Made available in DSpace on 2015-12-06T23:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / 0 enterococo resistente à vancomicina( VRE) é hoje patógeno de imensa importância no ambiente hospitalar, com aumento progressivo em sua incidência como causador de infecções nosocomiais. A bacteremia é uma das principais infecções causadas por este 1 patógeno e devido a sua importância e limitados dados nacionais foi definida como objeto deste estudo. Foram realizados dois estudos procurando avaliar a epidemiologia desta infecção em um hospital universitário . 0 primeiro estudo teve como objetivo avaliar os fatores de risco para bacteremia por VRE. No período de janeiro de 2001 a dezembro de 2003 foram estudados 34 pacientes com bacteremia por VRE, que foram comparados com 102 pacientes-controle pareados por ~ unidade de internação, sexo e idade. Tivemos durante o estudo uma incidência média de infecção de corrente sangüínea por VRE de 0,18 por 1000 pacientes-dia e de 0,11 por 100 saídas. A análise dos resultados demonstrou os seguintes fatores de risco estatisticamente significantes na análise univariada : uso de carbapenem( p= 0,003), uso de cefalosporinas p=0,017), uso de macrolídeos ( p= 0,025) , uso de polimixina B( p= 0,004), uso de vancomicina( p< 0,001), uso de cateter venoso central ( p= 0,023) , uso de ventilação mecânica( p= 0,021) , uso de sonda nasogástrica/nasoenteral( p= 0,001), tempo de internação( p< 0,001) e número de antibióticos(p= 0,001). Na análise multivariada, o único fator de risco independentemente associado à bacteremia por VRE foi : o uso prévio de vancomicina( OR= 10,19; IC9so¿= 3,63- 28,57)¿(au) / Vancomycin-resistant Enterococcus( VRE) is currently a very important pathogen at hospital environment, with progressive increase on its incidence as a cause of nosocomial infections. Bacteremia is a leading infection caused by this pathogen and due its importance and restricted national data was defined as objective of this study. Two studies were performed in order to evaluate the epidemiology of this type of infection at an university-affiliated hospital. The first study evaluated the risk factors for bacteremia by VRE. During the period from january 2001 to december 2003 we studied 34 patients with bacteremia by VRE who were compared to 102 control-patients matched by admission unit, sex and age. We had a average incidence of bloodstream infection by VRE of 0.18 per 1000 patient-days and 0.11 per 100 discharges. The analysis of the results, showed that the following risk factors were statistically significant in univariate analysis: carbapenem use( p= 0,003), cephalosporin use( p= 0,017), macrolides use( p=0,025), polimyxyn use(p= 0,004), vancomycin use( p < 0,001), central venous catheter use( p= 0,023), mechanic ventilation use( p=0,021), nasogastric/nasoenteral tube use( p=0,001), lenght of hospital stay( p< 0,001) and number of antibiotics( p= 0,001). The only factor independently associated to bacteremia on multivariate analysis was : previous vancomycin use( OR= 10,19 ; IC95%= 3,63- 28,57). 113 The second study was performed with the aim to study comparatively the patients with bacteremia by VRE and VSE in order to define differences between the groups concerning clinical outcome. We studied 34 patients with VRE bacteremia and 55 patients with VSE bacteremia admitted in several hospital units. The analysis of results showed that the following factors were statistically significant on univariate analysis: previous carbapenem use( p= 0,001), previous vancomycin use( p< 0,001), mechanical ventilation( p=0,016), nasogastric/nasoenteral tube use( p= 0,004), vasoactive drug use( p= 0,013), lenght of hospital stay( p< 0,001), number of antibiotics( p= 0,001). The only factors statistically significants on multivariate analysis between the two groups were: vasoactive drug use ( OR= 3,61; CI95%= 1,02- 12,72) and number of antibiotics( OR= 1,57; CI95%= 1,15-2,15) in first model and vasoactive drug use( OR= 5,68; CI95%= 1,25- 25,89) and previous vancomycin use( OR= 17,58; CI95%= 5,24-58,96) in second model. The most common Enterococcus species that caused bloodstream infection in our study was E.faecalis( 100% in VRE group and 95,6% in VSE group). There was 100% of sensivity to ampicillin, streptomycin and linezolide in VRE group. Due the importance of VRE bacteremia in hospitals, it is crucial to define the main risk factors associated to it and to observe whether there is differences on outcome in enterococcal bacteremia concerning vancomycin resistance. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

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Enterococcus faecalis estão entre as principais causas de infecções hospitalares em todo o mundo e é uma das mais importantes na área clínica devido à presença de inúmeros fatores de virulência que reforçam sua patogenicidade. Estudos mostram que concentrações subinibitórias de antimicrobianos podem alterar a resposta transcricional e fenotípica de bactérias, porém pouco se sabe sobre como a vancomicina pode afetar a expressão gênica nos microrganismos portadores de seus genes de resistência (genes van). Portanto, este trabalho objetivou avaliar presença e expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis e avaliar o comportamento de isolados Enterococos Vancomicina-Resistentes (EVR) na ausência e presença de concentrações subinibitórias de vancomicina por PCR quantitativa. Identificamos a presença e a expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis, sendo estes genes específicos para as espécies Enterococcus gallinarum e Enterococcus casseliflavus, sugere-se que o E. faecalis possa tê-los adquirido por transferência horizontal. Verificamos que a presença de vancomicina in vitro é capaz de interferir na modulação de genes de virulência em isolados EVR, porém não interfere na formação de biofilme destes isolados. Embora os dados aqui apresentados refiram-se a testes in vitro, podemos inferir que os genes vanC estão sendo transferidos para outras espécies e que a vancomicina pode estar contribuindo para o aumento na expressão de fatores de virulência in vivo, levando ao agravamento de quadros clínicos. / Enterococcus faecalis are among the leading causes of nosocomial infections worldwide and is one of the most important in the clinical area due to the presence of numerous virulence factors that enhance the pathogenicity. Studies show that sub-inhibitory concentrations of antibiotics can alter the transcriptional and phenotypic response of bacteria, but little is known about the effect of vancomycin in gene expression in microorganism bearers of their resistance genes (genes van). Therefore, this study aimed to evaluate the presence and expression of vanC genes in E. faecalis vancomycin susceptible and evaluate the behavior of vancomycin resistant enterococci (VRE) strains in the absence and presence of sub-inhibitory concentrations of vancomycin for Quantitative-PCR. We have identified the presence and expression of vanC genes in E. faecalis which are specific to Enterococcus gallinarum and Enterococcus casseliflavus species, it is suggested that the E. faecalis may have acquired these genes by horizontal gene transfer. We found that the presence of vancomycin in vitro is able of interfering with modulation of expression of virulence genes in VRE strains but does not interfere in the biofilm formation of these isolates. Although the data presented here were obtained from in vitro tests, we can infer that the vanC genes are being transferred to other species and that vancomycin may be contributing to the increase in the expression of virulence factors in vivo, leading to worseres clinical outcomes.

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Enterococcus faecalis estão entre as principais causas de infecções hospitalares em todo o mundo e é uma das mais importantes na área clínica devido à presença de inúmeros fatores de virulência que reforçam sua patogenicidade. Estudos mostram que concentrações subinibitórias de antimicrobianos podem alterar a resposta transcricional e fenotípica de bactérias, porém pouco se sabe sobre como a vancomicina pode afetar a expressão gênica nos microrganismos portadores de seus genes de resistência (genes van). Portanto, este trabalho objetivou avaliar presença e expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis e avaliar o comportamento de isolados Enterococos Vancomicina-Resistentes (EVR) na ausência e presença de concentrações subinibitórias de vancomicina por PCR quantitativa. Identificamos a presença e a expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis, sendo estes genes específicos para as espécies Enterococcus gallinarum e Enterococcus casseliflavus, sugere-se que o E. faecalis possa tê-los adquirido por transferência horizontal. Verificamos que a presença de vancomicina in vitro é capaz de interferir na modulação de genes de virulência em isolados EVR, porém não interfere na formação de biofilme destes isolados. Embora os dados aqui apresentados refiram-se a testes in vitro, podemos inferir que os genes vanC estão sendo transferidos para outras espécies e que a vancomicina pode estar contribuindo para o aumento na expressão de fatores de virulência in vivo, levando ao agravamento de quadros clínicos. / Enterococcus faecalis are among the leading causes of nosocomial infections worldwide and is one of the most important in the clinical area due to the presence of numerous virulence factors that enhance the pathogenicity. Studies show that sub-inhibitory concentrations of antibiotics can alter the transcriptional and phenotypic response of bacteria, but little is known about the effect of vancomycin in gene expression in microorganism bearers of their resistance genes (genes van). Therefore, this study aimed to evaluate the presence and expression of vanC genes in E. faecalis vancomycin susceptible and evaluate the behavior of vancomycin resistant enterococci (VRE) strains in the absence and presence of sub-inhibitory concentrations of vancomycin for Quantitative-PCR. We have identified the presence and expression of vanC genes in E. faecalis which are specific to Enterococcus gallinarum and Enterococcus casseliflavus species, it is suggested that the E. faecalis may have acquired these genes by horizontal gene transfer. We found that the presence of vancomycin in vitro is able of interfering with modulation of expression of virulence genes in VRE strains but does not interfere in the biofilm formation of these isolates. Although the data presented here were obtained from in vitro tests, we can infer that the vanC genes are being transferred to other species and that vancomycin may be contributing to the increase in the expression of virulence factors in vivo, leading to worseres clinical outcomes.

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Enterococcus faecalis estão entre as principais causas de infecções hospitalares em todo o mundo e é uma das mais importantes na área clínica devido à presença de inúmeros fatores de virulência que reforçam sua patogenicidade. Estudos mostram que concentrações subinibitórias de antimicrobianos podem alterar a resposta transcricional e fenotípica de bactérias, porém pouco se sabe sobre como a vancomicina pode afetar a expressão gênica nos microrganismos portadores de seus genes de resistência (genes van). Portanto, este trabalho objetivou avaliar presença e expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis e avaliar o comportamento de isolados Enterococos Vancomicina-Resistentes (EVR) na ausência e presença de concentrações subinibitórias de vancomicina por PCR quantitativa. Identificamos a presença e a expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis, sendo estes genes específicos para as espécies Enterococcus gallinarum e Enterococcus casseliflavus, sugere-se que o E. faecalis possa tê-los adquirido por transferência horizontal. Verificamos que a presença de vancomicina in vitro é capaz de interferir na modulação de genes de virulência em isolados EVR, porém não interfere na formação de biofilme destes isolados. Embora os dados aqui apresentados refiram-se a testes in vitro, podemos inferir que os genes vanC estão sendo transferidos para outras espécies e que a vancomicina pode estar contribuindo para o aumento na expressão de fatores de virulência in vivo, levando ao agravamento de quadros clínicos. / Enterococcus faecalis are among the leading causes of nosocomial infections worldwide and is one of the most important in the clinical area due to the presence of numerous virulence factors that enhance the pathogenicity. Studies show that sub-inhibitory concentrations of antibiotics can alter the transcriptional and phenotypic response of bacteria, but little is known about the effect of vancomycin in gene expression in microorganism bearers of their resistance genes (genes van). Therefore, this study aimed to evaluate the presence and expression of vanC genes in E. faecalis vancomycin susceptible and evaluate the behavior of vancomycin resistant enterococci (VRE) strains in the absence and presence of sub-inhibitory concentrations of vancomycin for Quantitative-PCR. We have identified the presence and expression of vanC genes in E. faecalis which are specific to Enterococcus gallinarum and Enterococcus casseliflavus species, it is suggested that the E. faecalis may have acquired these genes by horizontal gene transfer. We found that the presence of vancomycin in vitro is able of interfering with modulation of expression of virulence genes in VRE strains but does not interfere in the biofilm formation of these isolates. Although the data presented here were obtained from in vitro tests, we can infer that the vanC genes are being transferred to other species and that vancomycin may be contributing to the increase in the expression of virulence factors in vivo, leading to worseres clinical outcomes.