SILVA, B. R. Atividade antimicrobiana do peptídeo sintético LYS-A1 frente a estreptococos orais. 2013. 97 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2013. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-14T14:57:23Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_brsilva.pdf: 2710503 bytes, checksum: e07bf28f3517e6df3da00e13435338b8 (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-15T15:11:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_brsilva.pdf: 2710503 bytes, checksum: e07bf28f3517e6df3da00e13435338b8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-15T15:11:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_brsilva.pdf: 2710503 bytes, checksum: e07bf28f3517e6df3da00e13435338b8 (MD5) Previous issue date: 2013 / Dental caries is defined as an infectious, chronic and multifactorial disease, in which there is a progressive demineralization of tooth structure with consequent pain and dental loss. It is considered a major public health problem worldwide because its high incidence, besides its oral and systemic consequences. Thus, new methods of microbial control have been investigated to reduce the number of cases. Antimicrobial peptides are molecules present in many living beings and have a high biocidal activity against various pathogenic microrganisms. The peptide Lys-[Trp6]-Hy-A1 (Lys-a1) is a synthetic derivative of the peptide Hy-A1, initially isolated from the species Hypsiboas albopunctatus. According to previous research, it is a molecule with broad antimicrobial activity. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of the synthetic peptide Lys-a1 on the planktonic and biofilm growth of oral bacteria. The methods used to evaluate antimicrobial activity include the following: determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) in microtiter plates for growth in suspension and quantification of biomass by crystal violet staining and counting of colony forming units for biofilm growth. The microorganisms S. oralis, S. sanguinis, S. parasanguinis, S. salivarius, S. mutans and S. sobrinus were grown in Brain Heart Infusion broth supplemented with 1% sucrose (BHIs) at 37 °C under atmospheric pressure with 10% CO2. The peptide was solubilized in 0.1% acetic acid (v/v) at various concentrations (500 to 1.9 µg.mL-1). Chlorhexidine gluconate 0.12% was used as the positive control, and BHIs culture medium was used as the negative control. The tested peptide demonstrated a remarkable antimicrobial effect, inhibiting the planktonic and biofilm growth of all strains tested, even at low concentrations. Thus, the peptide Lys-a1 is an important source for potential antimicrobial agents, especially for the control and prevention of microbial biofilms, which is one of the most important factors in cariogenic processes / A cárie dental é conceituada como uma doença infectocontagiosa, crônica e multifatorial na qual ocorre uma desmineralização progressiva das estruturas dentais com consequente dor e perda do elemento dental. É considerada um problema de saúde pública em todo mundo devido sua incidência e consequências orais e sistêmicas. Dessa forma, novos métodos de controle microbiano têm sido pesquisados com vista à redução do número de casos. Os peptídeos antimicrobianos são moléculas presentes em diversos seres vivos e possuem uma alta atividade biocida frente a diversos microrganismos patogênicos. O peptídeo Lys-[Trp6]-Hy-A1 (Lys-a1), derivado sintético do peptídeo Hy-A1, isolado inicialmente da espécie Hypsiboas albopunctatus, é uma molécula com atividade antimicrobiana descrita na literatura. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antibacteriano do peptídeo sintético Lys-a1 sobre crescimento planctônico e em biofilme de bactérias orais. As metodologias utilizadas para avaliação do potencial antimicrobiano foram: determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) em placas de poliestireno para o crescimento em suspensão; e quantificação de biomassa por cristal violeta e contagem de unidades formadoras para crescimento em biofilme. Os micro-organismos, S. oralis, S. sanguinis, S. parasanguinis, S. salivarius, S. mutans e S. sobrinus, foram cultivados em Brain Heart Inffusion caldo suplementado com 1% de sacarose (BHIs) a 37 °C sob atmosfera com 10% de CO2. O peptídeo foi solubilizado em ácido acético 0,1% (v/v) em diferentes concentrações (500 a 1,9 µg.mL-1). Os grupos controle dos ensaios foram meio de cultura BHIs (controle negativo) e Gluconato de Clorexidina 0,12% (controle positivo). O peptídeo testado apresentou um destacado efeito antimicrobiano, sendo capaz de inibir o crescimento planctônico e em biofilme de todas as cepas testadas mesmo em baixas concentrações. Assim, o peptídeo Lys-a1 é uma importante fonte para possíveis agentes antimicrobianos, com ênfase no controle e prevenção de biofilmes microbianos, um dos fatores mais importantes para o desenvolvimento do processo cariogênico

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: José Luiz De Lorenzo / Banca: Cristiane Yumi Koga Ito / Banca: Jamil Awad Shibli / Banca: Leonardo Marchini / Resumo: O objetivo desse trabalho foi analisar in vitro a aderência de Streptococcus sanguinis, Candida albicans e associações destes microrganismos com Streptococcus mutans às superfícies dos implantes dentários tratados com jateamento de fosfato de cálcio, anodização, duplo ataque ácido e os de superfície lisa, com ou sem a prévia incubação em saliva ou plasma sanguíneo. Foram selecionados 120 implantes, sendo 30 de cada superfície para cada microrganismo e associações estudadas. Para análise da aderência, foram preparadas suspensões de microrganismos contendo 106 células/ml em espectrofotômetro. Além disso, cada microrganismo e associações foram divididos em três grupos: em um, o implante foi removido da embalagem e colocado diretamente no caldo, em outro, foi previamente embebido em saliva humana por uma hora e no último em plasma humano, também por uma hora. Os implantes foram acondicionados separadamente em poços de placas de cultura de células contendo caldo sacarosado (placa in vitro) e a suspensão do microrganismo. Após 24h de incubação a 37 °C e 5% de CO2, os implantes foram lavados três vezes durante um minuto em solução salina estéril e colocados em sonicador com 10 ml de salina para dispersão das células aderidas. A seguir, foram realizadas diluições seriadas e semeaduras em meios de cultura específico para cada microrganismo. Após 48h de incubação a 37 °C e 5% de CO2, foi realizada a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/ml) e os dados foram submetidos a análise de variância (ANOVA), teste de tukey, com nível de significância de 5%. Para ilustrar a aderência dos microrganismos, foram selecionados o microrganismo Streptococcus sanguinis, e as associações Streptococcus sanguinis e Candida albicans e Streptococcus sanguinis, Streptococcus mutans... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study has been to analyze, in vitro the adherence of Streptococcus sanguinis, Candida albicans and associations of those microorganisms with Streptococcus mutans to the surfaces of dental implants treated with calcium phosphate jetting, anodization, double acid attack and to those of smooth surface, with or without previous saliva or blood plasma incubation. Ten implants from each surface were selected for every studied microorganism and association. In order to analyze the adherence, suspensions of microorganisms bearing 106 viable cells/ml in spectrophotometer were prepared. Additionally, every microorganism and association was divided in three groups: in the first, an implant was removed from its wrap and put right away into the sauce; the second, it was previously drenched into saliva for one hour; and the last one, into plasma, for one hour, as well. The implants were separately placed in culturing plaque wells of cells containing saccharose sauce (in vitro plaque) and the microorganism's suspension. After 24 hours of incubation time at 37 °C and 5% of CO2, the implants were taken washed three times for a minute in saline sterile solution and put in a sonicator holding 10 ml of saline in order to disperse adherent cells. Then, seriated dilutions were done, and sowing in culture media specific for each of the. After a 48hincubation time at 37°C and 5% of CO2, a counting was carried, of the colony forming units (UFC/ml) and the data were submitted to the ANOVA, Tukey test, at a significance level of 5%. To illustrate the adherence of the microorganisms, some samples were exposed to electronic sweeping microscopy. The results did show great microorganism adherence to the surfaces studied, mainly when associated forming a biofilm. The anodized surface... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) / Biofilm-related infections account for more than 75% of all microbial infections in humans. Several studies argued that the biofilm-dispersal process initiates systemic infections by causing bacteria to be released into the host. Although our knowledge of the characteristics of dispersed bacteria is still limited, it is recognized that these bacteria have different characteristics, such as higher virulence and adhesion factors, in contrast to their planktonic and sessile counterparts. Streptococcus mutans (S. mutans), which is the major pathogen in the formation of dental caries has also been detected in atherosclerotic plaques, and heart valve specimens from patients with cardiovascular diseases. In oral isolates, the frequency of S. mutans strains positive for the collagen binding protein (CBP) cnm+ gene has been estimated to be 10-20%. Tobacco use is considered to be an independent risk factor for both atherosclerosis and dental caries. Knowledge about S. mutans biofilm dispersal is lacking. Thus, studying the characteristics of dispersed bacteria is crucial to fill that gap of knowledge. We began our investigation by conducting a review of the literature on current findings about biofilm formation and dispersion of several oral and extraoral pathogens, in addition to methodologies for analyzing the dispersion phase. For this study, we identified and chose three dispersion-inducing compounds: adenosine triphosphate (ATP), cis-2-deconoic acid (CDA), and nicotine (NIC). Subsequently, the dispersion, adhesion to collagen type IV, and invasion of bovine aortic endothelial cells (BAEC) were studied using two S. mutans strains, UA159 (Cnm-) and TLJ60a (Cnm+). Both strains showed increased dispersion, adherence rates to collagen type IV, and invasion percentages of BAEC when treated with dispersion inducers compared to their control. In the ATP and NIC groups, TLJ60a (Cnm+) demonstrated greater dispersion and adherence to collagen type IV than UA159 (Cnm-). Harboring the cnm encoding gene appears to enhance S. mutans invasion of BAEC in both biofilm and dispersed cells. In the Cnm+ strain, ATP-induced dispersed cells demonstrated a consistent increase in type IV collagen adhesion and BAEC invasion rates. Therefore, it is imperative to investigate the impact of ATP secretion by damaged endothelial cells in determining S. mutans role in atherogenesis. / 2023-12-28

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-14Bitstream added on 2014-06-13T19:22:47Z : No. of bitstreams: 1 romeiro_rl_dr_sjc.pdf: 889307 bytes, checksum: b97ee7a898e0c8f57f25ac75008f2fc8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo desse trabalho foi analisar in vitro a aderência de Streptococcus sanguinis, Candida albicans e associações destes microrganismos com Streptococcus mutans às superfícies dos implantes dentários tratados com jateamento de fosfato de cálcio, anodização, duplo ataque ácido e os de superfície lisa, com ou sem a prévia incubação em saliva ou plasma sanguíneo. Foram selecionados 120 implantes, sendo 30 de cada superfície para cada microrganismo e associações estudadas. Para análise da aderência, foram preparadas suspensões de microrganismos contendo 106 células/ml em espectrofotômetro. Além disso, cada microrganismo e associações foram divididos em três grupos: em um, o implante foi removido da embalagem e colocado diretamente no caldo, em outro, foi previamente embebido em saliva humana por uma hora e no último em plasma humano, também por uma hora. Os implantes foram acondicionados separadamente em poços de placas de cultura de células contendo caldo sacarosado (placa in vitro) e a suspensão do microrganismo. Após 24h de incubação a 37 °C e 5% de CO2, os implantes foram lavados três vezes durante um minuto em solução salina estéril e colocados em sonicador com 10 ml de salina para dispersão das células aderidas. A seguir, foram realizadas diluições seriadas e semeaduras em meios de cultura específico para cada microrganismo. Após 48h de incubação a 37 °C e 5% de CO2, foi realizada a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/ml) e os dados foram submetidos a análise de variância (ANOVA), teste de tukey, com nível de significância de 5%. Para ilustrar a aderência dos microrganismos, foram selecionados o microrganismo Streptococcus sanguinis, e as associações Streptococcus sanguinis e Candida albicans e Streptococcus sanguinis, Streptococcus mutans... / The aim of this study has been to analyze, in vitro the adherence of Streptococcus sanguinis, Candida albicans and associations of those microorganisms with Streptococcus mutans to the surfaces of dental implants treated with calcium phosphate jetting, anodization, double acid attack and to those of smooth surface, with or without previous saliva or blood plasma incubation. Ten implants from each surface were selected for every studied microorganism and association. In order to analyze the adherence, suspensions of microorganisms bearing 106 viable cells/ml in spectrophotometer were prepared. Additionally, every microorganism and association was divided in three groups: in the first, an implant was removed from its wrap and put right away into the sauce; the second, it was previously drenched into saliva for one hour; and the last one, into plasma, for one hour, as well. The implants were separately placed in culturing plaque wells of cells containing saccharose sauce (in vitro plaque) and the microorganism’s suspension. After 24 hours of incubation time at 37 °C and 5% of CO2, the implants were taken washed three times for a minute in saline sterile solution and put in a sonicator holding 10 ml of saline in order to disperse adherent cells. Then, seriated dilutions were done, and sowing in culture media specific for each of the. After a 48hincubation time at 37°C and 5% of CO2, a counting was carried, of the colony forming units (UFC/ml) and the data were submitted to the ANOVA, Tukey test, at a significance level of 5%. To illustrate the adherence of the microorganisms, some samples were exposed to electronic sweeping microscopy. The results did show great microorganism adherence to the surfaces studied, mainly when associated forming a biofilm. The anodized surface... (Complete abstract click electronic access below)