avaliação da remodelação óssea em alvéolos dentários, após a aplicação do laser de baixa potência / Bone Remodeling Valuation in tooth alveolus, after Low Power Laser

Ribeiro, Larissa Nogueira Soares 27 November 2013 (has links)
Introdução: A terapia com laser de baixa potência (LBP) vem sendo utilizada em Odontologia com diversos objetivos, em especial o de diminuir o tempo de cicatrização de feridas cirúrgicas. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar qualitativamente e quantitativamente o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos jovens. Material e Método: Foram utilizados 60 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=30) animais com extração dentária sem aplicação do LBP, e Grupo Experimental (n=30) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP (Ext+LBP) nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia). Os animais foram sacrificados nos períodos de 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias após o procedimento de extração dentária. Neste estudo foram analisados os efeitos da aplicação do laser sobre o reparo alveolar através de microscopia de luz, luz polarizada e imunomarcação. Para isso foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo; 2) grau de processo inflamatório; 3) grau de amadurecimento do colágeno; 4) imunomarcação para TRAP e RUNX-2. Todos os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e teste de Mann-Whitney U (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Experimental apresentaram processo de reparo mais evoluído quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela organização mais rápida do coágulo sanguíneo, proliferação de fibroblastos nos restos do ligamento periodontal mais pronunciada, organização do colágeno e formação óssea mais precoce e mais intensa. Conclusão: A utilização do laser de baixa potência acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação. / Introduction: Low Power Laser (LPL) therapy has been used in Dentistry to achieve many objectives, particularly to decrease the healing period on wound healing. Objectives: The purpose of this in vivo study was to evaluate qualitatively and quantitatively the irradiation effect with LPL in the bone remodeling process after tooth extraction in young rats. Material and Method: 60 Wistar rats were used, randomly distributed in the following groups: Control Group (n=30) animals with tooth extraction without LPL application, and Experimental Group (n=30) animals with tooth extraction (Ext) and LPL application (Ext+LPL) on the three fist days (54 J/cm2 per day). The animals were euthanized after the end periods of 1, 2, 3, 5, 7 and 10 days after the tooth extraction. This study looked into the effects of laser application on the alveolar repair through light microscopy, polarized light and immunostaining. After that, the following parameters were evaluated: 1) percentage of bone formation inside the dental alveolus; 2) degree of inflammatory process; 3) degree of collagen maturation; 4) immunostaining for TRAP and RUNX-2. All the results obtained were submitted to statistical analysis over the ANOVA and Mann- Whitney (p<0.05) test. Results: It was observed that the alveolus from the Experimental Group presented an improved repair process when compared to the Control Group, characterized by faster blood clot organization, more apparent fibroblasts proliferation on the remnants of the periodontal ligament, earlier and more intense collagen organization and bone generation. Conclusion: The use of Low Power Laser accelerated the bone generation process during the experimental initial period, although there was no difference in the ossification process in the final periods.
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Avaliação da remodelação óssea em alvéolos dentários, após a aplicação do laser de baixa potência / Bone Remodeling Valuation in tooth alveolus, after Low Power Laser

Larissa Nogueira Soares Ribeiro 27 November 2013 (has links)
Introdução: A terapia com laser de baixa potência (LBP) vem sendo utilizada em Odontologia com diversos objetivos, em especial o de diminuir o tempo de cicatrização de feridas cirúrgicas. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar qualitativamente e quantitativamente o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos jovens. Material e Método: Foram utilizados 60 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=30) animais com extração dentária sem aplicação do LBP, e Grupo Experimental (n=30) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP (Ext+LBP) nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia). Os animais foram sacrificados nos períodos de 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias após o procedimento de extração dentária. Neste estudo foram analisados os efeitos da aplicação do laser sobre o reparo alveolar através de microscopia de luz, luz polarizada e imunomarcação. Para isso foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo; 2) grau de processo inflamatório; 3) grau de amadurecimento do colágeno; 4) imunomarcação para TRAP e RUNX-2. Todos os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e teste de Mann-Whitney U (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Experimental apresentaram processo de reparo mais evoluído quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela organização mais rápida do coágulo sanguíneo, proliferação de fibroblastos nos restos do ligamento periodontal mais pronunciada, organização do colágeno e formação óssea mais precoce e mais intensa. Conclusão: A utilização do laser de baixa potência acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação. / Introduction: Low Power Laser (LPL) therapy has been used in Dentistry to achieve many objectives, particularly to decrease the healing period on wound healing. Objectives: The purpose of this in vivo study was to evaluate qualitatively and quantitatively the irradiation effect with LPL in the bone remodeling process after tooth extraction in young rats. Material and Method: 60 Wistar rats were used, randomly distributed in the following groups: Control Group (n=30) animals with tooth extraction without LPL application, and Experimental Group (n=30) animals with tooth extraction (Ext) and LPL application (Ext+LPL) on the three fist days (54 J/cm2 per day). The animals were euthanized after the end periods of 1, 2, 3, 5, 7 and 10 days after the tooth extraction. This study looked into the effects of laser application on the alveolar repair through light microscopy, polarized light and immunostaining. After that, the following parameters were evaluated: 1) percentage of bone formation inside the dental alveolus; 2) degree of inflammatory process; 3) degree of collagen maturation; 4) immunostaining for TRAP and RUNX-2. All the results obtained were submitted to statistical analysis over the ANOVA and Mann- Whitney (p<0.05) test. Results: It was observed that the alveolus from the Experimental Group presented an improved repair process when compared to the Control Group, characterized by faster blood clot organization, more apparent fibroblasts proliferation on the remnants of the periodontal ligament, earlier and more intense collagen organization and bone generation. Conclusion: The use of Low Power Laser accelerated the bone generation process during the experimental initial period, although there was no difference in the ossification process in the final periods.
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Estudos dos efeitos de um anti-inflamatório não esteroidal seletivo para COX-2 na osteogênese e na expressão das proteínas COX-2 e RUNX-2 durante o reparo ósseo alveolar em ratos

Viscelli, Bruno Alvares 03 July 2012 (has links)
Objetivo: No atual trabalho propomo-nos a avaliar morfometricamente possíveis alterações na reparação óssea alveolar pós-exodontia de ratos tratados com Meloxicam, um anti-inflamatório inibidor preferencial da cicloxigenase 2 (COX-2) e correlacionar com a expressão temporal da COX-2 e do fator de transcrição 2 com domínio Runt (Runx-2) associada com a diferenciação de células da linhagem osteoblástica. Material e Métodos: A exodontia do incisivo superior direito foi realizada em 120 ratos Wistar, divididos em grupo controle (n = 60) - animais tratados com injeção intraperitoneal de 0,1 ml de solução salina 0,9% diariamente e grupo tratado (n = 60) animais tratados com injeção de Meloxicam na dose de 3mg/kg de massa corporal, diariamente, ambos durante 7 dias. O volume total do alvéolo (VtA) e do tecido ósseo (VtO), o número de células imunomarcadas/mm² (Nm) para COX-2 e Runx-2 e a expressão protéica por Western blotting (WB) da COX-2 e RUNX-2 foram avaliados nos períodos 3, 7, 10, 14, 21 e 30 dias póscirurgias. Resultados: No grupo tratado o VtA manteve-se constante até os 21 dias, enquanto que no controle foi 0,272 vezes menor em relação aos 3 dias decorrente da maior atividade osteoclástica. Porém, aos 14 dias, no grupo tratado o VtO foi 0,337 vezes menor em relação ao controle decorrente da inibição parcial da transmigração de células inflamatórias responsáveis pela degradação do coágulo e da angiogênese, ocasionando um retardo na formação dos tecidos de granulação/conjuntivo, na diferenciação das células osteoblásticas e na formação/remodelação do tecido ósseo, e consequentemente no reparo ósseo alveolar. A imunomarcação para COX-2 foi observada em diversos tipos celulares, como fibroblastos, células endoteliais, células inflamatórias, osteoblastos e osteócitos. O Nm para COX-2 não apresentou diferenças estatísticas significantes entre os grupos no intervalo de 3 e 21 dias pós-cirurgia, enquanto que, a expressão protéica pelo WB foi em média 0,232 vezes menor no grupo tratado em relação ao controle. Por outro lado, a imunomarcação para Runx-2 foi mais expressiva em osteoblastos e osteócitos e raramente em fibroblastos. O Nm para Runx-2 no grupo tratado durante todo período experimental foi em média 0,256 vezes menor em relação ao controle, sendo o mesmo observado para a expressão protéica pelo WB. Conclusão: Dentro dos limites da atual pesquisa, a aplicação do Meloxicam por um curto período de tempo atrasa temporariamente o processo inicial de reparo ósseo alveolar diminuindo a expressão das proteínas COX-2 e RUNX-2. / Objective: To evaluate morphometrically possible changes in post-extraction alveolar bone healing in rats treated with Meloxicam, a selective anti-inflammatory inhibitor of cyclooxygenase (COX-2) and to correlate it with the temporal expression of COX-2 and transcription factor 2 with Runt domain (Runx-2) associated with differentiation of osteoblastic lineage cells. Material and Methods: The extraction of the right upper incisor was made in 120 male Wistar rats, divided into control group (n=60) - animals treated with an intraperitoneal injection of 0,1 ml of 0,9% NaCl solution daily for 7 days and the treated group (n=60) - animals treated with injection of 3mg/kg of body weight of Meloxicam 0.9% NaCl solution daily for 7 days. The total alveolar volume (VtA), total bone tissue volume (VtO), number of immunohistochemically positive cells/mm² (Nm) for COX-2 and RUNX-2 and the Western blotting (WB) COX-2 and RUNX-2 protein expressions were evaluated after 3, 7, 10, 14, 21 and 30 days after the surgeries. Results: In the treated group the VtA remained constant until the 21st day, while in the control group at the same day the value was 0,272 times lower compared to the 3 days period, due to the higher osteoclastic activity. However, at 14 days the VtO was 0,337 times lower in the treated group compared to the control due to the partial inhibition of the transmigration of inflammatory cells responsible for the degradation of the clot and angiogenesis, causing a delay in the formation of granulation/connective tissues, differentiation of osteoblastic cells and in bone tissue formation/remodeling, and consequently in the alveolar bone repair. The immunostaining for COX-2 was observed in various cell types, such as fibroblasts, endothelial cells, inflammatory cells, osteoblasts and osteocytes. The Nm for COX-2 showed no statistical differences between groups from the 3rd to the 21st day, while the WB protein expression was on average 0,232 times lower in the treated group compared to the control. On the other hand, the immunostaining for Runx-2 was more expressive in osteoblasts and osteocytes and rarely in fibroblasts. The Nm for Runx-2 on the treated group was, during the whole experimental period, on average 0,256 times smaller than in the control. The same difference was observed in the protein expression by WB. Conclusion: Within the limits of the present study, its was concluded that the application of Meloxicam daily for 7 days causes a temporary delay in the alveolar bone repair decreasing the expression of proteins COX-2 and RUNX-2.
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Estudos dos efeitos de um anti-inflamatório não esteroidal seletivo para COX-2 na osteogênese e na expressão das proteínas COX-2 e RUNX-2 durante o reparo ósseo alveolar em ratos

Bruno Alvares Viscelli 03 July 2012 (has links)
Objetivo: No atual trabalho propomo-nos a avaliar morfometricamente possíveis alterações na reparação óssea alveolar pós-exodontia de ratos tratados com Meloxicam, um anti-inflamatório inibidor preferencial da cicloxigenase 2 (COX-2) e correlacionar com a expressão temporal da COX-2 e do fator de transcrição 2 com domínio Runt (Runx-2) associada com a diferenciação de células da linhagem osteoblástica. Material e Métodos: A exodontia do incisivo superior direito foi realizada em 120 ratos Wistar, divididos em grupo controle (n = 60) - animais tratados com injeção intraperitoneal de 0,1 ml de solução salina 0,9% diariamente e grupo tratado (n = 60) animais tratados com injeção de Meloxicam na dose de 3mg/kg de massa corporal, diariamente, ambos durante 7 dias. O volume total do alvéolo (VtA) e do tecido ósseo (VtO), o número de células imunomarcadas/mm² (Nm) para COX-2 e Runx-2 e a expressão protéica por Western blotting (WB) da COX-2 e RUNX-2 foram avaliados nos períodos 3, 7, 10, 14, 21 e 30 dias póscirurgias. Resultados: No grupo tratado o VtA manteve-se constante até os 21 dias, enquanto que no controle foi 0,272 vezes menor em relação aos 3 dias decorrente da maior atividade osteoclástica. Porém, aos 14 dias, no grupo tratado o VtO foi 0,337 vezes menor em relação ao controle decorrente da inibição parcial da transmigração de células inflamatórias responsáveis pela degradação do coágulo e da angiogênese, ocasionando um retardo na formação dos tecidos de granulação/conjuntivo, na diferenciação das células osteoblásticas e na formação/remodelação do tecido ósseo, e consequentemente no reparo ósseo alveolar. A imunomarcação para COX-2 foi observada em diversos tipos celulares, como fibroblastos, células endoteliais, células inflamatórias, osteoblastos e osteócitos. O Nm para COX-2 não apresentou diferenças estatísticas significantes entre os grupos no intervalo de 3 e 21 dias pós-cirurgia, enquanto que, a expressão protéica pelo WB foi em média 0,232 vezes menor no grupo tratado em relação ao controle. Por outro lado, a imunomarcação para Runx-2 foi mais expressiva em osteoblastos e osteócitos e raramente em fibroblastos. O Nm para Runx-2 no grupo tratado durante todo período experimental foi em média 0,256 vezes menor em relação ao controle, sendo o mesmo observado para a expressão protéica pelo WB. Conclusão: Dentro dos limites da atual pesquisa, a aplicação do Meloxicam por um curto período de tempo atrasa temporariamente o processo inicial de reparo ósseo alveolar diminuindo a expressão das proteínas COX-2 e RUNX-2. / Objective: To evaluate morphometrically possible changes in post-extraction alveolar bone healing in rats treated with Meloxicam, a selective anti-inflammatory inhibitor of cyclooxygenase (COX-2) and to correlate it with the temporal expression of COX-2 and transcription factor 2 with Runt domain (Runx-2) associated with differentiation of osteoblastic lineage cells. Material and Methods: The extraction of the right upper incisor was made in 120 male Wistar rats, divided into control group (n=60) - animals treated with an intraperitoneal injection of 0,1 ml of 0,9% NaCl solution daily for 7 days and the treated group (n=60) - animals treated with injection of 3mg/kg of body weight of Meloxicam 0.9% NaCl solution daily for 7 days. The total alveolar volume (VtA), total bone tissue volume (VtO), number of immunohistochemically positive cells/mm² (Nm) for COX-2 and RUNX-2 and the Western blotting (WB) COX-2 and RUNX-2 protein expressions were evaluated after 3, 7, 10, 14, 21 and 30 days after the surgeries. Results: In the treated group the VtA remained constant until the 21st day, while in the control group at the same day the value was 0,272 times lower compared to the 3 days period, due to the higher osteoclastic activity. However, at 14 days the VtO was 0,337 times lower in the treated group compared to the control due to the partial inhibition of the transmigration of inflammatory cells responsible for the degradation of the clot and angiogenesis, causing a delay in the formation of granulation/connective tissues, differentiation of osteoblastic cells and in bone tissue formation/remodeling, and consequently in the alveolar bone repair. The immunostaining for COX-2 was observed in various cell types, such as fibroblasts, endothelial cells, inflammatory cells, osteoblasts and osteocytes. The Nm for COX-2 showed no statistical differences between groups from the 3rd to the 21st day, while the WB protein expression was on average 0,232 times lower in the treated group compared to the control. On the other hand, the immunostaining for Runx-2 was more expressive in osteoblasts and osteocytes and rarely in fibroblasts. The Nm for Runx-2 on the treated group was, during the whole experimental period, on average 0,256 times smaller than in the control. The same difference was observed in the protein expression by WB. Conclusion: Within the limits of the present study, its was concluded that the application of Meloxicam daily for 7 days causes a temporary delay in the alveolar bone repair decreasing the expression of proteins COX-2 and RUNX-2.
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EFFETS DES GLUCOCORTICOIDES SUR LA MISE EN PLACE DES CENTRES D'OSSIFICATION CHEZ L'EMBRYON DE RAT. <br>Implication de certains gènes du développement

Nadra, Rim 31 March 2004 (has links) (PDF)
Chez le fœtus de rat, en fin de gestation, le taux de glucocorticoïdes (GC) fœtal présente un pic de secrétion entre le 16ème et le 20ème jour de la vie embryonnaire, phénomène concomitant à l'apparition des centres d'ossification du 17ème au 19ème jour de gestation pour le calvaria et pour le septum nasal, respectivement. Dans le cartilage, les GC modulent l'effet des facteurs insulino-mimétiques (IGF-I et -II) par des mécanismes complexes et mal définis, auxquels nous nous sommes intéressés. Nos résultats montrent que les GC, en concentrations physiologiques, peuvent induire la biominéralisation des matrices extracellulaires des chondrocytes de septum nasal et des ostéoblastes du calvaria de fœtus du rat en culture primaire (augmentation de la phosphatase alcaline, du dépôt minéral, des GAG et du Co I). Dans le septum nasal, cette induction est liée à une régulation différentielle des IGFBP et de leurs fragments de dégradation. Les mécanismes moléculaires gouvernant la différenciation des structures craniofaciales par les GC, en particulier, la régulation des homéogènes de la famille Msx et Dlx par cette hormone, sont peu connus. Une partie de notre travail a donc consisté à décrypter l'effet des GC sur l'expression des gènes Msx-2, Dlx-5 et Runx-2 au cours de la minéralisation de calvaria de fœtus du rat. Nos résultats indiquent que les GC induisent, in vitro et in vivo, dans le calvaria de fœtus de rat, l'expression des homéogènes Msx-2, Dlx5 et du gène maître Runx-2, nécessaires à l'induction d'un marqueur fonctionnel de la biominéralisation, l'ostéocalcine. Dans notre laboratoire, l'implication du gène Msx-1 lors de l'amélogenèse et de la dentinogenèse ainsi que la présence d'un ARN antisens naturel de ce gène ont été montrées chez la souris. Nous avons mis en évidence un homologue de cet ARN AS chez le rat. Nos résultats montrent que ce dernier est exprimé au cours de la biominéralisation du calvaria de fœtus de rat, et permettront d'une part de poursuivre l'étude du rôle de cet ARN AS dans des modèles in vitro et in vivo, et d'autre part, d'aborder les mécanismes d'action de cet ARN AS.

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