Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-01T19:00:57Z No. of bitstreams: 1 Tese - José Maria Cabral.pdf: 2564703 bytes, checksum: 7c12bbf1d7242ebf4c86cdbdfcc713e1 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-01T19:01:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - José Maria Cabral.pdf: 2564703 bytes, checksum: 7c12bbf1d7242ebf4c86cdbdfcc713e1 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-01T19:01:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - José Maria Cabral.pdf: 2564703 bytes, checksum: 7c12bbf1d7242ebf4c86cdbdfcc713e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T19:01:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - José Maria Cabral.pdf: 2564703 bytes, checksum: 7c12bbf1d7242ebf4c86cdbdfcc713e1 (MD5) Previous issue date: 2013-11-28 / Hunter syndrome, or mucopolysaccharidosis II is one of the seven types of MPSs, lysosomal storage diseases inserted in the inborn errors of metabolism universe. Mutations in iduronate-2-sulfatase gene (IDS) cause deficiency of the homonymous enzyme activity and define the accumulation of GAG heparan and dermatan sulfate in the lysosomes, leading to dysfunction of cells, tissues and organs and clinical manifestations of wide phenotypic variety. The measures of the IDS gene expression in leukocytes by PCR in real time relative values evaluated by cDNA, were low in all five patients amazonenses in repeated tests, including in subjects with symptoms suggestive and no biochemical evidence. The partial sequencing of genomic DNA by choice of exon 9, home region of most mutations in Brazilian patients, to verify the presence of point mutation in all patients allowed to question the standard status gold of biochemical measurement of IDS enzyme for diagnosis. The use of PCR real time, via high-resolution melting analysis (HRM), proved to be useful for the identification of women with the mutant allele. Sequencing and HRM should be inserted in the flowchart for the confirmation of the disease with the accuracy of the advantages of early diagnosis and genetic counseling in more scientific basis. Plasma levels of manganese (Mn++) and B vitamins (pyridoxine and cobalamin) proved the deficiency of these items in patients and families, denouncing nutritional deficiency. Discusses the hypothesis that hipomanganesemia is directly related to low activity of IDS enzyme. The hypovitaminosis B6 and B12, in turn, can be related to hiperhomocistinemia / hypomethylation and changes in the methylation pattern of the IDS gene, further modifying gene expression and phenotypic defining multiple frames. This study advances the understanding of epigenetic accustomed processes to Hunter syndrome and justifies the development of new research in which a broader approach to validate low-cost therapeutic measures that are established in early childhood, pre-symptomatic, may prove to be able to modify the natural history of the disease to ensure greater efficiency of enzyme therapy and more favorable clinical outcome. / A Síndrome de Hunter ou Mucopolissacaridose II representa um dos sete tipos de MPSs, doenças de depósito lisossômico inseridas no universo dos erros inatos do metabolismo. Mutações no gene iduronato-2-sulfatase (IDS) causam deficiência da atividade da enzima homônima e definem o acúmulo de GAGsheparan e dermatan sulfato nos lisossomos, levando à disfunção de células, tecidos e órgãos e manifestações clínicas de ampla variedade fenotípica. As medidas da expressão do gene IDS em leucócitos através da PCR em tempo real, avaliadas pelos valores relativos de cDNA, foram baixas em todos os cinco pacientes amazonenses, em testes repetidos,inclusive no indivíduo com clínica sugestiva e sem comprovação bioquímica.O sequenciamento parcial do DNA genômico por escolha do éxon 9, região sede da maioria das mutações em pacientes brasileiros,ao constatar a presença de mutação pontual em todos os pacientes estudados, permitiu questionar o status de padrão ouro das dosagens bioquímicas da enzima IDS para o diagnóstico. O emprego da PCR real time, via análise de fusão de alta resolução (HRM), mostrou-se útil para a identificação das mulheres portadoras do alelo mutante. Sequenciamento e HRM devem ser inseridos no fluxograma para a confirmação da doença com as vantagens da precisão do diagnóstico precoce e do aconselhamento genético em bases mais científicas. As dosagens plasmáticas de manganês (Mn++) e de vitaminas do complexo B (piridoxina e cobalamina) comprovaram a deficiência desses itens em pacientes e familiares, denunciando carência nutricional. Discute-se a hipótese de que a hipomanganesemia esteja diretamente relacionada à baixa atividade da enzima IDS. As hipovitaminoses B6 e B12, por sua vez, podem estar relacionadas à hiperhomocistinemia/hipometilação e alterações no padrão de metilação do gene IDS, modificando ainda mais a expressão do gene e definindo quadros fenotípicos múltiplos. Este estudo avança no entendimento dos processos epigenéticosafeitos à síndrome de Hunter e justifica o empreendimento de novas pesquisas, nas quais uma abordagem mais ampla possa validar medidas terapêuticas de baixo custo que se instituídas em idade mais tenra,pré-sintomática,podem revelar-se capazes de modificar a história natural da doença aogarantir maior eficiência da terapia enzimática e evolução clínica mais favorável.