Thesis (MSc (Agric) (Conservation Ecology and Entomology))--University of Stellenbosch, 2010. / ENGLISH ABSTRACT: Ambient temperature plays a key role in insect-physiology, -population dynamics and ultimately -geographic distribution. Here, I investigate the survival of codling moth, Cydia pomonella (Linnaues) (Lepidoptera: Tortricidae), which is a pest of economic importance in pome fruit production, to a wide range of temperature treatments. In this thesis, I first explore how temperature affects the survival and limits to activity of codling moth and secondly investigate if thermal acclimation can improve field performance of moths used in sterile insect technique control programmes under ecologically relevant conditions. First, I found that absolute temperature as well as the duration of temperature exposure significantly affects adult C. pomonella survival. Lethal temperatures, explored between -20 °C to -5 °C and 32 °C to 47 °C over a range of durations, showed that 50% of the adult C. pomonella population killed at -12 °C and at 44 °C after 2 hrs for each treatment. At high temperatures a pretreatment at 37 °C for 1 hr dramatically improved survival at 43 °C for 2 hrs from 20% to 90% (p<0.0001). Furthermore, high temperature pre-treatments (37 °C for 1 hr) significantly improved low temperature survival at -9 °C for 2 hrs. In sum, my results suggest pronounced plasticity of acute high temperature tolerance in adult C. pomonella, but limited acute low temperature responses. Secondly, low-temperature acclimated laboratory-reared moths were recaptured in significantly higher numbers (d.f. = 2, χ2 = 53.13 p<0.001), by sex pheromone traps, under cooler conditions in the wild relative to warm-acclimated or non-acclimated moths. However, these improvements in low temperature performance in cold-acclimated moths came at a cost to performance under warmer conditions in the wild. This novel study demonstrates the importance of thermal history on C. pomonella survival and clear costs and benefits of thermal acclimation on field and laboratory performance, and thus, the potential utility of thermal pre-treatments for improved efficacy in the sterile insect technique programme for C. pomonella control under cooler, springtime conditions. Finally, on a global scale, this study highlights that low and high temperatures could play a role in CM adult survival through direct mortality and thus, may influence, or have influenced in the pest, population dynamics. / AFRIKAANSE OPSOMMING: Temperatuur speel ‘n belangrike rol in die fisiologie, populasiedinamika en geografiese verspreiding van insekte. In hierdie tesis ondersoek ek die rol van ‘n wye reeks temperature op die oorlewing van kodlingmot Cydia pomonella (Linnaues) (Lepidoptera: Tortricidae), ‘n sagtevrug pes-spesie van ekonomiese belang. Ek ondersoek hoofsaaklik die effek van temperatuur op die fisiologie en fiksheid van kodlingmot, asook die mate waartoe termiese akklimasie (‘n mate van aanpassing) die veldgedrag van die steriele insek beheer-metode (SIT), d.m.v. kodlingot, in relevante omgewingstemperature kan verbeter. Ek het (i) gevind dat die temperatuur en duur van die temperatuur toediening ‘n betekenisvolle toename in volwasse C. pomonella oorlewing tot gevolg het. In die deel van die studie is temperature tussen -20 °C en -5 °C and tussen 32 °C en 47 °C ondersoek oor ‘n reeks van 0.5, 1, 2, 3 en 4 ure van duur. In kort lei -12 °C en 44 °C vir 2 uur onderskeidelik tot die uitsterf van 50% van die volwasse C. pomonella populasie. Indien die motte vooraf gehou is by 37 °C vir ongeveer 1 uur, is oorlewing by 43 °C vir 2 ure betekenisvol verbeter van 20% tot 90% (p<0.0001). Hoër temperatuur vooraf-blootstellings (akklimasie), by 37 °C vir 1 uur, het daartoe gelei dat lae temperatuur lae-temperatuur-oorlewings by -9 °C vir 2 ure betekenisvol verbeter het. Oor die algemeen het die resultate gedui dat hoër akute temperatuurstoleransie in C. pomonella bestaan, maar beperkte akute lae-temperatuur reaksies bestaan. Verder het lae-temperatuur akklimasie (laboratorium geteelde) motte ‘n betekenisvolle hoër getal hervangste deur geslagsferomone in koeler omgewings opgelewer (v.i. = 2, χ2 = 53.13, p<0.001) in vergelyking met warmer-temperatuur geakklimatiseerder motte. Hierdie verbeteringe in laetemperatuur reaksies vanaf lea-temperatuur akklimasie groepe is teen ‘n koste teen warmer reaksie-toestande in die natuur geïs. Hierdie eersdaagse studie demonstreer die belang van historiese temperatuur op die oorlewing van C. pomonella. Die kostes- en voordele van termiese akklimasie op veld- en laboratoriumpopulasie reaksies en die potensiële gebruik daarvan in die verbetering van steriele insek tegniek programme, onder koeler omstandighede, is uitgelig. Laastens, beklemtoon hierdie studie die belangrikheid van temperatuur as bepalende faktor van kodlingmot-oorlewing en die invloed daarvan op die vrugte-pes populasiedinamika.

The mosquito Aedes aegypti is responsible for 50 million dengue fever infections in humans each year. A novel control strategy, named RIDL (Release of Insects carrying a Dominant Lethal) relies on releasing large numbers of genetically sterile male insects in order to control pest populations. This thesis describes the development of new tools to improve the efficiency of RIDL against Ae. aegypti and assessment of candidate strains for field release. <strong>Chapter 3</strong> describes a new selection system for Ae. aegypti based on ethanol susceptibility conferred by the alcohol dehydrogenase gene (Adh) from Drosophila melanogaster. I observed that the susceptibility of Ae. aegypti larvae to ethanol can be triggered by expression of Adh in larvae. <strong>Chapters 4</strong> and <strong>5</strong> focus on RIDL strains with a genetic sexing mechanism, for easy and stringent selection for males before mass-releases, eliminating disease- transmitting females. In <strong>Chapter 4</strong>, I describe the creation of a late-acting sexing strain of Ae. aegypti based on the Ae. aegypti doublesex (Aedsx) alternative splicing system. In <strong>Chapter 5</strong>, I describe an attempt to create an early-acting sexing system. Killing the females of the release generation early would free space and resources for the production of males. This was done by combining the Adh gene and the Aedsx alternative splicing system described in <strong>Chapters 3</strong> and <strong>4</strong>. <strong>Chapter 6</strong> reports the results of a comparison, in terms of quality and productivity, between an existing Ae. aegypti RIDL strain and a wild-type control. Results showed equivalent female quality and productivity between the two strains, while RIDL males were less fertile in comparison with wild-type males. RIDL eggs also seemed more susceptible to long- term storage. The results of this work show promise for development of novel RIDL strains that may be used in the field to control disease-transmitting mosquitoes.

The mosquito Aedes polynesiensis, a member of the Aedes scutellaris complex, is the main vector in the South Pacific region of the Wuchereria bancrofti parasite, the causative agent of lymphatic filariasis (LF), and is also a major nuisance biter. Decades of Mass Drug treatment (MDA) have not been successful in elimination LF. Two non-vector species in the Ae. scutellaris complex were introgressed with Ae. polynesiensis to attempt to obtain lines that would produce cytoplasmic incompatibility (CI) with wild populations and/or LF-refractoriness. Despite selection of progeny from Brugia-challenged, non-infective females at each backcross, no refractory line was acquired. However, three lines from crosses between aposymbiotic Ae. polynesiensis and Ae. riversi displayed CI and male mating competiveness suitable for the purpose of population suppression using the incompatible insect technique (IIT). A population study was conducted of potential release sites and the evaluation of monitoring tools for Ae. polynesiensis on Moorea and Tetiaroa, French Polynesia. There was no evidence of active migration between selected islets on the atoll of Tetiaroa, suggesting it is a suitable site for field releases of CI males. The BioGents Sentinel trap was shown to be an efficient and convenient trap suitable for Ae. polynesiensis monitoring. The effects of temperature and larval density on life-table parameters relevant to IIT were examined, including: larval survivorship, developmental time to pupation, male to female ratio, male pupae yield, male size and adult male survival. These findings were used to design and conduct a 14-week field experiment testing CI male strain against an isolated population, using optimized rearing conditions. Approximately 8000 males were released weekly on motu Onetahi, Tetiaroa atoll. Significant sterility was induced by Wolbachia in the targeted female population, supporting the development and scale-up of this approach toward Ae. polynesiensis nuisance and LF transmission reduction.

No mundo todo, o manejo integrado de moscas-das-frutas é feito com associação do controle biológico aplicado e técnica do inseto estéril. Além da boa eficiência no campo, a associação dessas técnicas é também favorecida pelo fato de ambos os organismos, insetos estéreis e parasitoides, poderem ser produzidos massalmente na mesma fábrica com menor custo. Visando à produção massal do parasitoide de moscas-das-frutas Diachasmimorpha longicaudata e de insetos estéreis para atender a programas de manejo integrado de Ceratitis capitata e Anastrepha fraterculus, o presente trabalho foi desenvolvido no Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA), da Universidade de São Paulo, entre os anos de 2006 a 2012. Durante esse período, metodologias de criação em laboratório foram implementadas e permitiram o desenvolvimento da tecnologia necessária para a produção desses insetos em grande escala no Brasil. Dados de 25 gerações do parasitoide produzido em grande escala em C. capitata tsl-Viena 8 e 51 gerações em A. fraterculus, bem como os efeitos e diferenças desses hospedeiros na qualidade do parasitoide foram analisados. É possível criar o parasitoide D. longicaudata em ambos os hospedeiros, C. capitata linhagem tsl-Viena 8 e A. fraterculus, entretanto essa linhagem de C. capitata não é indicada para produção massal do parasitoide, pois a emergência é muito baixa devido à debilidade do hospedeiro, possivelmente acarretada pelas manipulações genéticas que permitem a sexagem da mosca na fase embrionária. Caso essa seja a linhagem com melhor custo/ benefício disponível, recomenda-se o uso de larvas hospedeiras oriundas de ovos tratados termicamente para a produção do parasitoide. A criação em grande escala de A. fraterculus foi estabelecida com sucesso após o período de domesticação da espécie, obtendo-se larvas de boa qualidade com baixo custo, devido à dieta larval com baixa concentração de ágar e total uso de ingredientes nacionais nas dietas de adultos e larvas, por mais de 50 gerações. O uso de larvas irradiadas de A. fraterculus para a produção de D. longicaudata promove maior emergência do parasitoide, com maior quantidade e melhor qualidade de fêmeas que larvas de C. capitata. / The integrated management of fruit flies is worldwide done with the association of augmentative biological control with parasitoids and the sterile insect technique. Beyond the efficiency in the field, the joint of both techniques is also favored by the easy production of organisms, both parasitoids and sterile insects, in the same facility with low costs. Aiming for the mass production of the fruit fly parasitoid Diachasmimorpha longicaudata and sterile insects to support integrated management programs for Ceratitis capitata and Anastrepha fraterculus, this work was developed at the Center of Nuclear Energy in Agriculture (CENA) of the University of São Paulo, between 2006 and 2012. Along this period, laboratory rearing methods were improved which allowed the development of the required technology for a large scale production of those insects in Brazil. Data of 25 generations of the parasitoid large scale production using C. capitata tsl-Vienna 8 strain and 51 generations using A. fraterculus as hosts are presented. Moreover, the effect and differences between hosts in parasitoid\'s quality were analyzed. The parasitoid D. longicaudata can be large scale produced using both C. capitata tsl- Vienna 8 or A. fraterculus as hosts, but this strain of C. capitata is not recommended for D. longicaudata mass production once the parasitoid emergency is very low due to the host weakness. If this strain is the best cost/benefit available, the use of host larvae originating from heat treated eggs might be considered to parasitoids production. The A. fraterculus large scale rearing was established successfully after the domestication period of the specie, producing a large amount of insects with excellent quality using local ingredients and little agar in the diet composition over 50 generations. A. fraterculus irradiated larvae as host for large scale producing D. longicaudata promotes greater parasitoid emergence with greater female biased sex ratio and better female quality than C.capitata larvae.

As moscas-das-frutas são consideradas importantes pragas da fruticultura mundial, causando perdas significativas à produção e ao livre trânsito de frutas. Com a preferência por alimentos com baixos níveis de agrotóxicos, pesquisas estão buscando alternativas ecológica, social e econômica viáveis para o controle destas pragas. A Técnica do Inseto estéril (TIE) é uma técnica onde os insetos são criados, esterilizados e liberados em áreas infestadas, reduzindo a fertilidade da população selvagem, além de ser um método não poluente e não agressivo ao ambiente. Com o desenvolvimento de novos estudos da metodologia da TIE, foi introduzida uma nova linhagem mutante a Sensibilidade a Letal Temperatura (tsl) Viena-8, cujas fêmeas são sensíveis à alta temperatura, podendo ser eliminadas já na fase embrionária, no início da criação massal, agregando mais benefícios a este método de controle e/ou supressão de praga. Com diferentes testes de incubação de ovos da linhagem tsl, com temperaturas e tempos combinados e variados, comprovou-se a extrema sensibilidade às mudanças de temperatura. A temperatura ideal para a incubação dos ovos dessa linhagem está entre 24ºC a 26ºC pelo período de 24 a 48 horas. Deve-se tomar o máximo de cuidado com a elevação da temperatura acima de 26ºC durante a manutenção e multiplicação dessa linhagem em condições de laboratório ou massalmente. Acima de 26ºC, há sérios riscos de comprometer a qualidade dos insetos produzidos. O curto período de 6 horas a uma temperatura de 34ºC, já é suficiente para alterar negativamente a proporção de fêmeas de ovos tratados termicamente / The fruit flies are considered important pests of the world horticulture, causing significant loses to the production and the free traffic of fruits. With the preference for foods with low levels of pesticides, researches are looking for alternatives ecological, social and economical viable for the control of these pests. The Sterile Insect Technique (SIT) is a technique where the insects are reared, sterilized and release in infested areas, reducing the fertility of the wild population, and is a method no pollutant and no aggressive to the environment. With the development of new studies of the methodology of SIT, a new mutation, Temperature Sensitive Lethal (tsl) Vienna 8, whose females are sensitive to the high temperature, could already be eliminated in the embryonic phase, in the beginning of the mass-rearing, resulting in more benefits to the control/suppression this pests. Different tests of incubation with eggs of tsl strain, with variation of time and temperature was done and proved a very sensitive to temperature changes. The ideal temperature for the incubation of the eggs is among 24ºC to 26ºC by the period from 24 to 48 hours. The maximum of care should be taken with the elevation of the temperature above 26ºC during the maintenance and multiplication in laboratory conditions or mass-rearing. Above this temperature it can commit the quality of the produced insects. The short period of 6 hours with temperature to 34ºC, is enough to change negatively the proportion of females of eggs in the thermal treatment

Desde a década de 50, os cientistas tem utilizado radiação ionizante para esterilizar insetos, que são liberados na natureza para acasalar, mas sem nenhuma descendência. Conhecida como a técnica do inseto estéril (TIE), este método de controle de inseto vem tradicionalmente utilizando radiações ionizantes para esterilizar os insetos, sendo uma técnica que não gera resíduo, e pode agir em sinergia com as demais técnicas dentro do manejo integrado de pragas. O Brasil por vários anos vem lutando contra o aumento de pragas, introduzindo novas táticas e técnicas dentro dos programas de MIP, para driblar a resistência dos produtos químicos, como: diminuir os resíduos dos agrotóxicos; para algumas culturas importantes do o nosso país, temos um largo espectro de pragas ocorrendo do inicio ao fim da colheita, uma delas é a cultura do algodoeiro e dentre as pragas chave dessa cultura, temos algumas lagartas extremamente importantes, entre elas Heliothis virescens e Helicoverpa armigera. Essas espécies são parecidas morfologicamente, sendo a segunda identificada a poucos anos aqui no Brasil. Ainda não há trabalhos no Brasil utilizando TIE como ferramenta adicional para lepidópteros, portanto objetivou-se com esse estudo avaliar o efeito de doses de radiação gama nas diferentes fases do ciclo evolutivo de Heliothis virescens e Helicoverpa armigera, bem como avaliar a esterilidade na geração P e a capacidade de competição dos insetos irradiados com os não irradiados. A fase pupa foi a que apresentou um melhor resultado, pois com 75 Gy atingiu a esterilidade em Heliothis virecens e 100 Gy esterilizou Helicoverpa armigera, portanto contemplou a fase e a dose escolhida para avaliar a competição entre os insetos irradiados e os insetos normais de ambas as espécies. E tanto Heliothis virecens como Helicoverpa armigera apresentaram um resultado satisfatório, pois os insetos irradiados conseguiram reduzir significativamente a viabilidade dos ovos na proporção de 9: 1: 1 / Since the 1950s, scientists have used ionizing radiation to sterilize insects, which are released in nature to mate, but without any progeny. Known as the sterile insect technique (TIE), this method of insect control has traditionally used ionizing radiation to sterilize insects, a technique that does not generate residues, and can act in synergy with the other techniques within integrated pest management. For several years, Brazil has been fighting against the increase of pests, introducing new tactics and techniques within the IPM programs, to overcome the resistance of chemical products, such as: reducing the residues of agrochemicals; For some important crops of our country, we have a wide spectrum of pests occurring from the beginning to the end of the harvest, one of them is the cotton crop and among the key pests of this crop, we have some extremely important caterpillars, among them Heliothis virescens and Helicoverpa armigera These species are morphologically similar, the second being identified a few years ago in Brazil. There are still no studies in Brazil using TIE as an additional tool for Lepidoptera, therefore the purpose of this study was to evaluate the effect of doses of gamma radiation in the different phases of the evolutionary cycle of Heliothis virescens and Helicoverpa armigera, as well as to evaluate the sterility in generation P And the ability of insects to irradiate with non-irradiated insects. The pupal phase presented the best result because 75 Gy achieved sterility in Heliothis virecens and 100 Gy sterilized Helicoverpa armigera, therefore it contemplated the phase and dose chosen to evaluate the competition between the irradiated insects and the normal insects of both species. Both Heliothis virecens and Helicoverpa armigera presented a satisfactory result, as the irradiated insects managed to significantly reduce the viability of the eggs in a ratio of 9: 1: 1

Aedes aegypti L. é um dos principais insetos causadores de doenças no mundo, sendo assim, é importante trabalhos envolvendo o seu manejo. O objetivo do projeto foi avaliar os efeitos da radiação gama do Cobalto-60 nas fases do ciclo evolutivo de A. aegypti, visando a aplicação da TIE. O trabalho foi realizado no Laboratório de Radiobiologia e Ambiente do Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA/USP) em Piracicaba- SP. A criação do A. aegypti foi mantida nas instalações do laboratório, sob condições de 25&plusmn;2°C, UR 50-70% e fotofase de 12 horas. A irradiação de todas as fases do ciclo foi realizada em uma fonte de Cobalto-60 tipo Gammacell-220, instalada no CENA/USP, nas seguintes doses: 0 (controle) até 70 Gy sob uma taxa de dose de 0,356 kGy/hora. Quando ovos foram irradiados, avaliou-se viabilidade contando o número médio de larvas L4, pupas e adultos fêmeas e machos emergidos. Foi também avaliado a porcentagem de eclosão em larvas L1 da geração F1. Para larvas irradiadas, avaliaram-se a o número médio de larvas L4, pupas, adultos fêmeas e machos emergidos, porcentagem de eclosão em larvas L1 e larvas L4 F1. Das pupas irradiadas, avaliaram-se a média de eclosão de larvas F1, de larvas L4 F1, porcentagem de pupas F1 e média de adultos machos e fêmeas F1. Em adultos irradiados, avaliaram-se a média de eclosão de larvas F1, larvas L4 F1, pupas F1 e adultos machos e fêmeas F1. Avaliaram-se parâmetros de competitividade e longevidade de machos F1. Os resultados mostraram que as doses esterilizantes para as fases irradiadas: ovo, larva e pupa foram de 15 Gy, 20 Gy e 60 Gy, respectivamente. Já para adultos da geração F,1 as doses de 45 Gy e 50 Gy para macho e fêmea. Para a fase adulta, doses de 40 Gy e 45 Gy foram esterilizantes para machos e fêmeas. No teste de competitividade, a proporção de 10 machos estéreis: 1 macho não irradiado: 1 fêmea não irradiada causou 92,2% de ovos inviáveis, na dose de 50 Gy. A longevidade dos machos foi reduzida em pupas e adultos irradiados com a dose de 40 Gy. / Aedes aegypti L. is one of the main insects that cause diseases in the world. The objective of the project was to evaluate the gamma radiation effects in the phases of the evolutionary cycle of A. aegypti, aiming the application of SIT. The work was performed at the Radiobiology and Environment Laboratory of the Center for Nuclear Energy in Agriculture (CENA/ USP) in Piracicaba - SP. The establishment of A. aegypti was kept at the laboratory under conditions of 25 &plusmn; 2 ° C, RH 50-70% and photophase of 12 hours. Irradiation of all phases of the evolutionary cycle was performed in a Gammacell-220 type Cobalt-220 source, installed in CENA/ USP, at the following doses: 0 (control) to 70 Gy at a dose rate of 0.356 kGy/ hour. When the eggs were irradiated, the viability was evaluated by counting the mean number of L4 larvae, pupae, and adult females and males emerged. The percentage of hatching of larvae L1 in F1 generation was also evaluated. When larvae were irradiated, the mean number of L4 larvae, pupae, adult and emergent males, larval L1 and L4 F1 larvae were evaluated. From the irradiated pupae, the average of larvae F1, L4 F1 larvae, pupae F1 percentage and average female and male adults F1 were evaluated. From the irradiated adults, mean F1 larvae, L4 F1 larvae, F1 pupae and F1 male and female larvae were evaluated. The parameters of male competitiveness and longevity of F1 males were evaluated. The results showed that the sterilizing doses for a irradiated phases: egg, larva and pupa were 15 Gy, 20 Gy and 60 Gy, respectively. Already for adults of the F1 generation were the doses of 45 Gy and 50 Gy for male and female. For adults doses of 40 Gy and 45 Gy were sterilizing for males and females. For the competitiveness test, the proportion of 10 sterile males: 1 Non-irradiated male: 1 Non-irradiated caused 92.2% unviable eggs, at the dose of 50 Gy. The longevity of males was reduced when pupae and adults were irradiated with a dose of 40 Gy.

No mundo todo, o manejo integrado de moscas-das-frutas é feito com associação do controle biológico aplicado e técnica do inseto estéril. Além da boa eficiência no campo, a associação dessas técnicas é também favorecida pelo fato de ambos os organismos, insetos estéreis e parasitoides, poderem ser produzidos massalmente na mesma fábrica com menor custo. Visando à produção massal do parasitoide de moscas-das-frutas Diachasmimorpha longicaudata e de insetos estéreis para atender a programas de manejo integrado de Ceratitis capitata e Anastrepha fraterculus, o presente trabalho foi desenvolvido no Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA), da Universidade de São Paulo, entre os anos de 2006 a 2012. Durante esse período, metodologias de criação em laboratório foram implementadas e permitiram o desenvolvimento da tecnologia necessária para a produção desses insetos em grande escala no Brasil. Dados de 25 gerações do parasitoide produzido em grande escala em C. capitata tsl-Viena 8 e 51 gerações em A. fraterculus, bem como os efeitos e diferenças desses hospedeiros na qualidade do parasitoide foram analisados. É possível criar o parasitoide D. longicaudata em ambos os hospedeiros, C. capitata linhagem tsl-Viena 8 e A. fraterculus, entretanto essa linhagem de C. capitata não é indicada para produção massal do parasitoide, pois a emergência é muito baixa devido à debilidade do hospedeiro, possivelmente acarretada pelas manipulações genéticas que permitem a sexagem da mosca na fase embrionária. Caso essa seja a linhagem com melhor custo/ benefício disponível, recomenda-se o uso de larvas hospedeiras oriundas de ovos tratados termicamente para a produção do parasitoide. A criação em grande escala de A. fraterculus foi estabelecida com sucesso após o período de domesticação da espécie, obtendo-se larvas de boa qualidade com baixo custo, devido à dieta larval com baixa concentração de ágar e total uso de ingredientes nacionais nas dietas de adultos e larvas, por mais de 50 gerações. O uso de larvas irradiadas de A. fraterculus para a produção de D. longicaudata promove maior emergência do parasitoide, com maior quantidade e melhor qualidade de fêmeas que larvas de C. capitata. / The integrated management of fruit flies is worldwide done with the association of augmentative biological control with parasitoids and the sterile insect technique. Beyond the efficiency in the field, the joint of both techniques is also favored by the easy production of organisms, both parasitoids and sterile insects, in the same facility with low costs. Aiming for the mass production of the fruit fly parasitoid Diachasmimorpha longicaudata and sterile insects to support integrated management programs for Ceratitis capitata and Anastrepha fraterculus, this work was developed at the Center of Nuclear Energy in Agriculture (CENA) of the University of São Paulo, between 2006 and 2012. Along this period, laboratory rearing methods were improved which allowed the development of the required technology for a large scale production of those insects in Brazil. Data of 25 generations of the parasitoid large scale production using C. capitata tsl-Vienna 8 strain and 51 generations using A. fraterculus as hosts are presented. Moreover, the effect and differences between hosts in parasitoid\'s quality were analyzed. The parasitoid D. longicaudata can be large scale produced using both C. capitata tsl- Vienna 8 or A. fraterculus as hosts, but this strain of C. capitata is not recommended for D. longicaudata mass production once the parasitoid emergency is very low due to the host weakness. If this strain is the best cost/benefit available, the use of host larvae originating from heat treated eggs might be considered to parasitoids production. The A. fraterculus large scale rearing was established successfully after the domestication period of the specie, producing a large amount of insects with excellent quality using local ingredients and little agar in the diet composition over 50 generations. A. fraterculus irradiated larvae as host for large scale producing D. longicaudata promotes greater parasitoid emergence with greater female biased sex ratio and better female quality than C.capitata larvae.

As moscas-das-frutas são consideradas importantes pragas da fruticultura mundial, causando perdas significativas à produção e ao livre trânsito de frutas. Com a preferência por alimentos com baixos níveis de agrotóxicos, pesquisas estão buscando alternativas ecológica, social e econômica viáveis para o controle destas pragas. A Técnica do Inseto estéril (TIE) é uma técnica onde os insetos são criados, esterilizados e liberados em áreas infestadas, reduzindo a fertilidade da população selvagem, além de ser um método não poluente e não agressivo ao ambiente. Com o desenvolvimento de novos estudos da metodologia da TIE, foi introduzida uma nova linhagem mutante a Sensibilidade a Letal Temperatura (tsl) Viena-8, cujas fêmeas são sensíveis à alta temperatura, podendo ser eliminadas já na fase embrionária, no início da criação massal, agregando mais benefícios a este método de controle e/ou supressão de praga. Com diferentes testes de incubação de ovos da linhagem tsl, com temperaturas e tempos combinados e variados, comprovou-se a extrema sensibilidade às mudanças de temperatura. A temperatura ideal para a incubação dos ovos dessa linhagem está entre 24ºC a 26ºC pelo período de 24 a 48 horas. Deve-se tomar o máximo de cuidado com a elevação da temperatura acima de 26ºC durante a manutenção e multiplicação dessa linhagem em condições de laboratório ou massalmente. Acima de 26ºC, há sérios riscos de comprometer a qualidade dos insetos produzidos. O curto período de 6 horas a uma temperatura de 34ºC, já é suficiente para alterar negativamente a proporção de fêmeas de ovos tratados termicamente / The fruit flies are considered important pests of the world horticulture, causing significant loses to the production and the free traffic of fruits. With the preference for foods with low levels of pesticides, researches are looking for alternatives ecological, social and economical viable for the control of these pests. The Sterile Insect Technique (SIT) is a technique where the insects are reared, sterilized and release in infested areas, reducing the fertility of the wild population, and is a method no pollutant and no aggressive to the environment. With the development of new studies of the methodology of SIT, a new mutation, Temperature Sensitive Lethal (tsl) Vienna 8, whose females are sensitive to the high temperature, could already be eliminated in the embryonic phase, in the beginning of the mass-rearing, resulting in more benefits to the control/suppression this pests. Different tests of incubation with eggs of tsl strain, with variation of time and temperature was done and proved a very sensitive to temperature changes. The ideal temperature for the incubation of the eggs is among 24ºC to 26ºC by the period from 24 to 48 hours. The maximum of care should be taken with the elevation of the temperature above 26ºC during the maintenance and multiplication in laboratory conditions or mass-rearing. Above this temperature it can commit the quality of the produced insects. The short period of 6 hours with temperature to 34ºC, is enough to change negatively the proportion of females of eggs in the thermal treatment

Desde a década de 50, os cientistas tem utilizado radiação ionizante para esterilizar insetos, que são liberados na natureza para acasalar, mas sem nenhuma descendência. Conhecida como a técnica do inseto estéril (TIE), este método de controle de inseto vem tradicionalmente utilizando radiações ionizantes para esterilizar os insetos, sendo uma técnica que não gera resíduo, e pode agir em sinergia com as demais técnicas dentro do manejo integrado de pragas. O Brasil por vários anos vem lutando contra o aumento de pragas, introduzindo novas táticas e técnicas dentro dos programas de MIP, para driblar a resistência dos produtos químicos, como: diminuir os resíduos dos agrotóxicos; para algumas culturas importantes do o nosso país, temos um largo espectro de pragas ocorrendo do inicio ao fim da colheita, uma delas é a cultura do algodoeiro e dentre as pragas chave dessa cultura, temos algumas lagartas extremamente importantes, entre elas Heliothis virescens e Helicoverpa armigera. Essas espécies são parecidas morfologicamente, sendo a segunda identificada a poucos anos aqui no Brasil. Ainda não há trabalhos no Brasil utilizando TIE como ferramenta adicional para lepidópteros, portanto objetivou-se com esse estudo avaliar o efeito de doses de radiação gama nas diferentes fases do ciclo evolutivo de Heliothis virescens e Helicoverpa armigera, bem como avaliar a esterilidade na geração P e a capacidade de competição dos insetos irradiados com os não irradiados. A fase pupa foi a que apresentou um melhor resultado, pois com 75 Gy atingiu a esterilidade em Heliothis virecens e 100 Gy esterilizou Helicoverpa armigera, portanto contemplou a fase e a dose escolhida para avaliar a competição entre os insetos irradiados e os insetos normais de ambas as espécies. E tanto Heliothis virecens como Helicoverpa armigera apresentaram um resultado satisfatório, pois os insetos irradiados conseguiram reduzir significativamente a viabilidade dos ovos na proporção de 9: 1: 1 / Since the 1950s, scientists have used ionizing radiation to sterilize insects, which are released in nature to mate, but without any progeny. Known as the sterile insect technique (TIE), this method of insect control has traditionally used ionizing radiation to sterilize insects, a technique that does not generate residues, and can act in synergy with the other techniques within integrated pest management. For several years, Brazil has been fighting against the increase of pests, introducing new tactics and techniques within the IPM programs, to overcome the resistance of chemical products, such as: reducing the residues of agrochemicals; For some important crops of our country, we have a wide spectrum of pests occurring from the beginning to the end of the harvest, one of them is the cotton crop and among the key pests of this crop, we have some extremely important caterpillars, among them Heliothis virescens and Helicoverpa armigera These species are morphologically similar, the second being identified a few years ago in Brazil. There are still no studies in Brazil using TIE as an additional tool for Lepidoptera, therefore the purpose of this study was to evaluate the effect of doses of gamma radiation in the different phases of the evolutionary cycle of Heliothis virescens and Helicoverpa armigera, as well as to evaluate the sterility in generation P And the ability of insects to irradiate with non-irradiated insects. The pupal phase presented the best result because 75 Gy achieved sterility in Heliothis virecens and 100 Gy sterilized Helicoverpa armigera, therefore it contemplated the phase and dose chosen to evaluate the competition between the irradiated insects and the normal insects of both species. Both Heliothis virecens and Helicoverpa armigera presented a satisfactory result, as the irradiated insects managed to significantly reduce the viability of the eggs in a ratio of 9: 1: 1