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Isolamento e caracterização de cepas de Trypanosoma cruzi Chagas,1909 (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) a partir de triatomíneos silvestres do Estado do Rio Grande do Sul /

Martins, Luciamáre Perinetti Alves. January 2005 (has links)
Resumo: Embora a incidência da doença de Chagas tenha diminuído, os estudos sobre o Trypanosoma cruzi devem continuar, dada a dificuldade para o efetivo controle dos seus vetores. Triatoma infestans o principal vetor da doença de Chagas está praticamente eliminado no Brasil, entretanto outras espécies de Triatominae estão em processo de domiciliação, como o Triatoma rubrovaria no Rio Grande do Sul, constituindo-se em um fator de risco para o recrudescimento da infecção chagásica. Com o intuito de caracterizar cepas de T. cruzi que circulam na área rural, foram feitas buscas ativas de triatomíneos para isolamento desse protozoário em bairros do município de Quaraí, RS. Para tanto as fezes dos triatomíneos coletados foram obtidas por compressão abdominal para pesquisa de tripomastigotas metacíclicos. As fezes que se encontraram positivas foram inoculadas em animais de experimentação e em meio de cultura (LIT). Foram isoladas cinco cepas de T. cruzi, assim denominadas: QB1, QJ1, QJ3, QM1 e QM2, que apresentaram as seguintes características: predominância de formas tripomastigotas intermediárias após mensuração no 15º dia pósinfecção, picos parasitêmicos ao redor do17º dia pós-infecção, miotropismo na fase aguda e miosite na fase crônica da infecção. A análise do DNA que codifica a fração 24Sa do rRNA mostrou fragmentos de 110 pb, agrupando-as em T. cruzi I. Os serviços de vigilância epidemiológica foram informados sobre os resultados obtidos. / Abstract: Although the decrease in the incidence of Chagas' disease, the studies concerning T. cruzi shall continue, due to the difficulty in controlling its vector. Triatoma infestans the main vector of Chagas'disease is nearly eliminated in Brasil, nevertheless other Triatominae species are on domiciliate process, like Triatoma rubrovaria in Rio Grande do Sul State, representing a hazard factor for increasing Chagas infection. In order to characterize T. cruzi strains that naturally occur in the rural area, active searches were performed in order to isolated these strains in the district of Quarai, RS. Triatomine feces were collected by abdominal compression and the presence of metacyclic tripomastigotes was evaluated. The feces positive for metacyclic triatomines were inoculated in experimental animals and in the culture medium (LIT). Five T. cruzi strains were isolated: QB1, QJ1, QJ3, QM1 and QM2. The strains displayed a predominance of intermediate forms on 15th day post-infection. Parasitimia peak occurred on 17th day post-infection. Myotropism during acute phase and myositis in the chronic phase was oberved. The DNA analysis coding the 24 Sa r RNA fraction has displayed fragments of 110 pb, grouping them in T. cruzi I. The Epidemiologic Vigilance Services have been warmed about the achieved results. / Orientador: João Aristeu da Rosa / Coorientador: Márcia Aparecida Sperança / Banca: Mara Cristina Pinto / Banca: Márcia Aparecida Silva Graminha / Banca: José Clóvis do Prado Júnior / Banca: Sérgio Albuquerque / Doutor
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Estabilidade fenotípica de genótipos Precoces de soja com aptidão com rotação com cana-de-açucar /

Zanni, Welington Augusto. January 2011 (has links)
Resumo: Este trabalho teve o objetivo de avaliar a estabilidade e a adaptabilidade de 50 genótipos de soja [Glycine max (L.) Merrill], sendo 46 linhagens precoces, pertencente ao programa de melhoramento de soja da UNESP/FCAV- Jaboticabal, SP em parceria com a APTA (Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios) e cinco cultivares comercialmente utilizadas, em dez ambientes no Estado de São Paulo. Os experimentos foram conduzidos nas safras agrícolas 2006/2007, 2007/2008, 2008/2009 e 2009/2010. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso, com três repetições. Foram realizadas análises individuais e conjunta, considerando o número de dias para a maturidade (NDM), altura da planta na maturidade (APM), acamamento (Ac), valor agronômico (VA) e produtividade de grãos (PG) nos diferentes locais. A estabilidade e a adaptabilidade dos genótipos foram avaliadas pelos métodos de Wricke (1965), Eberhart e Russel (1966), Lin e Binns (1988) e Annicchiarico (1992). As linhagens avaliadas apresentou-se com bom desempenho e aptidão para cultivo em áreas de reformas com cana-de-açúcar, destacando-se os genótipos 12 (JAB.00-03), 29 (JAB.00-06), 30 (JAB.00-06), 31 (JAB.00-02), 32 (JAB.00-02), 44 (JAB.00-02) e 45 (JAB.00-02) e as cultivares 48 (COODETEC 205) e 50 (IAC-FOSCARIN 31) os quais apresentaram boa estabilidade fenotípica e em média, elevada produtividade de grãos. As metodologias de estabilidade e adaptabilidade fenotípica utilizadas foram eficientes quanto à discriminação dos melhores genótipos precoces de soja / Abstract: This work aimed to evaluate the stability and adaptability of 50 soybean genotypes [Glycine max (L.) Merr.], being 46 strains belonging to the breeding program for soybean UNESP/FCAV- Jaboticabal, SP in partnership with APTA (Agency Paulista Agribusiness Technology) and five cultivars used commercially in ten environments in the State of São Paulo. The experiments were conducted in the growing seasons 2006/2007, 2007/2008, 2008/2009 and 2009/2010. The experimental design was randomized blocks with three replications. Analysis were performed individual and joint, considering the number of days to maturity (NDM), plant height at maturity (APM), lodging (Ac), agronomic value (AV) and seed yield (PG) in different locations. The stability and adaptability of genotypes were evaluated by methods Wricke (1965), Eberhart and Russell (1966), Lin and Binns (1988) and Annicchiarico (1992). The strains evaluated presented with good performance and suitability for cultivation in areas of reforms with cane sugar, highlighting the genotypes 12 (JAB.00-03), 29 (JAB.00-06), 30 (JAB .00-06), 31 (JAB.00-02), 32 (JAB.00-02), 44 (JAB.00-02) and 45 (JAB.00-02) and 48 cultivars (COODETEC 205) and 50 (Foscarini IAC-31) which showed good stability phenotypic , high grain yield. The methodologies used phenotypic stability and adaptability were efficient as the best discrimination of soybean genotypes / Orientador: Sandra Helena Unêda-Treviso / Coorientador: Antonio Orlando Di Mauro / Banca: Rinaldo Cesar de Paula / Banca: José Baldin Pinheiro / Mestre
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Estudo biométrico de formas epimastigotas e tripomastigotas de quatro cepas de trypanosoma cruzi, Chagas 1909 (Kinetoplastidae, Trypanosomatidae) /

Rossi, Leila Regina Lima. January 2007 (has links)
Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Sergio de Albuquerque / Banca: José Clóvis do Prado Júnior / Resumo: Este estudo visou mensurar formas tripomastigotas e epimastigotas de Trypanosoma cruzi das cepas Bolívia, QM2, S.I.9 e Y por meio de microscópio óptico acoplado a um analisador de imagens e programa Leica QWin. Para tanto utilizou-se os parâmetros definidos por DIAS, FREITAS FILHO (1943) e BARRETO (1965): distâncias da extremidade posterior ao meio do núcleo (PN), do meio do núcleo à extremidade anterior do corpo (NA), comprimento do flagelo (FL), comprimento total (T), largura (L), Área do Cinetoplasto (AC), Área do Núcleo (NA) e Índice Nuclear (IN). Mensurou-se 360 formas tripomastigotas sanguíneas, 120 formas epimastigotas de meio de cultura LIT e 120 formas epimastigotas de fezes de triatomíneo de T. cruzi de cada uma das cepas Bolívia, QM2, S.I.9 e Y. Os oito parâmetros definidos para caracterização das formas tripomastigotas sanguíneas foram mensurados anteriormente ao pico de parasitemia, durante o pico e posteriormente ao pico de parasitemia para as formas tripomastigotas sanguíneas. As quatro cepas de T. cruzi mostraram percentual distinto de formas finas, intermediárias e largas das formas tripomastigotas sanguíneas. De acordo com os parâmetros morfométricos as formas foram classificadas em fina, intermediária e larga no que se refere à largura e curta, intermediária e longa com relação ao comprimento. As mensurações das formas tripomastigotas sanguíneas de T. cruzi das cepas Bolívia, QM2, S.I.9 e Y quanto a largura mostraram os seguintes resultados: as formas finas variaram entre 0,6 e 1,3μm; intermediárias entre 1,4 e 2,1μm; largas entre 2,2 e 5,5μm. Quanto ao comprimento total obtevese para a forma curta variação entre 13,5 e 19,5μm; para a forma intermediária entre 19,6 e 24,7μm; para a forma longa entre 24,8 e 43,8μm. As formas epimastigotas de meio de cultura LIT apresentaram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed the measurement of trypomastigotes and epimastigote of Trypanosoma cruzi from Bolivia strains, QM2, S.I.9 and Y by means of an optical microscope coupled to an image analyses program called Leica QWin. The following parameters defined for DIAS, FREITAS FILHO (1943) & BARRETO (1965) were used for these measurements: distance from the posterior extremity to the middle of the nucleus (PN), from the middle of the nucleus to the anterior extremity of the body (NA), flagellum length (FL), total length (T), width (L), kinetoplast area (AC), nucleus area (NA) and nuclear index (IN). 360 blood-stream forms were measured, 120 epimastigote forms in the LIT culture mean and 120 epimastigote forms from triatomine feces of T. cruzi for each of the Bolivia strains, QM2, S.I.9 and Y. All eight defined parameters for trypomastigote forms characterization were measured before the parasitemia peak, during the peak and after the parasitemia peak. The four T. cruzi strains showed to be distinct when comparing the percentage in the thin, intermediary and large forms of trypomastigotes. According the morphometric parameters the forms were classified as thin, intermediary and wide regarding width, and short, intermediary and long regarding length. The measurements of trypomastigote blood stream forms of T. cruzi from Bolivia strains QM2, S.I.9 and Y regarding width showed the following results: the thin form varied from 0.6 to 1.3μm; the intermediary from 1.4 to 2.1μm; wide from 2.2 to 5.5μm. Now the total length obtained for the short form varied from 13.5 to 19.5μm; for the intermediary form from 19.6 to 24.7μm; for the long form from 24.8 to 43.8μm. The epimastigote forms in the LIT culture mean presented the following measurements related to width: thin forms between 1.1 and 1.7μm, intermediary forms between 1.8 and 2.8μm. / Mestre
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Desenvolvimento de cinco linhagens de Agaricus Bisporus Lange (Imbach) ("champignon de Paris") em diferentes formulações de composto e meios de cultura /

Jesus, João Paulo Furlan de, 1985. January 2011 (has links)
Orientador: Marli Teixeira de Almeida Minhoni / Banca: Meire Cristina Nogueira de Andrade / Banca: Eduardo Bagagli / Resumo: A produção de composto de qualidade para Agaricus bisporus e a pesquisa por linhagens produtivas são alguns dos principais fatores relacionados à produtividades elevadas. Desta forma, foram realizados dois experimentos: 1. a campo, avaliou-se o efeito da suplementação nitrogenada na formulação de dois tipos de compostos, clássico e sintético, para o cultivo de cinco linhagens de A. bisporus: ABI-05/03, ABI-04/02, ABI-06/05, ABI-09/10 e ABI-09/11; 2. avaliou-se a influência de cinco linhagens de A. bisporus no desenvolvimento micelial em dois meios de cultura sólidos (CA, composto ágar; e BDA, batata dextrose ágar). No experimento 1, constatou-se durante o processo de compostagem, pasteurização e condicionamento o composto clássico obteve temperatura média e perda de massa 10,56 e 13,29% superiores ao composto sintético, respectivamente. O composto clássico obteve as maiores eficiências biológicas ao final de 25 dias de produção, pelas linhagens ABI-05/03, ABI-06/05 e ABI-04/02 com valores de 83,95, 79,45 e 77,49%, respectivamente. Além da eficiência biológica, houve uma tendencia de maior produtividade, número e massa de fresca de basidiomas quando as linhagens foram cultivadas em composto clássico. No experimento II as maiores velocidades de desenvolvimento micelial das linhagens de A. bisporus foram observadas nos meios de cultura CA. Concluiu-se que não houve ligação entre os resultados observados nos experimentos I e II em relação ao potencial genético das... / Abstract: The production of quality compost for Agaricus bisporus and the research for high productivity strains are some important factors involving high yields. Were carried out two expiriments: 1. at field, the effect of the type of nitrogen supplementation was evaluated, elaborating two types of compost, classic and synthetic, cultivating five strains of A. bisporus ABI-05/03, ABI-04/02, ABI-06/05, ABI-09/10 e ABI-09/11; 2. was evaluated the influence of five A. bisporus strains on the rate of micelial growth in different type of culture media (MC, compost media; BDA, potato-dextrose-agar). In the first experiment, the data showed that during the composting process, pasteurization and conditioning, the averages temperatures and weight loss 10,56 and 13,29% higher in the classic compost than the synthetic compost . The classic compost had the higher biological efficiency in the end of the crop (25 days), for the strains ABI-05/03, ABI-06/05 e ABI-04/02 with values of 83,95, 79,45 e 77,49, respectively. Moreover, there was a tendency for higher yields, number and fresh weight of mushrooms when the strains were cultivated in the classic compost. In the second experiment the highest micelial growth rate by the A. bisporus strains were observed in the compost agar media. It was observed that were no relation between the data in experiments I and II, by the genetic potential of the strains / Mestre
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Produção de fragmentos de anticorpos monoclonais (scFv) contra isolados de campo do vírus da bronquite infecciosa das galinhas utilizando phage display /

Fernandes, Camila Cesario. January 2009 (has links)
Orientador: Hélio José Montassier / Banca: Camillo Del Cistia Andrade / Banca: Janete Apparecida Desidério Sena. / Resumo: Anticorpos monoclonais se constituem na base de vários testes usados na detecção e na identificação de antígenos. Nesse contexto, tais imuno-reagentes têm sido extensivamente empregados na identificação de estirpes virais envolvidas na etiologia de surtos de bronquite infecciosa a campo, permitindo o aperfeiçoamento das técnicas de detecção e caracterização antigênica do vírus da bronquite infecciosa das galinhas (VBI). No presente estudo, uma biblioteca de fragmentos de anticorpos de galinha originalmente preparada por "phage display" contra a estirpe vacinal (H120) do VBI, foi usada para a seleção de fragmentos de anticorpos recombinantes com reatividade cruzada para as estirpes heterólogas IBVPR01, IBVPR05, isoladas de surtos a campo no Brasil e SE-17, isolada nos Estados Unidos. Após três ciclos de "panning", foi identificado pelo ELISA um conjunto de 15 anticorpos scFv expressos em fagos e com reatividade cruzada para essas mesmas estirpes do VBI. A análise por Western-blotting revelou que três desses clones apresentavam fagos expressando fragmentos de anticorpos monoclonais com reatividade cruzada para a nucleoproteína N das três estirpes do VBI e também para a forma recombinante dessa nucleoproteína derivada da estirpe M41. Concluindo, os fragmentos de anticorpos monoclonais recombinantes scFv-N produzido em fagos interagem com um epítopo mais conservado da proteína N do VBI e apresentam um grande potencial para utilização na detecção e no diagnóstico direto desse vírus e no estudo de evolução de variantes desse vírus. / Abstract: Monoclonal antibodies are the basis of various techniques used for antigen detection or characterization, and their use is specially recommended for the identification of viral strains involved in the etiology of outbreaks of infectious bronchitis, because these antibodies are homogeneous, highly specific and fully characterized, allowing the improvement of detection of immunological techniques and antigenic characterization of avian infectious bronchitis virus strains (IBV). We used a phage display library prepared previously against the IBV vaccine strain (H120) for the selection of new scFv antibody fragments reacting with heterologous IBV strains isolated from outbreaks in Brazil (IBVPR01, IBVPR05) and USA (SE-17). After three cycles of panning a set of 15 scFv antibodies was expressed in phages and exhibited crossreaction in ELISA with these three viral strains. Western-blotting analysis showed that three of this clone set were expressing scFv specific for the nucleoprotein of these IBV strains, as well as to the recombinant form of this protein derived from M41 strain of IBV. In conclusion, the recombinant fragments of monoclonal antibodies expressed by phage-display technique have a great potential for future use in immunodiagnostic techniques and study the evolution of variant strains of this virus. / Mestre

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