Orientador: Frederico Ozanam Papa / Resumo: Com o intuito de verificar a ação do acetato de prednisolona e do plasma seminal sobre a resposta inflamatória uterina de éguas inseminadas com sêmen congelado, desenvolveu-se os seguintes procedimentos: inicialmente 36 éguas foram aleatoriamente divididas em 6 grupos experimentais: G1 grupo controle, éguas não inseminadas; G2 éguas inseminadas com 800 x 106 de espermatozóides "in natura"; G3 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação; G4 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + adição de 20 mL de plasma seminal; G5 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + corticóide-terapia; G6 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + adição de 20 mL de plasma seminal + corticóide-terapia. A corticóide-terapia foi iniciada quando os animais apresentavam folículos de 35 mm e edema uterino, neste momento, se efetuava a administração da gonadotrofina coriônica humana (hCG) e concomitantemente 0,1 mg/kg de acetato de prednisolona por via intramuscular (Predef ), e repetia-se o corticóide a cada 12 horas até a ovulação. Os animais dos grupos tratados com corticóide G5 e G6, demonstraram um decréscimo significativo na função neutrofílica, frente ao teste da redução do tetrazólio nitroazul (NBT). O plasma seminal não alterou a intensidade da resposta inflamatória em nenhum dos testes realizados. No teste de fertilidade foram realizados dois grupos de inseminação, no primeiro, foram utilizadas éguas sem histórico de resposta inflamatória intensa pós-inseminação e não foi vista diferença estatística nos resultados de prenhes. Entretanto, no segundo teste de fertilidade, onde foram usadas éguas problemas, com... (Resumo completo clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Aiming to verify the action of prednizolone acetate and of seminal plasma on the uterine inflammatory response of mares inseminated with frozen semen, the following procedures were developed. Thirty six mares were randomly allocated in 6 experimental groups: G1 control groups, with non-inseminated mares; G2 mares inseminated with 800 x 106 "in natura" sperm cells; G3 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells; G4 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + 20 mL seminal plasma; G5 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + cortico-therapy; G6 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + 20 mL seminal plasma + cortico-therapy. The therapy with 0,1 mg/kg of prednizolone acetate (IM) (Predef ), was performed when the mares presented follicles with 35 mm and uterine edema. At this moment the ovulation was induced with human corionic gonadotrophin (hCG), and the corticoid administrations repeated every 12 hours until ovulation. In G5 and G6 when the animals were treated with corticoid, it was observed a significant decrease on the neutrophil function, analyzed by the tetrazolio nitroazul test (NBT). The infusion of seminal plasma did not modify the uterine inflammatory response in any of the performed tests. For the fertility test, two groups of inseminated mares were used. On the first one, mares with no history of intense uterine inflammatory response after insemination were used. No statistic differences were observed on pregnancy results. However, on the second group of fertility test when problem mares, with history of post-insemination endometritis, were used, the corticoid-treated group presented a significant high pregnancy rate when compared with the control group (67% and 0% respectively). The cortico-therapy showed to be a safe method with no side effects on treated animals, representing an adequate choice for animals... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Orientador: Ciro Moraes Barros / Banca: José Buratini Junior / Banca: Marcelo Fabio Gouveia Nogueira / Banca: Andrey Borges Teixeira / Banca: Maura Elena Ortiz D'Ávila Assumpção / Resumo: Objetivou-se com o presente trabalho avaliar a expressão das isoformas (M1 a M4) do receptor de LH (LHR) em células da granulosa de folículos 8,5 mm de diâmetro obtidos de novilhas cíclicas (grupo NC) ou de vacas superestimuladas (grupo VSE), na raça Nelore. As novilhas cíclicas (n=4) foram submetidas à sincronização da ovulação e em seguida monitoradas por ultra-sonografia transretal, até serem abatidas no terceiro ou quinto dia após a ovulação. As vacas do grupo VSE (n=5) foram submetidas à superestimulação ovariana (protocolo P-36 modificado) e ovariectomizadas 36 horas após a remoção da fonte de progesterona. A expressão das isoformas do LHR (M1 a M4) foram calculadas como valores relativos à expressão do GAPDH. Verificou-se menor expressão do gene do LHR no grupo VSE quando comparado ao grupo NC (6,5±0,35 e 28,96±0,4, respectivamente; Bonferroni, p<0,02). Quando os dados dos grupos NC e VSE foram analisados conjuntamente, obteve-se maior expressão das isoformas M1 (27,22±0,19) e M3 (28,37±0,22) quando comparadas com as isoformas M2 (6,46± 0,38) e M4 (5,05±0,43, Bonferroni, p<0,02). No grupo NC, a expressão do LHR foi mais intensa nos folículos coletados no quinto dia (12 mm de diâmetro, 38,1±0,03) quando comparados aos obtidos no terceiro dia (8,75 mm, 22,6±0,03, Bonferroni, p<0,01) após a ovulação. Estes resultados são indicativos de que o tratamento superestimulatório com Folltropin® em vacas Nelore diminuiu a expressão do LHR nas células da granulosa, aumentou as concentrações intrafoliculares de progesterona, reduziu a razão E2/P4, e que a expressão das isoformas M1 e M3 foi mais abundante do que as M2 e M4 tanto nas novilhas cíclicas quanto nas vacas superestimuladas. / Abstract: The aim of the present work was to evaluate in the Nelore breed the gene expression of LH receptor isoforms (M1 to M4) in granulosa cells of follicles 8.5 mm diameter from cycling heifers (CH) and superestimulated cows (SC). The cycling heifers (n=4) were submitted to synchronization of ovulation and afterwards evaluated by transrectal ultrasonography until the third and fifth days after ovulation, when the animals were slaughtered to obtain the ovaries and follicles. The SC group (n=5) were submitted to ovarian superstimulation (modified Protocol P-36) and ovariectomized 36 hours after removal of progesterone source. The results of the isoforms expression (M1 to M4) were calculated as GAPDH expression. There was a lower expression of LH receptor gene in SC group as compared to CH group (6.50±0.35 and 28.96±0.40, respectively, Bonferroni, p<0.02). When data of both groups were analyzed together, there was a higher expression of M1 (27.22±0.19) and M3 (28.37±0.22) isoforms when compared to M2 (6.46± 0.38) and M4 (5.05±0.43, Bonferroni, p<0.02). In CH group, LHR expression was more intense in follicles obtained in the fifth day (12 mm diameter, 38.1±0.03) when compared to those obtained on third day (8.75 mm, 22.6±0.03, Bonferroni, p<0.01) after ovulation. The results indicated that superstimulatory treatment with FSH in Nelore cows decreased LH receptor expression in granulosa cells, it increased the concentrations progesterone intrafolliculares, it reduced the reason E2/P4, and that M1 and M3 isoforms expression were more abundant than M2 and M4 in both cycling and superstimulated animals. / Doutor

Orientador: Frederico Ozanam Papa / Resumo: Com objetivo de correlacionar e associar a eficiência do teste de termoresistência (rápido e lento) de sêmen congelado na espécie bovina com a fertilidade a campo após a Inseminação Artificial foram utilizados 64 ejaculados de 39 touros da raça Nelore com idades entre 2 e 10 anos pertencentes a central de inseminação artificial Jacarezinho Genetics. Após as colheitas as amostras de sêmen foram avaliadas macro e microscopicamente quanto ao volume, aspecto, turbilhonamento, motilidade total, vigor, concentração e patologia espermática. Posteriormente os ejaculados foram congelados com diluente (TRIS) a uma altura de 3 cm do nitrogênio líquido (-140ºC) em um tanque de congelação durante 15 minutos. Para análise das partidas congeladas foram utilizados os parâmetros de motilidade total subjetiva, vigor, análise computadorizada do movimento espermático (HTMA - IVOS 10), análise de fluorescência para avaliar a integridade de membrana pós-descongelação, após as provas rápidas (46ºC/30') e lenta (38ºC/5h) de termoresistência. Os valores de motilidade total após as provas de termoresistência foram subdivididos em 4 grupos (0= 0% de motilidade, 1= 1-20% de motilidade, 2= 21-40% de motilidade e 3= > 40% de motilidade). O teste de fertilidade foi realizado através da inseminação artificial de 3161 fêmeas da raça Nelore, com idade entre 2 e 16 anos em uma mesma propriedade, sendo a fertilidade avaliada através do índice de prenhez a 1ª inseminação artificial. Para verificar a associação entre as ocorrências de interesse e a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: With the aim of correlating the efficiency of the thermoresistance test (fast and slow) of the frozen sperm in the bovine species with the fertility 64 were used ejaculated of 39 bulls of the race Nelore with age between 2 and 10 years belonging to a Headquarter of Artificial Insemination. After the crops the sperm samples were appraised macro and microscopical as for the volume, aspect, turbine, total motility, energy, concentration and spermatic pathology.Later the ejaculated were frozen in diluent (TRIS) to a height of 3 cm of the liquid nitrogen (-140º C) in a freezing tank for 15 minutes. For analysis of the frozen departures the parameters of subjective total motility, energy, computerized analysis of the spermatic movement (HTMA - IVOS 10) were used. Fluorescence test was also used to evaluate the integrity of the membrane post-defrosting after the proofs fast (46°C/30') and slow (38°C/5h) of thermoresistance. The total motility values after the thermoresistance proofs they were subdivided into 4 categories denominated of adaptation (0=0% of motility, 1= 0- 20% of motility, 2= 20-40% of motility and 3= >40% of motility).The fertility test was accomplished through the artificial insemination of 3161 females of the race Nelore, with age between 2 and 16 years in a same property and the fertility was appraised through the pregnancy index after the first artificial insemination. In order to verify the association between the occurrences of interest and the fertility it was used the proof of Qui-square, with the calculation of statistics X2 and P. The statistics were considered significant when p<0,05 and in the cases which 0,05<p<0,10 the tendency was referred to significance, where p is the probability of erroneously concluding for the significance.The results showed that there were no significant differences among the categories of total... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Resumo: O presente estudo identificou o perfil protéico da membrana plasmática dos espermatozóides, congelados, de caprinos, através de eletroforese bidimensional (2-D). O objetivo foi encontrar proteínas que possam ser utilizadas como marcadores de congelabilidade na seleção precoce de doadores de sêmen. Para isso, foram utilizados seis machos caprinos, da raça Anglo-nubiana, de propriedade da Embrapa Caprinos, mantidos em regime de estabulação. O sêmen foi colhido, em vagina artificial, durante três épocas de inseminação artificial (EIA I - época seca; II - época chuvosa-seca; III - época seca-chuvosa), nos anos de 2002, 2003 e 2004, e avaliado a fresco, quanto ao volume (mL), a concentração (x 109 spz/mL), motilidade progressiva individual (MIP-f, %), o vigor (0 a 5) e a morfologia (% de defeitos maiores, DMa-f; menores, Dme-f e totais, DT-f). Logo após, foi submetido a congelação, em palhetas de 0,5 mL, numa concentração de 150 x 106 espermatozóides por palheta, de acordo com o protocolo do Laboratório de Andrologia, Tecnologia de Sêmen e Inseminação Artificial da Embrapa Caprinos. Em seguida foi armazenado em nitrogênio líquido até seu uso na inseminação artificial e analise de proteínas. Para avaliar a fertilidade do sêmen foram inseminadas 321 cabras, sem raça definida, manejadas em pastagem nativa, com escore corporal entre 2,5 e 4,0, distribuídas por reprodutor e EIA's. As cabras foram inseminadas após estimulação do estro, através do "Efeito Macho", a partir do oitavo dia, pela via transcervical, entre 10 e 12 horas após a identificação do estro, quando o sêmen foi então descongelado. Os resultados das características espermáticas foram analisados pela analise de variância e as proteínas qualitativamente, registrando-se o peso molecular... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The study identified the goat frozen sperm plasmatic membrane proteins profile, using bidimensional electrophoresis (2-D). The aim was to detect those proteins that eventually could be used as markers to select the males by fertility. To evaluate the fertility rates six Anglo-nubian goat male belonging to Embrapa Caprinos kept in stable was used. The sperm was collected by artificial vagina during three insemination seasons (EIA; I, dry season; II, rains-dry season; III, dry-rains season) and the years 2002, 2003 and 2004. The ejaculated sperm was evaluated by volume (mL), concentration (x109 spz/mL), individual progressive motility (MIP-f, %) and vigor-f (0 to 5), and morphology (% of major, DMa-f; minor Dme-f and total, DT-f, abnormalities). There after the sperm was frozen according to Laboratório de Andrologia, Tecnologia de Sêmen e Inseminação Artificial da Embrapa Caprinos, in 0.5 mL straw, with a concentration of 150 x 106 spz/straw and stored in liquid nitrogen. These frozen sperm was maintained until insemination and protein analysis. To evaluate the fertility rate, 321 crossbreed goats, raised on native pasture, with body score between 2.5 and 4.0, were inseminated. Males and EIA's divided the goats in groups. The goats were inseminates after estrus stimulation (male effect) on eighth day after 10 to 12 hours of estrus identification. At insemination the sperm was towed and its characteristics evaluated. The sperm parameters were analyzed by variance analysis and the proteins qualified by molecular weight (kDa) and isoelectric point (pI). The ejaculated sperm showed values of MIP-f ranging from 68.4 to 86.3%, vigor-f 3.3 to 3.8 and DT-f 10.6 to 19.5%; the frozen values of MIP-d were 21.2 to 27.9%, vigor-d 1,7 to 2.0 and DT-d 12.6 to 17.6%. It was observed a significant variation (P<0.05) of MIP-f between the males and even EIA's... (Complete abstract, click electronic address below). / Orientador: Antonio Emidio Dias Feliciano Silva / Coorientador: Francisco de Assis Paiva Campos / Doutor

Orientador: Marco Antônio Alvarenga / Banca: Frederico Ozanam Papa / Banca: Cezinande de Meira / Banca: Guilherme de Paula Nogueira / Banca: José Renato Costa Caiado / Resumo: A somatotrofina recombinante bovina (rbST) tem sido utilizado com sucesso em bovinos para melhorar resposta superovulatória e produção de embriões. Em função do exposto o objetivo deste estudo, foi o de avaliar o efeito da rbST na resposta superovulatória e recuperação embrionária de éguas superovuladas com EPE (12,5 mg duas vezes ao dia). Também foi estudado seu efeito na dinâmica ovariana de éguas superovuladas bem como determinando sua ação sistêmica através da avaliação dos níveis plasmáticos de insulina. Não foi observado efeito da associação do rbST ao protocolo de superovulação em éguas. Tendo sido a resposta superovulatória (2,93 e 2,86 ovulações, respectivamente para EPE e EPE+rbST), percentual de recuperação de embriões (46,3% x 60%, respectivamente para EPE e EPE+rbST) e número de embriões por égua tratada (1,36 e 1,71 embriões, respectivamente para EPE e EPE + rbST) similares entre os grupos (p>0.05). Da mesma forma, não foi observado efeito na dinâmica ovariana. Por outro lado a rbST se mostrou biologicamente ativo em éguas, pois aumentou significativamente os níveis plasmáticos de insulina 24 horas tendo o pico 48 horas após aplicação. Baseado nos resultados do presente experimento pode-se concluir que o rbST a despeito de se mostrar biologicamente ativo quando aplicado em éguas, não interferiu na resposta superovulatória e produção de embriões de éguas tratadas com EPE. / Abstract: The aim of superovulation is to increase the number of embryos from genetically superior animals in embryo transfer program. Many studies showed that mares fail to respond to conventional superovulating drugs used in other species like pFSH and PMSG. The only drugs that are effective in induce superovulation in mares are EPE (equine pituitary extract) and Equine FSH. Recent studies have reported an increase in the number of ovulations using a higher frequency of administration of EPE, but the embryo recovery rates are still low. Growth hormone has been used to improve the superovulatory response in cows. The main objective of this study was to evaluate the effect of bovine growth hormone (ST) in superovulatory response and embryo production of superovulated mares. The utilization of bST did not show any effect on ovarian response and embryo production when used in mares superovulated with EPE. The superovulation answer (2,93 e 2,86 ovulations, respectively for EPE and EPE+bST), embryo recovery rates per ovulation (51% e 66%, respectively for EPE and EPE+bST) and the number of embryos produced per mare (1,36 e 1,71 embryos, respectively for EPE and EPE+bST), were similar between the experimental groups (p>0.05). Also no effects on follicular dynamic was observed. However, bST showed to be biologic active for a long time, when injected in mares, inducing an increase on sistemic insulin levels. Based on the results of the present experiment we can cocluded that in spite of biologic active in mares bST did not interfere on superovulatory answer and embryo production of superovulated mares. / Doutor

Orientador: Frederico Ozanam Papa / Resumo: A influência da estação nas características reprodutivas de garanhões tem sido bem caracterizada nas regiões temperadas; entretanto, pouco se sabe sobre a sazonalidade de garanhões nos trópicos. Este estudo avaliou os efeitos da luz natural e da luz artificial contínua sobre as características reprodutivas de garanhões que vivem na região de Botucatu, SP, Brasil, nos períodos de maior e menor luminosidade do ano. Oito garanhões de diferentes raças e idades foram mantidos semi-estabulados por 12 meses. Um grupo (n=4) permaneceu sob luz natural e o outro (n=4) recebeu luz contínua nas baias durante à noite. As seguintes características reprodutivas foram avaliadas nos períodos de transição primavera-verão e outono-inverno: volume testicular total (VTT), sêmen, libido, concentrações séricas de FSH, LH e testosterona e citologia testicular. Neste estudo, os garanhões sob luz natural apresentaram maior VTT (p£0,05), melhor qualidade do sêmen (p£0,05), maior número de espermatozóides ejaculados (p£0,05) e menor porcentagem de células de Sertoli (p£0,05) em relação aos garanhões sob luz contínua, porém, não diferiram significantemente quanto às concentrações séricas de FSH, LH e testosterona. Ambos os grupos apresentaram uma diminuição do VTT, queda na libido, diminuição das concentrações de LH e aumento significativo da porcentagem de células de Sertoli (p£0,05) no período outono-inverno. Os garanhões sob luz natural não tiveram queda no número de espermatozóides ejaculados neste mesmo período, enquanto os garanhões sob luz contínua tiveram uma evidente diminuiçào do número de espermatozóides ejaculados. Portanto, a avaliação do sêmen dos garanhões sob luz natural não foi suficiente para mostrar sazonalidade reprodutiva nestes animais, ao contrário das demais características que mostraram diferenças sazonais. Isto ocorreu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The influence of season on reproductive characteristics of stallions has been well characterized in temperate zones. However, there are very few studies about seasonality of stallions in tropical zones. This study assessed the effects of natural and prolonged long photoperiod in the reproductive characteristics of stallions that live in Botucatu, Brazil during the periods of the year with the longest and shortest day lengths. Eight stallions of different age and breeds were kept in stalls just at night for a period of 12 months. These stallions were divided into two groups: natural light (n=4) and artificial light all night long (n=4). The following characteristics were assessed during the transition periods between spring-summer and autumn-winter: total testicular volume (TTV), semen, libido, serum concentrations of FSH, LH and testosterone, and testicular cytology. Although, the stallions under natural light had increased TTV (p£0,05), better semen quality (p£0,05), higher number of sperm in the ejaculates (p£0,05) and lower percentage of Sertoli cells (p£0,05) compared with these characteristics in the stallion under continued photoperiod, there were no significant differences in serum hormone concentrations between the two groups. The two groups had similar aspects in relation to the following results: decreased TTV, along with poor libido, lower serum LH levels and a significantly higher percentage of Sertoli cells (p£0,05) during autumn-winter. The stallions under natural light had no changes in the number of sperm in the ejaculates during the same period, but the stallions under continued photoperiod showed an evident decrease of the number of sperm in the ejaculates during autumn-winter. Thus, semen evaluation was not enough to show the seasonality in stallions under natural light as it was shown by the other results. This fact could be explained by the lack of efficiency in... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Botânica, 2008. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2009-10-19T17:48:50Z No. of bitstreams: 1 2008_MariadoDesterroMdosSantos.pdf: 1950534 bytes, checksum: fc398dd40f07c4c764c0dd4bcab9563a (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2009-10-20T13:14:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_MariadoDesterroMdosSantos.pdf: 1950534 bytes, checksum: fc398dd40f07c4c764c0dd4bcab9563a (MD5) / Made available in DSpace on 2009-10-20T13:14:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_MariadoDesterroMdosSantos.pdf: 1950534 bytes, checksum: fc398dd40f07c4c764c0dd4bcab9563a (MD5) Previous issue date: 2008-07-09 / O abacaxizeiro ornamental (Ananas comosus var. bracteatus (Lindl.) Coppens & Leal pertence a família Bromeliaceae. Essa espécie é de propagação vegetativa via propágulos removidos da planta-mãe. Esse tipo de propagação usualmente traz doenças causadas por fungos, bactérias e vírus, mediante o uso de mudas contaminadas. Uma das maneiras de controlar patógenos é usar plantas estoques livres de doenças, obtidos via cultura de tecidos. O objetivo do trabalho foi o estabelecer um sistema eficiente de propagação massal de plantas livres de doenças do abacaxizeiro ornamental e avaliar a fidelidade genética das propagulos regenerados. Os efeitos da adição de BAP em combinação com ANA e períodos de subcultivo foram estudados na formação de brotações in vitro. O delineamento experimental empregado foi o inteiramente ao acaso com os tratamentos dispostos no esquema fatorial 6 x 2 x 4, referentes a 6 concentrações BA (0,0; 0,125; 0,25; 0,5; 1,0; e 2,0 mg L-1), duas de ANA (0,0 e 0,1 mg L-1) e 4 períodos de subcultivos (30, 60, 90 e 120 dias). A formação de brotações foi observada em meio suplementado com BAP, em todos os períodos de subcultivos. O maior número médio de brotos por explante (872,2) foi obtido em meio líquido com a concentração de 1,2 mg L-1 de BAP e 120 dias de subcultivo. Na avaliação da fidelidade genética das plantas regeneradas após 120 dias de cultivo foi observado que os tratamentos com BAP nas concentrações de 0,125, 0,25, 0,5, 1,0 e 2,0 mg.L-1 influenciaram o aparecimento de variações genéticas determinadas pelo uso de marcadores RAPD. Os 46 primers utilizados amplificaram 434 bandas monomórficas (95,8%) e 18 foram polimórficas (4,2%), dentre os propágulos regenerados. Também foi estudado o efeito de concentrações de 2ip e diferentes períodos de subcultivos na propagação in vitro dessa espécie. Propágulos com, aproximadamente, 1,0 cm de tamanho, oriundos da cultura in vitro foram utilizados como explantes. Os explantes foram inoculados em meio básico, formulação líquida, contendo concentrações de 2ip (0,0; 0,5; 1,0 e 2,0 mg L-1) em combinação com quatro períodos de subcultivos (30, 60, 90 e 120 dias). O maior número de brotos por explante (139) foi obtido em meio básico com 1,6 mg L-1 de 2ip e 120 dias de subcultivo. Após a transferência de brotações individualizadas para meio contendo ANA (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0 e 4,0 mg.L-1) verificou-se a diferenciação de raízes adventícias na porção basilar dos explantes. As folhas das plantas in vitro apresentam a forma lanceoladas e consistem de uma camada de células epidérmicas, hipoderme, parênquima aqüífero, parênquima clorofiliano, idioblastos de ráfides, canais de ar e sistema vascular circundado total ou parcialmente por fibras. Na epiderme ocorrem tricomas e escamas. O processo de pré-aclimatação consiste em abrir as tampas dos frascos de cultura contendo as plantas enraizadas in vitro progressivamente, 4 a 5 dias antes de transplantio para casa de vegetação. O transplantio deve ser feito para vasos contendo o substrato PlantMax ou mistura 1:1 de areia e vermiculita. Em ambas as condições 90% dos propágulos sobrevivem e desenvolvem-se ex vitro. Propágulos que não foram aclimatados apresentaram uma percentagem de sobrevivência de 70%, após transplantio com desenvolvimento inicial lento quando comparado com plantas pré-aclimatadas. _______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The ornamental pineapple (Ananas comosus var. bracteatus (Lindley) Coppens & Leal) belongs to the Bromeliaceae family. This specie is vegetatively propagated by propagules removed from the mother plant. This kind of propagation brings diseases caused by fungi, bacteria and viruses by using infected propagules. One option to control pathogens is to use disease-free stock plants obtained by tissue culture. The objectives of this work were to establish an efficient system for mass propagation of disease-free plants of ornamental pineapple and to evaluate the genetic fidelity of regenerated plantlets. The effects of the addition of BAP in combination with either NAA or subculture periods were studied in shoot formations in vitro. The experiment was arranged as a randomized complete design in a factorial disposition 6 x 2 x 4, referring to six BAP (0.0; 0.125; 0.25; 0.5; 1.0; and 2.0 mg L-1) and two NAA (0.0 and 0.1 mg L-1) concentrations and four subculturing periods (30, 60, 90 e 120 days). Shoot formations were observed in medium supplemented with BAP in all subculturing periods. The maximum average number of shoots per explant (872,2) was obtained in liquid medium with 1.2 mg L-1 BAP and 120 days of subcultive. In the evaluation of genetic fidelity of micropropagated plants, after 120 days in culture, it was observed that BAP in concentrations of 0.125; 0.25; 0.5; 1.0 and 2.0 mg.L-1 influenced the appearance of genetic variation in the regenerated propagules using RAPD markers. The 46 primers used amplified 434 monomorphic bands (96.66%) and 22 were polymorphics (4.44%), among regenerated plants. The effect of 2ip concentrations and subculture periods in the micropropagation of ornamental pineapple was also studied. Propagules with approximately 1.0 cm in height, originated from in vitro culture were used as explants. The explants were inoculated in basal medium, liquid formulation, with 2ip in concentrations of 0.0; 0.5; 1.0 and 2.0 mg L-1) in combination with four subculture periods of 30, 60, 90 and 120 days. The maximum number of shoot production per explant (139) was obtained in basal medium with 1.6 mg L-1 de 2ip and 120 days of subculture. After transferring individual shoots to NAA (0.0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0 and 4.0 mg.L-1) media adventitious root formed in the basal portion of the explants. The leaves of the in vitro plants presented a laceolated form and consisted of an epidermal layer of cells, hypoderme, aquiferous parenchyma, chlorophyllous parenchyma, raphydes idioblastes, and vascular system circundated total or partially by fibers. Tricomes and scales were found in the epidermis. The pre-acclimatization process consisted in opening the closure of the culture flasks containing in vitro rooted plantlets progressively five days prior to transplanting them to the greenhouse. The transplanting was done in pots containing PlantMax substrate or a mixture of sand and vermiculate in the proportion 1:1 v/v. In both conditions 90% of the plantlets survived and developed ex vitro. Non acclimatized plantlets showed a 70% survival rate after they were transferred to substrate and they presented slow initial growth as compared with acclimatized plants.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-03-12T15:59:39Z No. of bitstreams: 1 2008_JoseAmorimSobreiraNeto.pdf: 440835 bytes, checksum: 45685ac7e397dfd21e7bf63ba857133c (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-18T00:25:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_JoseAmorimSobreiraNeto.pdf: 440835 bytes, checksum: 45685ac7e397dfd21e7bf63ba857133c (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-18T00:25:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_JoseAmorimSobreiraNeto.pdf: 440835 bytes, checksum: 45685ac7e397dfd21e7bf63ba857133c (MD5) Previous issue date: 2008-03-25 / A reprodução eqüina moderna, em muitos rebanhos, é baseada no uso da inseminação artificial (IA). A difusão do uso da IA pelo mundo tem acelerado o progresso genético pela seleção de garanhões aptos para cruzamento que estão fora do país ou da região onde são mantidos. Quando o transporte do sêmen desde o centro de coleta ao local onde as éguas vão ser inseminadas pode ser alcançado dentro de aproximadamente 24 horas, o sêmen refrigerado, em muitos casos, é preferível ao sêmen congelado devido a sua melhor capacidade fertilizante. O objetivo deste experimento foi o de avaliar a viabilidade do meio diluente para sêmen eqüino à base de água de coco em pó (ACP-105) no resfriamento do sêmen a 5ºC. Foram utilizados 25 ejaculados de 05 garanhões distintos das raças árabe, mangalarga marchador e campolina, de comprovada fertilidade, com idades entre 36 e 120 meses. O sêmen foi avaliado a fresco quanto aos parâmetros de volume, concentração, motilidade total e vigor e quanto aos últimos dois, pós-diluição, em ACP-105 e Equimix® (à base de leite desnatado e glicose) nos tempos de conservação de 2, 12, 24, 36 e 48 horas. A motilidade total não apresentou diferença estatística (p < 0.05) até 36 horas de conservação. Após 48 horas de estocagem, a motilidade total caiu para menos de 10%. Foram inseminadas 14 éguas com sêmen conservado com o diluente ACP-105 por 24 e 36 horas, sendo observadas taxas de prenhez de 57,1 e 35,7%, respectivamente. Como demonstrado no trabalho, o diluente ACP-105 torna-se uma alternativa biotecnológica satisfatória para a refrigeração de sêmen eqüino. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Modern horse reproduction, in most breeds, in based on the use of artificial insemination (AI). The wide-spread use of AI has accelerated genetic progress by making selected stallion available to breeders outside the country or region where the stallion is located. When transport of semen from the collection centre to the place where the mare is to be inseminated can be organized within approximately 24 hours, cooled semen, in most cases, is preferred to frozen semen because of its better fertilizing capacity. The aim of this study was to evaluate the viability of the extender to equine semen based on powder coconut water (PCW-105) on the cooling semen at 5ºC. Were used 25 ejaculates from 05 stallions from arab, mangalarga marchador and campolina breeds, with proved fertility, with ages between 36 and 120 months. Semen was evaluated fresh for volume, concentration, total motility and vigor and respect to the last two, after dilution, on PCW-105 and Equimix® (based on skim milk and glucose) at the conservation times of 2, 12, 24, 36 and 48 hours. There wasn’t statistical differences in total motility (p<0.05) till 36 hours of conservation. After 48 hours, total motility decreased to less than 10%. 14 mares were inseminated with semen conserved in extender PCW-105 by 24 and 36 hours, with pregnancy rates of 57,1% and 35.7%, respectively, showing that is a satisfactory biotechnological alternative to the refrigeration of equine semen.

Orientador : Suely Kofes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Filosofia e Ciencias Humanas / Made available in DSpace on 2018-07-28T07:52:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_RoselyGomes_D.pdf: 15698789 bytes, checksum: 78ff327251a3ede5bfd5d686b82c739a (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Nao informado / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Antropologia Social

Orientador: Luis Guillermo Bahamondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T17:08:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Biazotti_MariaCristinaSantoro_M.pdf: 1692221 bytes, checksum: 5eaa89c725804e0cd5e73b40a1a79317 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Este foi um estudo clínico descritivo, que teve como objetivo avaliar a influência de determinadas variáveis, entre elas alguns parâmetros espermáticos e o número de óvulos maduros, sobre a fertilização in vitro em humanos. Analisaram-se 98 amostras de sêmen e 678 oócitos de casais atendidos no Ambulatório de Esterilidade Conjugal do Departamento de Tocoginecologia da Faculdade de Ciências Médicas da Universidade Estadual de Campinas. A avaliação dos gametas e a técnica de fertilização in vitro foram realizadas no Laboratório de Genética da Reprodução do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher. Para análise dos dados, consideraram-se como variáveis independentes a concentração de espermatozóides no sêmen fresco, a porcentagem de espermatozóides móveis, vivos, normais, maduros e aqueles com membrana íntegra, a concentração de leucócitos no sêmen, a concentração de espermatozóides e a porcentagem de espermatozóides progressivos rápidos recuperados após capacitação espermática, o número de microlitros utilizados na inseminação do oócito e o número de óvulos maduros utilizados no processo de fertilização in vitro. A variável dependente foi a ocorrência ou não de fertilização do oócito in vitro e a taxa de fertilização in vitro. Para avaliação estatística utilizou-se a análise de regressão logística univariada, seguida desta mesma técnica baseando-se em modelos múltiplos. Constatou-se que as variáveis de maior influência na fertilização do oócito in vitro foram: a motilidade grau A e o número de óvulos maduros. Outras variáveis espermáticas que tiveram influência na fertilização do oócito in vitro foram: a concentração espermática inicial; a porcentagem de espematozóides vivos; a porcentagem de espermatozóides morfologicamente normais; a porcentagem de espermatozóides maduros. O número de microlitros utilizados para a inseminação do oócito teve influência negativa sobre a fertilização do oócito in vitro. A taxa de fertilização in vitro aumentou significativamente q usando a porcentagem de espermatozóides normais foi superior a 14%, a motilidade grau A superior a 30% e a concentração espermática maior que 20 milhões por militro de sêmen fresco. Dados obtidos através da curva ROC demonstraram que o ponto de corte para porcentagem de espermatozóides com motilidade do grau A, foi ? 30/? 30, cujos valores de sensibilidade e especificidade foram respectivamente de 65,2% e 65,5%. Baseando-se neste valores, estima-se que o odds de ocorrer a fertilização, quando a porcentagem de espermatozóides móveis do grau A for superior a 30%, é de 1,89 / Abstract: This was a descriptive clinical study, which aimed at evaluating whether there is any influence in determined variables, among them some spermatic parameters and number of mature ovules, with regards of fertilization in vitro of human gametes. Ninety eight samples of semen and 678 oocytes of couples, attended at the Infertility Clinic of UNICAMP, were analyzed. The evaluation of the gametes and the technique of in vitro fertilization (IVF) were performed at the Laboratory of Genetics of Reproduction of CAISM. For the data analysis, the independent variables were: the sperm count in the fresh semen; the percentage of motile, live, normal, mature spermatozoa and those with complete membrane; the leucocyte concentration in semen; the concentration of spermatozoa and the percentage of rapid progressive spermatozoa recovered after spermatic capacitation; the number of microliters inseminated per oocyte and the number of mature ovules used in the process of in vitro fertilization. The dependent variable was the occurrence or not of fertilization of the oocyte in vitro and the rate of fertilization in vitro. During statistics evaluation an analysis of univariated logistic regression was done, followed by multiple analysis. The variables with greater influence in the fertilization of the oocyte in vitro were: grade A motility and the amount of mature ovules. Others spermatic variables which influenced fertilization of the oocyte in vitro were: initial spermatic concentration; percentage of live spermatozoa; percentage of morphologically normal spermatozoa and percentage of mature spermatozoa. The amount of microliters used for the insemination of the oocyte had a negative influence on the fertilization in vitro of the oocyte. The rate of fertilization in vitro increased significantly when the percentage of normal spermatozoa was greater than 14%; grade A motility was greater than 30% and the spermatic concentration was greater than 20 million per milliliter of fresh semen. Data obtained from the ROC curve showed that the cut point for the percentage of spermatozoa with grade A motility was ? ?30/<30, with sensitivity and specificity values at 65.2% and 65.5% respectively. Based on these values, the odds for fertilization, when the percentage of motile grade A spermatozoa is greater than 30%, is 1.89 / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia