Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Elétrica, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-09T21:40:22Z No. of bitstreams: 1 2017_LuisaSantiagoContreirasBritodaSilva.pdf: 4732963 bytes, checksum: ed2a7969fde70fe3b2349be5930d780e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-03-13T19:47:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_LuisaSantiagoContreirasBritodaSilva.pdf: 4732963 bytes, checksum: ed2a7969fde70fe3b2349be5930d780e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-13T19:47:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_LuisaSantiagoContreirasBritodaSilva.pdf: 4732963 bytes, checksum: ed2a7969fde70fe3b2349be5930d780e (MD5) Previous issue date: 2018-03-13 / Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAP-DF). / A dinâmica entre a PA e a FC é de malha fechada, na qual a PA influencia a FC através do baroreflexo e a FC influencia a PA através da dinâmica circulatória. A respiração exerce uma influência direta sobre a FC que é mediada pelo SNA, chamada de acoplamento cardiorrespiratório (ACR), e também um efeito mecânico indireto mediado pelo baroreflexo. Enquanto análises espectrais univariáveis e bivariáveis podem ser usadas para avaliar esses mecanismos, são técnicas de malha aberta que são incapazes de diferenciar efeitos de retroalimentação dos efeitos de alimentação direta e também de separar o ACR das influências indiretas da respiração na FC. Para lidar com essas limitações, uma abordagem de identificação de sistemas foi aplicada. O CRSIDLab implementa três modelos: o modelo AR com entradas exógenas (ARX), o modelo de funções de base de Laguerre (FBL) e o modelo de funções de base de Meixner (FBM). As respostas ao impulso, que caracterizam a dinâmica entre cada par de variáveis, são calculadas a partir do modelo estimado. Esses modelos são capazes de isolar o ACR ao considerar ambos VPI e PAS como entradas e conseguem abrir a malha do baroreflexo computacionalmente pela imposição de atrasos entre a PAS e o IRR, caracterizando a resposta ao impulso do baroreflexo arterial (BRA). A partir dessas análises, não só o ganho em cada banda de frequência é fornecido através da transformada de Fourier da resposta ao impulso, mas também informações temporais como o atraso entre duas variáveis. Os resultados mostram que ficar de pé é acompanhado por uma supressão vagal e tom vascular simpático aumentado. Análises de correlação mostraram que as estimativas de ASR e SBR baseadas em análises espectrais não apresentam a mesma informação que as estimativas baseadas no modelo de ACR e BRA. As diferenças encontradas sugerem que as análises baseadas em modelo são efetivas em representar o ACR como uma medida dos efeitos diretos da respiração na FC e o BRA como expressão do baroreflexo independente da dinâmica circulatória. Assim, o CRSIDLab é uma ferramenta poderosa para a determinação não-invasiva de diferentes indicadores quantitativos do SNA. Os resultados mostram que os indicadores estimados refletem a fisiologia subjacente, pois ficar de pé é um estímulo simpático que deveria levar a supressão vagal, conforme observado. Os resultados obtidos também mostram que a abordagem de modelagem de sistemas multivariáveis pode fornecer importantes informações adicionais àquelas encontradas pelas abordagens espectrais mais tradicionais, podendo levar a indicadores quantitativos mais específicos do SNA. / The autonomic nervous system (ANS) controls the involuntary functions of the body and its imbalance has been linked to increased risk of cardiac mortality. Heart rate variability (HRV) analysis is usually employed as a non-invasive method for assessing ANS modulation. Traditional measures of HRV are based on the analysis of the beat-to-beat oscillations in heart rate (or its reciprocal, the interval between consecutive R waves on the electrocardiogram - RRI), since heart rate (HR) rhythm is a consequence of sympathetic and parasympathetic activity on the sinoatrial node of the heart. However, these oscillations in beat-to-beat HR are also influenced by mechanisms, such as baroreflex and respiratory sinus arrhythmia (RSA), that affect HRV. Therefore, in this work, a multivariate analysis of the cardiorespiratory system is used. This study consists of two parts: the development of the cardiorespiratory system identification lab (CRSIDLab), a Matlab graphical user interface that provides quantitative indicators of ANS activity from a multivariate system model analysis of cardiorespiratory data, followed by its application on data obtained from subjects in supine and standing postures, illustrating its capabilities. Electrocardiogram (ECG), continuous blood pressure (BP) and airflow were recorded from 23 subjects in supine and standing postures for 10 min and preprocessed on CRSIDLab. In this work the classical HRV and BP variability (BPV) analyses were performed though power spectral density (PSD) analysis of the RRI and the systolic BP (SBP), respectively. CRSIDLab implements three methods for spectral analysis: the Fourier transform, Welch method and AR model. All methods were used to calculate the power of the low frequency (LF: 0.04-0.15 Hz) and high frequency (HF: 0.15-0.4 Hz) bands, as the areas under the PSD curve. For the HRV, the LF/HF ratio was also calculated. Traditional baroreflex sensitivity (BRS) estimates were calculated from the relation between HRV and BPV in the LF and HF regions. Spectral transfer functions were estimated between SBP and RRI, characterizing baroreflex, and between instantaneous lung volume (ILV, derived from the airflow record) and RRI, characterizing RSA, or the effects of respiration on HR, for the determination of the LF and HF gains. BRS was estimated from the gains of the transfer function between SBP and RRI.The dynamics between BP and HR are closed-loop, where BP influences HR through baroreflex and HR influences BP through circulatory dynamics. Respiration has a direct influence on HR that is mediated through the ANS, called the respiratory-cardiac coupling (RCC), and also a mechanical indirect effect mediated through baroreflex. While univariate and bivariate spectral analyses can be used to assess these effects, they are open-loop techniques that are unable to differentiate feedforward from feedback effects and also to separate RCC from the indirect effects of respiration on HR. To address these limitations a system model identification approach was applied. CRSIDLab implements three types of models: the autoregressive with exogenous inputs (ARX) model, the Laguerre basis function (LBF) model, and the Meixner basis function (MBF) model. The impulse responses, which characterize the dynamics between each pair of variables, are calculated from the estimated model. These multivariate models are able to isolate RCC by considering both SBP and ILV as system inputs and are able to computationally open the baroreflex loop through the imposition of time delays between SBP and RRI, characterizing the arterial baroreflex (ABR) impulse response. From this analysis not only the gain for each frequency band is provided from the Fourier transform of the impulse response, but also temporal information such as delays between variables. The results show that standing is accompanied by significant vagal withdrawal and increased sympathetic vascular tone. Correlation analyses showed that the spectral-based RSA and BRS estimates do not present the same information as the model-based RCC and ABR estimates. The differences found suggest the model-based analyses are effective in representing RCC as a measure of the direct effects of respiration on HR and ABR as an expression of baroreflex that is independent from circulatory dynamics. Thus, CRSIDLab is a powerful tool for the non-invasive determination of different quantitative indicators of the ANS. The results show that all estimated indicators reflect the underlying physiology, in the sense that standing is a sympathetic stimulus that should lead to vagal withdrawal, as observed. The results obtained also show that the multivariate system modeling approach can provide important additional information to those found by the more traditional spectral analyses approaches, which could potentially lead to more specific quantitative indicators of the ANS.

As plaquetas sangüíneas são fragmentos citoplasmáticos, oriundos da ruptura dos megacariócitos, cuja principal função está relacionada à manutenção da integridade vascular. Os nucleotídeos extracelulares, ATP e ADP, bem como a adenosina, têm sido implicados em um grande número de funções fisiológicas: o ADP é o principal fator recrutador de plaquetas, enquanto que o ATP é um inibidor competitivo da agregação induzida por ADP. A adenosina é uma molécula capaz de induzir vasodilatação e inibir a agregação plaquetária. Desta maneira, a manutenção da sinalização purinérgica normal tem se mostrado importante para o tratamento de doenças cardiovasculares. Os nucleosídeos di e trifosfatos circulantes podem ser hidrolisados por membros de várias famílias de ectonucleotidases de membrana e solúveis, incluindo as ecto-nucleosídeo trifosfato difosfoidrolases (E-NTPDases) e ecto-nucleotídeo pirofosfatase/fosfodiesterases (E-NPPs), que em conjunto com a ecto-5’-nucleotidase, levam à formação de adenosina. Na superfície das plaquetas, ambas enzimas, E-NTPDase e ecto-5’-nucleotidase, estão descritas. O sistema renina-angiotensina é o principal regulador da função renal e cardiovascular, desenvolvendo um papel fundamental na homeostasia da pressão arterial e do balanço eletrolítico. A angiotensina II (ANGII) induz fisiologicamente a ativação das plaquetas, possivelmente devido às suas propriedades vasoconstritoras. Os objetivos deste trabalho foram, portanto: 1) caracterizar cineticamente a enzima E-NPP em plaquetas de ratos, utilizando o substrato marcador p-Nph-5’TMP e 2) esclarecer, mesmo que em parte, os possíveis efeitos da ANGII sobre a hidrólise extracelular de nucleotídeos por plaquetas de ratos. No primeiro capítulo deste trabalho, descrevemos uma atividade enzimática em plaquetas de ratos que compartilha as principais características bioquímicas já descritas para as E-NPPs: pH ótimo alcalino; valores de KM e Vmax calculados de aproximadamente 106.22 ± 17.83 μM e 3.44 ± 0.18 nmol p-nitrophenol/min/mg, respectivamente; e dependência de cátions divalentes. Além disso, o AMP inibiu somente a hidrólise do p-Nph-5’TMP. Por outro lado, a azida de sódio, em altas concentrações, a angiotensina II e o cloreto de gadolínio alteraram apenas as hidrólises de ATP ou ADP ou de ambos. No segundo capítulo, mostramos que a ANGII foi capaz de aumentar as hidrólises de ATP, ADP e AMP em plaquetas em todas as doses testadas (5, 50, 500 e 5000 picomóis). Entretanto, nenhuma alteração foi observada com relação à hidrólise do p-Nph-5'TMP. Em adição, observamos um aumento na hidrólise de AMP e uma diminuição na hidrólise de p-Nph-5'TMP em plaquetas de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) quando comparados a ratos Wistar normotensos. De maneira geral, esta dissertação traz a caracterização bioquímica da enzima E-NPP na superfície de plaquetas intactas de ratos como sendo parte de um complexo sistema para a hidrólise de nucleotídeos nestes fragmentos citoplasmáticos, podendo, assim, contribuir para o desenvolvimento de terapias antiplaquetárias e para o tratamento de doenças vasculares. Adicionalmente, apresentamos alguns resultados demonstrando interações entre os sistemas angiotensinérgico e adenosinérgico de plaquetas de ratos, o que poderá contribuir para o entendimento e o tratamento de doenças cardiovasculares como hipertensão e arteriosclerose. / Platelets are cytoplasmic fragments derived from bone marrow megakaryocytes rupture, whose major role is related to the vascular integrity maintenance. The extracellular nucleotides ATP and ADP as well as adenosine have been implicated in a great number of physiological functions: ADP is the major factor recruiting platelet, whereas ATP has been considered as a competitive inhibitor of ADP-induced platelet aggregation. Adenosine is a molecule able to induce vasodilatation and to inhibit platelet aggregation. Thus, the maintenance of normal purinergic signalling has been showed as an important issue for the treatment of cardiovascular diseases. The nucleoside di and triphosphate can be hydrolyzed by members of several families of membrane-bound or soluble ectonucleotidases, including ecto-nucleoside triphosphate diphosphohydrolases (E-NTPDases) and ecto-nucleotide pyrophosphatase/ phosphodiesterases (E-NPPs), that together with an ecto-5’-nucleotidase lead to adenosine formation. On the platelets ecto-surface, both E-NTPDase and ecto-5’-nucleotidase are already described. The renin-angiotensin system is the most important regulator of renal and cardiovascular function developing a fundamental role in the arterial blood pressure homeostasis and in the electrolytic balance. Angiotensin II (ANGII) induces physiologically the platelet activation, probably due to its vasoconstrictors properties. The aims of this study were: 1) to kinetically characterize the enzyme E-NPP from rat blood platelet, using the artificial marker substrate p-Nph-5’TMP and 2) to clarify, even though in part, the effects of ANGII upon extracellular nucleotide hydrolysis by rat platelets ectoenzymes. In the first chapter, we describe an enzymatic activity that shares the major characteristics already described for E-NPPs: optimum alkaline pH; KM and Vmax calculated values of approximately 106.22 ± 17.83 μM and 3.44 ± 0.18 nmol p-nitrophenol/min/mg, respectively; and divalent cation dependence. Besides, AMP inhibited only p-Nph-5’TMP hydrolysis. On the other hand, sodium azide, in high concentrations, ANGII and gadolinium chloride just changed ATP or ADP or both hydrolysis. In the second chapter, we show that ANGII was able to increase ATP, ADP and AMP hydrolysis in platelets from rats in all tested dosis (5, 50, 500 e 5000 picomoles). However, no modification was observed regarding p-Nph-5'TMP hydrolysis. Additionally, we verified an increase on AMP hydrolysis and a reduction on p-Nph-5'TMP hydrolysis in platelets from spontaneously hypertensive rats (SHR) when compared to Wistar normotensive rats. Finally, this work shows the kinetic and biochemistry characterization of an E-NPP enzyme on the intact platelet surface as being part of a complex system for nucleotide hydrolysis that could contribute for the antiplatelet therapies and vascular diseases treatment. In addition, we present some results showing interactions between rat platelet angiotensinergic and adenosinergic systems that could contribute to the understanding and treatment of cardiovascular diseases such as hypertension and atherosclerosis.

El problema que aflige a muchas pequeñas y medianas empresas que producen bienes y servicios de elementos de la industria automotriz y minera es la disminución y variaciones constantes de sus costos de mantenimiento. Muchos de ellos han quebrado debido a su incompetencia, falta de operaciones y desorganización en sus funciones logísticas. Lo que conduce a los altos costos de mantenimiento y deterioro de la maquinaria. Debido a esta necesidad, cada vez que se crea el interés para investigar nuevos modelos de gestión del Sistema de Producción en el área de Mantenimiento. De ahí el uso de herramientas que generen una optimización dentro de la línea de producción, ya que permite impulsar el crecimiento sostenido de la empresa y revertir los problemas con el uso de sus técnicas de Gestión de Calidad.

Produtos naturais derivados de planta têm contribuído enormemente para o desenvolvimento de drogas terapêuticas. Poligodial e drimanial são sesquiterpenos isolados da casca de Drymis winteri (Winteraceae), que apresenta propriedades antinociceptivas. O glutamato periférico possui ações nociceptivas; assim, neste estudo investigamos os efeitos destes compostos em vários parâmetros do sistema glutamatérgico de cérebro de ratos e camundongos. O poligodial, in vitro, inibiu significativamente a união do glutamato aos seus receptores, a captação de glutamato em céluas de astrocitos, assim como a captação de glutamato por fatias de córtex, hipocampo e estriado de cérebro de ratos, e estimulou a liberação de glutamato em preparações de sinaptossomas.O drimanial, in vitro, inibiu significativamente a união do glutamato aos seus receptores, a captação de glutamato em células de astrocitos e em preparações de vesículas sinápticas, assim como a captação de glutamato por fatias de córtex, hipocampo e estriado de cérebro de ratos, e estimulou a liberação de glutamato em preparações de sinaptossomas. Quando efetuamos experimentos, in vivo, em camundongos injetados i.p., observamos que a captação de glutamato por fatias de hipocampo e estriado foi inibida por ambos (poligodial e drimanial) enquanto em fatias de córtex não tiveram efeito. Estes resultados demonstram que há uma possibilidade destes dois compostos aumentarem as concentrações extracelulares de glutamato, apontando para um possível efeito neurotóxico, o que sugere cautela com suas utilizações terapêuticas. / Natural products including those derived from plants, have over the years greatly contributed to the development of therapeutic drugs. Polygodial and drimanial are sesquiterpenes isolated from the bark of the plant Drymis Winteri (Winteraceae) that exhibit antinociceptive properties. Since peripheral glutamate presents nociceptive actions, in this study it was investigated the effects of these compounds on the glutamatergic system in rat brain and mice. Polygodial in vitro inhibited glutamate binding, glutamate uptake by astrocytes, as well as by cortical, hippocampal and striatal slices, and increased synaptosomal glutamate release. The drimanial in vitro inhibited glutamate binding, glutamate uptake by astrocytes, synaptic vesicles, as well as by cortical, hippocampal and striatal slices, and increased synaptosomal glutamate release.When injected intraperitoneally in adult male mice, we observed that both polygodial and drimanial inhibited the glutamate uptake in slices from hippocampus and striatum, and did not affects glutamate uptake by cortical slices. These concurrent effects would predispose to an increase in the extracellular glutamate concentrations, leading to possible neurotoxic effects (excitotoxicity) of these natural compounds, which would suggest the need for some caution in their therapeutic application.

As plaquetas sangüíneas são fragmentos citoplasmáticos, oriundos da ruptura dos megacariócitos, cuja principal função está relacionada à manutenção da integridade vascular. Os nucleotídeos extracelulares, ATP e ADP, bem como a adenosina, têm sido implicados em um grande número de funções fisiológicas: o ADP é o principal fator recrutador de plaquetas, enquanto que o ATP é um inibidor competitivo da agregação induzida por ADP. A adenosina é uma molécula capaz de induzir vasodilatação e inibir a agregação plaquetária. Desta maneira, a manutenção da sinalização purinérgica normal tem se mostrado importante para o tratamento de doenças cardiovasculares. Os nucleosídeos di e trifosfatos circulantes podem ser hidrolisados por membros de várias famílias de ectonucleotidases de membrana e solúveis, incluindo as ecto-nucleosídeo trifosfato difosfoidrolases (E-NTPDases) e ecto-nucleotídeo pirofosfatase/fosfodiesterases (E-NPPs), que em conjunto com a ecto-5’-nucleotidase, levam à formação de adenosina. Na superfície das plaquetas, ambas enzimas, E-NTPDase e ecto-5’-nucleotidase, estão descritas. O sistema renina-angiotensina é o principal regulador da função renal e cardiovascular, desenvolvendo um papel fundamental na homeostasia da pressão arterial e do balanço eletrolítico. A angiotensina II (ANGII) induz fisiologicamente a ativação das plaquetas, possivelmente devido às suas propriedades vasoconstritoras. Os objetivos deste trabalho foram, portanto: 1) caracterizar cineticamente a enzima E-NPP em plaquetas de ratos, utilizando o substrato marcador p-Nph-5’TMP e 2) esclarecer, mesmo que em parte, os possíveis efeitos da ANGII sobre a hidrólise extracelular de nucleotídeos por plaquetas de ratos. No primeiro capítulo deste trabalho, descrevemos uma atividade enzimática em plaquetas de ratos que compartilha as principais características bioquímicas já descritas para as E-NPPs: pH ótimo alcalino; valores de KM e Vmax calculados de aproximadamente 106.22 ± 17.83 μM e 3.44 ± 0.18 nmol p-nitrophenol/min/mg, respectivamente; e dependência de cátions divalentes. Além disso, o AMP inibiu somente a hidrólise do p-Nph-5’TMP. Por outro lado, a azida de sódio, em altas concentrações, a angiotensina II e o cloreto de gadolínio alteraram apenas as hidrólises de ATP ou ADP ou de ambos. No segundo capítulo, mostramos que a ANGII foi capaz de aumentar as hidrólises de ATP, ADP e AMP em plaquetas em todas as doses testadas (5, 50, 500 e 5000 picomóis). Entretanto, nenhuma alteração foi observada com relação à hidrólise do p-Nph-5'TMP. Em adição, observamos um aumento na hidrólise de AMP e uma diminuição na hidrólise de p-Nph-5'TMP em plaquetas de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) quando comparados a ratos Wistar normotensos. De maneira geral, esta dissertação traz a caracterização bioquímica da enzima E-NPP na superfície de plaquetas intactas de ratos como sendo parte de um complexo sistema para a hidrólise de nucleotídeos nestes fragmentos citoplasmáticos, podendo, assim, contribuir para o desenvolvimento de terapias antiplaquetárias e para o tratamento de doenças vasculares. Adicionalmente, apresentamos alguns resultados demonstrando interações entre os sistemas angiotensinérgico e adenosinérgico de plaquetas de ratos, o que poderá contribuir para o entendimento e o tratamento de doenças cardiovasculares como hipertensão e arteriosclerose. / Platelets are cytoplasmic fragments derived from bone marrow megakaryocytes rupture, whose major role is related to the vascular integrity maintenance. The extracellular nucleotides ATP and ADP as well as adenosine have been implicated in a great number of physiological functions: ADP is the major factor recruiting platelet, whereas ATP has been considered as a competitive inhibitor of ADP-induced platelet aggregation. Adenosine is a molecule able to induce vasodilatation and to inhibit platelet aggregation. Thus, the maintenance of normal purinergic signalling has been showed as an important issue for the treatment of cardiovascular diseases. The nucleoside di and triphosphate can be hydrolyzed by members of several families of membrane-bound or soluble ectonucleotidases, including ecto-nucleoside triphosphate diphosphohydrolases (E-NTPDases) and ecto-nucleotide pyrophosphatase/ phosphodiesterases (E-NPPs), that together with an ecto-5’-nucleotidase lead to adenosine formation. On the platelets ecto-surface, both E-NTPDase and ecto-5’-nucleotidase are already described. The renin-angiotensin system is the most important regulator of renal and cardiovascular function developing a fundamental role in the arterial blood pressure homeostasis and in the electrolytic balance. Angiotensin II (ANGII) induces physiologically the platelet activation, probably due to its vasoconstrictors properties. The aims of this study were: 1) to kinetically characterize the enzyme E-NPP from rat blood platelet, using the artificial marker substrate p-Nph-5’TMP and 2) to clarify, even though in part, the effects of ANGII upon extracellular nucleotide hydrolysis by rat platelets ectoenzymes. In the first chapter, we describe an enzymatic activity that shares the major characteristics already described for E-NPPs: optimum alkaline pH; KM and Vmax calculated values of approximately 106.22 ± 17.83 μM and 3.44 ± 0.18 nmol p-nitrophenol/min/mg, respectively; and divalent cation dependence. Besides, AMP inhibited only p-Nph-5’TMP hydrolysis. On the other hand, sodium azide, in high concentrations, ANGII and gadolinium chloride just changed ATP or ADP or both hydrolysis. In the second chapter, we show that ANGII was able to increase ATP, ADP and AMP hydrolysis in platelets from rats in all tested dosis (5, 50, 500 e 5000 picomoles). However, no modification was observed regarding p-Nph-5'TMP hydrolysis. Additionally, we verified an increase on AMP hydrolysis and a reduction on p-Nph-5'TMP hydrolysis in platelets from spontaneously hypertensive rats (SHR) when compared to Wistar normotensive rats. Finally, this work shows the kinetic and biochemistry characterization of an E-NPP enzyme on the intact platelet surface as being part of a complex system for nucleotide hydrolysis that could contribute for the antiplatelet therapies and vascular diseases treatment. In addition, we present some results showing interactions between rat platelet angiotensinergic and adenosinergic systems that could contribute to the understanding and treatment of cardiovascular diseases such as hypertension and atherosclerosis.

Produtos naturais derivados de planta têm contribuído enormemente para o desenvolvimento de drogas terapêuticas. Poligodial e drimanial são sesquiterpenos isolados da casca de Drymis winteri (Winteraceae), que apresenta propriedades antinociceptivas. O glutamato periférico possui ações nociceptivas; assim, neste estudo investigamos os efeitos destes compostos em vários parâmetros do sistema glutamatérgico de cérebro de ratos e camundongos. O poligodial, in vitro, inibiu significativamente a união do glutamato aos seus receptores, a captação de glutamato em céluas de astrocitos, assim como a captação de glutamato por fatias de córtex, hipocampo e estriado de cérebro de ratos, e estimulou a liberação de glutamato em preparações de sinaptossomas.O drimanial, in vitro, inibiu significativamente a união do glutamato aos seus receptores, a captação de glutamato em células de astrocitos e em preparações de vesículas sinápticas, assim como a captação de glutamato por fatias de córtex, hipocampo e estriado de cérebro de ratos, e estimulou a liberação de glutamato em preparações de sinaptossomas. Quando efetuamos experimentos, in vivo, em camundongos injetados i.p., observamos que a captação de glutamato por fatias de hipocampo e estriado foi inibida por ambos (poligodial e drimanial) enquanto em fatias de córtex não tiveram efeito. Estes resultados demonstram que há uma possibilidade destes dois compostos aumentarem as concentrações extracelulares de glutamato, apontando para um possível efeito neurotóxico, o que sugere cautela com suas utilizações terapêuticas. / Natural products including those derived from plants, have over the years greatly contributed to the development of therapeutic drugs. Polygodial and drimanial are sesquiterpenes isolated from the bark of the plant Drymis Winteri (Winteraceae) that exhibit antinociceptive properties. Since peripheral glutamate presents nociceptive actions, in this study it was investigated the effects of these compounds on the glutamatergic system in rat brain and mice. Polygodial in vitro inhibited glutamate binding, glutamate uptake by astrocytes, as well as by cortical, hippocampal and striatal slices, and increased synaptosomal glutamate release. The drimanial in vitro inhibited glutamate binding, glutamate uptake by astrocytes, synaptic vesicles, as well as by cortical, hippocampal and striatal slices, and increased synaptosomal glutamate release.When injected intraperitoneally in adult male mice, we observed that both polygodial and drimanial inhibited the glutamate uptake in slices from hippocampus and striatum, and did not affects glutamate uptake by cortical slices. These concurrent effects would predispose to an increase in the extracellular glutamate concentrations, leading to possible neurotoxic effects (excitotoxicity) of these natural compounds, which would suggest the need for some caution in their therapeutic application.

Orientador: Lourenço Gallo Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T13:25:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maraes_VeraReginaFernandesdaSilva_M.pdf: 9466045 bytes, checksum: e4e2f54651e731c4699c9c53addf4d01 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O presente estudo tem como objetivo estudar a resposta da freqüência cardíaca durante o repouso, a manobra de Valsalva e determinar os padrões da variabilidade da freqüência cardíaca (VFC), nos domínios do tempo e da freqüência, durante a execução de exercício físico dinâmico de intensidades progressivas crescentes e alternadas, em voluntários sadios.Foram estudados 21 (vinte e um) voluntários considerados normais, do sexo masculino, com padrão ativo de vida; destes, dez eram pessoas jovens (J),com idades compreendidas entre 20 e 24 anos (mediana = 22,5) e onze outros eram pessoas de meia-idade (MI), com idades compreendidas entre 40 e 46 anos (mediana = 43). Os voluntários foram submetidos a: a) condição controle de repouso, nas posições supina e sentada; b) manobra de Valsalva (MV); c) Protocolo I: Teste de esforço físico dinâmico descontínuo (TEFDD) com potências progressivas: potência inicial de 25 Watts 0N) e incrementos de 10 em 10 W; d) Protocolo 11:TEFDO com potências alternadas; e) Protocolo 111:TEFDD com potência progressivas com medidas metabólicas: repetiu-se o protocolo I, utilizando-se a análise das variáveis ventilatórias; f) Protocolo IV: teste de esforço físico dinâmico contínuo em rampa, com medidas metabólicas: incrementos contínuos de 10 W a cada minuto, até a exaustão física. Antes de cada protocolo experimental os voluntários permaneceram por 15 minutos na condição de repouso supina e sentada. Os protocolos de TEFDD foram realizados em bicicleta de frenagem eletromagnética na posição sentada, e durante todos os protocolos experimentais a FC foi registrada e armazenada, batimento a batimento, em tempo real. A análise no domínio do tempo constou de: ajustes dos modelos autorregressivos-integrados-médias móveis (AR 1MA) para verificar o LA através da variabilidade da FC (protocolos I, 11, 111), cálculos dos índices de variabilidade (RMSM e RMSSD) dos intervalos RR (IRR) obtidos durante o repouso e durante potências dos TEFDD (protocolo I), cálculos dos deltas e índices de Valsalva. Por outro lado, para a análise no domínio da freqüência utilizou-se a transformada rápida de Fourier (TRF). Os resultados na condição de repouso mostram que os valores absolutos da FC são maiores na postura sentada comparativamente à postura supina para ambos os grupos (P<0,05); existe uma maior VFC no grupo J (P<0,05); e que as áreas de AF são maiores nos voluntários J comparativamente aos voluntários de MI. Os resultados dos TEFD, mostram que as potências de esforço físico expressas em mediana nas quais ocorreu o LA foram similares para o grupo J, onde o LA ocorreu em 75 e 85 W e para o grupo de MI em 60 e 75 W nos protocolos 1e 11(P>0,05), respectivamente; os índices espectrais não mostram diferenças estatisticamente significantes nas potências de esforço físico e entre os grupos estudados (P>0,05). Os resultados obtidos a partir da FC durante a MV sugerem que o índice de Valsava expressa melhor as diferenças de respostas entre os grupos estudados do que deltas (incrementos), uma vez que os valores (medianas) dos índices de Valsalva calculados com os dados de FC (J = 2,01 e MI = 1,75) e com os IRR (J= 2 e MI = 1,70) foram estatisticamente diferentes (P< 0,05). Os nossos resultados suportam a idéia de que os voluntários de MI possuem: 1) menor VFC (repouso, TEFDD) e menor resposta reflexa à MV, o que reflete uma diminuição da atividade parassimpática atuante sobre o nódulo sinoatrial e 2) menor nível do LA, expresso em potência, comparativamente aos voluntários J, refletindo uma menor capaci- dade aeróbia em tais voluntários. O método ARIMA mostrou um melhor ajuste ao conjunto de dados em relação a regressão linear (método dos mínimos quadrados) e a transformada rápida de Fourier, no que diz respeito à mudança do padrão de VFC, que expressa o limiar de anaerobiose / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

La esclerosis múltiple es una en enfermedad neurodegenerativa, progresiva e inflamatoria del sistema nervioso central, en la cual interaccionan dos entidades clínicas: la inflamación y la neurodegeneración. Esto implica la alteración de capacidades motoras, sensoriales y de coordinación. El sistema visual, por su amplia implicación neurológica, es una de las capacidades más afectadas en el transcurso de la enfermedad. Cuadros clínicos característicos como la neuritis óptica o la oftalmoplejía internuclear han sido ampliamente estudiados por su alta prevalencia. Otras alteraciones como el adelgazamiento de las diferentes capas retinianas, la reducción de la sensibilidad al contraste o la aparición de nistagmo también han sido sobradamente informadas. En cambio, la función binocular no ha sido objeto de tan exhaustivo estudio, probablemente por la porque la sintomatología asociada a un problema binocular no se manifiesta de forma tan grave o incapacitante como en otras capacidades motoras, sensoriales y/o de coordinación. O porque, anomalías en la visión binocular son sutiles y podrían estar enmascaradas porque se evita la realización de tareas visuales como la lectura. Por este motivo, la presente tesis ha fijado como objetivo caracterizar la binocularidad y oculomotricidad mediante la valoración de la capacidad vergencial, las sacadas, la fijación, la sensibilidad macular y la estereopsis. Se han detectado alteraciones en algunas funciones oculomotoras como la fijación en pacientes con EM, describiendo una mayor inestabilidad con un patrón elipsoidal vertical. Pero este hallazgo no se traduce en una alteración de las sacadas verticales, de hecho, son las horizontales las que presentan mayor dificultad para estos pacientes. Además de esto, los pacientes con EM ven reducida la estereopsis y la capacidad de divergir. Y aunque presentan síntomas que podrían ser compatibles con alteraciones binoculares como la insuficiencia de convergencia, los signos clínicos no caracterizan tal afectación. Así pues, la afectación binocular y oculomotora en pacientes con EM es extensa y presenta una gran variabilidad intra-sujeto, al igual que ocurre en el transcurso mismo de la enfermedad a nivel sistémico.

Trabajo de suficiencia profesional / La presente investigación se desarrolló, porque consideramos de suma importancia analizar la modificación de la Ley del Impuesto a la Renta sobre los pagos a cuenta para conocer los efectos financieros, contables y tributarios en los principales contribuyentes de la ciudad de Chiclayo durante el ejercicio 2013 en relación al cambio normativo realizado a partir de la dación del Decreto Legislativo No. 1120. La investigación se realizó mediante el método descriptivo analítico-no experimental; el desarrollo se logró con el uso de encuesta por cuestionario dirigido a los principales contribuyentes con el fin de obtener información sobre los efectos que trae la modificación de la ley del Impuesto a la Renta y los pagos a cuenta; siendo respaldada por los aportes de las teorías de la renta, teoría del flujo de riqueza, teoría de la tributación, teoría de la disuasión y la teoría de Eheberg. Luego de analizar e interpretar la información obtenida, se determinó que las modificaciones efectuadas para el cálculo de los pagos a cuenta del Impuesto a la Renta de tercera categoría de agosto a diciembre 2012; originaron al principio desconcierto en un porcentaje importante de los principales contribuyentes de la Intendencia Regional Lambayeque; como siempre ocurre con la dación de una nueva norma. Sin embargo, con el transcurrir del tiempo por la dación de las normas tributarias posteriores referidas al tema investigado; las empresas tienen un cabal conocimiento sobre la aplicación de los pagos a cuenta del Impuesto a la Renta. Para tales deficiencias encontradas se recomendó que todo cambio normativo tributario que signifique una afectación a la operatividad empresarial respecto a su liquidez, debe ser difundida con anticipación a todos los contribuyentes; para evitar desconcierto e inseguridad jurídica; también el ente administrador del tributo puede consignar en un link especial en su página web en el que oportunamente incluya casos prácticos y preguntas frecuentes sobre cambios normativos de relevancia y se debe fomentar en los colegios de contadores públicos del país, el uso de programas de declaración telemática y jornadas contables con efecto tributario sobre cambios importantes normativos de la tributación porque tiene mucha connotación para el correcto registro y la oportuna declaración jurada.

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