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Caracterização molecular, morfológica e biológica do agente etiológico da pinta-preta em solanáceas no BrasilPEIXOTO, Celma Cardoso 26 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-26 / Early blight caused by species from Alternaria genus affects several solanaceous of economic importance. Previous studies have shown that the species A. tomatophila and A. grandis prevail as causal agents of disease on tomato and potato, respectively. The control of this disease is based on the use of protective and systemic fungicides. However, there are reports of the existence of other species of Alternaria causing early blight in plants of the Solanácea family. This study aimed to perform molecular, morphological and biological characterization of Alternaria isolates from cultivated and wild solanaceous from different regions of Brazil. Molecular characterization of the isolates was done by sequencing and phylogenetic analysis of the genes Alt a1, GPD and Calmodulin. Morphological characterization was performed by measurement of dimensions of the conidia and quantification of the number of septa and rostrums. Biological characterization of Alternaria isolates was done by evaluation of host range and by the in vitro sensitivity to tebuconazole. Phylogenetic analysis of the genes Alt a1, GPD and Calmodulin allowed the identification of the species A. tomatophila, A. mimicula and A. dauci from tomato, and the species A. grandis and A. solani from potato and from lobeira, respectively. Morphologic caracteristics of most isolates corroborate the molecular characterization. The isolate EH1642-BA, identified as A. solani, was able to cause early blight on all solanaceous hosts evaluated except the sweet pepper. EH1823-CE of the specie A. tomatophila and EH1548-DF of A. grandis isolates from tomato and potato, respectively, had not specificity for their original host plants. However, the isolates EH1143-RS of the specie A.dauci and EH1377-CE of A. mimicula showed specificity for original host causing typical symptoms of early blight only on tomato. Alternaria isolates from tomato and eggplant caused disease on wild invasive solanaceous Datura stramonium and Physalis pubescens and isolates from D. stramonium and Nicandra physaloides caused symptoms of early blight on tomato, potato and jiló. In the sensitivity tests to the fungicide tebuconazole in general the isolates showed high sensitivity under in vitro conditions. The results obtained in this study confirmed the occurrence of A. tomatophila and A. grandis as causal agents of early blight on tomato and potato, respectively, and in this work were detected for the first time in Brazil the presence of A. dauci and A. mimicula associated with the disease on tomato. It has been found that some wild solanaceous can act as pathogen inoculum sources and the tebuconazole was efficient in the in vitro control for the isolates evaluated. / A pinta-preta, causada por fungos do gênero Alternaria, afeta diversas solanáceas importantes economicamente e as espécies A. tomatophila e A. grandis prevalecem como agentes causais da doença em batateira e tomateiro, respectivamente. O controle se baseia no uso de fungicidas protetores e sistêmicos. Todavia, existem relatos da existência de outras espécies de Alternaria causando pinta-preta em plantas da família Solanácea. O presente trabalho teve como objetivos realizar a caracterização molecular, morfológica e biológica de isolados de Alternaria oriundos de solanáceas cultiváveis e silvestres de diferentes regiões do Brasil. A caracterização molecular foi feita mediante sequenciamento e análises filogenéticas das regiões Alt a 1, GPD e Calmodulina. A caracterização morfológica foi conduzida por meio da mensuração das dimensões dos conídios e quantificação do número de septos e rostros. Na caracterização biológica realizou-se a avaliação da gama de hospedeiras solanáceas e testes in vitro de sensibilidade ao fungicida tebuconazole. As análises filogenéticas dos genes Alt a 1, GPD e Calmodulina possibilitaram a identificação das espécies A. tomatophila, A. mimicula e A. dauci oriundos de tomateiro, e também das espécies A. grandis e A. solani provenientes de batateira e lobeira. As características morfológicas da maioria dos isolados concordaram com a caracterização molecular. O isolado EH1642-BA identificado como A. solani foi capaz de causar pinta-preta em todos os hospedeiros exceto o pimentão. Já o EH1823-CE da espécie A. tomatophila e o EH1548-DF de A. grandis provenientes de tomateiro e batateira não apresentaram especificidade para as duas plantas hospedeiras originais. Contudo, os isolados EH1143-RS da espécie A.dauci e EH1377-CE de A. mimicula mostraram especificidade por hospedeira de origem ocasionando sintomas típicos da pinta-preta apenas em tomateiro. Isolados obtidos de tomateiro e berinjela causaram doença nas invasoras silvestres Datura stramonium e Physalis pubescens e isolados originários de D. stramonium e Nicandra physaloides provocaram sintomas em tomateiro, batateira e jiló. Em relação à sensibilidade ao tebuconazole verificou-se que em termos gerais os isolados apresentaram alta sensibilidade ao produto sob condições in vitro. Os resultados obtidos no presente estudo confirmaram a ocorrência de A. tomatophila e A. grandis como agentes causais da pinta-preta em tomateiro e batateira e foram detectadas pela primeira vez no Brasil a presença das espécies A. dauci e A. mimicula associadas à doença em tomateiro. Verificou-se ainda que solanáceas invasoras podem atuar como fontes de inóculo do patógeno e que o tebuconazole apresentou eficiência no controle in vitro para todos os isolados avaliados.
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