Interés del estudio: El virus de la rotura del color de la flor del Pelargonium (Pelargonium flower break virus, PFBV) (género Carmovirus, familia Tombusviridae) constituye uno de patógenos virales más frecuentes en geranio, una planta ornamental de gran interés para la industria floral. En los últimos años se ha registrado un aumento progresivo de las infecciones causadas por este patógeno, con un porcentaje de incidencia superior al 80% en regiones de Europa occidental y en algunas áreas de España. La información acerca de las relaciones estructura-función en las proteínas de este virus era prácticamente inexistente al inicio de este trabajo y bastante limitada para las proteínas equivalentes de muchos virus relacionados, de modo que la aportación de datos adicionales en este campo puede ser de gran utilidad para entender mejor el establecimiento de la infección y los mecanismos de interacción con el huésped de este virus y de otros equivalentes. Objetivos: Durante el desarrollo de esta Tesis Doctoral se han llevado a cabo análisis de las relaciones estructura-función de las proteínas que codifica el PFBV, centrándonos en aquellos productos virales con características atípicas o cuya función no está del todo clara dentro del grupo al cual pertenece el virus. Con ello se ha pretendido aportar nuevos datos al conocimiento del patógeno y, en general, del grupo al que pertenece. Elementos de la metodología a destacar: La realización de esta Tesis ha permitido la publicación de varios artículos de divulgación científica, aprobados por comités que han avalado convenientemente el uso de las metodologías empleadas. Resultados logrados: Con este trabajo se ha establecido la etapa del ciclo infeccioso en la que se encuentran involucradas las distintas proteínas del PFBV y se han analizado relaciones estructura-función en dichos productos. Asimismo, se han determinado algunas propiedades relevantes de proteínas implicadas en la replicación, así como de aquellas que asisten / Martínez Turiño, S. (2012). ANÁLISIS FUNCIONAL DE PROTEÍNAS CODIFICADAS POR EL VIRUS DE LA ROTURA DEL COLOR DE LA FLOR DEL PELARGONIUM [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/16807 / Palancia

Plum pox virus (PPV) es miembro del género Potyvirus, causa la enfermedad de la sharka que tiene un serio impacto agrícola y económico sobre el cultivo de frutales de hueso. Puesto que la utilización de variedades resistentes es la estrategia más duradera y definitiva en la lucha contra virosis de plantas. El objetivo general de esta tesis doctoral sería evaluar la expresión de anticuerpos recombinantes específicos de proteínas de PPV para interferir o inmunomodular la infección viral y servir así como estrategia para obtener resistencia. Para ello se ha utilizado el fragmento de anticuerpo recombinante scFv2A (del inglés "single chain Fv variable fragment) que reconoce específicamente a la proteína NIb replicasa de PPV. Esta proteína se localiza principalmente en el núcleo de células de plantas infectadas, aunque su función de replicación, presumiblemente, tiene lugar en estructuras membranosas derivadas del retículo endoplásmico (RE) en el citoplasma. Se transformaron plantas de Nicotiana benthamiana con tres versiones del fragmento recombinante scFv2A dirigidas a diferentes compartimentos celulares. Una versión citosólica (scFv2A), una versión nuclear (NLS-scFv2A) y otra dirigida a membranas del RE (6K2-scFv2A) por la cara citosólica. Se obtuvieron diversas líneas transgénicas: líneas A, líneas N y líneas K transformadas respectivamente con las construcciones scFv2A, NLS-scFv2A y 6K2-scFv2A. Se realizaron ensayos independientes de desafío, mediante inoculación mecánica con extractos de plantas infectadas con virus o bien inoculando con un clon recombinante de PPV fusionado a GFP (PPV-GFP). Tras los ensayos, se comprobó que las plantas de las diversas líneas transgénicas de N. benthamiana que expresaban los fragmentos scFv2A, 6K2scFv2A o NLSscFv2A presentaban diferentes grados de protección frente a la infección por PPV. Además, se determinó que varias de las líneas transgénicas, tanto líneas A como K y N, presentaban porcentajes de infección significativamente m / Gil Capitán, MT. (2010). Inmunomodulación de la infección de Plum pox virus mediante la expresión estable y transitoria de anticuerpos recombinantes contra la NIb replicasa viral en plantas de Nicotiana benthamiana [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/34204 / Palancia