Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-28T18:21:56Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Caroline Maria Igrejas Lopes.pdf: 1274855 bytes, checksum: 7ab2a1c83145983aec2524d4fde884c2 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-05T23:19:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Caroline Maria Igrejas Lopes.pdf: 1274855 bytes, checksum: 7ab2a1c83145983aec2524d4fde884c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-05T23:19:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Caroline Maria Igrejas Lopes.pdf: 1274855 bytes, checksum: 7ab2a1c83145983aec2524d4fde884c2 (MD5) Previous issue date: 2015-08-10 / CAPES / Introdução: Avicennia schaueriana é uma espécie endêmica da vegetação de manguezal pertencente à família Verbenaceae. As espécies do gênero Avicennia são muito utilizadas pelas comunidades tradicionais para cura de várias doenças. Objetivo: Investigar a presença de compostos químicos e avaliar a citotoxicidade in vitro do extrato aquoso de folhas de Avicennia schaueriana e a ação cicatrizante do creme desse extrato nas feridas cutâneas em ratos. Materiais e Métodos: O extrato aquoso de folhas de A. schaueriana foi analisado por cromatografia em camada delgada para realização do perfil fitoquímico de cumarinas, flavonoides, triterpenos e taninos. Para a análise de saponinas foi utilizado o teste de formação de espuma e para os alcaloides o de precipitação. A avaliação citotóxica foi realizada através do método colorimétrico de brometo em células Vero. A ação cicatrizante foi avaliada utilizando 45 ratos divididos em três grupos iguais tratados durante 5, 10 e 15 dias com creme de extrato aquoso de folhas de A. schaueriana, solução de cloreto de sódio a 0,9% e creme de dexpantenol, aplicados sobre a região dorsal previamente tricotomizada e lesionada. Foram realizadas mensurações iniciais e finais de cada ferida para calcular o índice de cicatrização das úlceras, a análise histomorfométrica e a contagem dos fibroblastos nas secções histológicas das feridas cirúrgicas nos diferentes grupos e intervalos de tempo. Resultados: O estudo fitoquímico mostrou a presença de flavonoides, taninos, triterpenos e saponinas, porém não foi evidenciada a presença de cumarinas e alcaloides. Em relação àcitotoxicidade in vitro, observou que o extrato aquoso de folhas de A. schaueriana não foi considerado citotóxico, pois apresentou capacidade de proliferação de células Vero na maior concentração testada (100μg/mL). Na análise morfométrica verificou-se que o percentual médio de contração das feridas, após 10 dias de tratamento, foi mais elevado no grupo medicado com dexpantenol (93,41%). No tempo de 15 dias, o menor percentual médio de contração ocorreu no grupo do dexpantenol (94,41%) e o maior no de A. schaueriana (98,50%). Na histomorfometria, após 10 dias da cirurgia, o grupo do dexpantenol apresentou o menor comprimento médio não reepitelizado, não demonstrando diferença significativa com o de A.schaueriana, mas apresentando com o soro fisiológico. No período de 15 dias, a média foi nula no grupo da planta estudada, indicando 100% de reepitelização das feridas. Evidenciou-se também que, após 10 dias, o número médio de fibroblastos encontrado no grupo A. schaueriana foi mais elevado do que o soro fisiológico. No período de 15 dias, ogrupo A. schaueriana manteve uma maior quantidade de fibroblastos quando comparado aos demais grupos. Conclusão: O extrato aquoso de folhas de A. schaueriana contém importantes metabólitos secundários, associados a relevantes propriedades farmacológicas. Além disso, a espécie A. schaueriana não apresenta atividade citotóxica e a aplicação tópica do creme desse extrato diminui a área da ferida, estimula a reepitelização e aumenta o número de fibroblastos, exibindo ação cicatrizante mais eficiente nas feridas cutâneas em ratos do que o creme de dexpantenol. Portanto, esta planta poderá tornar-se um tratamento de uso tópico no proce sso de reparação tecidual. / Introduction: Avicennia schaueriana is an endemic species of mangrove vegetation belonging to the Verbenaceae family. The species of the Avicennia gender are extensively used by traditional communities for curing various diseases. Aim: To investigate the presence of chemical compounds and to evaluate the cytotoxicity in vitro of aqueous extract of Avicennia schaueriana leaves and the healing action of the cream of this extract in skin wounds in mice. Materials and Methods: The aqueous extract of A. schaueriana leaves was analyzed by thin-layer chromatography for performing the phytochemical profile of coumarins, flavonoids, triterpenes and tannins. For the analyses of saponnins the formation of foaming test was used and alkaloids the precipitation. The cytotoxic evaluation was performed using the colorimetric method of bromide in Vero cells. The cicatrizing activity was evaluated using 45 mice, divided into three equal groups treated for 5, 10 and 15 days with the cream of the aqueous extract of A. schaueriana leaves, solution of sodium chloride at 0.9% and cream of dexpanthenol, applied to the dorsal region previously shaved and injured. Thus, the initial and final measurements of each wound were taken to calculate the rate of healing of the ulcers, the histomorphometric analysis and the count of fibroblasts of histological sections of surgical wounds in the different groups and timeslots. Results: The phytochemical study showed the presence of flavonoids, tannins, triterpenes and saponins, but the presence of coumarins and alkaloids was not detected. Regarding the cytotoxicity in vitro, it was observed the aqueous extract of A. schaueriana leaves was not considered cytotoxic, as it presented Vero cell proliferation capacity at the highest concentration tested (100μg/ml). In the morphometric analysis, it was found that the average percentage of contraction of the wounds, after 10 days of treatment, was higher in the group medicated with dexpanthenol (93.41%). In the 15 days analysis, the lowest average percentage of contraction was observed in the dexpanthenol group (94.41%) and the highest in the A. schaueriana (98.50%). In the histomorphometry, after 10 days of the surgery, the dexpanthenol group had the lowest average length not re-epithelialized, showing no significant statistical difference from the A.schaueriana, but showing with saline solution. In the 15-days period, the average was void in the group of the studied plant, indicating 100% of re-epithelialization of the wounds. It was also noticed that after 10 days, the average number of fibroblasts found in the A. schaueriana group was higher than the saline solution. In the 15-days period, the A. schaueriana group maintained a higher amount of fibroblasts when compared to the others groups. Conclusion: The aqueous extract of A. schaueriana leaves contains important secondary metabolites, which have relevant pharmacological properties. Furthermore, the species A. schaueriana present no cytotoxic activity and the topical application of the cream of this extract decreases the wound area, stimulates the re-epithelialization, and increases the number of fibroblasts, presenting healing action more efficient, on mice skin wounds, than dexpanthenol cream. Therefore, this plant could become a topical treatment in the tissue repair process.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A cicatrização de feridas cutâneas visa restaurar a integridade da pele, objetivando um fechamento rápido da lesão e a formação de uma cicatriz funcional e esteticamente satisfatória. Diversos modelos in vivo têm sido estudados a fim de caracterizar diversos componentes e mecanismos envolvidos no reparo tecidual e avaliar os efeitos de potenciais compostos terapêuticos que aceleram o processo de cicatrização. O óleo extraído da gordura subcutânea de capivara possui certas propriedades, entre elas está o seu uso em ferimentos externos com o intuito de acelerar o processo cicatricial, embora tal evento não seja confirmado em pesquisas experimentais. O presente estudo teve como objetivo investigar os possíveis efeitos da aplicação tópica de óleo de capivara em feridas cutâneas induzidas em camundongos Swiss, avaliando sua interferência macro e microscópica no processo de cicatrização das lesões. A lesão foi realizada no dorso dos animais, que receberam aplicação tópica do óleo de capivara (0,1 ml) durante 3, 7, 14 e 21 dias de pós-operatório (PO), conforme protocolo estabelecido. Ao final dos dias, foi realizada eutanásia dos animais e fragmentos de lesão e pele adjacente foram coletados e processados para a microscopia de luz. Cortes histológicos da amostra foram corados com hematoxilina e eosina, azul de toluidina, picro sirius red, resorcina fucsina de Weigert, e imunomarcadas para detecção de antígeno nuclear de proliferação celular. Foram analisados macroscopicamente o aspecto geral da lesão, contração da lesão e reepitelização, e microscopicamente a espessura da neoepiderme, quantidade de leucócitos polimorfonucleares (PMN) e mastócitos, proliferação celular na epiderme e derme, e avaliação das fibras de colágeno e do sistema elástico-microfibrilar na matriz extracelular da derme cicatricial. Os animais tratados topicamente com o óleo de capivara mostraram, comparados ao grupo controle que não recebeu tratamento, melhor desenvolvimento da crosta de fibrina nas fases iniciais da cicatrização e desaparecimento da mesma antes do 14 dia PO; maior contração e reepitelização da área da lesão, bem como neoepiderme mais espessa em 7 dias PO; aumento do número de leucócitos PMN em 3 dias PO e sua gradativa redução nos dias subsequentes e diminuição do número de mastócitos em 21 dias PO. Além disso, no grupo tratado com óleo de capivara foi observada uma benéfica modulação das fibras colágenas e elásticas presentes na matriz extracelular da derme, apresentando aceleração da deposição de fibras de colágeno do tipo I e melhor organização dessas fibras no tecido, bem como aceleração da elastogênese com o aparecimento das fibras do sistema elástico-microfibrilar a partir do 7 dia PO. O presente trabalho demonstrou que o emprego tópico do óleo de capivara em feridas cutâneas de camundongos interfere favoravelmente no processo de cicatrização, acelerando o fechamento da ferida e a reparação da epiderme e derme / The cutaneous wound healing aims to restore the integrity of the skin, aiming a quick closing of the lesion and a functional and aesthetically satisfying scar formation. Several in vivo models have been studied to characterize different components and mechanisms involved in tissue repair and evaluate the effects of potential therapeutic compounds which accelerate the healing process. The oil extracted from the subcutaneous fat of capybara has certain properties, among them is its use in external injuries in order to accelerate the healing process, although this event is not confirmed by experimental research. The present study aimed to investigate the possible effects of topical application of capybara oil in cutaneous wounds induced in Swiss mice, assessing their macro and microscopic interference in the process of wound healing. Lesion was created on the backs of animals which received topical application of capybara oil (0,1 ml) during 3, 7, 14 and 21 days postoperatively (PO), according to established protocol. At the end of the days, euthanasia of animals was performed, lesions and adjacent skin fragments were collected and processed for light microscopy. Sections were stained with hematoxylin-eosin, toluidine blue, picro sirius red, Weigerts resorcin fuchsin, and immunostained for proliferating cell nuclear antigen. Were examined macroscopically the general appearance of the lesion, wound contraction and reepithelialization, and microscopically the neoepidermis thickness, amount of polymorphonuclear (PMN) leukocytes and mast cells, cell proliferating in the epidermis and dermis, and evaluation of collagen and microfibril-elastin fibers system in extracellular matrix (ECM) of dermal scarring. The animals treated topically with capybara oil showed, compared to control group that received no treatment, better development of fibrin crust in the early stages of healing and your disappearance before 14th PO day; higher contraction and reepithelialization of the lesion area, as well as neoepidermis thicker in 7 days PO; increase in PMN leukocytes in 3 days PO and its gradual reduction in subsequent days and reduced number of mast cells in 21 days PO. Furthermore, was observed in the group treated with capybara oil a beneficial modulation of collagen and elastic fibers present in the dermis ECM, presenting accelerating type I collagen fibers deposition and better organization of these fibers, as well as accelerating elastogenesis with emergence of microfibril-elastin fibers system from 7th PO day. The present study showed that topic employment of capybara oil in cutaneous wound on mice interfere favorably in the healing process, accelerating wound closure and repair of the epidermis and dermis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A cicatrização de feridas cutâneas visa restaurar a integridade da pele, objetivando um fechamento rápido da lesão e a formação de uma cicatriz funcional e esteticamente satisfatória. Diversos modelos in vivo têm sido estudados a fim de caracterizar diversos componentes e mecanismos envolvidos no reparo tecidual e avaliar os efeitos de potenciais compostos terapêuticos que aceleram o processo de cicatrização. O óleo extraído da gordura subcutânea de capivara possui certas propriedades, entre elas está o seu uso em ferimentos externos com o intuito de acelerar o processo cicatricial, embora tal evento não seja confirmado em pesquisas experimentais. O presente estudo teve como objetivo investigar os possíveis efeitos da aplicação tópica de óleo de capivara em feridas cutâneas induzidas em camundongos Swiss, avaliando sua interferência macro e microscópica no processo de cicatrização das lesões. A lesão foi realizada no dorso dos animais, que receberam aplicação tópica do óleo de capivara (0,1 ml) durante 3, 7, 14 e 21 dias de pós-operatório (PO), conforme protocolo estabelecido. Ao final dos dias, foi realizada eutanásia dos animais e fragmentos de lesão e pele adjacente foram coletados e processados para a microscopia de luz. Cortes histológicos da amostra foram corados com hematoxilina e eosina, azul de toluidina, picro sirius red, resorcina fucsina de Weigert, e imunomarcadas para detecção de antígeno nuclear de proliferação celular. Foram analisados macroscopicamente o aspecto geral da lesão, contração da lesão e reepitelização, e microscopicamente a espessura da neoepiderme, quantidade de leucócitos polimorfonucleares (PMN) e mastócitos, proliferação celular na epiderme e derme, e avaliação das fibras de colágeno e do sistema elástico-microfibrilar na matriz extracelular da derme cicatricial. Os animais tratados topicamente com o óleo de capivara mostraram, comparados ao grupo controle que não recebeu tratamento, melhor desenvolvimento da crosta de fibrina nas fases iniciais da cicatrização e desaparecimento da mesma antes do 14 dia PO; maior contração e reepitelização da área da lesão, bem como neoepiderme mais espessa em 7 dias PO; aumento do número de leucócitos PMN em 3 dias PO e sua gradativa redução nos dias subsequentes e diminuição do número de mastócitos em 21 dias PO. Além disso, no grupo tratado com óleo de capivara foi observada uma benéfica modulação das fibras colágenas e elásticas presentes na matriz extracelular da derme, apresentando aceleração da deposição de fibras de colágeno do tipo I e melhor organização dessas fibras no tecido, bem como aceleração da elastogênese com o aparecimento das fibras do sistema elástico-microfibrilar a partir do 7 dia PO. O presente trabalho demonstrou que o emprego tópico do óleo de capivara em feridas cutâneas de camundongos interfere favoravelmente no processo de cicatrização, acelerando o fechamento da ferida e a reparação da epiderme e derme / The cutaneous wound healing aims to restore the integrity of the skin, aiming a quick closing of the lesion and a functional and aesthetically satisfying scar formation. Several in vivo models have been studied to characterize different components and mechanisms involved in tissue repair and evaluate the effects of potential therapeutic compounds which accelerate the healing process. The oil extracted from the subcutaneous fat of capybara has certain properties, among them is its use in external injuries in order to accelerate the healing process, although this event is not confirmed by experimental research. The present study aimed to investigate the possible effects of topical application of capybara oil in cutaneous wounds induced in Swiss mice, assessing their macro and microscopic interference in the process of wound healing. Lesion was created on the backs of animals which received topical application of capybara oil (0,1 ml) during 3, 7, 14 and 21 days postoperatively (PO), according to established protocol. At the end of the days, euthanasia of animals was performed, lesions and adjacent skin fragments were collected and processed for light microscopy. Sections were stained with hematoxylin-eosin, toluidine blue, picro sirius red, Weigerts resorcin fuchsin, and immunostained for proliferating cell nuclear antigen. Were examined macroscopically the general appearance of the lesion, wound contraction and reepithelialization, and microscopically the neoepidermis thickness, amount of polymorphonuclear (PMN) leukocytes and mast cells, cell proliferating in the epidermis and dermis, and evaluation of collagen and microfibril-elastin fibers system in extracellular matrix (ECM) of dermal scarring. The animals treated topically with capybara oil showed, compared to control group that received no treatment, better development of fibrin crust in the early stages of healing and your disappearance before 14th PO day; higher contraction and reepithelialization of the lesion area, as well as neoepidermis thicker in 7 days PO; increase in PMN leukocytes in 3 days PO and its gradual reduction in subsequent days and reduced number of mast cells in 21 days PO. Furthermore, was observed in the group treated with capybara oil a beneficial modulation of collagen and elastic fibers present in the dermis ECM, presenting accelerating type I collagen fibers deposition and better organization of these fibers, as well as accelerating elastogenesis with emergence of microfibril-elastin fibers system from 7th PO day. The present study showed that topic employment of capybara oil in cutaneous wound on mice interfere favorably in the healing process, accelerating wound closure and repair of the epidermis and dermis

Orientador: Maria Aparecida Neves Jardini / Resumo: A estimulação elétrica (EE) tem sido usada no tratamento de lesões crônicas apresentando resultados favoráveis no fechamento da lesão cutânea entre outras aplicações clínicas. No entanto, a literatura carece de estudos avaliando se os efeitos da EE no fechamento da lesão oral. Diante disso, torna-se relevante investigar os efeitos da EE durante o processo de reparo da lesão oral em camundongos (Swiss). Métodos: Noventa animais foram divididos em grupos: Controle (C; n=45) que receberam a aplicação da EE com o aparelho desligado e Teste (EE; n=45) que receberam a EE (100 µA; 9 kHz; 660 mVpp; 1x/dia por 3 dias). Uma lesão de espessura total foi realizada com punch de biópsia de 1,5 mm de diâmetro. Os animais foram eutanasiados no 1o, 3o e 5o dia após a confecção da lesão. As amostras foram fixadas em paraformaldeído 4%, descalcificadas em ácido fórmico 20% e emblocadas em parafina. Os parâmetros avaliados foram: fechamento clínico da lesão; distância de reparação epitelial (DRE) e conjuntiva (DRC), concentração de citocinas IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e VEGF; porcentagem de fibras colágenas e quantificação das proteínas de sinalização Smad2. Resultados: A área de fechamento clínico foi reduzida no grupo EE no 5º dia de avaliação (p=0,01). As DRE e DRC do grupo EE apresentaram menor distância em todos os tempos avaliados (p<0,05) com reduzida concentração de IL-6, TNF-α, IL-10 e VEGF (p<0,05). Não houve diferença na porcentagem de fibras colágenas e na phospho-Smad2. Conclus... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background: Since Electrical Stimulation (ES) has used for chronic wounds treatment and other clinical applications showing favorable results in wound closure, it was hypothesized whether it could bring good results in oral wound closure. The aim was to investigate the ES effects during the oral wound healing process in mice (Swiss). Methods: Ninety animals were divided in groups: Control (C; n=45) which received a fictitious ES application, i.e. the ES applicance was shutted off and ES (ES; n=45) which received ES (100 µA; 9 kHz; 660 mVpp) once time a day for 3 days consecutively. A full thickness wound was done using a 1.5 mm diameter biopsy punch in the hard palate. The animals were euthanized on 1st, 3rd and 5th day post-wounding. The samples were fixed, decalcified and embedded in paraffin. The parameters evaluated were: clinical wound closure; distance of epithelial and connective wound edges (EWD and CWD); cytokines (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10), TNF-α and VEGF by multiplex, percentage of collagen fibers and Smad proteins. Results: Clinical wound closure area was reduced on day 5 in ES group (p = 0.01). Both EWD and CWD distance were shorter in all times (p < 0.05) with a reduction of inflammatory cytokines production (p < 0.05). There were no difference in collagen percentage and phospho-Smad2. Conclusion: ES had a positive effect on clinical and histomorphometric wound closure outcomes showing a modulation of inflammatory response in the beginning of wound healing. / Doutor