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Diagnóstico morfológico e molecular de Haemonchus spp. em bovinos e ovinos /Silva, Maria Regina Lucas da. January 2014 (has links)
Orientador: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Kátia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Lucia Helena O'Dwyer de Oliveira / Resumo: Infecções por nematódeos gastrintestinais causam consideráveis perdas na pecuária. Haemonchus spp. é o principal nematódeo que acometem bovinos e ovinos principalmente em regiões tropicais e subtropicais. Portanto este estudo teve por objetivo avaliar metodologias de diagnóstico baseado em analises morfológicas e moleculares de larvas infectantes e adultos de Haemonchus spp. Foram utilizados 23 bezerros e 20 cordeiros naturalmente infectados por nematódeos gastrintestinais. Antes da necropsia dos animais, fezes foram coletadas para realização de coproculturas e obtenção de larvas infectantes, que foram morfometricamente analisadas. Logo após o sacrifício dos animais, os abomasos foram removidos e congelados, para posterior recuperação dos exemplares de Haemonchus spp. que foram armazenados em álcool 70º. No caso dos ovinos, os parasitas permaneceram estocados em alcool 70º por mais de um ano antes de serem analisados, enquanto que os parasitas dos bovinos foram armazenados por apenas quatro meses. O diagnóstico morfológico dos Haemonchus machos foi realizado por meio da análise de sínlofe e mensuração de espículos. Os mesmos parasitas utilizados na análise morfológica foram submetidos à análise molecular, com utilização da PCR, com os primers 52/154, 75/86 e Hplacbotu. A técnica padrão ouro para identificação de Haemonchus similis foi análise de espículos e para Haemonchus placei foi PCR com os primes HplacBotu. Todas as amostras de ovinos foram consideradas como sendo de Haemonchus contortus, devido à especificidade parasitária e nenhuma evidencia de outras espécies de Haemonchus nas análises moleculares. Os resultados demonstraram diferença estatística no comprimento da distância entre o final da L3 e o final da bainha das larvas infectantes das três espécies. Houve sobreposição de medidas de apenas 1,26% entre as espécies H. placei e H. contortus. Na análises moleculares o par ... / Abstract: Nematodes gastrointestinal infection causes considerable losses in the livestock industry. Haemonchus spp. is major nematode that affects cattle and sheep mainly in tropical and subtropical region. Therefore, the aim of the present study was to assess diagnosis methodologies based in morphological and molecular analysis of infective larvae and adults of Haemonchus spp. Twenty-three calves and twenty lambs naturally infected with gastrointestinal nematodes were utilized. Before necropsy of animals, faecal samples were collated for preparing faecal cultures and obtaining infective larvae that were morphometrically analyzed. After the euthanasia of animals the abomasums were removed and frozen for posterior recovered Haemonchus specimens that were stored in alcohol 70º. In the case sheep, the parasites remained stored in alcohol 70º for more than one year before be analyzed, while the parasites of cattle were stored for only four months. The morphological diagnosis of males Haemonchus spp. was released by synlophe analysis and spicule measurements. The same parasites used in the morphological analysis were submitted in the molecular analysis, using PCR, with primers 52/159, 75/86 and HplacBotu. The "gold standard" method used to identify Haemonchus similis was spicules analysis and to identify Haemonchus placei was PCR with the primers HplacBotu. All Haemonchus specimens recovered from sheep were assumed to be Haemonchus contortus based on host specificity, and because the molecular analysis did not show any evidence of other Haemonchus species. The results presented statistic differences in the sheath tail length of infective larvae of three species. There was overlapping of measurements was only 1.26% between H.contortus and H. placei. In the espicule analysis also were observed same overlapping of measurements that caused misidentification of H. placei and H. contortus. In relation the synlophe most samples ... / Mestre
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Epidemiologia das infecções por nematódeos gatrintestinais em ovinos criados em BotucatuWilmsen, Maurício Orlando [UNESP] 27 February 2014 (has links) (PDF)
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000783736.pdf: 2035792 bytes, checksum: 625352f737e5067d881064a582a375aa (MD5) / A epidemiologia das infecções por nematódeos gastrintestinais foi avaliada em ovinos criados em Botucatu - SP. A partir de abril de 2008 até março de 2011, dois cordeiros traçadores foram expostos à infecção natural por nematódeos gastrintestinais durante 28 dias consecutivos, ao pastejar junto com um rebanho de ovelhas. Haemonchus contortus apresentou as maiores intensidades de infecção com prevalência de 100%. Não houve influência significativa das estações do ano na intensidade de infecção por H. contortus. Trichostrongylus colubriformis também apresentou prevalência de 100% com a intensidade de infecção menor durante os meses de verão. No caso de T. colubriformis, houve correlação significativa entre as contagens de vermes x precipitação (r = -0,32; P < 0,05). Outras três espécies de nematódeos foram verificadas, no entanto, em pequenas quantidades, prevalências e intensidades de infecção: Oesophagostomum columbianum 28% (25,2), Cooperia curticei 7% (4,5) e Trichuris spp. 2 % (1). Contudo, as condições ambientais da área foram favoráveis durante todo o ano para a transmissão de H. contortus e T. colubriformis. Este fato explica parcialmente o fracasso de programas governamentais e privados realizados no intuito de promover a ovinocultura no Estado, devido a taxas elevadas de mortalidade e baixa produtividade causada pela verminose / The epidemiology of gastrointestinal nematode infections was evaluated in sheep raised in Botucatu – SP. Every month, from April 2008 until March 2011, two tracer lambs were exposed to natural infection with gastrointestinal nematodes for 28 consecutive days, while grazing together with a sheep flock. Haemonchus contortus presented the highest infection intensities with 100% prevalence. There was no significant influence of the seasons in H. contortus infection intensity. Trichostrongylus colubriformis also presented 100% prevalence with the lowest infection intensity during the summer months. In the case of T. colubriformis, there was significant correlation coefficient between worm counts x precipitation (r = -0.32; P < 0.05). Other three nematodes species were found in tracer lambs, however, in small numbers. Their prevalence and mean intensity of infection (in parenthesis) were the following: Oesophagostomum columbianum 28% (25.2), Cooperia curticei 7% (4.5) and Trichuris spp. 2% (1). In conclusion, the environmental conditions of the area were very favourable for H. contortus and T. colubriformis transmission all year round. These explain in part the failure of private and governmental programs to promote the sheep breeding activity in São Paulo State due to high sheep mortality rates and low productivity caused by gastrointestinal nematode infections
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Epidemiologia das infecções por nematódeos gatrintestinais em ovinos criados em Botucatu /Wilmsen, Maurício Orlando. January 2014 (has links)
Orientador: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Raimundo de Souza Lopes / Banca: Fernanda Rosalinski Moraes / Resumo: A epidemiologia das infecções por nematódeos gastrintestinais foi avaliada em ovinos criados em Botucatu - SP. A partir de abril de 2008 até março de 2011, dois cordeiros traçadores foram expostos à infecção natural por nematódeos gastrintestinais durante 28 dias consecutivos, ao pastejar junto com um rebanho de ovelhas. Haemonchus contortus apresentou as maiores intensidades de infecção com prevalência de 100%. Não houve influência significativa das estações do ano na intensidade de infecção por H. contortus. Trichostrongylus colubriformis também apresentou prevalência de 100% com a intensidade de infecção menor durante os meses de verão. No caso de T. colubriformis, houve correlação significativa entre as contagens de vermes x precipitação (r = -0,32; P < 0,05). Outras três espécies de nematódeos foram verificadas, no entanto, em pequenas quantidades, prevalências e intensidades de infecção: Oesophagostomum columbianum 28% (25,2), Cooperia curticei 7% (4,5) e Trichuris spp. 2 % (1). Contudo, as condições ambientais da área foram favoráveis durante todo o ano para a transmissão de H. contortus e T. colubriformis. Este fato explica parcialmente o fracasso de programas governamentais e privados realizados no intuito de promover a ovinocultura no Estado, devido a taxas elevadas de mortalidade e baixa produtividade causada pela verminose / Abstract: The epidemiology of gastrointestinal nematode infections was evaluated in sheep raised in Botucatu - SP. Every month, from April 2008 until March 2011, two tracer lambs were exposed to natural infection with gastrointestinal nematodes for 28 consecutive days, while grazing together with a sheep flock. Haemonchus contortus presented the highest infection intensities with 100% prevalence. There was no significant influence of the seasons in H. contortus infection intensity. Trichostrongylus colubriformis also presented 100% prevalence with the lowest infection intensity during the summer months. In the case of T. colubriformis, there was significant correlation coefficient between worm counts x precipitation (r = -0.32; P < 0.05). Other three nematodes species were found in tracer lambs, however, in small numbers. Their prevalence and mean intensity of infection (in parenthesis) were the following: Oesophagostomum columbianum 28% (25.2), Cooperia curticei 7% (4.5) and Trichuris spp. 2% (1). In conclusion, the environmental conditions of the area were very favourable for H. contortus and T. colubriformis transmission all year round. These explain in part the failure of private and governmental programs to promote the sheep breeding activity in São Paulo State due to high sheep mortality rates and low productivity caused by gastrointestinal nematode infections / Mestre
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Atividade gastroprotetora do óleo essencial de Citrus lemon (Rutaceae), de seus componentes principais Limoneno e β-pineno e do óleo essencial de Croton cajucara (Euphorbiaceae)Rozza, Ariane Leite [UNESP] 30 April 2009 (has links) (PDF)
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rozza_al_me_botib.pdf: 637817 bytes, checksum: 8ebe24dd454c0104e96eebe3786bda97 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente trabalho teve como objetivos testar a atividade gastroprotetora de úlceras gástricas e mecanismos de ação do óleo essencial de Croton cajucara (CC), do óleo essencial de Citrus lemon (CL) e dos constituintes majoritários de CL, que são o Limoneno (L) e o β- pineno (P). Assim, foram realizados modelos de indução de úlcera gástrica por etanol absoluto para CL, L, P e CC e por droga anti-inflamatória não esteroidal (Indometacina) para CL, L e P. Todos os resultados foram expressos em média epm (p<0.05). No modelo de indução de úlceras por etanol absoluto, a área das lesões (mm2) foi 0.00 0.00** para CL, L e CC (100% de gastroproteção), 73.20 27.32 para P, que não exerceu efetiva gastroproteção (53.26%), 22.27 8.21** para o controle positivo (85.80%) e 156.60 36.30 para o veículo. O escore microscópico indicou excelente preservação da mucosa por CL**, L*** e CC***. A área de marcação imunoistoquímica para heat shock protein 70 foi estatisticamente maior nos grupos CL, L, P e CC e para peptídeo intestinal vasoativo foi maior nos grupos CL, L e P. Os níveis de glutationa (GSH, em μg/ml) foram 1182.00 52.47** para CL, 1316.6 67.75** para L, 1286.5 93.15* para CC, 1195.60 37.57** para o controle positivo, 982.8 79.07** para o veículo e 1704.30 ± 149.03 para o grupo branco. Na indução de úlcera por Indometacina, CL exerceu gastroproteção de 98.3% com área de lesão (mm2) 0.85 ± 0.85**, L exerceu gastroproteção de 50.1% (área lesada 24.34 ± 5.3**), P não exerceu efetivo efeito gastroprotetor (37%) com área lesada 30.66 ± 4.22, contra 66.6% de gastroproteção e 16.27 ± 4.49** para o controle positivo e 48.72 ± 6.64 de área lesada para o veículo. CL administrado isoladamente manteve os níveis gástricos de PGE2 (em ng/ml) em 18,25 ± 2,58, mesmo com a administração em conjunto com... / This study aimed to test the gastroprotective activity and the mechanism of action of the essential oil of Croton cajucara (CC), the essential oil of Citrus lemon (CL) and the majoritary substances present in CL, wich are Limonene (L) and β-pinene (P). Then, gastric ulcers in rats were induced by absolute ethanol after oral treatment with CL, L, P and CC and by indometacin (non-steroidal anti-inflamatory drug) after oral treatment with CL, L and P. All results were expressed in mean standard error mean (p<0.05). In ethanol-induced gastric ulcer, the ulcer area (mm²) were 0.00 0.00** for CL, L and CC (100% of gastroprotection), 73.20 27.32 for P (53.26% of the ulcer area was reduced, however there was no effective gastroprotection), 22.27 8.21** for the positive control (85.80%) and 165.60 36.30 for the vehicle. The microscopic score showed gastric mucosa was preserved in CL**, L*** and CC***. The marked area for heat shock protein 70 (HSP-70) and vasoactive intestinal peptide (VIP) immunohistochemistries were statistically augmented in CL, L and P groups. The levels of glutathione (GSH, μg/ml) were 1182.00 52.47** for CL, 1316.6 67.75** for L, 1286.5 93.15* for CC, 1195.60 37.57** for the positive control, 982.8 79.07** for the vehicle and 1704.30 ± 149.03 for the sham group. In the indomethacin-induced gastric ulcer, CL offered 98.3% gastroprotection (ulcer area 0.85 ± 0.85**), L offered 50.1% gastroprotection (ulcer area 24.34 ± 5.3**), P did not show gastroprotective effect (37%) and presented ulcer area 30.66 ± 4.22. The positive control offered 66.6% gastroprotection (ulcer area 16.27 ± 4.49**) and the vehicle presented ulcer area 48.72 ± 6.64. CL was able to maintain the PGE2 levels (ng/ml) 18.25 ± 2.58 near to sham group (21.14 ± 1.14), even with indomethacin (PGE2 inhibitor) administration (17.89 ± 1.55), compared with ... (Complete abstract click electronic access below)
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Atividade gastroprotetora do óleo essencial de Citrus lemon (Rutaceae), de seus componentes principais Limoneno e β-pineno e do óleo essencial de Croton cajucara (Euphorbiaceae) /Rozza, Ariane Leite. January 2009 (has links)
Resumo: O presente trabalho teve como objetivos testar a atividade gastroprotetora de úlceras gástricas e mecanismos de ação do óleo essencial de Croton cajucara (CC), do óleo essencial de Citrus lemon (CL) e dos constituintes majoritários de CL, que são o Limoneno (L) e o β- pineno (P). Assim, foram realizados modelos de indução de úlcera gástrica por etanol absoluto para CL, L, P e CC e por droga anti-inflamatória não esteroidal (Indometacina) para CL, L e P. Todos os resultados foram expressos em média epm (p<0.05). No modelo de indução de úlceras por etanol absoluto, a área das lesões (mm2) foi 0.00 0.00** para CL, L e CC (100% de gastroproteção), 73.20 27.32 para P, que não exerceu efetiva gastroproteção (53.26%), 22.27 8.21** para o controle positivo (85.80%) e 156.60 36.30 para o veículo. O escore microscópico indicou excelente preservação da mucosa por CL**, L*** e CC***. A área de marcação imunoistoquímica para heat shock protein 70 foi estatisticamente maior nos grupos CL, L, P e CC e para peptídeo intestinal vasoativo foi maior nos grupos CL, L e P. Os níveis de glutationa (GSH, em μg/ml) foram 1182.00 52.47** para CL, 1316.6 67.75** para L, 1286.5 93.15* para CC, 1195.60 37.57** para o controle positivo, 982.8 79.07** para o veículo e 1704.30 ± 149.03 para o grupo branco. Na indução de úlcera por Indometacina, CL exerceu gastroproteção de 98.3% com área de lesão (mm2) 0.85 ± 0.85**, L exerceu gastroproteção de 50.1% (área lesada 24.34 ± 5.3**), P não exerceu efetivo efeito gastroprotetor (37%) com área lesada 30.66 ± 4.22, contra 66.6% de gastroproteção e 16.27 ± 4.49** para o controle positivo e 48.72 ± 6.64 de área lesada para o veículo. CL administrado isoladamente manteve os níveis gástricos de PGE2 (em ng/ml) em 18,25 ± 2,58, mesmo com a administração em conjunto com ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to test the gastroprotective activity and the mechanism of action of the essential oil of Croton cajucara (CC), the essential oil of Citrus lemon (CL) and the majoritary substances present in CL, wich are Limonene (L) and β-pinene (P). Then, gastric ulcers in rats were induced by absolute ethanol after oral treatment with CL, L, P and CC and by indometacin (non-steroidal anti-inflamatory drug) after oral treatment with CL, L and P. All results were expressed in mean standard error mean (p<0.05). In ethanol-induced gastric ulcer, the ulcer area (mm²) were 0.00 0.00** for CL, L and CC (100% of gastroprotection), 73.20 27.32 for P (53.26% of the ulcer area was reduced, however there was no effective gastroprotection), 22.27 8.21** for the positive control (85.80%) and 165.60 36.30 for the vehicle. The microscopic score showed gastric mucosa was preserved in CL**, L*** and CC***. The marked area for heat shock protein 70 (HSP-70) and vasoactive intestinal peptide (VIP) immunohistochemistries were statistically augmented in CL, L and P groups. The levels of glutathione (GSH, μg/ml) were 1182.00 52.47** for CL, 1316.6 67.75** for L, 1286.5 93.15* for CC, 1195.60 37.57** for the positive control, 982.8 79.07** for the vehicle and 1704.30 ± 149.03 for the sham group. In the indomethacin-induced gastric ulcer, CL offered 98.3% gastroprotection (ulcer area 0.85 ± 0.85**), L offered 50.1% gastroprotection (ulcer area 24.34 ± 5.3**), P did not show gastroprotective effect (37%) and presented ulcer area 30.66 ± 4.22. The positive control offered 66.6% gastroprotection (ulcer area 16.27 ± 4.49**) and the vehicle presented ulcer area 48.72 ± 6.64. CL was able to maintain the PGE2 levels (ng/ml) 18.25 ± 2.58 near to sham group (21.14 ± 1.14), even with indomethacin (PGE2 inhibitor) administration (17.89 ± 1.55), compared with ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Cláudia Helena Pellizon / Coorientador: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Banca: Maria de Lourdes Mendes Vicentini Paulino / Banca: Lourdes Campaner dos Santos / Mestre
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