Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2014. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2014-11-03T14:42:03Z No. of bitstreams: 1 2014_LuanaPaesdeAguiarMota.pdf: 1499752 bytes, checksum: 77902a8b2bff8efacfd2065894ebf23d (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-11-12T13:54:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_LuanaPaesdeAguiarMota.pdf: 1499752 bytes, checksum: 77902a8b2bff8efacfd2065894ebf23d (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-12T13:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_LuanaPaesdeAguiarMota.pdf: 1499752 bytes, checksum: 77902a8b2bff8efacfd2065894ebf23d (MD5) / O presente trabalho foi um estudo abrangente e optou-se por dividi-lo em dois artigos. O primeiro redigido e formatado segundo as normas de submissão para publicação na revista Pesquisa Veterinária Brasileira (Brazilian Journal of Veterinary Research, ISSN: 0100-736X; Fator de impacto 0.51, Qualis A2) e o segundo, redigido e formatado segundo as normas de submissão para publicação da revista Veterinary Ophthalmology (Fator de impacto 0.959, ISI Journal Citation Reports © Ranking: 2012: 66/143 (Veterinary Sciences) Online ISSN: 1463-5224)”. ______________________________________________________________________________ RESUMO DO ARTIGO 1 / O teste de cristalização da lágrima (TCL) ainda não foi padronizado em cães. Este trabalho propõe padroniza-lo e validar o programa STEPanizer © stereology tool version 1.0 como método de classificação complementar para o teste. Foram utilizados 31 cães (62 olhos), sem predominância de sexo ou raça, com idade média de 18,8 ± 18.4 meses. Dentre estes, 14 apresentavam a superfície ocular hígida e 17 apresentavam protrusão unilateral da glândula da terceira pálpebra. Foram realizados em todos os cães, testes de rotina para avaliar a higidez da superfície ocular. O TCL foi classificado de acordo com Rolando (1984) e pelo programa STEPanizer. Neste, testou-se a avaliação com 16, 25, 36, 49, 64, 81 e 100 pontos equidistantes de contagem, no sistema teste que fica sobreposto à imagem, correlacionando-os com a classificação segundo Rolando (1984). Os dados foram analisados com o software Statistical Analysis System (SAS®). Valores de maior correlação (r), p < 0.05, menor erro mean square (MSE) e maior coeficiente de determinação (R2 ajustado) foram utilizados para definir o melhor número de pontos no STEPanizer. O TCL classificado segundo Rolando (1984) resultou, em média, tipo II para os animais hígidos e tipo III para os animais com protrusão da glândula da terceira pálpebra. A classificação do TCL utilizando o STEPanizer mostrou melhor correlação com a classificação de Rolando quando feita por meio da contagem com 100 pontos equidistantes (r - 0.9; MSE 0.38 e R2 ajustado 0.81). A classificação para o TCL utilizando o STEPanizer mostrou-se objetiva e factível de ser empregada na rotina clínica, sendo útil como ferramenta de padronização para a classificação do TCL, feita segundo Rolando (1984). ______________________________________________________________________________ RESUMO DO ARTIGO 2 / Objetivo Avaliar a superfície ocular de cães com protrusão da glândula da terceira pálpebra, antes e após a cirurgia de reposicionamento da glândula, comparativamente a animais hígidos. Animais vinte e sete cães, sendo 14 sem alterações de superfície ocular (grupo controle – GC) e 13 acometidos unilateralmente pela protrusão da glândula da terceira pálpebra (grupo afetado – GA), machos ou fêmeas, com idade media de 20,8 ± 19 meses. Procedimentos Foram realizados, em todos os cães, o teste lacrimal de Schirmer (TLS); o tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL); a coloração com fluoresceína (FLUO), a análise histopatológica do fórnix conjuntival (BIO) e o teste de cristalização da lagrima (TCL), classificado como o proposto por Rolando (1984) e por meio do programa STEPanizer © Stereology tool version 1.0. Sendo que no GA, os testes também foram realizados nos dias 7, 15, 30 e 60 após a reposição da glândula protruída. Os dados foram analisados com o software Statistical Analysis System (SAS ®). Valores de maior correlação (r), p < 0.05, menor erro mean square (MSE) e maior coeficiente de determinação (R2 ajustado) foram considerados significativos. Resultados Não se verificou diferença significativa para os testes TLS, TRFL e FLUO nem antes, nem após o procedimento de reposição da glândula. O TCL classificado de acordo com o STEPanizer mostrou piora significativa após o procedimento cirúrgico (p < 0,001), piora não significativa quando classificado de acordo com Rolando (1984). A classificação do TCL 20 pelo STEPanizer é altamente correlacionada com a de Rolando, tanto nos olhos dos animais hígidos (r – 0,94), como nos olhos afetados pela protrusão (r – 0,91). A concentração de células caliciformes por campo de grande aumento (400x) para os olhos do GC (22,28 ± 5,78) foi significativamente maior do que no GA (18,45 ± 10,6). Conclusão O diagnóstico e a terapêutica cirúrgica precoce provavelmente evitaram os sinais característicos da cronicidade desta afecção sobre a superfície ocular dos animais deste estudo. A classificação do TCL utilizando o STEPanizer, mostrou-se mais sensível do que a de Rolando (1984). As alterações visualizadas no olho sem a protrusão foram as mesmas visualizadas no olho afetado pela protrusão, o que gera a hipótese de que a etiopatogenia da doença pode ter início com alterações de superfície ocular ainda não descritas em literatura. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT OF THE ARTICLE 1 / The tear ferning test (FT) has no standard in dogs. This paper proposes this standardization it and validation using the STEPanizer © Stereology tool version 1.0 program (STEPanizer) as a complementary classification method for the test. Thirty one dogs (62 eyes) of no predominant sex or bread, with an average age of 18.8 ± 18.4 months were used. Among these, 14 had a healthy ocular surface and 17 had a unilateral third eyelid gland protrusion. Routine tests for evaluating the health of the ocular surface were performed on all dogs. The FT was classified according to Rolando (1984) and by the STEPanizer program. The STEPanizer uses a test system with equidistant points overlaid on the analyzed image. A total of 16, 25, 36, 49, 64, 81 and 100 equidistant points were evaluated, correlating them with the Rolando (1984) classification. Data were analyzed with the Statistical Analysis System (SAS®) software. Higher correlation (r) coefficients, p < 0.05, lower mean square error (MSE) and higher adjusted R2 were used to define the best number of points. Healthy animals showed, on average, FT classification according Rolando (1984) of Type II in healthy animals and Type III in animals with third eyelid gland protrusion. The FT regression on STEPanizer using 100 equidistant points (r - 0.9; MSE 0.38 and adjusted R2 0.81) showed the highest correlation with Rolando (1984) classification. The FT classification using STEPanizer proved to be objective and feasible for use in clinical routine, being useful as a standardized tool for the FT Rolando (1984) classification. INDEX TERMS: eye, ocular surface, validation, Rolando (1984), test system, third eyelid gland protrusion. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT OF THE ARTICLE 2 / Objective Evaluate third eyelid gland protrusion dogs ocular surface both before and after surgical repositioning of the gland, compared to healthy animals. Animals Twenty-seven dogs, 14 with healthy ocular surface (control group - CG) and 13 unilaterally affected by third eyelid gland protrusion (affected group - AG), male or female, with a mean age of 20.8 ± 19 months. Procedures In all dogs were performed the Schirmer tear test (STT); the breakup time of the tear film (BUT); the fluorescein staining (FLUO), the histopathological analysis of the conjunctival fornix (BIO) and the tear Ferning test (FT), classified as proposed by Rolando (1984) and with STEPanizer © Stereology tool version 1.0 program. On AG, the tests were also performed on 7, 15, 30 and 60 days after the gland replacement. Data were analyzed with the Statistical Analysis System software. Higher correlation values, p < 0.05, lower mean square error and higher determination coefficient were significant. Results No statistical difference was found for STT, BUT and FLUO tests. FT classified using STEPanizer showed significant worse after surgery (p <0.001), but no significant when classified according to Rolando (1984). On AG, changes in the eyes without protrusion were the same displayed in the affected eyes. Conclusion Early diagnosis and surgical therapy of affected dogs prevented chronic changes on their ocular surface. The FT rating using the STEPanizer was more sensitive than Rolando (1984) classification. It’s assumed that the disease pathogenesis may begin with changes in ocular surface not previously described in the literature.

Orientador: Elenice Deffune / Resumo: Introdução: A Síndrome do Olho Seco (SOS) é uma doença multifatorial das lágrimas e da superfície ocular que resulta em desconforto, distúrbios visuais e instabilidade do filme lacrimal e afeta principalmente adultos com mais de 50 anos e mulheres. É uma doença que pode ter grande impacto negativo na qualidade de vida dos pacientes. A abordagem terapêutica com soro autólogo tem sido preconizada desde 1986 com prós e contras na literatura. Esta pesquisa teve como objetivo realizar uma revisão sistemática e metanálise para analisar a efetiva contribuição do Soro Autólogo segundo os protocolos, ensaios terapêuticos publicados nos últimos 10 anos e o atendimento dos pacientes portadores de Síndrome do olho seco (SOS) no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu .Objetivos: 1) realizar revisão sistemática e metanálise para avaliar a eficácia do uso do soro autólogo em comparação com lágrimas artificiais comerciais no tratamento para adultos com olho seco. 2) realizar um trabalho retrospectivo da contribuição do soro autólogo de uso ocular no tratamento da SOS nos pacientes do ambulatório do Hospital das Clínicas de 2014-2018 comparando com o período anterior (2008-2013). Materiais e Métodos: Para a revisão sistemática e metanálise foi pesquisado na base de dados do Pubmed não usando restrições de língua, apenas trabalhos dos últimos 10 anos. Para os desfechos primários e secundários foi utilizado um intervalo de confiança de 95%. O levantamento de dados dos pacien... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Dry Eye Syndrome is a multifactorial disease of tears and ocular surface that results into discomfort, visual disturbances and tear film instability and affects mainly female adults, over 50 years. It is a disease which may cause a great negative impact on the patients’ quality of life. The therapeutic approach employing autologous serum has been advocated in 1986, with pros and cons in the literature. This study aimed to perform a systematic review and a meta-analysis to investigate the effective contribution of Autologus Serum according to the protocols and clinical trials published in the last 10 years, and the SOS patients care at Hospital das Clínicas, during two periods: 2008-2013 and 2014- 2018.Objectives: 1) to perform a systematic review and meta-analysis to evaluate the efficacy of the autologous serum, in comparison to commercial artificial tears for the treatment of dry eye in adults. 2) to carry out a retrospective study of the ocular autologous serum contribution for SOS out patients’ treatment, at Hospital das Clínicas (2014 to 2018), comparing with the previous period (2008-2013).Materials and Methods: For the systematic review and meta-analysis, searches were realized in Pubmed databases, with no language restrictions, for papers published in the last 10 years, with full text availability, for researches dated until 10/12/2018. For the primary and secondary outcomes, a 95% confidence interval was used. For the outpatients’ data collection, each ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Distúrbios na superfície da córnea e nas glândulas lacrimais acometem com frequência os indivíduos com diabetes mellitus. Atualmente não existe tratamento seguro e eficaz para feridas na córnea e o tratamento da síndrome do olho seco (SOS) é predominantemente sintomático. A administração tópica da insulina (INS) é uma estratégia promissora para tratar esses distúrbios, devido à presença de seus receptores na superfície ocular e na glândula lacrimal, e aos seus efeitos metabólicos e mitogênicos. No entanto, os fármacos aplicados topicamente na forma de solução são rapidamente drenados do olho, resultando em uma baixa biodisponibilidade local. O objetivo deste trabalho foi desenvolver formulações contendo INS e avaliar a sua influência no distúrbio das glândulas lacrimais e na regeneração da córnea em ratos diabéticos. Foram desenvolvidas quatro formulações contendo 1 UI/mL de INS: dispersão contendo insulina (DISP INS), dispersão contendo micropartículas quitosana/INS (DISP MP INS), gel termorreversível in situ com INS (Gel INS) e Gel contendo as micropartículas quitosana/INS (Gel MP INS). Também foram produzidas formulações \"brancas\", sem a veiculação do fármaco: dispersão contendo micropartículas sem insulina (DISP MP s/INS); gel termorreversível in situ sem insulina (Gel s/INS). As MP incorporadas nas formulações foram preparadas por spray drying e apresentaram tamanho de 4,0±0,1 ?m, morfologia adequada e grande quantidade de INS (77±6%). Todas as formulações apresentaram pH e osmolalidade compatíveis com o uso ocular. Durante o estudo in vivo, foi realizado o tratamento diário (15 dias) dos animais diabéticos, com as formulações (50 ?L) em ambos os olhos, exceto nos controles positivo (sem diabetes) e controle negativo (diabético não tratado). Todos os animais tratados com INS aumentaram a produção de fluido lacrimal, sendo que, ao término do tratamento, não foi observada diferença estatística entre o controle positivo e aqueles tratados com DISP INS e com Gel MP INS. A INS foi detectada na glândula lacrimal e no globo ocular dos animais tratados com DISP MP INS, Gel INS e Gel MP INS, sendo que a maior concentração de INS foi encontrada nos ratos tratados com Gel MP INS. Ao término do tratamento houve redução da glicemia dos animais tratados com a INS, o que pode sugerir um tratamento coadjuvante em pacientes diabéticos. Estudos de citologia de impressão mostraram que o Gel INS e Gel MP INS foram capazes de aumentar o número de células do epitélio da córnea e melhorar a relação núcleo/citoplasma em relação ao controle negativo. A histologia do globo ocular mostrou que essas duas formulações também melhoraram a espessura do epitélio da córnea, que foi semelhante a dos controles positivos. Conclui-se que a incorporação da INS nos géis e nas micropartículas desenvolvidas desempenhou um efeito positivo no tratamento da síndrome do olho seco e de lesões na córnea. / Disorders in the corneal surface and the lachrymal glands often affect individuals with diabetes mellitus. Nowadays there is no safe and effective treatment for wounds in the cornea and the treatment of dry eye syndrome (DES) is primarily symptomatic. Topical administration of insulin (INS) is a promising strategy for treating these disorders due to the presence of receptors on the ocular surface and lacrimal gland, besides its metabolic and mitogenic effects. However, the drugs applied topically in the form of a solution are quickly drained from the eye, resulting in a low local bioavailability. The aim of this study was to develop formulations containing INS and evaluate their influence on disorders of lacrimal glands and cornea healing in diabetic rats. Four formulations containing 1 IU/mL of INS were developed: dispersion containing insulin (DISP INS), dispersion containing chitosan microparticles/INS (DISP MP INS), in situ forming gel containing INS (Gel INS) and in situ forming gel containing microparticles chitosan/INS (Gel MP INS). \"White\" formulations were also produced without the drug: dispersion containing microparticles without insulin and in situ forming gel without insulin. MP incorporated in the formulations were prepared by spray drying and showed size of 4.0±0.1 ?m, proper morphology and high INS load (77±6%). All formulations exhibited pH and osmolarity compatible with the ocular use. In vivo studies were performed using diabetic rats that were treated daily (15 days) with instillation of the formulations (50 ?L) in both eyes, except in the positive controls (health rats) and negative control (untreated diabetic rats). All animals treated with INS showed an increase in the production of tear fluid. After treatment, no statistical difference was observed between the positive control and those treated with DISP INS and Gel MP INS. The INS was detected in the lacrimal gland of the animals treated with DISP MP INS, Gel INS and Gel MP INS, with the highest concentration of INS found in mice treated with Gel MP INS. After treatment there was a reduction in blood glucose of the animals treated with formulations containing INS, which suggests that developed formulations may be used as an adjuvant treatment in diabetic patients. Impression cytology studies showed that the Gel INS and Gel MP INS were able to increase the number of the corneal epithelium cells and improve nucleus/cytoplasm ratio compared to the negative control. The histology of the eyeball showed that these two formulations have improved the thickness of the corneal epithelium, which was similar to the positive controls. In conclusion, incorporation of INS in the gels and MP developed induced a positive effect in the treatment of dry eye syndrome and corneal wound.

Orientador: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar e avaliar a aplicação de célula tronco mesenquimal de tecido adiposo (CTM-TA) e plasma rico em plaquetas aquecido alogênico (PRP-AA) perilacrimal em cães com ceratoconjuntivite seca (CCS), bem como, se há diferença na resposta segundo o grau de gravidade da afecção. Foram analisados 20 cães com produção lacrimal <15mm/min e distribuídos aleatoriamente em dois grupos (n=10). O grupo 1 tratado com CTM-TA (5x106 e 3x106 células) (GCTM-TA) e com grupo 2 PRP-AA (0,7mL e 0,3mL) (GPRP-AA), ambos injetados perilacrimal nas glândulas lacrimal principal e da terceira pálpebra, respectivamente. Todos os olhos foram avaliados em quatro momentos (M0 M15, M30, M60 dias). As variáveis avaliadas foram: osmolaridade da lágrima; teste lacrimal de Schirmer (TLS); sensibilidade corneal; tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL); pressão intraocular; espessura corneal; e biopsia da conjuntiva bulbar, além das variáveis clínico-oftalmológicas. Houve melhora nos dois grupos a partir de M15 (p<0,05) na qualidade do filme lacrimal, avaliada por meio da osmolaridade e TRFL, sem diferença entre os grupos. A produção de lágrima aumentou, entretanto notou-se diferença significativa nos animais com CCS discreta no GPRP-AA a partir do M30, e nos cães com CCS grave no GCTM-TA a partir do M30 e no GPRP-AA a partir do M60. Verificou-se melhora dos sinais clínicos da inflamação em ambos os grupos. Aplicação única perilacrimal de CTM-TA e PRP aquecido alogênicos normaliza a ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the study was to compare and evaluate the application of allogenic mesenchymal stem cell adipose tissue derived (MSCs-AD) and inativate platelet-rich plasma allogenic (PRP-IA), perilacrimal in dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS), and if there is difference in the response according to the degree of severity of the condition. Twenty dogs with lacrimal production <15mm/min randomly assigned to two groups were used. Group treated with MSCs-AD (5x106 and 3x106) (GMSCs-AD) and with PRP-IA (0.7ml and 0.3ml) (GPRP-IA), both intralacrimal in the main lacrimal glands and third eyelid, respectively. The eyes were evaluated in four moments after application (M0 M15, M30, M60). The variables evaluated were: tear osmolarity e; Schirmer's tear test (STT); sensitivity corneal; tear film break time (TBUT); intraocular pressure; corneal thickness; and biopsy of the bulbar conjunctiva, in addition to clinical-ophthalmologic variables. There was improvement in two groups at M15 (p <0.05) on tear film quality, assessed by osmolarity and TBUT, with there was no difference between groups. STT increased, however, statistical difference was only observed in animals with mild KCS in the GPRP-IA from the M30 and in the intense KCS at M30 in the G MSCs-AD and at M60 in the GPRP-IA. There was an improvement in the clinical signs of inflammation in both groups. The unique Intralacrimal application of MSCs-AD and PRP-IA normalizes tear film quality and improves clinical signs of inflamma... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2018-06-04T19:14:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2017-05-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivo: Descrever os caminhos percorridos pelo portador da Síndrome do Olho Seco em busca da atenção integral do cuidado na saúde pelo Sistema Único de Saúde. O objeto de estudo foi construído a partir da contextualização do agravo no cenário mundial, inclusive no Brasil, do entendimento da doença como problema de saúde pública, bem como sob o ponto de vista da integralidade sistêmica, passando pelas políticas públicas, e da atenção integral do cuidado individual na saúde, incluindo os aspectos psicossociais. Método: Trata-se de uma pesquisa com abordagem qualitativa e de caráter exploratório que envolveu duas etapas: a teórico-conceitual e a empírica. Na primeira, foram utilizados trabalhos que abordam a temática deste estudo, incluindo uma pesquisa bibliográfica correspondente ao período de 2011-2015. Na segunda etapa, as ferramentas utilizadas foram: a realização de grupos focais e entrevistas semiestruturadas, e como suporte, o diário de campo. Os grupos focais, com a participação de usuários do Ambulatório de Doenças Externas e Córnea, portadores da Síndrome do Olho Seco, no intuito de conhecer os caminhos percorridos na busca por um cuidado integral. A “amostra” final para a análise constituiu-se de 14 participantes. As entrevistas semiestruturadas com gestores do Departamento de Oftalmologia para conhecer a dinâmica de funcionamento dos serviços, incluindo a da assistência psicossocial, e o médico oftalmologista, no que tange a assistência ao portador da Síndrome do Olho Seco pelo serviço estudado. O diário de campo foi o instrumento utilizado para o registro sobre o reconhecimento do cenário da pesquisa, bem como outros acontecimentos no decorrer do estudo, inclusive durante os grupos focais e entrevistas semiestruturadas. Este estudo foi realizado num serviço universitário ligado ao Departamento de Oftalmologia de uma Escola Médica vinculada a uma Universidade Federal. Resultados: quanto à análise da empiria, pode-se afirmar que o cuidado em saúde ao portador da Síndrome do Olho Seco está aquém do princípio da integralidade. Tanto na gestão, quanto no cuidado, o Sistema Único de Saúde apresenta lacunas que incidem sobre a qualidade de vida do portador do agravo. Considerações: Por fim, este estudo propõe algumas ações que visam tornar o SUS mais acessível ao portador da Síndrome do Olho Seco, inclusive sugerindo a aproximação do Departamento de Oftalmologia com a rede básica, a integração entre os serviços de psicologia/psicoterapia, de assistência social e de oftalmologia clínico-cirúrgica, e, no serviço estudado, o incentivo para a formação de grupo de apoio com portadores do agravo em parceria com a Associação dos Portadores de Olho Seco, entidade tida como porta-voz dos portadores desse agravo para a população brasileira, por meio de ações que realiza. / Objective: Describing the paths covered by the Dry Eye Syndrome patient in search of the integral attention of health care by the Unified Health System (SUS). The object of study was constructed from the contextualization of the disease in the world scenario, including in Brazil, the understanding of the disease as a public health problem, as well as from the point of view of systemic integrality, through public policies, and the integral attention of individual health care, including psychosocial aspects. Method: This is a research with a qualitative and exploratory approach that involved two stages: the theoretical-conceptual and the empirical. In the first one, papers which approach the theme of this study were used, including a bibliographical research corresponding to the period of 2011-2015. In the second stage, the tools used were the observance of focal groups and semi-structured interviews, and as support, the field diary. The focal groups, with the participation of users of the Outpatient Clinic of External Diseases and Cornea, with Dry Eye Syndrome, in order to know the paths covered in the search for integral care. The final sample for the analysis consisted of 14 participants. The semi-structured interviews with managers of the Department of Ophthalmology to know the dynamics of the functioning of the services, including psychosocial assistance, and the ophthalmologist, regarding the assistance to the bearer of Dry Eye Syndrome by the service studied. The field diary was the instrument used to register the recognition of the research scenario, as well as other events during the study, including during focus groups and semi-structured interviews. This study was carried out in a university service linked to the Department of Ophthalmology of a Medical School linked to a Federal University. Results: Regarding the empirical analysis, it can be affirmed that health care for patients with Dry Eye Syndrome falls short of the principle of integrality. In both management and care, the Unified Health System has gaps that affect the quality of life of people suffering from the disease. Considerations: Finally, this study proposes some actions aiming at making the SUS more accessible to the bearer of Dry Eye Syndrome, including suggesting the approach of the Department of Ophthalmology with the basic network, the integration between psychology / psychotherapy services, social care and clinical-surgical ophthalmology, and, in the service studied, the stimulus for the formation of a support group with patients with the disease in partnership with the Association of Carriers of Dry Eye, an entity considered as the spokesperson for those who suffer from this disease to the Brazilian population, through its actions. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Distúrbios na superfície da córnea e nas glândulas lacrimais acometem com frequência os indivíduos com diabetes mellitus. Atualmente não existe tratamento seguro e eficaz para feridas na córnea e o tratamento da síndrome do olho seco (SOS) é predominantemente sintomático. A administração tópica da insulina (INS) é uma estratégia promissora para tratar esses distúrbios, devido à presença de seus receptores na superfície ocular e na glândula lacrimal, e aos seus efeitos metabólicos e mitogênicos. No entanto, os fármacos aplicados topicamente na forma de solução são rapidamente drenados do olho, resultando em uma baixa biodisponibilidade local. O objetivo deste trabalho foi desenvolver formulações contendo INS e avaliar a sua influência no distúrbio das glândulas lacrimais e na regeneração da córnea em ratos diabéticos. Foram desenvolvidas quatro formulações contendo 1 UI/mL de INS: dispersão contendo insulina (DISP INS), dispersão contendo micropartículas quitosana/INS (DISP MP INS), gel termorreversível in situ com INS (Gel INS) e Gel contendo as micropartículas quitosana/INS (Gel MP INS). Também foram produzidas formulações \"brancas\", sem a veiculação do fármaco: dispersão contendo micropartículas sem insulina (DISP MP s/INS); gel termorreversível in situ sem insulina (Gel s/INS). As MP incorporadas nas formulações foram preparadas por spray drying e apresentaram tamanho de 4,0±0,1 ?m, morfologia adequada e grande quantidade de INS (77±6%). Todas as formulações apresentaram pH e osmolalidade compatíveis com o uso ocular. Durante o estudo in vivo, foi realizado o tratamento diário (15 dias) dos animais diabéticos, com as formulações (50 ?L) em ambos os olhos, exceto nos controles positivo (sem diabetes) e controle negativo (diabético não tratado). Todos os animais tratados com INS aumentaram a produção de fluido lacrimal, sendo que, ao término do tratamento, não foi observada diferença estatística entre o controle positivo e aqueles tratados com DISP INS e com Gel MP INS. A INS foi detectada na glândula lacrimal e no globo ocular dos animais tratados com DISP MP INS, Gel INS e Gel MP INS, sendo que a maior concentração de INS foi encontrada nos ratos tratados com Gel MP INS. Ao término do tratamento houve redução da glicemia dos animais tratados com a INS, o que pode sugerir um tratamento coadjuvante em pacientes diabéticos. Estudos de citologia de impressão mostraram que o Gel INS e Gel MP INS foram capazes de aumentar o número de células do epitélio da córnea e melhorar a relação núcleo/citoplasma em relação ao controle negativo. A histologia do globo ocular mostrou que essas duas formulações também melhoraram a espessura do epitélio da córnea, que foi semelhante a dos controles positivos. Conclui-se que a incorporação da INS nos géis e nas micropartículas desenvolvidas desempenhou um efeito positivo no tratamento da síndrome do olho seco e de lesões na córnea. / Disorders in the corneal surface and the lachrymal glands often affect individuals with diabetes mellitus. Nowadays there is no safe and effective treatment for wounds in the cornea and the treatment of dry eye syndrome (DES) is primarily symptomatic. Topical administration of insulin (INS) is a promising strategy for treating these disorders due to the presence of receptors on the ocular surface and lacrimal gland, besides its metabolic and mitogenic effects. However, the drugs applied topically in the form of a solution are quickly drained from the eye, resulting in a low local bioavailability. The aim of this study was to develop formulations containing INS and evaluate their influence on disorders of lacrimal glands and cornea healing in diabetic rats. Four formulations containing 1 IU/mL of INS were developed: dispersion containing insulin (DISP INS), dispersion containing chitosan microparticles/INS (DISP MP INS), in situ forming gel containing INS (Gel INS) and in situ forming gel containing microparticles chitosan/INS (Gel MP INS). \"White\" formulations were also produced without the drug: dispersion containing microparticles without insulin and in situ forming gel without insulin. MP incorporated in the formulations were prepared by spray drying and showed size of 4.0±0.1 ?m, proper morphology and high INS load (77±6%). All formulations exhibited pH and osmolarity compatible with the ocular use. In vivo studies were performed using diabetic rats that were treated daily (15 days) with instillation of the formulations (50 ?L) in both eyes, except in the positive controls (health rats) and negative control (untreated diabetic rats). All animals treated with INS showed an increase in the production of tear fluid. After treatment, no statistical difference was observed between the positive control and those treated with DISP INS and Gel MP INS. The INS was detected in the lacrimal gland of the animals treated with DISP MP INS, Gel INS and Gel MP INS, with the highest concentration of INS found in mice treated with Gel MP INS. After treatment there was a reduction in blood glucose of the animals treated with formulations containing INS, which suggests that developed formulations may be used as an adjuvant treatment in diabetic patients. Impression cytology studies showed that the Gel INS and Gel MP INS were able to increase the number of the corneal epithelium cells and improve nucleus/cytoplasm ratio compared to the negative control. The histology of the eyeball showed that these two formulations have improved the thickness of the corneal epithelium, which was similar to the positive controls. In conclusion, incorporation of INS in the gels and MP developed induced a positive effect in the treatment of dry eye syndrome and corneal wound.