Magíster en fisiología / Introducción: La muerte de los cardiomiocitos induce la pérdida de función del corazón y el desarrollo de diferentes patologías, sin embargo, se desconoce a cabalidad los mecanismos implicados. La policistina-1 (PC1) es un mecanosensor presente en los cardiomiocitos, clave en la función cardiaca, por lo que su presencia en los cardiomiocitos podría implicar la protección de los mismos ante un estrés celular. La necrosis y la apoptosis son dos principales tipos de muerte celular. Durante la apoptosis diferentes vías de señalización son reguladas, donde BCL-2 es una proteína clave como anti-apoptótica mientras NIX es pro-apoptótica. Las variaciones entre ellas son importantes para determinar las vías implicadas en la apoptosis. Debido a que la PC1 es un mecanosensor, en este proyecto se propuso estudiar el papel de la PC1 en la protección de los cardiomiocitos ante procesos de muerte celular, especialmente el ligado a la apoptosis inducida por estrés hiposmótico. Hipótesis: La ausencia de la policistina-1 induce la muerte del tejido cardiaco en condiciones basales y predispone a la muerte de los cardiomiocitos en cultivo sometidos a estrés mecánico, asociado a una disminución de la relación BCL-2/NIX.Materiales y métodos: Se utilizaron cardiomiocitos de ventrículo de ratas neonatas en cultivo, silenciadas para la PC1 (siPC1), en condiciones basales y sometidas a estrés mecánico con un medio hipo-osmótico (HS) y muestras de tejido cardiaco de ratones jóvenes y seniles, controles y knockout para la PC1 (PC1 KO) en los cardiomiocitos. Resultados: La deficiencia de PC1 en los cardiomiocitos (siPC1) induce la muerte por apoptosis de los mismos mientras aumenta la muerte posterior a un estrés hiposmótico. La relación BCL-2/NIX disminuye en los cardiomiocitos siPC1 sometidos a estrés mecánico, debido principalmente a la disminución del contenido de BCL-2 en condiciones basales. Por otro lado, los animales PC1 KO no muestran diferencias en el contenido de BCL-2 o NIX, pero sí muestran un aumento del contenido de Bax, otra proteína pro-apoptótica. Conclusión: Nuestros datos indican que la PC1 tiene un papel regulador de la apoptosis en los cardiomiocitos, aún en condiciones basales y, al menos en parte, por evitar la disminución del contenido de proteínas pro-apoptóticas como BCL-2 y el aumento de NIX ante un estrés hiposmótico. / Background: Cardiomyocyte death leads to the loss of the heart function and the development of different pathologies; however, the implied mechanisms are poorly understood. Polycystin-1 (PC1) is a mechanosensor present in the cardiomyocytes, key in the heart function, so its presence in cardiomyocytes may involve the protection of them against a cellular stress. Necrosis and apoptosis are the two major classes of cellular death. During apoptosis, different signaling pathways are regulated, where BCL-2 is a key anti-apoptotic protein whereas NIX is pro-apoptotic. The variations between them are relevant to determinate the implied pathways in the apoptosis. Since PC1 is a mechanosensor, this project aims to study the role of PC1 in the protection of the cardiomyocytes against the processes of cellular death, especially the one linked to apoptosis induced by hiposmotic stress. Hypothesis: The absence of Polycystin-1 induces the death of the cardiac tissue in basal conditions and predisposes to the death the cardiomyocytes in culture subjected to mechanical stress, associated with a decrease in the BCL-2/NIX ratio.Materials and methods: Neonatal rat ventricular cardiomyocytes, PC-1 silenced (siPC1), where used, in basal conditions and subjected to mechanical stress with a hypo-osmotic medium (HS), and samples of young and senile rat cardiac tissue, control and knockout for PC1 (PC1 KO) in the cardiomyocyte. Results: PC1 deficiency in cardiomyocytes (siPC1) induces death by apoptosis of them while increasing death following hypo-osmotic stress. The BCL-2/NIX ratio decreases in siPC1 cardiomyocytes subjected to mechanical stress, mainly due to the decrease in BCL-2 content at baseline conditions. Conversely, PC1 KO animals do not show differences in BCL-2 or NIX content, but they do show an increase in the content of Bax, another pro-apoptotic protein. Conclusion: Our data suggest that PC1 has a regulatory role for apoptosis in the cardiomyocytes, even under basal conditions and, at least in part, to avoiding the reduction of the pro-apoptotic protein content as BCL-2, and the increase in NIX content to a hypo-osmotic stress.

Os dados espaciais têm sido utilizados para o monitoramento ambiental de consequências de acidentes com produtos químicos no transporte de produtos perigosos. A Infraestrutura de Dados Espaciais (IDE), que foi criada para a disponibilização e uso de dados espaciais, esbarra na ausência de políticas para dar suporte a essa realização. O objetivo principal deste trabalho é explorar o uso da teoria de Análise de Rede Social (ARS) para diagnosticar a articulação entre as organizações do setor, e discutir as políticas e acordos institucionais vigentes e criar um esquema conceitual de uma IDE para gerenciamento de acidentes relacionados ao Transporte Rodoviário de Produtos Perigosos (TRPP). Neste contexto, esta pesquisa identificou as instituições que tratam do tema TRPP, para que informações sobre o interesse no uso e compartilhamento de dados espaciais através de uma IDE pudessem ser coletadas através de entrevistas, e desta forma, consolidadas. As entrevistas foram aplicadas de forma presencial em 39 instituições. A aplicação da teoria Análise de Rede Social (ARS) pôde diagnosticar o fluxo dos dados entre as instituições através da representação gráfica das redes de disponibilização e utilização de dados espaciais entre as organizações participantes. A partir de então, foram analisados e discutidos os acordos vigentes para compartilhamento de dados espaciais. Os resultados compilados permitiram propor um esquema conceitual de uma IDE para apoio a desastres envolvendo o TRPP, para, então, prover a elaboração de metodologia para o suporte ao diagnóstico da articulação entre os diversos atores de uma IDE. A finalidade é a possível a formulação de políticas para disponibilização de dados espaciais para tomada de decisões preventivas e de enfrentamento de desastres. Os resultados indicaram que as 39 instituições compartilham dados espaciais entre si, ainda que nem sempre por acordos formais preestabelecidos. Constatou-se ainda que há um grande anseio por parte das instituições que fazem o gerenciamento de acidentes envolvendo o TRPP para que haja mecanismos legais para compartilhamento de dados estruturantes para planejamento territorial - para que o uso desses dados possa auxiliar na preparação, prevenção, gerenciamento e socorro imediato aos incidentes que envolvem o TRPP. / Spatial data have been used for environmental monitoring of chemical accidents on the road transportation of dangerous goods. The Spatial Data Infrastructure (SDI) has been created to availability and use of spatial data, however, it emphasizes that there are no policies to support this realization. The main aim of this work is to create a conceptual scheme of a Spatial Data Infrastructure (SDI) for management of transport of Dangerous Goods by road, focusing on the political context. It was identified the institutions that deal with the subject of road transportation of hazardous materials, Moreover the interviews could be consolidated. The interviews were administered by face, in 39 institutions. Interview data were ran in software UCINET, 2000 to obtain metrics related to centrality measures. The application of the theory of Social Network Analysis (ARS) could recognize the flow of data between institutions through the enrolled institutions. Furthermore, it was analyzed the network availability and use aspects of spatial data sharing between the organizations. Besides, the compiled results allowed to propose a conceptual scheme of a SDI to support technological disasters with road transportation of hazardous materials throw the SNA theory applied to investigation of spatial data sharing between different stakeholders to make prevention and risk management of the sector. Therefore, the analysis of the theory of Social Network Analysis (ARS) found that 39 (thirty-nine) institutions share spatial data between themselves, but not always in formal agreements previously established. It was further observed that there is a great desire on the part of the institutions that make the management of the accidents of this kind of transportation mode, so there are legal frameworks for data sharing for land cover uses, as a result the use of such data can be shared between different stakeholders to assist the preparedness, mitigation, response and recovery from incidents related to road dangerous goods transportation.

Os dados espaciais têm sido utilizados para o monitoramento ambiental de consequências de acidentes com produtos químicos no transporte de produtos perigosos. A Infraestrutura de Dados Espaciais (IDE), que foi criada para a disponibilização e uso de dados espaciais, esbarra na ausência de políticas para dar suporte a essa realização. O objetivo principal deste trabalho é explorar o uso da teoria de Análise de Rede Social (ARS) para diagnosticar a articulação entre as organizações do setor, e discutir as políticas e acordos institucionais vigentes e criar um esquema conceitual de uma IDE para gerenciamento de acidentes relacionados ao Transporte Rodoviário de Produtos Perigosos (TRPP). Neste contexto, esta pesquisa identificou as instituições que tratam do tema TRPP, para que informações sobre o interesse no uso e compartilhamento de dados espaciais através de uma IDE pudessem ser coletadas através de entrevistas, e desta forma, consolidadas. As entrevistas foram aplicadas de forma presencial em 39 instituições. A aplicação da teoria Análise de Rede Social (ARS) pôde diagnosticar o fluxo dos dados entre as instituições através da representação gráfica das redes de disponibilização e utilização de dados espaciais entre as organizações participantes. A partir de então, foram analisados e discutidos os acordos vigentes para compartilhamento de dados espaciais. Os resultados compilados permitiram propor um esquema conceitual de uma IDE para apoio a desastres envolvendo o TRPP, para, então, prover a elaboração de metodologia para o suporte ao diagnóstico da articulação entre os diversos atores de uma IDE. A finalidade é a possível a formulação de políticas para disponibilização de dados espaciais para tomada de decisões preventivas e de enfrentamento de desastres. Os resultados indicaram que as 39 instituições compartilham dados espaciais entre si, ainda que nem sempre por acordos formais preestabelecidos. Constatou-se ainda que há um grande anseio por parte das instituições que fazem o gerenciamento de acidentes envolvendo o TRPP para que haja mecanismos legais para compartilhamento de dados estruturantes para planejamento territorial - para que o uso desses dados possa auxiliar na preparação, prevenção, gerenciamento e socorro imediato aos incidentes que envolvem o TRPP. / Spatial data have been used for environmental monitoring of chemical accidents on the road transportation of dangerous goods. The Spatial Data Infrastructure (SDI) has been created to availability and use of spatial data, however, it emphasizes that there are no policies to support this realization. The main aim of this work is to create a conceptual scheme of a Spatial Data Infrastructure (SDI) for management of transport of Dangerous Goods by road, focusing on the political context. It was identified the institutions that deal with the subject of road transportation of hazardous materials, Moreover the interviews could be consolidated. The interviews were administered by face, in 39 institutions. Interview data were ran in software UCINET, 2000 to obtain metrics related to centrality measures. The application of the theory of Social Network Analysis (ARS) could recognize the flow of data between institutions through the enrolled institutions. Furthermore, it was analyzed the network availability and use aspects of spatial data sharing between the organizations. Besides, the compiled results allowed to propose a conceptual scheme of a SDI to support technological disasters with road transportation of hazardous materials throw the SNA theory applied to investigation of spatial data sharing between different stakeholders to make prevention and risk management of the sector. Therefore, the analysis of the theory of Social Network Analysis (ARS) found that 39 (thirty-nine) institutions share spatial data between themselves, but not always in formal agreements previously established. It was further observed that there is a great desire on the part of the institutions that make the management of the accidents of this kind of transportation mode, so there are legal frameworks for data sharing for land cover uses, as a result the use of such data can be shared between different stakeholders to assist the preparedness, mitigation, response and recovery from incidents related to road dangerous goods transportation.

Grado de magíster en fisiopatología / Las enfermedades cardiovasculares corresponden a una de las mayores causas de muerte en el mundo, donde el infarto agudo del miocardio es responsable de la mayoría de ellas. Diferentes vías confluyen en el daño y muerte del tejido cardiaco durante el infarto. Sin embargo las principales corresponden al aumento descontrolado tanto de especies reactivas de oxígeno (EROS), como de iones calcio (Ca2+) citoplasmáticos. A pesar de esto se desconoce la totalidad de mecanismos implicados durante este tipo de patología. La policistina-1 (PC1) es una proteína transmembrana, producto del gen PKD1, clave en la función cardiaca en condiciones fisiológicas, lo cual podría estar relacionado al hecho de que regula los niveles proteicos de los canales de Ca2+ sensibles a voltaje tipo-L en la membrana de los cardiomiocitos. Además, se ha reportado que la PC1 regula las concentraciones de Ca2+ y de ROS citoplasmáticos y que su ausencia aumenta el daño posterior a la isquemia reperfusión renal. A pesar de lo anterior, se desconoce el papel de la PC1 en condiciones de isquemia-reperfusión (IR) cardiaca. En esta tesis se evaluó la hipótesis que la ausencia de la PC1 en los cardiomiocitos aumenta el estrés oxidativo y el daño producido por la IR cardiaca. Utilizamos un modelo ex vivo de IR en corazones de ratones controles (PC1F/F) y knockout para la PC1 en los cardiomiocitos (PC1 KO). Los resultados indican que los corazones de los ratones PC1 KO sometidos a IR, en comparación a los PC1F/F, presentan un mayor tamaño de infarto y cantidad de LDH, dando cuenta de una mayor muerte del miocardio posterior a una IR. Sin embargo, al comparar los parámetros hemodinámicos, no existieron diferencias entre ambos grupos. En cuanto a los EROS, los corazones PC1 KO sometidos a IR, presentaron niveles mayores de proteínas carboniladas y nitradas que los ratones PC1F/F. En su conjunto, nuestros resultados sugieren que la PC1 es una proteína que evita un mayor daño durante la IR cardiaca, lo cual podría estar asociado con su capacidad para evitar un aumento del estrés oxidativo durante la IR. / Cardiovascular diseases are one of the most important causes of death world wide, and acute myocardial infarction is responsible for the most of them. Different mechanisms are involved in the injury and death of the myocardium during an infarct. However, the main mechanisms are the uncontrolled increase of reactive oxygen species (ROS) and citoplasmatic calcium (Ca2+). Nevertheless, many of the mechanisms implicated in this pathology are still unknown. Polycistin-1 (PC1) is a transmembrane protein product of the translation of PKD1 gene, which plays a key role in the cardiac function in physiological conditions; this could be related to the fact that PC1 regulates the voltage-dependent Ca2+ channels in the membrane of the cardiomyocites. It has been reported that PC1 regulates the concentrations of Ca2+ and ROS in the cytoplasm, and that the absence of PC1 increases the damage after renal ischemia-reperfusion. In spite of this, the role of PC1 under myocardial ischemia reperfusion (IR) is uncleared. The hypothesis that the absence of PC1 in the cardiomyocites increases the oxidative stress and the damage produced by myocardial IR was evaluated in this thesis. An ex vivo model of myocardial IR, in control mouse hearts (PC1F/F) and knockout for PC1 mouse hearts (PC1 KO) was used for this purpose. The results show that the PC1 KO hearts submitted to IR presented bigger infarct size and higher amount of LDH in comparison with PC1F/F, indicating more death of the myocardium after IR, although they did not show differences in hemodynamic parameters. In relation to the levels of ROS after IR, PC1 KO hearts showed higher levels of protein carbonilation and nitrotyrosination in comparison with PCF/F. The results of this investigation suggest that PC1 is a protein that prevents the damage during myocardial IR, and this could be associated to its role in preventing the increase of ROS during IR.