Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarciaOP_DISSERT.pdf: 660946 bytes, checksum: 587d1049df3f129a5c11e9b6394de8fc (MD5) Previous issue date: 2010-08-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Derivatives of propionic acid NSAIDs are irreversible inhibitors of cyclooxygenase enzyme widely used. The aim of this study was to evaluate, through different experimental models, biological effects of derivatives of propionic acid (fenoprofen, naproxen, ibuprofen and ketoprofen) in cellular and molecular level. The labeling of blood constituents with technetium-99m (99mTc) and morphological analysis of erythrocytes of blood of rats, as well as growth, survival of cultures of Escherichia coli (E. coli) and the assessment of bacterial plasmid electrophoretic profiles were models used for experimental evaluation of possible biological effects of antiinflammatory drugs. The results show that, in general, anti-inflammatory drugs evaluated were not able to alter the labeling of blood constituents with 99mTc, the morphology of red blood cells from blood of rats, as well as the growth of cultures of E. coli and the electrophoretic profile of plasmid DNA. However, naproxen appears to cytotoxic effect on bacterial cultures, plasmids and genotoxic effects in reducing the action of stannous chloride in cultures of E. coli. The use of experimental fast performance and low cost was important for assessment of biological effects, contributing to a better understanding of the properties of propionic acid derivatives studied. anti-inflammatory, blood constituents, technetium-99m, stannous chloride, Escherichia coli; DNA / Os derivados do acido propi?nico s?o antiinflamat?rios n?o esteroidais inibidores irrevers?veis da enzima cicloxigenase amplamente utilizados. O objetivo deste trabalho foi avaliar, atrav?s de diferentes modelos experimentais, efeitos biol?gicos de derivados do ?cido propi?nico (fenoprofeno, naproxeno, ibuprofeno e cetoprofeno) em n?vel celular e molecular. A marca??o de constituintes sangu?neos com tecn?cio 99m (99mTc) e a an?lise morfol?gica de hem?cias de sangue de ratos Wistar, bem como, o crescimento, sobreviv?ncia de culturas de Escherichia coli (E. coli) e a avalia??o do perfil eletrofor?tico plasm?dios bacterianos, foram modelos experimentais utilizados para avalia??o de poss?veis efeitos biol?gicos dos antiinflamat?rios. Os resultados obtidos demonstram que, de modo geral, os antiinflamat?rios avaliados n?o foram capazes de alterar a marca??o de constituintes sangu?neos com 99mTc, a morfologia de hem?cias de sangue de ratos Wistar, assim como, o crescimento de culturas de E. coli e o perfil eletrofor?tico de plasm?dios. Entretanto, o naproxeno parece apresentar efeito citot?xico em culturas bacterianas, efeito genot?xico em plasm?dios e diminui??o da a??o do cloreto estanoso em culturas de E. coli. A utiliza??o de modelos experimentais de r?pida realiza??o e baixo custo se mostrou importante para avalia??o de efeitos biol?gicos, contribuindo para uma melhor compreens?o das propriedades dos derivados do ?cido propi?nico estudados. Esse trabalho teve car?ter multidisciplinar e na vig?ncia dos aux?lios concedidos pela CAPES, FAPERJ e CNPq

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O cloreto estanoso (SnCl2) e a radiação ultravioleta A (UVA) são agentes que lesam diversas estruturas celulares, inclusive o DNA, principalmente pela geração de espécies reativas de oxigênio. O objetivo deste trabalho foi estudar a mutagênese e o reparo das lesões produzidas pela combinação do UVA, na condição de préiluminação, com o SnCl2. Avaliou-se a ação de enzimas do reparo por excisão de bases (BER), em Escherichia coli (E. coli), por eletroforese em gel alcalino de agarose e sobrevivência bacteriana. Também se estudou a indução do sistema SoxRS pelo cromoteste, e a mutagênese pelo teste de Ames. De acordo com os resultados: i) o UVA induziu quebras no DNA das cepas testadas e os mutantes fpgnfo e fpg apresentaram maior retardo no reparo das lesões; ii) o SnCl2 induziu mais quebras que o UVA e os mutantes nfo e fpg mostraram maior dificuldade em reparar as lesões; iii) o UVA+SnCl2 provocou mais quebras que o SnCl2 e os mutantes nfo e fpg também apresentaram maior lentidão no reparo das lesões; iv) o UVA não inativou as cepas testadas; v) as cepas nfo e fpg foram as mais sensíveis ao SnCl2; vi) o UVA+SnCl2 provocou maior letalidade em todas as cepas testadas, em relação ao SnCl2, e os mutantes nfo e fpg também foram os mais sensíveis ao tratamento com ambos os agentes; vii) a transformação dos mutantes nfo com o plasmídio pBW21 (nfo+) e dos mutantes fpg com o plasmídio pFPG (fpg+) aumentou a sobrevivência das cepas aos tratamentos com SnCl2 e UVA+SnCl2; viii) o SnCl2 induziu o sistema SoxRS; ix) o SnCl2, UVA e UVA+SnCl2 não induziram mutagênese; x) o reparo das lesões parece ser preferencialmente realizado pelas proteínas Fpg e Nfo. / Stannous chloride (SnCl2) and ultraviolet radiation A (UVA) are able to induce lesions in different cellular structures, including DNA, manly through ROS generation. The aim of this work was to study the mutagenesis and repair of lesions induced by the association of UVA (pre treatment) with SnCl2. It was evaluated the action of base excision repair (BER) enzymes in Escherichia coli (E. coli) by alkaline gel electrophoresis and bacterial survival. It was also evaluated the SoxRS system induction by chromotest and mutagenesis through the Ames test. According to the results: i) UVA induced DNA strand breaks in all strains and fpg-nfo and fpg mutants showed greater delay in the repair of lesions; ii) SnCl2 induced more breaks than UVA and nfo and fpg mutants showed more difficult to repair the damage; iii) UVA + SnCl2 caused more breaks than the SnCl2 and nfo and fpg mutants also showed a slowest repair of injuries; iv) UVA did not inactivate any bacterial strains tested; v) nfo and fpg strains were more sensitive to SnCl2; vi) UVA + SnCl2 caused higher mortality in all strains tested, when compared to SnCl2, and, again, nfo and fpg mutants were the most sensitives to the treatment with both agents; vii) the transformation of nfo mutant with the plasmid pBW21 (nfo+) and fpg mutants with plasmid pFPG (fpg+) increased the survival of the strains to SnCl2 and UVA + SnCl2 treatments; viii) SnCl2 was able to induce SoxRS system; ix) SnCl2, UVA + SnCl2 and UVA did not induce mutagenesis; x) damage repair seems to be preferentially performed by Fpg and Nfo proteins.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As células dos seres vivos são constantemente ameaçadas por agentes químicos ou físicos que possam causar danos ao DNA. Um dos agentes deste estudo foi o cloreto estanoso (SnCl2), utilizado na medicina nuclear como redutor de um isótopo radioativo do tecnécio, o 99mTc. O SnCl2 é um agente cujo mecanismo de produção de lesões em estruturas celulares envolve a geração de espécies reativas de oxigênio (ERO), tais como o H2O2 e o radical OH. Essas ERO podem causar uma série de doenças, o envelhecimento e até mesmo a morte celular, por apoptose ou necrose. Sendo assim, torna-se importante a pesquisa sobre os efeitos biológicos, tanto desse sal, quanto das outras substâncias que compõem os radiofármacos utilizados em medicina nuclear. Desta forma, nosso objetivo geral foi avaliar a toxicidade do cloreto estanoso, associado, ou não, ao kit 99mTc-MDP, bem como dos demais componentes do kit, em diferentes sistemas biológicos. Eletroforese em gel alcalino de agarose em células de E. coli AB 1157 para a avaliação da genotoxicidade; Ensaio do Cometa em células de sangue total de ratos Wistar para estudar a genotoxicidade; Ensaio do Micronúcleo em células da medula óssea de ratos Wistar para verificar o potencial aneugênico e clastogênico; Ensaio Cometa em células de sangue total e em células mononucleares de sangue periférico humano para estudar a genotoxicidade; Ensaio de Viabilidade com Azul Trypan e citometria de fluxo para analisar a citotoxicidade em PBMC; Ensaio do Micronúcleo em linfócitos humanos para verificar o potencial aneugênico e clastogênico. Em cepas de E. coli AB1157, o SnCl2 e o MDP induziram quebras no DNA genômico, quando isolados; porém quando usados de forma associada, ocorreu uma atenuação do número de quebras. Em ratos Wistar, o 99mTc-MDP não foi genotóxico e também não induziu clastogênese ou aneugênese. Em Sangue total, in vitro, o SnCl2 apresentou efeito dose-resposta. Em PBMC, in vitro, o 99mTc-MDP causou redução da viabilidade celular e apresentou genotoxicidade, porém não induziu clastogênese e nem aneugênese. / Alive cells are constantly threated by chemical and physical agents that can generate DNA damage. Here, the studied agent was stannous chloride (SnCl2), a 99mTc reducing agent employed in nuclear medicine. This salt can produce lesions through generation of reactive oxygen species (ROS) as H2O2 and OH. These ROS can be the origin of several diseases and cell death by apoptosis or necrosis. In this way it is important the research about the biological effects of this salt and the other substances composing the radiopharmaceuticals used in nuclear medicine.The aim of this work was to evaluate, in different biological systems, the stannous chloride toxic potentiality, associated or not to 99mTc-MDP radiopharmaceutical as well as the other kit components. Alkaline electrophoresis agarosis gel of E. coli AB 1157 to evaluate the genotoxicity in prokariotic cells; Comet assay in Wistar rats total blood to evaluate the genotoxicity in eukaryotic cells; Micronucleous assay in Wistar rats bone marrow cells to verify the aneugenic and clastogenic effects; Comet assay in human in peripherical total blood and mononuclear cells to evaluate the genotoxicity; Trypan blue viability assay and flow cytometry to evaluate citotoxicity in PBMC; Micronucleous assay in human lymphocyte cells to verify the aneugenic and clastogenic effects; SnCl2 and MDP when isolated induced breaks in E. coli genomic DNA. But, when used in an associated way it was observed an atenuation of the breaks number. 99mTc-MDP was not genotoxic, clastogenic nor aneugenic in Wistar rats In ex vivo human total blood, SnCl2 presented a dose-response effect In ex vivo PBMC; 99mTc-MDP induced a cellular viability reduction and presented genotoxic but not clastogenic or aneugenic effects.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GiuseppeAP.pdf: 289778 bytes, checksum: 0019c3f931b948d4ac6b9aa32d20ec37 (MD5) Previous issue date: 2007-08-16 / &#65279;The use of radionuclides has contributed for advances in Health Sciences, to research or to the diagnosis and/or treatment of diseases. These advances have been possible with the utilization of radiopharmaceuticals labeled with technetium-99m (99mTc). Stannous chloride (SnCl2) has the main reducing agent utilized to obtain radiopharmaceuticals labeled with technetium-99m. It has been reported that several natural or synthetic drugs are capable to alter the labeling of blood constituents with 99mTc, as well as the red blood cells morphology. The aim of this study was to evaluate possible alterations of Chrysobalanus icaco extract on the labeling of blood constituents with 99mTc, on the morphology of RBC of blood of Wistar rats, on the breakage of plasmid DNA and on the effects of stannous chloride on plasmid DNA. The results showed significant (P<0.05) alteration of the labeling of blood constituents with 99mTc, as well as, modification of the morphology and morphometry (perimeter/area ratio) of the RBC in presence of the extract. These data suggest that this abajeru extract could alter the labeling of blood constituents with 99mTc by its chelating/antioxidant action and/or effects on membrane structures. Moreover C. icaco extract altered the electrophoretic profile and decreased significantly (p<0.05) the effect of SnCl2 on plasmid DNA. The results obtained in this work could indicate a dose-dependent protective action against the SnCl2 and a genotoxic effect of C. icaco extract on plasmid DNA / &#65279;O uso de radionucl?deos tem contribu?do para avan?os relevantes em Ci?ncias da Sa?de, seja para pesquisa ou seja para o diagn?stico e/ou tratamento de doen?as. Muitos desses avan?os t?m sido poss?veis com a utiliza??o de radiof?rmacos marcados com tecn?cio-99m (99mTc). A marca??o desses radiof?rmacos necessita de um agente redutor e o cloreto estanoso tem sido o mais empregado. Tem sido descrito que diversas drogas naturais ou sint?ticas s?o capazes de interferir na marca??o de constituintes sangu?neos com 99mTc, assim como na morfologia das hem?cias. O objetivo deste estudo foi avaliar poss?veis interfer?ncias de um extrato de Chrysobalanus icaco (C. icaco) na marca??o dos constituintes sangu?neos com 99mTc, na morfologia de hem?cias do sangue de ratos Wistar, na quebra de DNA de plasm?dios e na a??o do cloreto estanoso no DNA plasmidial. Os resultados indicam que o extrato de C. icaco altera a marca??o de constituintes sangu?neos significativamente (p<0,05) com 99mTc, a morfologia e a morfometria (rela??o per?metro/?rea) das hem?cias, talvez por a??o quelante ou antioxidante e/ou por efeitos em estruturas da membrana envolvidas no transporte de ?ons. Al?m disso C. icaco altera o perfil eletrofor?tico e diminui significativamente (p<0.05) os efeitos do cloreto estanoso no DNA plasmidial. Estes ?ltimos resultados sugerem uma a??o protetora dose-dependente contra a a??o do cloreto estanoso e um efeito genot?xico do extrato de C. icaco no DNA plasmidial. O estudo tem car?ter multidisciplinar com a participa??o das seguintes ?reas do conhecimento: Radiobiologia, Bot?nica, Gen?tica, Fitoterapia e Hematologia

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CamilaGR.pdf: 488995 bytes, checksum: fa9e656a33d6c75d3226bec90875615a (MD5) Previous issue date: 2008-08-12 / Radiobiocomplexes are used in nuclear medicine to obtain images and to treat diseases. Blood constituents have been used as radiobiocomplexes. Natural or synthetic products can influence on the labeling of blood constituents with technetium-99m (99mTc), the morphology of red blood cells and on the stannous chloride (SnCl2) action on plasmid DNA. Sambucus australis and Sambucus nigra are used in popular culture for treating diseases. The aim of this work was to evaluate the effects of the extracts of Sambucus australis and Sambucus nigra on the labeling of blood constituents with 99mTc, on morphology of red blood cells of Wistar rats, on the topology of plasmids DNA and the action against the SnCl2 effects on the DNA of plasmids pBSK. On the labeling of blood constituents with 99mTc it was verified that both extracts were capable to decrease significantly the radioactivity in the cellular compartment and in the insoluble fraction of plasma. Sambucus australis also decreased the labeling of insoluble fraction of blood cells with 99mTc. Both extracts did not alter the morphology of red blood cells. Moreover, it was verified that Sambucus nigra did not alter the electrophoretic profile of plasmid DNA, but decreased the effect of SnCl2 on plasmid DNA. These last results sugest a genotoxic effect and a protective action of Sambucus nigra extract against the SnCl2 action on plasmid DNA. This work was developed with the contribution of several Departments of biomedical area of the Hospital Universit?rio Pedro Ernesto, of the UERJ, characterizing a multidisciplinary experimental research / Radiobiocomplexos s?o utilizados em medicina nuclear para obten??o de imagens e tratamento de doen?as. Constituintes sangu?neos t?m sido utilizados como radiobiocomplexos. Produtos naturais ou sint?ticos podem influenciar a marca??o de constituintes sang??neos com tecn?cio-99m (99mTc), a morfologia de hem?cias e a a??o do cloreto estanoso no DNA plasmidial. Sambucus australis e Sambucus nigra s?o utilizados na cultura popular para o tratamento de doen?as. O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos dos extratos de Sambucus australis e de Sambucus nigra na marca??o de constituintes sang??neos com 99mTc, na morfologia de hem?cias de ratos Wistar, na topologia do DNA plasmidial e sua a??o sobre os efeitos do cloreto estanoso no DNA de plasm?dios pBSK. Na marca??o de constituintes sang??neos com 99mTc verificou-se que os dois extratos foram capazes de diminuir significativamente a radioatividade no compartimento celular e na fra??o insol?vel do plasma. Sambucus australis diminuiu tamb?m a marca??o da fra??o insol?vel da c?lula com 99mTc. Os dois extratos n?o alteraram a morfologia das hem?cias. Al?m disso, foi verificado que um extrato de Sambucus nigra n?o alterou o perfil eletrofor?tico do DNA plasmidial, entretanto diminuiu os efeitos do cloreto estanoso no DNA plasmidial. Estes ?ltimos resultados sugerem um efeito genot?xico e uma a??o protetora do extrato de Sambucus nigra contra a a??o do cloreto estanoso no DNA plasmidial. Este trabalho foi realizado com a colabora??o de diversos Departamentos da ?rea biom?dica do Hospital Universit?rio Pedro Ernesto, da UERJ, caracterizando uma pesquisa experimental multidisciplinar