Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 2005. / The entire dissertation/thesis text is included in the research.pdf file; the official abstract appears in the short.pdf file (which also appears in the research.pdf); a non-technical general description, or public abstract, appears in the public.pdf file. Title from title screen of research.pdf file viewed on (November 7, 2006). Vita. Includes bibliographical references.

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:08:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lexandra Novaki.pdf: 494663 bytes, checksum: dd065fb2df65e19ff5515118352e33a1 (MD5) Previous issue date: 2009-03-16 / The invertase, enzyme found in yeast, above all in the Sacharomyces cerevisiae species, invertebrate, vertebrate, green alga, bacteries, vegetal and fungus, is one of the principal accountable for sucrose hydrolysis to form the inverted syrup, is used by the food industry and pharmacy, in the hydrolyses of rafinose, inulin and gentianose. In the present work, the invertase was produced by Aspergillus casiellus through solid state fermentation, using the industrial waste of soy bran, during a period of 72 h at 25ºC. The enzyme extraction was done by shaking at 120 rpm to period of 1h. The extract obtained was filtered and stocked in freezer. The enzyme recovery was done throughout the protein precipitation with organic solvents, ammonium sulphate and thermal shock. The invertase purification was carried-out in anion-exchange chromatography DEAE-cellulose. It was characterized the enzyme activity of fermented material, the stability relationship to temperature and pH, optimum temperature and pH, effect of the presence of some ions, chelating, redutors agents and detergents, beyond the neutral carbohydrate content determination and specificity to the substrate. The specific enzyme activity was 1029,75 U/mg after the period of 72h of fermentation using soybean bran as substrate. The precipitation with ammonium sulphate and solvents was less efficient than thermal shock for the invertase recovery. The enzyme was purified through thermal shock and anion-exchange chromatography in DEAE-cellulose with a purification factor of 30,30 fold and a yield of 42,70%. The electrophoretic analyses demonstrated that the studied invertase presents molar mass around 25.5 kDa. After submitted to the purification steps, the enzyme showed optimum pH 4.0 and temperature 70ºC. In relation to the stability, after 24 hours of incubation at pH 4.0, the invertase maintained 50% of residual activity. The invertase showed thermalstability at 60 70ºC not arrive the half-life time in 240 minutes was observed 40% of the catalytic capacity remained. In temperatures of 75-85ºC, 40% of residual activity were maintained after 4h of incubation. The partially purified invertase didn´t need metallic ions for catalytic activity, but the presence of Al3+ and Cu+ improved the activity, and Sn2+ challenged decrease in the activity. Sugar content corresponded to 36.57% of total mass protein. The invertase of A. casiellus demonstrated specificity to sucrose. For purification of the invertase of Aspergillus casiellus, induced through soybean bran, were needed 2 steps made up anion-exchange chromatography DEAE-cellulose, which turn the process practible and with few time despended relationship to the others process. The use of agroindustrial waste to obtain invertase is becoming an instrument to development of clean technology, converting the waste in a valuable product. / A invertase, enzima encontrada em leveduras, sobretudo na espécie Sacharomyces cerevisiae, invertebrados, vertebrados, algas verdes, bactérias, vegetais e fungos, é uma das principais responsáveis pela hidrólise da sacarose para a formação de açúcar invertido e é utilizada por indústrias alimentícias e farmacêuticas, na hidrólise da rafinose, inulina e gentianose. No presente trabalho objetivou-se a purificação e caracterização parcial da invertase, obtida por fermentação em estado sólido. A invertase foi produzida por Aspergillus casiellus utilizando como substrato farelo de soja por um período de 72 a 220h, a 25 ºC. A extração das enzimas foi feita utilizando shaker a 120 rpm por um período de 1h. O extrato obtido foi filtrado e estocado em freezer. A recuperação da enzima invertase foi feita através de precipitação das proteínas com solventes orgânicos, sulfato de amônio e através de choque térmico. A purificação da invertase foi conduzida em coluna de DEAE-celulose. Foram caracterizados atividade enzimática do material fermentado, a estabilidade quanto à temperatura e ao pH, temperatura e pH ótimos, efeito da presença de íons, quelantes, agentes redutores e detergentes, além da determinação de carboidratos neutros e especificidade ao substrato. A atividade específica do extrato bruto foi de 1029,75 após um período de 72h de fermentação usando o farelo de soja como substrato. A recuperação por precipitação por sulfato de amônio e solventes foi menos eficiente que um choque térmico para a recuperação da invertase do extrato bruto. A enzima foi parcialmente purificada através de precipitação por choque térmico (utilizando sobrenadante) e cromatografia de troca aniônica em DEAE-celulose com um fator de purificação de 30,30 vezes e rendimento de 42,70%. As análises eletroforéticas estimaram a massa molecular da invertase estudada em torno de 25,5 kDa. Após ser submetida às etapas de purificação, a enzima manteve as condições ótimas de pH 4,0 e de temperatura 70 ºC. Após 24 horas de incubação em pH 4,0, a invertase homogênea manteve 50% de atividade enzimática residual. A invertase demonstrou termoresistência em temperaturas de 60 a 70ºC não atingindo o tempo de meia vida em 240 minutos. Nas temperaturas de 75 a 80ºC foram mantidas aproximadamente 40% da atividade residual após 4 horas de incubação. A invertase parcialmente purificada não demonstrou a necessidade de íons metálicos para a ativação catalítica, mas a presença de íons Al3+ e Cu+ provocaram aumento da atividade, enquanto que Sn2+ diminuiu a atividade catalítica. O conteúdo de carboidratos corresponde a 36,57% da massa total de proteína. A invertase do A. casiellus demonstrou ser especificidade à sacarose. Para a purificação da invertase de Aspergillus casiellus, induzido por farelo de soja, foram necessários 2 passos constituídos de colunas cromatográficas de troca-iônica DEAE-Celulose, o que torna o processo viável e com tempo despendido em relação a outros processos. O uso de resíduo agroindustrial para obtenção da invertase torna-se uma ferramenta para o desenvolvimento de tecnologias limpas, convertendo o resíduo em questão em um produto de maior valor agregado.

Orientadores: Pedro Eduardo de Felício, Angélica Simone Cravo Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-22T11:18:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guizzo_MarianaMasson_M.pdf: 798911 bytes, checksum: d15448b3fe13c02e48078fa86ee4fd74 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Um dos maiores desafios do setor produtivo da carne esta relacionado com a alteracao do perfil de acidos graxos atraves da manipulacao da dieta fornecida aos animais. O teor de gordura e a composicao de acidos graxos da carne assumem, atualmente, um papel importante na cadeia produtiva sob influencia das exigencias pelo mercado consumidor. A tendencia atual e a da demanda crescente por alimentos considerados "saudaveis", cujas características principais sao os baixos teores de gorduras saturadas. Porem, a busca de um produto mais atraente ao consumidor pode influenciar de forma positiva e/ou negativa nas caracteristicas de quantitativas e qualitativas da carcaca e da carne. Com o objetivo de avaliar os efeitos da nutricao animal sobre as caracteristicas da carcaca e carne de cordeiros, 24 cordeiros machos inteiros, da raca Santa Inesx Dorper foram confinados em baias individuais, separados aleatoriamente em quatro tratamentos utilizando sementes oleaginosas nas dietas, sendo os tratamentos contendo caroco de algodao (CA), semente de girassol (SG), grao de soja (GS) e controle (C). Apos 84 dias de confinamento, os cordeiros foram abatidos e, apos 24h o resfriamento, foram realizadas as analises quantitativas da carcaca, e em seguida a desossa e a separacao do musculo Longissimus dorsi para a realizacao das analises de parametros de qualidade da carne. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro tratamentos e seis repeticoes. As dietas com caroco de algodao, semente de girassol e grao de soja, prejudicaram o peso, o rendimento e o comprimento de carcaca na comparacao com a dieta controle. Para as demais características quantitativas e qualitativas, nao houve influencia (P>0,05) dos tratamentos, para as medidas de AOL e EGS, pH, cor, e maciez, perda de peso na coccao e os teores de umidade e lipidios da carne dos cordeiros. Sob o ponto de vista da avaliacao sensorial, houve diferenca estatistica (P<0,05) em relacao a aceitabilidade do aroma, sabor e do produto de modo geral, indicando que os consumidores apresentam maior preferencia por carne de cordeiros confinados com dietas contendo semente de soja e girassol, do que contendo caroco de algodao. O uso do grao de soja aumentou significativamente os teores de acido linoleico (18:2) e CLA na carne, acidos graxos que sao desejaveis para o consumo humano / Abstract: One of the biggest challenges of the meat industry is related to the change in composition of the fatty acid profile by manipulating the diet givere to the animals. Nowadays the fat content and fatty acid composition of meat has an important role in the meat industry due to the influence of the consumer market demands. The current trend is the growing demand for foods deemed "healthy", whose main characteristic is the low saturated fat. However, the search for a product more attractive to consumers can influence in a positive or negative way on characteristics of meat and quantitative or qualitive carcass. With the aim of evaluating the effects of animal nutrition on carcass and ovine meat characteristics, 24 male lambs, . Santa Ines . Dorper breed were housed in individual pens, randomly separated in four treatments using oilseeds into diets, and treatments containing cottonseed (CS), sunflower seeds (SS), soybean (SB) and control (C). After 84 days on the feedlot, the lambs were slaughtered and, after 24h of cooling, were conducted quantitative analyzes of the carcass, and when the carcass was deboned the Longissimus dorsi muscle was separated to perform the meat quality analysis. The experimental design was completely randomized with four treatments and six replications. The diets with cottonseed, sunflower seed and soybean, undermined the weight, yield and carcass length compared to the control diet. For other quantitative and qualitative characteristics, there was no influence (P> 0.05) of treatment, measures to AOL and EGS, pH, color, and softness, weight loss during cooking and the moisture and fat meat lambs. From the point of view of sensory evaluation, there was a statistical difference (P <0.05) relative acceptability of aroma, flavor and overall product, indicating that most consumers have a preference for beef and sheep fed diets containing seed soya and sunflower, which contains cottonseed. The use of soybean significantly increased levels of linoleic acid (18:2) and CLA in the flesh fatty acids that are desirable for human consumption / Mestrado / Tecnologia de Alimentos / Mestra em Tecnologia de Alimentos