Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2014. / Submitted by Thomaz Siqueira Araujo (thomaz001.ta@gmail.com) on 2015-05-06T18:13:17Z No. of bitstreams: 1 2014_NédioRodrigoTormen.pdf: 1088713 bytes, checksum: 77829b02405687d8043add07a761209c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-05-06T20:39:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_NédioRodrigoTormen.pdf: 1088713 bytes, checksum: 77829b02405687d8043add07a761209c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-06T20:39:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_NédioRodrigoTormen.pdf: 1088713 bytes, checksum: 77829b02405687d8043add07a761209c (MD5) / A soja (Glycine max L.) é atualmente o principal produto do agronegócio brasileiro e contribui de forma expressiva para o desenvolvimento do país. A ocorrência de doenças está entre os principais fatores que limitam as maiores produtividades e algumas doenças consideradas menos severas, como a seca da haste e da vagem, têm sido ignoradas. Este trabalho objetivou avaliar o efeito do espaçamento entre linhas, cultivares de soja e fungicida sobre a incidência da seca da haste da soja causada por Diaporthe phaseolorum var. sojae e sobre a produtividade da cultura. O ensaio foi instalado em campo em duas épocas de semeadura (15/11 e 15/12/2012) em Planaltina/DF. O delineamento experimental utilizado foi de blocos completos ao acaso, em esquema de parcelas subsubdivididas, com quatro repetições. Foram testados três espaçamentos entre linhas (42, 60 e 75 cm), duas cultivares de soja (“Syn1180RR” e “Syn1080RR”) e o fungicida boscalida (500 g i.a. ha-1), aplicado nos estádios R1 e R3 da soja, além da testemunha sem controle. As variáveis mensuradas foram a estatura das plantas, número de ramos, incidência da doença em hastes e sementes de soja, peso de 100 grãos e produtividade. Os resultados obtidos permitem concluir que a ampliação do espaçamento entre linhas favoreceu a incidência da doença em hastes e sementes de soja, houve diferença de suscetibilidade entre as cultivares (“Syn1180RR” mais susceptível; “Syn1080RR” menos susceptível) e a aplicação de fungicida reduziu a incidência da doença. O terço superior foi mais afetado pela doença em comparação com o mediano e inferior. A seca da haste e da vagem reduziu a produtividade da soja. ______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Currently, soybean (Glycine max L.) represents important role on Brazilian agribusiness and contribute significantly for the economical development of Brazil. The occurrence of diseases corresponds to an important factor limiting greater yield rates and some diseases considered to be less severe, as the stem blight, have been ignored. This work aims to assess the effect of row spacing, cultivar and fungicide on the incidence of soybean stem blight and yield. The experiment was carried out under field conditions, in two seedling times (11/15/2012 and 12/15/2012) in Planaltina/DF. The treatments were arranged on randomized blocks design, with a split-split plot arrangement and four replicates. The treatments evaluated were row spacing (42, 60 and 75 cm), soybean cultivars (“Syn1180RR” and “Syn1080RR”) and the fungicide boscalid (500 g a.i ha-1), sprayed at R1 and R3 soybean growth stages, and a control plot without fungicide. The parameters evaluated were plant height, branch number per plant, disease incidence on stems and seeds, seed weight and yield. The data obtained suggests that broader row spacing induced greater disease incidence in stems and seeds, there was difference between cultivars in terms of susceptibility (“Syn1180RR” more susceptible; “Syn1080RR” less susceptible) and fungicide applications reduced the disease incidence. The stem blight incidence was higher at the top parts of the plants. The disease reduced the yield of soybean crop.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-graduação em Fitopatologia, 2011. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-09-14T20:54:47Z No. of bitstreams: 1 2011_LeonardoMinareBrauna.pdf: 2346526 bytes, checksum: 9843339909a8bb2b743cdb1c02f58697 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2012-09-18T10:29:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_LeonardoMinareBrauna.pdf: 2346526 bytes, checksum: 9843339909a8bb2b743cdb1c02f58697 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-18T10:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_LeonardoMinareBrauna.pdf: 2346526 bytes, checksum: 9843339909a8bb2b743cdb1c02f58697 (MD5) / O mofo branco, doença causada pelo fungo Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary possui em seu ciclo de hospedeiros 408 espécies dentro de 278 gêneros, distribuídas em 75 famílias botânicas e é responsável por perdas de rendimento que podem chegar a 100% em culturas agronômicas. As medidas de controle na maioria das vezes são ineficazes. O uso de defensivos químicos é muito oneroso, tornando-se inviável. Quanto ao controle biológico, vários estudos têm sido realizados com fungos antagonistas e, dentre eles, espécies do gênero Trichoderma tem demonstrado atividade antagônica contra S. sclerotiorum, em testes conduzidos tanto em laboratório, quanto em condições de campo. Neste trabalho, 20 isolados de Trichoderma foram testados em laboratório e em casa de vegetação. Em campo, três desses isolados foram avaliados em termos de redução do impacto do patógeno sobre o desenvolvimento das culturas de feijão comum e soja. Nestes ensaios, utilizou-se além da microbiolização de sementes, aplicação no sulco de plantio com jato direto e aplicação na parte aérea por barra traçada, cuja concentração de propágulos na suspensão de inóculo para aplicação dos isolados foi de 1x109 conídios – mL-1. Nos testes de laboratório, quatro isolados apresentaram grau máximo de antagonismo (classe 1), 10 isolados alocaram-se na classe 2 e quatro na classe 3, estas duas consideradas com potencial médio e moderado de biocontrole, respectivamente. Dois isolados exerceram baixa atividade antagônica contra S. sclerotiorum (classe 4). Quanto à germinação de escleródios, 10 isolados de Trichoderma inibiram pelo menos em 90%; quatro apresentaram índices de inibição entre 80% e 65%; dois apresentaram índices de 35% e 25% e os quatro restantes não apresentaram atividade inibitória sobre os escleródios. Já nos testes com metabólitos não voláteis, verificou-se diferença significativa na inibição do crescimento de S. sclerotiorum, com os valores médios da porcentagem de inibição micelial variando desde zero (ausência de inibição) até 100%. Dentre os 20 isolados, seis apresentaram os melhores níveis de controle de doença. Os ensaios conduzidos em campo indicaram maior eficiência dos isolados quando o inoculo foi aplicado via barra, juntamente com as sementes microbiolizadas, seguindo-se a aplicação por meio de aspersão da suspensão de esporos e, por fim, onde só houve aplicação pela microbiolização das sementes, quanto ao desenvolvimento das plantas. Os resultados obtidos indicam que esses isolados são promissores para o desenvolvimento de um programa de controle biológico. Assim, foi avaliada a produção de esporos em laboratório, utilizando dois substratos preparados com diferentes teores de água e tempo de embebição. As maiores taxas de esporulação foram observadas com os CEN162 e CEN238, em arroz parboilizado. Adição de água na proporção de 80%, e períodos de embebição superiores a 15 horas favoreceram a esporulação, independentemente do substrato. Nestas condições, os isolados apresentaram diferentes picos de esporulação no decorrer de 30 dias. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / White mold disease caused by the fungus Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary has its cycle of hosts 408 species in 278 genera, distributed in 75 botanic families and is responsible for loss of income that can reach 100 % in agronomic crops. Control measures are most often ineffective. The use of pesticides is very expensive, making it unfeasible. As for biological control, several studies have been conducted on fungi and antagonists, among them species of the genus Trichoderma have demonstrated antagonistic activity against S. sclerotiorum in trials conducted both in laboratory and in field conditions. In this study, 20 isolates of Trichoderma were tested in laboratory and greenhouse. In the field, three of these isolates were evaluated in terms of reducing the impact of the pathogen on the development of crops of beans and soybeans. In these tests, we used beyond microbiolization seed, application in furrow application with jet direct and shoot with a slash drawn, where the concentration of propagules in the inoculum suspension for application of the isolates was 1x109 conidia - mL-1. In laboratory tests, four isolates showed maximum degree of antagonism (class 1), 10 isolates allocated to the Class 2 and four in Class 3, these two considered potential biocontrol medium and moderate, respectively. Two isolates have had low antagonistic activity against S. sclerotiorum (class 4). As for the germination of sclerotia, 10 strains of Trichoderma inhibited at least 90%, four showed inhibition rates between 80% and 65% had two rates of 35% and 25% and the remaining four showed no inhibitory activity on the sclerotia. Already in the tests with non-volatile metabolites, there was significant difference in growth inhibition of S. sclerotiorum, with the mean percentage inhibition of mycelial ranging from zero (no inhibition) to 100%. Among the 20 isolates, six showed the highest levels of disease control. Tests conducted in the field suggest greater efficiency of the isolates when the inoculum was applied by bar, along with microbiolization seeds, followed by the application by spraying the spore suspension and, finally, where there was only applied by microbiolization seeds, for the development of plants. The results indicate that these isolates are promising for developing a biological control program. Thus, we evaluated the production of spores in the laboratory using two substrates prepared with different amounts of water and soaking time. The highest rates of spore production were observed with CEN162 and CEN238 in parboiled rice. Addition of water at a ratio of 80%, and soaking periods exceeding 15 hours favored sporulation, regardless of the substrate. Under these conditions, the isolates showed different peaks for spore collecting in the course of 30 days.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2009-12-01T02:37:43Z No. of bitstreams: 1 2006_JanderdaSilvaNeves.pdf: 5657161 bytes, checksum: f46bab6723ba3c1245bf77c9be7f7a2a (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-01-12T23:51:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_JanderdaSilvaNeves.pdf: 5657161 bytes, checksum: f46bab6723ba3c1245bf77c9be7f7a2a (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-12T23:51:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_JanderdaSilvaNeves.pdf: 5657161 bytes, checksum: f46bab6723ba3c1245bf77c9be7f7a2a (MD5) Previous issue date: 2006-10 / A ferrugem asiática (Phakopsora pachyrhizi) da soja é uma das doenças mais agressivas que incidem na cultura. Dependendo do clima e da cultivar de soja, perdas severas de rendimento podem ocorrer. O objetivo principal deste estudo foi avaliar o efeito de aplicações de fosfito e dos fungicidas na severidade da doença (porcentagem da área foliar afetada), na produtividade (kg/ha), e na massa (g) de 1000 grãos. Os experimentos de campo foram conduzidos de dezembro 2005 a abril 2006 em Cristalina, Goiás, Brasil. Utilizou-se delineamento de blocos ao acaso com nove tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram os seguintes: (1) testemunha; (2) uma aplicação do fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + (0,5% v/v) óleo vegetal; (3) duas aplicações do fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + (0,5% v/v) óleo vegetal; (4) duas aplicações do pyraclostrobin + epoxiconazole (66,5+25 g.i.a/ha); (5) uma aplicação do pyraclostrobin + epoxiconazole (66,5+25 g.i.a/ha)+ fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) e uma aplicação do fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + (0,5% v/v) óleo vegetal; (6) duas aplicações do tiofanato metílico+flutriafol (300+60g.i.a/ha); (7) uma aplicação do tiofanato metílico+flutriafol (300+60gi.a/ha)+fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) e uma aplicação do fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + (0,5% v/v) óleo vegetal; (8) duas aplicações do tebuconazole (100 g.i.a/ha); (9) uma aplicação do tebuconazole (100 g.i.a/ha) + fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) e uma aplicação do fosfito (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + (0,5% v/v) óleo vegetal. As aplicações foram feitas no inicio do aparecimento das primeiras lesões na cultivar Emgopa 313(ciclo tardio) nos estágios de crescimento da soja V8 e reaplicado em R2, no outro com a cultivar Coodetec 219RR (ciclo médio) nos estágios R1 e R5. As avaliações da severidade da doença foram feitas a cada sete dias após a aplicação dos produtos. Em ambos, após a primeira aplicação dos produtos todos os tratamentos reduziram significativamente a severidade da doença do sétimo ao trigésimo quinto dia da avaliação. Entretanto, após a segunda aplicação dos produtos, a doença apenas foi reduzida significativamente do sétimo ao vigésimo segundo dia da avaliação. Na avaliação final dos tratamentos somente os fungicidas tradicionais (pyraclostrobin + epoxiconazole, tiofanato metílico + flutriafol e tebuconazole) reduziu significativamente a severidade da doença. A produtividade e a massa de 1000 grãos foram significativamente mais elevados para tratamentos com pyraclostrobin + epoxiconazole, tiofanato metílico + flutriafol e tebuconazole. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Asian rust (Phakopsora pachyrhizi) of soybean is one of the most destructive diseases. Depending on the soybean cultivar and on the climate severe yield losses might occur. The main goal of this study was to evaluate de effects of phosphite and fungicides applications on disease severity (percentage of foliar area affected), on yield of seeds (kg/ha), and on mass (g) of 1000 seeds. For these purposes, two field experiments were conduced from December 2005 to April 2006 in Cristalina, Goias, Brazil. Both experiments were conduced in a complete randomized design with nine treatments and five replications. The treatments were the following: (1) no treatment; (2) one application of phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + vegetable oil (0.5% v/v); (3) two applications of phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + vegetable oil (0.5% v/v); (4) two applications of pyraclostrobin + epoxyconazole (66,5+25 g.i.a/ha); (5) one application of pyraclostrobin + epoxyconazole (66,5+25 g.i.a/ha)+ phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) and one application of phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + vegetable oil (0.5% v/v); (6) two applications of methyl thiophanate + flutriafol (300+60 g.i.a/ha); (7) one application of methyl thiophanate + flutriafol (300+60 g.i.a/ha) + phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) and one application of phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + vegetable oil (0.5% v/v); (8) two application of tebuconazole (100 g.i.a/ha); (9) one application of tebuconazole (100 g.i.a/ha) + phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) and one application of phosphite (1192 P2O5+596 K2O g.i.a/ha) + vegetable oil (0.5% v/v). In one of the experiments the applications were made on V8 and R2 soybean growth stage, while in the other at the R1 and R5 stages. Evaluations of disease severity were made every seven days after the application of the products. In both experiments, after the first application of the products all treatments significantly reduced disease severity from the seventh through the thirty-fifth day of evaluation. Nevertheless, after the second application of the products the disease was reduced significantly from the seventh through the twenty-second day of evaluation. At the end of evaluations only treatments with traditional fungicides (pyraclostrobin + epoxyconazole, methyl thiophanate + flutriafol, and tebuconazole) significantly reduced disease severity. Yield and mass of 1000 seeds were significantly higher for treatments with pyraclostrobin + epoxyconazole, methyl thiophanate + flutriafol and tebuconazole.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2011. / Submitted by Suelen Silva dos Santos (suelenunb@yahoo.com.br) on 2011-06-28T16:24:18Z No. of bitstreams: 1 2011_VivianJesusMiranda.pdf: 2223657 bytes, checksum: 8ae576873fa3b7447df05b15485f671b (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-06-30T15:01:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_VivianJesusMiranda.pdf: 2223657 bytes, checksum: 8ae576873fa3b7447df05b15485f671b (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-30T15:01:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_VivianJesusMiranda.pdf: 2223657 bytes, checksum: 8ae576873fa3b7447df05b15485f671b (MD5) / A soja é uma cultura de grande importância econômica no Brasil. No entanto, vários fatores bióticos afetam sua produtividade. Entre esse fatores destacam-se os danos causados por insetos-praga, como lagartas desfolhadoras e por fitonematoides. Várias estratégias envolvendo transgenia têm sido desenvolvidas para o controle de pragas e doenças, sendo importante o uso de promotores gênicos capazes de direcionar a expressão de transgenes nos tecidos atacados, atingindo níveis adequados para desencadear a proteção vegetal. Vários trabalhos sugerem um importante papel da via ubiquitina-proteassoma ao longo do desenvolvimento das plantas, assim como em resposta a estresses bióticos. Particularmente, genes codificadores de enzima de conjugação a ubiquitina (E2) mostraram ser ativados em sítio de alimentação de Meloidogyne incognita e em resposta ao ataque de insetos. Neste contexto, o presente trabalho tem como objetivo determinar o perfil de expressão transcricional do gene E2 em diferentes tecidos de soja, em diferentes fases do desenvolvimento, em raízes inoculadas com M. incognita e folhas infestadas por Anticarsia gemmatalis, pela técnica de qRT-PCR, como caracterização de promotor cognato UceS8.3, previamente isolado e patenteado. Para a normalização do gene E2 nos experimentos de qPCR, oito genes de referência clássicos foram selecionados e validados quanto a sua estabilidade de expressão nas diferentes condições experimentais analisadas. Os melhores genes de referência foram utilizados na quantificação dos níveis do transcrito do gene E2. O acúmulo de transcritos de E2 foi determinado espacial e temporalmente, nos orgãos de raiz, caule, folha, flor e vagem, nos fases de desenvolvimento (V4, R2 e R4). Foi observado que ocorre acúmulo de transcritos de E2 em R4, provavelmente relacionado a senescência da planta. Em seguida, bioensaios foram conduzidos em raízes de soja inoculadas com juvenis de segundo estádio (J2) de M. incognita, e em folhas infestadas com lagartas de quarto ínstar de A. gemmatalis. Nas interações com nematóide e com insetos, foi detectado acúmulo de transcritos de E2 de 2 a 6 vezes. Paralelamente, o banco de bibliotecas subtrativas GENOSOJA foi utilizado para verificar acúmulo de transcritos de E2 em resposta a estresses (bióticos e abióticos). As análises in silico mostraram que o gene E2 é mais abundante em resposta a bactéria Bradirhyzobium japonicum, ao fungo Phakopsora pachyrhyzi e ao estresse hídrico. Os resultados obtidos de quantificação de transcritos de E2 e da análise in silico foram relacionados a cis-elementos presentes na região regulatória, e indicam que o promotor UceS8.3 representa uma importante ferramenta biotecnológica para obtenção de plantas geneticamente modificadas resistentes a fitonematóides, doenças fúngicas, insetos desfolhadores e/ou deficiência hídrica. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Soybean is a crop of great economic importance in Brazil. However, several biotic factors have been affecting soya productivity. Among them, the damage caused by insect pests such as defoliating caterpillars and plant nematodes. Several strategies involving transgenic plants have been developed to control pests and diseases, being important the utilization of gene promoters capable of driving transgene expression in tissues attacked, at appropriate levels to trigger plant protection. Several studies suggest an important role of ubiquitin-proteasome pathway during plant development and in plant responses to biotic stresses. Particularly, genes encoding ubiquitin conjugation factors (E2) have been shown to be activated in feeding sites of Meloidogyne incognita and in response to insect attack. In this context, this study aims to determine the accumulation of the E2 transcripts considering different tissues of soybean, different stages of development, roots inoculated with M. incognita and leaves infested with Anticarsia gemmatalis, by qRT-PCR technique in order to further characterize its cognate promoter (UceS8.3). Aiming E2 gene normalization in qPCR experiments, eight classical reference genes were selected and validated for their expression stability. The best reference genes were used in the normalization of the E2 gene. To characterize the spatial and temporal accumulation of E2 transcripts, samples of root, stem, leaf, flower and pod were collected at three different developmental stages (V4, R2 and R4). It was found that E2 transcripts accumulated in R4, probably related to senescence process. Thus, bioassays were conducted in soybean roots inoculated with second stage juveniles (J2) of M. incognita, and leaves infested with fourth instar larvae of A. gemmatalis. Considering the nematode and caterpillars interactions, it was detected an E2 transcripts accumulation of 2 to 6 times. Parallely, the subtractive libraries bank GENOSOJA was used to verify the accumulation of E2 transcripts in response to other stresses (biotic and abiotic). In silico analysis showed that the E2 gene is more abundant in response to Bradirhyzobium japonicum bacteria, Phakopsora pachyrhyzi fungal, and to drought stress. The results were related to cis-elements present in the regulatory region, and suggested that the UceS8.3 promoter represents an important biotechnological tool to genetic modified plant generation resistant to plant nematodes, fungal diseases, defoliating insects and/or hydric deficit.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2011. / Submitted by Max Lee da Silva (bruce1415@hotmail.com) on 2011-06-28T14:32:38Z No. of bitstreams: 1 2011_LucianaRamalhoDeFarias.pdf: 2230097 bytes, checksum: ad0589346d3e4e161f07d665eb227f60 (MD5) / Approved for entry into archive by Elna Araújo(elna@bce.unb.br) on 2011-07-04T19:52:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_LucianaRamalhoDeFarias.pdf: 2230097 bytes, checksum: ad0589346d3e4e161f07d665eb227f60 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-04T19:52:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_LucianaRamalhoDeFarias.pdf: 2230097 bytes, checksum: ad0589346d3e4e161f07d665eb227f60 (MD5) / O percevejo-marrom Euschistus heros é uma praga que reduz consideravelmente a produtividade nacional de culturas agrícolas de grande importância econômica, dentre elas a soja. Visando subsidiar o desenvolvimento de ferramentas biotecnológicas alternativas para auxílio no controle dessa praga, o presente trabalho realizou o estudo da expressão de genes relacionados à olfação e análise do perfil e sítios de expressão utilizando as técnicas de qPCR em Tempo Real e hibridização in situ, respectivamente. A prospecção foi realizada através da construção de uma biblioteca de cDNA a partir do RNA total extraído das antenas utilizando o kit Smart cDNA Library Construction (Clontech®). Mil clones foram sequenciados e, através de bioinformática, foram identificadas duas sequências de 477 e 294 pares bases pertencentes a genes da família das proteínas ligantes de odorantes (Odorant Binding Protein - OBP) que foram denominados EherOBP1 e EherOBP2, respectivamente. O EherOBP1 possui sequência deduzida de aminoácidos de 16 kDa e pI 5,18, peptídio sinal na extremidade N-terminal, domínio de ligação a feromônio (Pheromone Binding Protein – PBP) e seis resíduos de cisteína em posições conservadas, todas características esperadas para proteínas integrantes da família OBP. Embora parcial, a sequência deduzida de aminoácidos de EherOBP2 já pode também ser atribuída a função hipotética de proteína ligante a odor devido a presença do domínio PBP e cinco resíduos de cisteína em posições conservadas. A análise da expressão diferencial através de RT-PCR quantitativo em tempo real (qRT-PCR) indicou que as antenas representam o principal sítio de produção da EherOBP1 em ambos os sexos, sendo a expressão nas antenas de macho cerca de três vezes maior que nas antenas de fêmeas. Em relação a EherOBP2, foi observada uma predominância da expressão nas antenas e abdômen de machos, sendo esta cerca de cinco vezes maior em relação à expressão observada nas antenas de fêmeas. A partir dos resultados obtidos com a localização da hibridização in situ nas antenas foi possível inferir que os mRNAs das EherOBPs são localizados especificamente na base dos órgãos olfativos (sensilas), havendo diferenças na expressão ao longo da antena entre machos e fêmeas. Neste trabalho foram identificados dois transcritos gênicos relacionados à olfação que codificam duas proteínas com provável função de ligação a odorantes. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In Brazil, the stink bug Euschistus heros represents an important agricultural plague responsible for economic damages on several cultures, including the soy. Aiming the development of alternatives biotechnological tools, the present work conducted the study of the expression of genes related to olfaction through the construction of a cDNA library from transcripts (mRNA) isolated from the antennae and analysis of the profile and sites of expression using the techniques of real-time qPCR and in situ hybridization, respectively. cDNA library was successfully constructed from total RNA extract from adults antenna using the Smart cDNA Library Construction Kit (Clontech®). A total of 1000 cDNA clones were randomly selected and submitted to sequencing. Two transcripts encoding OBPs were identified by bioinformatics approaches. The E. heros OBPs nucleotide sequences showed 477 and 294 pb and were named as EherOBP1 and EherOBP2, respectively. The deduced amino acid sequence of EherOBP1 has16kDa and pI 5.18, signal peptide at the N-terminal, PBP domain and six cysteine residues in conserved positions, all the expected features for members of OBP protein family. Although partial, the deduced amino acid sequence of EherOBP2 can be assigned as a hypothetical Odorant Binding Protein due the presence of PBP domain and five cysteine residues in conserved positions. Analysis of differential expression by quantitative real time PCR indicated that antenna are the main production site of EherOBP1 in both sexes, and the expression in male antennae is about three times higher than in female antennae. Regarding to EherOBP2, there was a predominance of expression in the antennae and abdomen of males, which is about six times greater than the expression observed in the antennae of females. In situ hybridization results showed that EherOBPs mRNAs are specifically expressed on the base of the antenna olfactory organs (sensilas) with differences in the localization of the expression along the antenna of male and female. In this work were identified two transcripts related to olfaction encoding proteins with hypothetical function odorant binding.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2009. / Submitted by Luiza Moreira Camargo (luizaamc@gmail.com) on 2011-07-04T17:29:31Z No. of bitstreams: 1 2009_MarcelloArraisLima.pdf: 1866483 bytes, checksum: 1cec10d4db895e70df39656e79d784ee (MD5) / Approved for entry into archive by Elna Araújo(elna@bce.unb.br) on 2011-07-08T23:28:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_MarcelloArraisLima.pdf: 1866483 bytes, checksum: 1cec10d4db895e70df39656e79d784ee (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-08T23:28:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_MarcelloArraisLima.pdf: 1866483 bytes, checksum: 1cec10d4db895e70df39656e79d784ee (MD5) / Os objetivos do trabalho foram: (a) avaliar genótipos de soja quanto a reação à ferrugem asiática (Phakopsora pachyrhizi); (b) verificar o progresso da doença em campo de soja associados às condições ambientais, correlacionando-as à variação temporal de urediniósporos coletados no ar; (c) determinar a influência do ambiente na infecção por P. pachyrhizi; e (d) avaliar a influência da concentração de urediniósporos de P. pachyrhizi sobre a doença. Os principais resultados são a seguir apresentados. Quanto à reação dos genótipos, resultados semelhantes em estufa e laboratório mostraram os menores valores de doença pelo genótipo GT04-9062. Todavia, em campo, o genótipo menos afetado foi o GT04-9180. Quanto a flutuação aérea de inoculo, houve grande variação na quantidade de esporos coletados entre janeiro e fevereiro de 2007 (~100-600/dia) e 2008 (~50-500/dia). A captura dos urediniósporos realizada em armadilha (Burkard) foi maior entre 11:00 (~65-80/h) e 19:00h (~35-80/h). Houve correlação positiva entre a quantidade de esporos e os fatores ambientais. Quanto a concentração de inóculo, 1 x 105 urediniósporos/ml proporcionou resultados de doença que permitiram a reação diferencial de ferrugem em genótipos com variada susceptibilidade. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The main objectives of this study were: (a) to evaluate the reaction of soybean (Glycine max) genotypes to the Asian rust (Phakopsora pachyrhizi); (b) to evaluate the association of rust progress to the airborne urediniospores; (c) to evaluate the effects of climate on rust progress; and, (d) to evaluate the effects of spore concentration on disease. The principal results are described as follow. The genotype GT04-9062 was less affected by the disease on laboratory and greenhouse trials. However, under commercial field conditions, the less affected one was GT04-9180. The highest amount of airborne spore collected (Burkard spore trap) was in January and February 2007 (~100-600/day) and 2008 (~50-500/day), from 11 a.m (~65-80/h) to 7 p.m. (~35-80/h). There was positive correlation between collected airborne spores and to the climate factors. The inoculum concentration of 1x105 spores/ml allowed an ideal amount of disease for genotype reaction comparisons.

Orientador: Sandra Helena Unêda Trevisoli / Coorientador: Antonio Orlando Di Mauro / Coorientador: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Adriana Zanin Kronka / Banca: Everlon Cid Rigobelo / Banca: Viviane Formice Vianna / Banca: Walter Maldonado Junior / Resumo: A podridão de carvão, causada pelo fungo Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid, tem sido uma doença de crescente importância na cultura da soja. Essa doença ocorre principalmente em regiões tropicais e subtropicais e sabe-se que sua maior incidência e severidade são observadas principalmente quando há estresse hídrico e altas temperaturas. Na tentativa de compreender o comportamento da resistência desse patógeno, objetivou-se o estudo da herança genética por meio de uma abordagem quantitativa, sendo utilizada uma análise de componentes de médias e variâncias. O experimento foi conduzido em casa de vegetação no delineamento inteiramente casualizado utilizando as seis gerações de estudo (P1, P2, F1, F2, RCr e RCs). As populações foram inoculadas com o fungo Macrophomina phaseolina por meio de sementes de sorgo infectadas. Após o estádio R8, as plantas foram avaliadas utilizando como critério a Severidade em Raiz e Caule (SRC). Foram estimados componentes de média (por meio do método dos mínimos quadrados ponderados), além das variâncias e parâmetros genéticos associados. Foi confirmado o caráter quantitativo da herança da resistência, com estimativa de 5,62 genes envolvidos na resistência. O modelo aditivo-dominante foi adequado, assim como a estimativa de parâmetros genéticos, havendo predominância de efeitos gênicos aditivos, tanto nos modelos de médias como nos de variância. / Abstract: Charcoal rot disease, caused by Macrophomina phaseolina, is a disease of significant economic importance in the soybean crop. This disease occurs mainly in tropical and subtropical regions and it is known that the incidence and severity occur mainly when there is stress of water and heat. The evaluation of this pathogen is difficult due to the lack of reliable and efficient methods for the evaluation of soybean genotypes. The present work had the objective of evaluating different methods of inoculation and evaluation in ten soybean genotypes, besides discovering the degree of resistance of the genotypes studied. Infected sorghum seeds, pre-germinated seed in culture medium and infected toothpick test were the tested methods. Colony forming units and root and stem severity were evaluated. There was good correlation between evaluations of colony forming units and root and stem severity (0.87). The infected sorghum seed method was the most efficient for inoculating the pathogen in soybean genotypes. Genotype PI594302 presented higher resistance in the two evaluated parameters, being indicated its introduction in programs of genetic improvement aiming the resistance to the charcoal rot in soybean. / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-02Bitstream added on 2014-06-13T19:27:26Z : No. of bitstreams: 1 000752638.pdf: 1757207 bytes, checksum: 8fb553c4d32356d7c6cc3e2f18ebc2a8 (MD5) / O trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de novos sistemas de semeadura além de diferentes técnicas de pulverização sobre os depósitos da pulverização e no controle da ferrugem asiática da soja visando à sustentabilidade da cultura. Dois experimentos foram conduzidos no ano agrícola 2012/2013 na área experimental da FCA/UNESP – Campus de Botucatu. Um experimento foi conduzido no delineamento em blocos ao acaso com 8 tratamentos e quatro repetições, totalizando 32 parcelas. Os tratamentos foram distribuídos no esquema fatorial 4 x 2, quatro sistemas de semeadura : convencional (CV), linha dupla (LD), Linha Cruzada (LC) e adensado (AD) e duas tecnologias de aplicação: com assistência de ar (AA) com capacidade máxima de rotação do ventilador e sem assistência de ar (AA) associada à barra de pulverização. Foram selecionadas 10 plantas ao acaso no centro de cada parcela. De cada planta foi cortado na região do pecíolo um folíolo da parte superior (topo das plantas) com maior exposição à pulverização e outro folíolo na parte inferior (último folíolo da parte inferior das plantas). Para avaliação dos depósitos, o corante Azul Brilhante (FD&C no 1) foi usado como marcador e a quantificação dos depósitos feito por espectrofotometria. Outro experimento foi conduzido no mesmo local do experimento anterior. O delineamento utilizado foi em blocos ao acaso com 12 tratamentos, distribuídos no esquema fatorial 4 x 2 (quatro sistemas de semeadura utilizados no primeiro experimento e duas tecnologias de aplicação: com AA e sem AA, mais uma testemunha para cada tratamento). Nos estádios de desenvolvimento R2 e R4 foi pulverizado o fungicida trifloxistrobina associado com protioconazil a 146 L ha-1. Para avaliação de severidade da ferrugem asiática da soja foram avaliados visualmente 20 folíolos da parte médio-inferior da planta e foram atribuídas notas de porcentagem da... / This study aimed to evaluate the effect of new cropping systems as well as different spraying techniques on deposits of spray and control of Asian soybean rust aiming at sustainability culture. Two experiments were carried out in the agricultural year 2012/2013 in the experimental area of the FCA/UNESP - Botucatu. The first experiment was carried out in randomized blocks with eight treatments and four replications, totaling 32 plots. The treatments were arranged in a 4 x 2 factorial design, four sowing systems: conventional (CV), double lines (LD), Crossed lines (LC), high density (HD) and two application technologies: with air assistance (AA) with maximum fan rotation and without air assistance (AA) along the spray boom. Ten plants were selected at random in the center of each plot, which were cut, the petiole one leaflet from the top (top of the plants) with greater exposure to spraying and other leaflets in the bottom (top leaflet of the lower part of the plants). For evaluation of spray deposits the tracer Brilliant Blue dye (FD & C 1) was used. The spray deposits quantification was made by spectrophotometry. A second experiment was carried out in the same place of the previous experiment. The experimental design was randomized blocks with 12 treatments distributed in a factorial scheme 4 x 3 (four sowing systems used in the first experiment and two application technologies: with AA, without AA and a control for each treatment). In the growth stages R2 and R4, the fungicide trifloxystrobin associated with protioconazil was sprayed at 146 L ha-1. To assess Asian soybean rust disease severity were evaluated visually 20 leaflets from the bottom-half of the plant and notes attributed to percentage of lesion area by using diagrammatic grade scale of disease. Also were evaluated the number of pods per plant, measured the weight of a thousand grains...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-12Bitstream added on 2014-06-13T19:47:14Z : No. of bitstreams: 1 000747558.pdf: 2139417 bytes, checksum: ba48dca706489c6c421e4a7ea42bca60 (MD5) / O nematoide das lesões radiculares (Pratylenchus brachyurus) é autóctone da região dos cerrados do Brasil. Os danos econômicos do fitopatógeno para sojicultura brasileira tem aumentado nos últimos anos devido à expansão da área de produção desta cultura para solos arenosos associada à utilização de cultivares muito susceptíveis ao nematoide. Como endoparasitas migradores, os nematoides destroem tecidos das raízes, causando rompimento superficial e destruição interna, predispondo-os a infecções secundárias de fungos e bactérias. O objetivo foi analizar a distribuição espacial dos nematoides das lesões radiculares em área de cultivo de soja e sua relação com a variabilidade de produtividade e atributos químicos do solo. A área pesquisada localiza-se na Fazenda Condor, situada no município de Brejo, região Leste do Estado do Maranhão. Foram marcados e georreferenciados com GPS, 142 pontos amostrais espaçados de 20 em 20 m em uma área de 180×180 m, em lavoura de soja. Foram coletadas 6 plantas com respectivas raízes juntamente com solo ao redor do ponto de amostra para quantificação dos nematoides e atributos químicos da área. As amostras de solo foram processadas pela técnica de Jenkins (1964) e os nematoides e ovos presentes nas raízes pelo método de Coolen & D'Herde (1972). Os nematoides extraídos foram contados com auxílio de lâminas de Peters, sob microscópio fotônico. A dependência espacial foi analisada por meio de técnicas geoestatísticas com estimativas de semivariogramas experimentais e ajustes de modelos permissíveis. Para as variáveis de produção e população dos nematoides foram usados semivariogramas anisotrópicos. O modelo exponencial foi ajustado para todas as variáveis de produção e população de nematoides, com presença de anisotropia e alcances maiores na direção de 135º, devido ao preparo do solo e direção do plantio e... / The nematodes of root lesions (Pratylenchus brachyurus) is indigenous to the Cerrado region of Brazil. The economic damage from the pathogen for Brazilian soybean production has increased in recent years due to the expansion of the production area of this crop for sandy soils associated with the use of cultivars very susceptible to nematodes. As migratory endoparasites, the nematodes destroy tissues of roots, causing surface disruption and destruction internal, predisposing them to secondary infections by fungi and bacteria. The objective was to analyze the spatial distribution of nematodes in root lesions on soybean cultivation area and its relation to the variability of productivity and soil chemistry. The studied area is located in the Condor Farm, located in the city of Heath, East of Maranhão region. Were marked and georeferenced with GPS 142 sampling points spaced 20 to 20 m in an area of 180×180 m in soybean crop. 6 plants with their roots with soil around the sample point for quantification of nematode and chemical attributes of the area were collected. Soil samples were processed by the technique Jenkins (1964) and nematodes and eggs roots by the method of Coolen & D'Herde (1972). The extracted nematodes were counted with the aid of slides Peters under photonic microscope. Spatial dependence was analyzed using geostatistical techniques with experimental semivariogram estimates and adjustments of allowable models. For the variables of production and nematode population anisotropic semivariograms were used. The exponential model was adjusted for all variables of production and population of nematodes, with the presence of anisotropy and higher reaches in the direction of 135°, due to tillage and planting direction and isotropic variograms for soil chemical properties. It was concluded that nematode population increase is related to the presence of roots of the host plant in the ...

Orientador: Carlos Gilberto Raetano / Coorientador: Mário Henrique F. A. Dal Pogetto / Banca: Dagoberto Martins / Banca: Rafael de Souza Christovam / Resumo: O trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de novos sistemas de semeadura além de diferentes técnicas de pulverização sobre os depósitos da pulverização e no controle da ferrugem asiática da soja visando à sustentabilidade da cultura. Dois experimentos foram conduzidos no ano agrícola 2012/2013 na área experimental da FCA/UNESP - Campus de Botucatu. Um experimento foi conduzido no delineamento em blocos ao acaso com 8 tratamentos e quatro repetições, totalizando 32 parcelas. Os tratamentos foram distribuídos no esquema fatorial 4 x 2, quatro sistemas de semeadura : convencional (CV), linha dupla (LD), Linha Cruzada (LC) e adensado (AD) e duas tecnologias de aplicação: com assistência de ar (AA) com capacidade máxima de rotação do ventilador e sem assistência de ar (AA) associada à barra de pulverização. Foram selecionadas 10 plantas ao acaso no centro de cada parcela. De cada planta foi cortado na região do pecíolo um folíolo da parte superior (topo das plantas) com maior exposição à pulverização e outro folíolo na parte inferior (último folíolo da parte inferior das plantas). Para avaliação dos depósitos, o corante Azul Brilhante (FD&C no 1) foi usado como marcador e a quantificação dos depósitos feito por espectrofotometria. Outro experimento foi conduzido no mesmo local do experimento anterior. O delineamento utilizado foi em blocos ao acaso com 12 tratamentos, distribuídos no esquema fatorial 4 x 2 (quatro sistemas de semeadura utilizados no primeiro experimento e duas tecnologias de aplicação: com AA e sem AA, mais uma testemunha para cada tratamento). Nos estádios de desenvolvimento R2 e R4 foi pulverizado o fungicida trifloxistrobina associado com protioconazil a 146 L ha-1. Para avaliação de severidade da ferrugem asiática da soja foram avaliados visualmente 20 folíolos da parte médio-inferior da planta e foram atribuídas notas de porcentagem da ... / Abstract: This study aimed to evaluate the effect of new cropping systems as well as different spraying techniques on deposits of spray and control of Asian soybean rust aiming at sustainability culture. Two experiments were carried out in the agricultural year 2012/2013 in the experimental area of the FCA/UNESP - Botucatu. The first experiment was carried out in randomized blocks with eight treatments and four replications, totaling 32 plots. The treatments were arranged in a 4 x 2 factorial design, four sowing systems: conventional (CV), double lines (LD), Crossed lines (LC), high density (HD) and two application technologies: with air assistance (AA) with maximum fan rotation and without air assistance (AA) along the spray boom. Ten plants were selected at random in the center of each plot, which were cut, the petiole one leaflet from the top (top of the plants) with greater exposure to spraying and other leaflets in the bottom (top leaflet of the lower part of the plants). For evaluation of spray deposits the tracer Brilliant Blue dye (FD & C 1) was used. The spray deposits quantification was made by spectrophotometry. A second experiment was carried out in the same place of the previous experiment. The experimental design was randomized blocks with 12 treatments distributed in a factorial scheme 4 x 3 (four sowing systems used in the first experiment and two application technologies: with AA, without AA and a control for each treatment). In the growth stages R2 and R4, the fungicide trifloxystrobin associated with protioconazil was sprayed at 146 L ha-1. To assess Asian soybean rust disease severity were evaluated visually 20 leaflets from the bottom-half of the plant and notes attributed to percentage of lesion area by using diagrammatic grade scale of disease. Also were evaluated the number of pods per plant, measured the weight of a thousand grains... / Mestre