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Pesquisa de miRNAs circulantes, potenciais biomarcadores de aterosclerose subclínica em indivíduos euglicêmicos e pré-diabéticos / Search of circulating miRNAs, potential biomarkers of subclinical atherosclerosis in euglycemic and pre-diabetic subjects

Magda Elizabeth Graciano Saldarriaga 24 May 2017 (has links)
As doenças cardiovasculares e o diabete melito fazem parte das DCNT prioritárias da OMS, devido às altas taxas de morbimortalidade e incapacidade que geram a cada ano. Estima-se que no mundo existam 387 milhões de diabéticos e outros 316 milhões de pessoas com características de risco, como pré-diabete. Cerca de 60% dos pacientes com DM2 desenvolvem doença cardiovascular, a qual inicia de forma concomitante aos distúrbios do metabolismo da glicose, podendo existir mecanismos fisiopatológicos comuns entre as doenças. Metade dos eventos coronarianos, inclusive a morte súbita, ocorrem em indivíduos assintomáticos, evidenciando a necessidade de novos marcadores precoces, já que em muitos deles a morte é a primeira manifestação. Recentemente, tem sido sugerido que os miRNAs envolvidos na regulação da expressão gênica podem ser caracterizados como biomarcadores em diversas doenças. Nosso objetivo é identificar alterações no perfil de miRNAs circulantes em indivíduos euglicêmicos e pré-diabéticos com e sem aterosclerose subclínica, utilizando a tecnologia de qPCR Arrays, com a finalidade de identificar candidatos a biomarcadores moleculares dessa condição. Encontrou-se que a aterosclerose subclínica esteve associada com o envelhecimento, a menopausa, etnia branca, dislipidemia, resistência à insulina, o aumento da adiposidade, leptina e do TNF-α. O aumento do miR98-5p e a diminuição dos miRNAs miR-212-3p, miR-145-5p, miR-93-5p, miR15a-5p, miR-19a-3p, miR32-5p levaram a ativação da via de sinalização da aterosclerose. Os resultados sugerem que a inflamação foi o principal mecanismo associado com o desenvolvimento de aterosclerose subclínica neste estudo. / Cardiovascular Disease and Diabetes Mellitus are relevant NCDs for the WHO. It´s estimated that, worldwide, there are 387 millions of diabetics and 316 millions of people with risk characteristics like prediabetes. About 60% of patients with T2DM develops cardiovascular disease, which starts at the same time as disorders of glucose metabolism, there may be common pathophysiological mechanisms among diseases. Half of coronary events, including sudden death, occurs in asymptomatic individuals. This fact, highlights the need for new early markers of the disease, especially in asymptomatic patients, since in many of them, death is the first manifestation. It has been recently suggested that miRNAs involved in pos-transcriptional regulation of gene expression, could be characterized as biomarkers of diseases. Our goal is to identify changes in the profile of circulating microRNAs in euglycemic and prediabetic patients with or without subclinical atherosclerosis, by quantitative Polymerase Chain Reaction array (qPCR Array) in order to find molecular biomarkers of this condition. We found that subclinical atherosclerosis was associated with aging, menopause, white ethnicity, dyslipidemia, insulin resistance, increased adiposity, leptin and TNF-α. The up-regulation of miR98-5p and the down-regulation miR-212-3p, miR-145-5p, miR-93-5p, miR15a-5p, miR-19a-3p, miR32-5p led to activation of the signaling pathway of atherosclerosis. The results suggest that inflammation was the main mechanism associated with the development of subclinical atherosclerosis in this study.
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Prevalência de coccidiose e correlação com a saúde intestinal de frangos de corte em agroindústrias brasileiras entre os anos de 2012 a 2014 / Coccidiosis prevalence and correlation with intestinal health of broilers in brazilian agricultural industries between the years 2012 and 2014

Gazoni, Fabio Luis 25 September 2015 (has links)
Coccidiosis is a disease caused by protozoa of the genus Eimeria ssp. These protozoa are intracellular parasites of enterocytes that rupture the host cell, causing damage to the intestinal mucosa. The lesions caused by Eimeria reduce nutrient uptake by broilers, affecting their productivity gain, and also represent a portal of entry for other enteropathogens. The aim of this study was to assess the correlation between lesions caused by Eimeria and the prevalence of coccidiosis and other gastrointestinal disorders among broilers reared in Brazil from 2012 to 2014. Intestinal health was evaluated at 82 poultry houses in Brazil, totaling 5,528 birds aged 12 to 40 days. The rearing period was divided into two phases: phase 1 (12 to 21 days) and phase 2 (22 to 40 days). The broilers, at least three per shed, were collected from three different sites. The following gastrointestinal aspects were analyzed in the present study: presence of cell desquamation, excess fluid, excess mucus, ingestion of contaminated litter, thickened intestinal walls, thin intestinal walls, movement of food bolus, abnormal intestinal tonus, Turkish towel appearance, verminosis, and necrotic enteritis. The classification of the scores for gross lesions caused by Eimeria acervulina, Eimeria maxima, and Eimeria tenella followed the method proposed by Johnson & Reid, [8] and the oocyst count of E. maxima (E. maxima micro) in the mucosa was performed under a light microscope at 100X magnification. The statistical analysis of the Pearson correlation coefficient was carried out by the SAS 9.3 software program [16], using a 95% confidence interval. The results of this study revealed that E. acervulina was the most prevalent (mean of 13.5%) species in both rearing stages. Also, there was a positive correlation with thin intestinal walls and abnormal intestinal tonus in phases 1 and 2, as well as a positive correlation with ingestion of contaminated litter in phase 2. The second highest prevalence was that of E. maxima (mean of 6.75%), with a positive correlation with excess mucus, thickened and thin intestinal walls in phase 1, and a positive correlation with cell desquamation, excess fluid, and Turkish towel appearance in phase 2. E. tenella yielded the lowest prevalence rates (mean of 4.35) among the analyzed Eimeria species, showing a positive correlation with excess fluid in phases 1 and 2 and with thickened intestinal walls and lesions caused by E. maxima in phase 2. The microscopic analysis demonstrated that E. maxima was found in 18% of mucosal scrapings in phase 1, which accounts for a subclinical coccidiosis rate of 282.98% compared with clinical coccidiosis. A positive correlation was observed for E. maxima micro between thickened intestinal walls and lesions caused by E. maxima. E. maxima was detected in mucosal scrapings of 29.6% of the broilers in phase 2, accounting for a subclinical coccidiosis rate of 236.37% compared with clinical coccidiosis. E. maxima micro revealed a positive correlation with excess fluid, necrotic enteritis, E. acervulina, E. maxima, and E. tenella in phase 2. The comparison between the rearing periods showed that subclinical coccidiosis affected 64.45% more broilers in phase 2 than in phase 1. In the gross analysis, E. acervulina was the most prevalent species in both rearing periods. A lesion score equal to 1 was the most frequent among all Eimeria species. Subclinical coccidiosis affected a significant number of broilers in the analyzed Brazilian flocks, and was correlated with several factors that reduce intestinal health. It may be concluded that monitoring is of utmost importance to find out the status of intestinal health of poultry. The microscopic detection of E. maxima (mean of 23.8%) is correlated with factors that negatively affect intestinal health. / A coccidiose é uma enfermidade causada por protozoários do gênero Eimeria ssp. Esses são parasitas intracelulares de enterócitos que rompem a célula hospedeira causando lesões na mucosa intestinal. As lesões causadas pelas Eimerias resultam em redução na capacidade de absorção de nutrientes, afetando o ganho produtivo dos frangos de corte, e representam uma porta de entrada para outros enteropatógenos. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi analisar a correlação entre as lesões causadas pelas Eimerias, e a prevalência de coccidiose e de demais alterações encontradas no trato gastrointestinal de frangos de corte produzidos, no Brasil, no período de 2012 a 2014. As avaliações da saúde intestinal foram realizadas em 82 integrações de frangos de corte, no Brasil, totalizando 5.528 aves analisadas com idades entre 12 e 40 dias. O período de produção analisado foi dividido em duas fases: 1ª fase (12 aos 21 dias) e 2ª fase (22 aos 40 dias). Os frangos necropsiados foram coletados em três diferentes pontos e no mínimo três aves por galpão. No presente estudo foram analisadas as seguintes alterações do trato gastrintestinal: presença de descamação celular, excesso de fluido, excesso de muco, ingestão de cama, intestino espesso, intestino fino, passagem de alimento, tônus alterado, toalha turca, verminose e enterite necrótica. A definição dos escores macroscópicos de lesão causados pelas Eimeria acervulina, Eimeria maxima, Eimeria tenella seguiram a metodologia de Johnson & Reid [8], e a contagem de oocistos na mucosa para E. maxima (E. maxima micro) foi realizada com auxílio de microscópio óptico com aumento de 100 X. A análise estatística do coeficiente de correlação de Pearson foi feita com o programa SAS 9.3., com intervalo de confiança de 95%. Os resultados desse estudo demonstraram que a espécie E. acervulina foi a que apresentou maior prevalência (média de 13,5%) em ambas as fases de produção avaliadas. Ainda, referente à E. acervulina, observou-se correlação positiva com intestino fino e tônus intestinal alterado na 1ª e 2ª fase, bem como correlação positiva com ingestão de cama apenas na 2ª fase. A segunda maior prevalência foi da espécie E. maxima (média de 6,75%), obteu-se correlação positiva com excesso de muco, intestino espesso e fino na 1a fase e correlação positiva com descamação celular, excesso de fluído e toalha turca na 2a fase avaliada. A E. tenella representou a menor prevalência (média de 4,35) entre as espécies de Eimerias analisadas, apresentando uma correlação positiva na 1ª e 2ª fase com o excesso de fluído e na 2ª fase com o intestino espesso e com lesões de E. maxima. Na avaliação microscópica, a E. maxima esteve presente em 18% dos raspados de mucosa realizados na 1ª fase, o que representa uma coccidiose subclínica de 282,98% com relação a coccidiose clínica. Para a E. maxima micro foi detectada correlação positiva entre os achados com o intestino espesso e com as lesões de E. maxima. Na 2ª fase, E. maxima foi encontrada nos raspados de mucosa de 29,6% das aves, representando uma coccidiose subclínica de 236,37% com relação à coccidiose clínica. A E. maxima micro apresentou na 2ª fase uma correlação positiva com o excesso de fluido, enterite necrótica, E. acervulina, E. maxima e E. tenella. Na análise comparativa entre os períodos, a coccidiose subclínica acometeu 64,45% mais frangos de corte na 2ª fase em relação a 1ª fase. Na avaliação macroscópia de lesões relacionadas à coccidiose, a E. acervulina foi a espécie de maior prevalência em ambas fases de produção. O escore de lesão mais frequente para todas as espécies de Eimerias foi o de grau 1. A coccidiose subclínica acometeu um número expressivo de frangos de corte do plantel brasileiro e foi correlacionada com diversos fatores de diminuição de saúde intestinal. Concluiu-se que o monitoramento é de suma importância para conhecer o status de saúde intestinal dos lotes avícolas. Pois, a E. maxima microscópica está presente (média de 23,8%) com correlação aos fatores que reduzem a saúde intestinal.
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Avaliação de fatores de risco relacionados com aterosclerose subclínica em mulheres hipertensas / Assessment of risk factors related subclinical atherosclerosis in hypertensive women

Michelle Trindade Soares da Silva 25 March 2011 (has links)
A aterosclerose e suas complicações são a principal causa de morbidade e mortalidade no mundo ocidental. O aumento da espessura da camada médio-intimal da carótida está associado com risco para doenças cardiovasculares, pois representa um marcador de aterosclerose subclínica, podendo ser detectada precocemente em indivíduos assintomáticos. O objetivo desse estudo foi identificar variáveis clínicas e nutricionais associadas com a aterosclerose subclínica em mulheres hipertensas. Estudo transversal envolvendo uma amostra de conveniência composta por 116 mulheres hipertensas entre 40 e 65 anos. Dados clínicos, como pressão arterial (PA) sistólica e diastólica, história de tabagismo, atividade física, uso de medicamentos foram coletados; foi feita a análise do perfil lipídico, glicemia e proteína C reativa (PCR); a avaliação dietética obtida pelo Recordatório de 24 horas e pelo Registro de três dias. A espessura médio-intimal (EMI) de carótidas foi realizada pelo aparelho de ultrassonografia. As pacientes foram divididas em dois grupos, de acordo com os valores da espessura médio-intimal de carótidas: EMI 0,9mm ou EMI > 0,9mm. Houve diferença significativa entre os grupos em relação à idade (50,846,62 vs 53,547,13; p=0,044), PA sistólica (134,5216,54 vs 142,9821,47; p=0,020), pressão de pulso (PP) (49,3611,03 vs 60,15 17,77; p<0,001), HDL (48,988,54 vs 44,057,45; p=0,004) e PCR (2,311,21 vs 3,051,34; p=0,016). Não houve diferença significativa em relação aos parâmetros antropométricos, exceto em relação à reactância (65,199,69 vs 61,447,88; p=0,036), avaliada pela bioimpedância elétrica (BIA). Quanto ao padrão de consumo alimentar, somente o consumo de gordura monoinsaturada foi diferente entre os grupos, sendo o maior consumo no grupo com menor valor de EMI (7,882,09 vs 7,022,06; p=0,031). Não houve diferença em relação à frequência de tabagismo e atividade física. Quando foi feita a análise de correlação da amostra, foi encontrada uma correlação entre a EMI de carótidas e idade (r=0,25; p=0,0067), PAS (r=0,19; p=0,0086); PP (r=0,30; p=0,0009), LDL (r=0,19; p=0,0434), assim como com gordura monoinsaturada (r= -0,25; p=0,0087), PCR (r=0,31; p=0,007) e HDL (r=-0,33; p=0,0004), porém apenas as variáveis HDL, PCRus e pressão de pulso mostraram ser preditoras independentes da EMI de carótida após feita uma análise de regressão linear multivariada. A proteína C reativa, HDL colesterol e pressão de pulso são importantes preditores independentes de aterosclerose subclínica. / Atherosclerosis and its complications are the main cause of morbidity and mortality in the Western world. Increased carotid intima-media thickness is associated with cardiovascular risk,and it represents a marker of subclinical atherosclerosis, which can be detected early in asymptomatic individuals. The aim of this study was to identify clinical and nutritional variables associated with subclinical atherosclerosis in hypertensive women. Cross-sectional study involving a convenience sample composed by 116 hypertensive women aged between 40 and 65. Clinical data such systolic and diastolic blood pressure (BP), smoking history, physical activity, medication use were collected, a lipid profile, blood glucose and C-reactive protein (CRP)analysis was performed, the dietary assessment was obtained by dietary recall 24 hours and three days food record. Carotid intima-media thickness was performed by the high resolution ultrasound. Patients were divided into two groups according to the values of carotid IMT: IMT 0.9 mm or IMT > 0.9 mm. There was significant difference between the groups regarding age (50.846.62 vs 53.547.13; p=0.044), systolic BP(134.5216.54 vs 142.9821.47; p=0.020), pulse pressure (PP) (49.3611.03 vs 60.15 17.77; p<0.001), HDL-cholesterol (49.3611.03 vs 60.1517.77; p<0.001)and CRP(2.311.21 vs 3.051.34; p=0.016). There was no significant difference regarding to anthropometric parameters, except for the reactance (65.199.69 vs 61.447.88; p=0.036), measured by bioelectrical impedance analysis (BIA). Regarding the dietary pattern, only the monounsaturated fat intake was different between the groups 65.199.69 vs 61.447.88; p=0.036),. There was no difference in smoking and physical activity. In the correlation analysis, we have found a correlation between carotid IMT and age (r = 0.25, p = 0.0067), SBP (r= 0.19, p = 0.0086); PP (r = 0.30, p = 0.0009), LDL (r = 0.19, p = 0.0434), and monounsaturated fat (r = -0.25, p = 0.0087), CRP (r = 0.31, p = 0.007) and HDL (r =- 0.33, p = 0.0004), but only HDL-cholesterol, hsCRP and pulse pressure were shown to be independent predictors of carotid IMT after made a multivariate analysis. Conclude that C reactive protein, HDL-cholesterol and pulse pressure are important predictors for subclinical atherosclerosis.
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Avaliação de fatores de risco relacionados com aterosclerose subclínica em mulheres hipertensas / Assessment of risk factors related subclinical atherosclerosis in hypertensive women

Michelle Trindade Soares da Silva 25 March 2011 (has links)
A aterosclerose e suas complicações são a principal causa de morbidade e mortalidade no mundo ocidental. O aumento da espessura da camada médio-intimal da carótida está associado com risco para doenças cardiovasculares, pois representa um marcador de aterosclerose subclínica, podendo ser detectada precocemente em indivíduos assintomáticos. O objetivo desse estudo foi identificar variáveis clínicas e nutricionais associadas com a aterosclerose subclínica em mulheres hipertensas. Estudo transversal envolvendo uma amostra de conveniência composta por 116 mulheres hipertensas entre 40 e 65 anos. Dados clínicos, como pressão arterial (PA) sistólica e diastólica, história de tabagismo, atividade física, uso de medicamentos foram coletados; foi feita a análise do perfil lipídico, glicemia e proteína C reativa (PCR); a avaliação dietética obtida pelo Recordatório de 24 horas e pelo Registro de três dias. A espessura médio-intimal (EMI) de carótidas foi realizada pelo aparelho de ultrassonografia. As pacientes foram divididas em dois grupos, de acordo com os valores da espessura médio-intimal de carótidas: EMI 0,9mm ou EMI > 0,9mm. Houve diferença significativa entre os grupos em relação à idade (50,846,62 vs 53,547,13; p=0,044), PA sistólica (134,5216,54 vs 142,9821,47; p=0,020), pressão de pulso (PP) (49,3611,03 vs 60,15 17,77; p<0,001), HDL (48,988,54 vs 44,057,45; p=0,004) e PCR (2,311,21 vs 3,051,34; p=0,016). Não houve diferença significativa em relação aos parâmetros antropométricos, exceto em relação à reactância (65,199,69 vs 61,447,88; p=0,036), avaliada pela bioimpedância elétrica (BIA). Quanto ao padrão de consumo alimentar, somente o consumo de gordura monoinsaturada foi diferente entre os grupos, sendo o maior consumo no grupo com menor valor de EMI (7,882,09 vs 7,022,06; p=0,031). Não houve diferença em relação à frequência de tabagismo e atividade física. Quando foi feita a análise de correlação da amostra, foi encontrada uma correlação entre a EMI de carótidas e idade (r=0,25; p=0,0067), PAS (r=0,19; p=0,0086); PP (r=0,30; p=0,0009), LDL (r=0,19; p=0,0434), assim como com gordura monoinsaturada (r= -0,25; p=0,0087), PCR (r=0,31; p=0,007) e HDL (r=-0,33; p=0,0004), porém apenas as variáveis HDL, PCRus e pressão de pulso mostraram ser preditoras independentes da EMI de carótida após feita uma análise de regressão linear multivariada. A proteína C reativa, HDL colesterol e pressão de pulso são importantes preditores independentes de aterosclerose subclínica. / Atherosclerosis and its complications are the main cause of morbidity and mortality in the Western world. Increased carotid intima-media thickness is associated with cardiovascular risk,and it represents a marker of subclinical atherosclerosis, which can be detected early in asymptomatic individuals. The aim of this study was to identify clinical and nutritional variables associated with subclinical atherosclerosis in hypertensive women. Cross-sectional study involving a convenience sample composed by 116 hypertensive women aged between 40 and 65. Clinical data such systolic and diastolic blood pressure (BP), smoking history, physical activity, medication use were collected, a lipid profile, blood glucose and C-reactive protein (CRP)analysis was performed, the dietary assessment was obtained by dietary recall 24 hours and three days food record. Carotid intima-media thickness was performed by the high resolution ultrasound. Patients were divided into two groups according to the values of carotid IMT: IMT 0.9 mm or IMT > 0.9 mm. There was significant difference between the groups regarding age (50.846.62 vs 53.547.13; p=0.044), systolic BP(134.5216.54 vs 142.9821.47; p=0.020), pulse pressure (PP) (49.3611.03 vs 60.15 17.77; p<0.001), HDL-cholesterol (49.3611.03 vs 60.1517.77; p<0.001)and CRP(2.311.21 vs 3.051.34; p=0.016). There was no significant difference regarding to anthropometric parameters, except for the reactance (65.199.69 vs 61.447.88; p=0.036), measured by bioelectrical impedance analysis (BIA). Regarding the dietary pattern, only the monounsaturated fat intake was different between the groups 65.199.69 vs 61.447.88; p=0.036),. There was no difference in smoking and physical activity. In the correlation analysis, we have found a correlation between carotid IMT and age (r = 0.25, p = 0.0067), SBP (r= 0.19, p = 0.0086); PP (r = 0.30, p = 0.0009), LDL (r = 0.19, p = 0.0434), and monounsaturated fat (r = -0.25, p = 0.0087), CRP (r = 0.31, p = 0.007) and HDL (r =- 0.33, p = 0.0004), but only HDL-cholesterol, hsCRP and pulse pressure were shown to be independent predictors of carotid IMT after made a multivariate analysis. Conclude that C reactive protein, HDL-cholesterol and pulse pressure are important predictors for subclinical atherosclerosis.

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