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Cultura de tecidos de Stylosanthes guianensis (Aubl.) Sw. Cv. IRI 1022: estudo morfogenético e histológico / Tissue culture on Stylosanthes guianensis (Aubl.) Sw. CV. IRI 1022: morphogenetic and histological study

Silva, Benedita Aparecida da 22 January 1992 (has links)
A espécie Stylosanthes guianensis, importante forrageira para as regiões tropicais do globo, vem se estabelecendo a partir da década de 80 como um sistema modelo em potencial, para a tecnologia da cultura de tecidos na família Leguminosae (MEIJER & SZABADOS, 1990). No presente estudo, avaliou-se o potencial morfogenético in vitro de uma cultivar pertencente a esta espécie, a IRI 1022, em relação aos fatores genótipo e meio de cultura, mais especificamente, a reguladores de crescimento. A indução de calos foi obtida a partir de explantes foliares da cv IRI 1022 colocados em meios basais MS suplementados com combinações dos fitorreguladores NAA e BAP, nas concentrações 0,0; 0,1; 0,4; 1,0 e 2,0 mg/l, sob fotoperíodo de 16 horas luz e temperaturas entre 25 a 28°C. Entre estas combinações foram selecionadas favoravelmente, aquelas capazes de promover fases de calo mais prolongadas e ainda a regeneração de partes aéreas nestes calos durante o período de indução de 30 dias. Calos induzidos nestas condições foram transferidos após 30 dias para meios de regeneração, isto é, meios MS suplementados apenas com BAP, onde a concentração 2,0 mg/l, mostrou-se a mais satisfatória. Brotos regenerados foram alongados em meio MS com as concentrações de sais reduzidas à metade e a um quarto, e concentração de BAP também reduzida ou ausente. A implementação do enraizamento em brotos alongados se deu em meio MS reduzido à metade e a um quarto, e suplementado com 0,2 mg/l de IBA. As maiores taxas de sobrevivência de plantas regeneradas in vitro se deu sob condições elevadas de umidade relativa, luminosidade e temperatura. Plantas SC1 (regenerantes primários) avaliadas preliminarmente, apresentaram variações quanto a alguns aspectos vegetativo e reprodutivo; progênies destas plantas por sua vez, quando submetidas a cultura, demonstraram variabilidade para o caráter regeneração. A indução de calos e a organogênese de partes aéreas nestes, foram igualmente avaliadas a nível estrutural. Os eventos chaves que levam a indução de calos em explantes foliares da cultivar IRI 1022, ocorrem entre o segundo e o terceiro dias de cultura; a desdiferenciação e a proliferação celulares têm início nas regiões de ferimento do expl ante, notadamente a nível da nervura principal, em células do parênquima e da bainha do feixe vascular. No quinto dia de cultura, já é evidente a nível da morfologia externa, o início de formação de calo. Em torno do décimo dia de cultura já se observa a presença de meristemóides. Trinta dias após a inoculação do explante, são evidentes as gemas caulinaes. O processo de regeneração ocorre por organogênese, com os brotos desenvolvendo na superfície dos calos. / Since the 80's decade, Stylosanthes guianensis, an important forage species for world tropical regions, has been established as a potential model system for tissue culture in the Leguminosae family (MEIJER & SZABADOS, 1990). In the present study, S. guianensis cultivar IRI 1022 in vitro morphogenetic potential was evaluated; genotype and culture media, specifically, growth regulators was studied. Cal1i induction was obtained from IRI 1022 leaves explants placed on the MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) basal medium supplemented with combinations of NAA and BAP at. 0.0, 0.1, 0.4, 1.0 and 2.0 mgl-1 concentrations. Cultures were maintained at 25 to 28°C, under 16 hs light regime. Plant growth regulator combinations able to promote extended call us phase and shoot regeneration in a 30 days period were selected. The derived calli were then transferred auxin free MS regeneration media; 2.0 mgl-1 BAP was the more satisfactory concentration for shoot regeneration. Shoots were elongated in half-and-quarter- strength MS medium, free of hormones or supplemented with reduced BAP concentration. Rooting was induced in the same basal medium supplemented with 0,2 mgl-1 IBA. Regenerated plantlets, when transferred to the soil, showed greater survival rates under high humidity, 1ight and temperature conditions. SC1 plants (primary regenerants) showed some variations related with morphological and reproductive aspects; progenies of SC1 plants showed variabi1ity in in vitro regenerative in abi1ity. Histological analyses of calli induction and shoot regeneration processes were performed. Leaf explants derived calli were induced by hystological events that. occur between the second and the third day of culture; dedifferentiation and cellular proliferation begin in regions closed to lesions caused by explant excision, mainly at the central vein, involving both, cel1 of the vascular parenchyma and sheath of the bundle. On the fifth day of culture calli began to be evident at the level of external morphology. After the tenth day of culture meristemoids can be observed. After thirty days of explants inoculation shoot buds are evident. Regeneration process occurs by organogenesis, with shoot development on calli surfaces.
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Estudo das propriedades mecânicas e dos mecanismos de fratura de fibras sintéticas do tipo náilon  e poliéster  em tecidos de engenharia / Study of mechanical properties and fracture mechanisms of synthetic fibers like nylon and polyester in engineering fabrics

Cardoso, Sérgio Gomes 15 December 2009 (has links)
Fibras são definidas como o conjunto formado de filamentos orientados na direção da cadeia molecular e são parte fundamental na vida diária do ser humano, encontradas de várias formas, tais como filamentos, fios, feixes, cordas, tecidos, compósitos, revestimentos, entre outras. Elas abrangem diversas áreas, tais como civil, mecânica, elétrica, eletrônica, militar, naval, náutica, aeronáutica, saúde, medicina, ambiental, comunicação, segurança, espacial, entre outras. A fibras são divididas em duas classes distintas, naturais e químicas, que compõem as subclasses sintéticas e artificiais. Podem ser produzidas de vários materiais, tais como lã, algodão, raion, linho, seda, rocha, náilon, poliéster, polietileno, polipropileno, aramida, vidro, carbono, aço, cerâmica, entre outros. Em nível global, as fibras químicas correspondem a 59,9% do mercado, sendo as fibras sintéticas tipo poliéster as mais utilizadas, com 63%. Necessidades vitais têm levado ao desenvolvimento de fibras multifuncionais e o foco mudou nos últimos dez anos com a utilização da nanotecnologia para fibras de responsabilidade ambiental e fibras inteligentes. O estudo das propriedades mecânicas e dos mecanismos de fratura das fibras é de grande importância para caracterização e entendimento das causas de falhas. Para este propósito foram selecionados tecidos fabricados com fibras sintéticas de alto desempenho do tipo náilon e poliéster, utilizadas em produtos de engenharia tais como pneus, correias, mangueiras e molas pneumáticas, as quais foram analisadas em cada etapa de processamento. Amostras das fibras foram retiradas de cada etapa de processamento para análise por ensaios destrutivos de tração e microscopia eletrônica de varredura. Os resultados de análise das propriedades mecânicas mostraram perda de resistência por temperatura e tensões multiaxiais durante as etapas de processamento da fibra. Por meio de ensaios de microscopia foi possível determinar contaminações, manchas superficiais, deformações plásticas, delaminações, variações nas faces de fratura dos filamentos e analisar, na interface fibra-borracha, o nível de adesão. Estas irregularidades e variações são causadas durante as etapas inerentes ao processo de fabricação. / Fibers are groups formed by molecular-chain-oriented filaments. Fibers play a fundamental role in human beings daily life and they can be found in several forms and geometries, such as filaments, yarns, beams, rope, fabric, composite, coatings, others. They are used in various segments such as civil, mechanical, electrical, electronics, military, naval, nautical, aviation, health, medicine, environment, communications, safety, space, others. Fibers are divided into two distinct classes: natural and chemical ones, which cover synthetic and man-made sub-classes. They can be produced from several materials, such as wool, cotton, rayon, flax, silk, rock, nylon, polyester, polyethylene, poly-propylene, aramid, glass, carbon, steel, ceramic, others. Globally, the participation of chemical fibers corresponds to approximately 59,9%, and the synthetic fiber polyester, the most used one, represents approximately 63% of the world market. Vital needs have led to the development of multi-function fibers and the focus has changed in the last 10 years with the use of nanotechnology for environmental responsibility and smart fibers. The study of mechanical properties and fracture mechanisms of fibers is of great relevance for characterization and understanding of causes as consequence of failures. For such reason, it was selected technical fabrics made of high performance synthetic fiber nylon-and-polyester type, used in engineered products such as tires, belts, hoses and pneumatic springs, which have been analyzed in each processing phase. Fiber samples were extracted after each processing phase to be analyzed, by traction destructive tests and scanning electron microscopy. The results of analysis of mechanical properties showed loss of resistance to temperature and multi axial stress during fiber processing phase. Through microscopy tests, it was possible to find contamination, surface stains, plastic deformations, scaling, variations in the fracture faces of the filaments and analyze in the fiber-rubber interface, the level of adhesion. These irregularities and variations are caused during the stages of the process.
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Desempenho do aparato fotossintético em função das citocininas empregadas durante a fase de multiplicação in vitro de Aechmea blanchetiana (Bromeliaceae)

ROSA, W. S. 09 November 2017 (has links)
Made available in DSpace on 2018-08-01T23:27:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_11486_90-Waldesse Storch Rosa.pdf: 1765207 bytes, checksum: 635e186d749563e065af18b815faaefa (MD5) Previous issue date: 2017-11-09 / A cultura de tecidos pode contribuir para a propagação de diversas espécies vegetais de importância ecológica ou ameaçadas de extinção, tais como as bromélias. Durante a fase de multiplicação in vitro, o emprego de citocininas pode ser indispensável para a indução de brotos laterais em diversas espécies. Contudo, análises sobre as desordens fisiológicas induzidas pelos fitorreguladores ainda não é bem entendida, principalmente sobre o aparato fotossintético. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de citocininas em função da concentração, na taxa de multiplicação, no desempenho do aparato fotossintético e na funcionalidade estomática de Aechmea blanchetiana durante a fase de multiplicação in vitro. Plantas de A. blanchetiana previamente estabelecida in vitro foram inoculadas em meio MS suplementado com 6-benzilaminopurina (BAP) ou 6-furfurilaminopurina (KIN) nas concentrações: 0, 5, 10, 15 e 20 μM. Após 60 dias de exposição aos fitorreguladores, foi analisada a taxa de multiplicação, o desempenho do aparato fotossintético (fluorômetro portátil Handy PEA) e a caracterização da funcionalidade estomática dos explantes em função dos tratamentos. Não foi observada formação de brotos na ausência de citocininas exógenas (controle). O uso de KIN não induziu formação de brotos e nem incremento de massa fresca, independentemente da concentração utilizada. Foi verificado incremento significativo de massa fresca e de brotos em plantas cultivadas com BAP, à medida que aumentou a concentração. O tipo e a concentração de citocininas também influenciaram o aparato fotossintético das plântulas. A fluorescência transiente da clorofila a apresentou forma típica das curvas OJIP com pontos J e I bem definidos. Foi observada a redução na produção quântica (Fv/Fm) em função da concentração, em todos tratamentos com citocininas exógenas, exceto, para o tratamento com 5μM de BAP. O decréscimo mais acentuado em produção quântica foi verificado nas plantas tratadas com KIN. Na avaliação anatômica, foi encontrada uma redução da funcionalidade estomática, em resposta ao aumento da concentração de citocininas. As citocininas exógenas influenciam a fisiologia do aparato fotossintético e a anatomia de plântulas de A. blanchetiana durante a multiplicação in vitro. A KIN não é indicada para a multiplicação desta espécie in vitro. O emprego de BAP em menores concentrações proporcionou a quebra da dominância apical e a formação de brotos, com menor grau de distúrbios no aparato fotossintético dos brotos formados.
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Tratamento de superfície de tecido de poliamida 6.6 com plasma e/ou quitosana /

Abatti, Dirceu, Barcellos, Ivonete Oliveira, Universidade Regional de Blumenau. Programa de Pós-Graduação em Química. January 2007 (has links) (PDF)
Orientadora: Ivonete Oliveira Barcellos. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.
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Catecolaminas do aparelho reprodutor de ratos após simpatectomia química : metodologia analítica e comparação entre as variedades Wistar e Sprague-Dawley /

Silva, Daniela Alessandra Fossato da. January 2007 (has links)
Resumo: O tratamento com baixas doses de guanetidina provoca desnervação seletiva em órgãos sexuais acessórios de ratos Wistar e Sprague-Dawley, devido à depleção da noradrenalina nas terminações nervosas autonômicas simpáticas. O modelo experimental proposto possui semelhanças com casos de homens acometidos por lesão na medula espinhal. O objetivo deste trabalho foi investigar as concentrações de catecolaminas em órgãos reprodutores de ratos Wistar e Sprague-Dawley, após simpatectomia química por guanetidina e período de suspensão do tratamento, através do desenvolvimento e validação de um método analítico para a determinação simultânea de noradrenalina e adrenalina, por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com Detecção Eletroquímica. As amostras foram obtidas de ratos machos das variedades Wistar e Sprague- Dawley, controle e submetidos ao tratamento (via intraperitonial) com guanetidina, nas doses de 10mg/kg, durante 30 dias e 6,25mg/kg durante 21 dias, respectivamente. Foi utilizado ácido perclórico 0,4 mol L-1 no procedimento de extração das catecolaminas. Em seguida as seguintes etapas foram realizadas: avaliação do tempo de extração, ensaios de recuperação (empregando o método de calibração adição padrão) e determinação de noradrenalina e adrenalina nas amostras reais. O melhor rendimento de extração da noradrenalina foi em 90 min na cauda do epidídimo e 60 min no ducto deferente. A extração manteve-se constante a partir de 30 min para a adrenalina nas duas amostras de tecidos. O emprego do ácido perclórico 0,4 mol L-1 e o método cromatográfico com detecção eletroquímica permitiram uma boa extração e quantificação. A extração do analito resultou em valores de recuperação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The treatment with low doses of guanethidine provokes selective denervation in accessory sexual organs of Wistar and Sprague-Dawley rats due to depletion of noradrenaline in the autonomic sympathetic nervous termination. The experimental model proposed has similarities with cases of men with spinal cord injury. The objective of this work was to investigate in the concentrations of catecholamines in reproductive organs of Wistar and Sprague-Dawley rats, after chemical sympathectomy with guanethidine and a period of suspension of the treatment, through the development and validation of an analytical method for the simultaneous determination of noradrenaline and adrenaline, by High Performance Liquid Chromatography with electrochemical detection. The samples were obtained from male rats of the varieties Wistar and Sprague-Dawley, control and those submitted to a treatment (intraperitonially) with guanethidine sulfate, at the doses of 10mg/kg, for 30 days and 6.25mg/kg for 21 days, respectively. Percloric acid 0.4 mol L-1 was used in the procedure of catecholamine extraction. Next, the following steps were performed: evaluation of the extraction time, assays of recovery (using the standard addition calibration method) and determination of noradrenaline and adrenaline in real samples. The best noradrenaline extraction yield was at 90 minutes for the cauda epididymis and 60 minutes for the vas deferens. The extraction was kept constant starting at 30 minutes for adrenaline in both tissue samples. The use of percloric acid 0.4 mol L-1 and the chromatographic method with eletrochemical detection allowed a good extraction and quantification. The extraction of the analyte resulted in recovery values between 56% and 114%, and coefficient of variation between 3.8% and 23%. The quantification limit of the method... (Complete abstract, click electronic access below) / Orientador: Manoel Lima de Menezes / Coorientador: Wilma de Grava Kempinas / Banca: Maria Lucia Ribeiro / Banca: Antônio Francisco Godinho / Banca: Oduvaldo Camara Marques Pereira / Banca: Teresa Lucia Lamano Carvalho / Doutor
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Caracteriza??o morfol?gica de frutos, sementes e pl?ntulas, germina??o e micropropaga??o de Terminalia fagifolia e Terminalia argentea (Combretaceae)

Santos, Marcone Moreira 21 February 2014 (has links)
Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-05T18:07:53Z No. of bitstreams: 3 marcone_pereira_santos.pdf: 1338852 bytes, checksum: 86d20ee6ba91dc0a65cc934f2b95512f (MD5) marcone_pereira_santos_folha _de_ aprovacao.pdf: 226112 bytes, checksum: cc7414929efdeb8df3244ee8d8a4429c (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-05T18:08:19Z (GMT) No. of bitstreams: 3 marcone_pereira_santos.pdf: 1338852 bytes, checksum: 86d20ee6ba91dc0a65cc934f2b95512f (MD5) marcone_pereira_santos_folha _de_ aprovacao.pdf: 226112 bytes, checksum: cc7414929efdeb8df3244ee8d8a4429c (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-05T18:08:34Z (GMT) No. of bitstreams: 3 marcone_pereira_santos.pdf: 1338852 bytes, checksum: 86d20ee6ba91dc0a65cc934f2b95512f (MD5) marcone_pereira_santos_folha _de_ aprovacao.pdf: 226112 bytes, checksum: cc7414929efdeb8df3244ee8d8a4429c (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-05T18:08:34Z (GMT). No. of bitstreams: 3 marcone_pereira_santos.pdf: 1338852 bytes, checksum: 86d20ee6ba91dc0a65cc934f2b95512f (MD5) marcone_pereira_santos_folha _de_ aprovacao.pdf: 226112 bytes, checksum: cc7414929efdeb8df3244ee8d8a4429c (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O trabalho teve por objetivos caracterizar morfologicamente frutos, sementes e pl?ntulas de Terminalia fagifolia e Terminalia argentea, avaliar o percentual de germina??o das sementes em resposta ao armazenamento e tratamentos de supera??o de dorm?ncia, e desenvolver uma metodologia de micropropaga??o a partir de pl?ntulas germinadas in vitro para ambas esp?cies. Para a caracteriza??o morfol?gica, foram amostrados 100 frutos e 100 sementes, dos quais foram avaliadas caracter?sticas como colora??o, textura, comprimento, largura e estruturas morfol?gicas. A umidade foi determinada pelo m?todo de estufa a 103?2?C. A germina??o foi realizada em c?mara de germina??o tipo BOD, utilizando caixas tipo Gerbox (15x15 cm) contendo areia esterilizada e ?gua destilada, sob temperatura de 30?C e fotoper?odo de 16 horas. Foram testados os seguintes tratamentos para supera??o da dorm?ncia: Controle; escarifica??o em esmeril, escarifica??o com ?cido sulf?rico P.A por 5 minutos; imers?o em ?gua fervente por 5 minutos; e embebi??o em ?gua em temperatura ambiente por 24 horas. A umidade e germina??o foram realizados em sementes rec?m colhidas e com 2, 4 e 6 meses de armazenamento em c?mera fria. Para a desinfesta??o foram instalados quatro experimentos in vitro. No primeiro, as sementes de T. fagifolia foram lavadas, escarificadas em ?cido sulf?rico por 5 minutos e posteriormente imersas em solu??o de ?lcool 70% por 30 segundos e, logo ap?s, em solu??o de hipoclorito de s?dio a 5%, sendo adicionado 4 a 5 gotas de Tween 20 para cada 100 ml de solu??o. Foram utilizados os tempos de imers?o de 5, 10, 15, 20 e 25 minutos em hipoclorito de s?dio a 5%, os quais constitu?ram cinco tratamentos. No experimento II, os procedimentos foram semelhantes aos descritos no experimento I, diferindo com rela??o aos tratamentos utilizados. Foram testados os tempos de imers?o de 5, 10, 15, 20 e 25 minutos em solu??o de Digluconato de Clorexidina a 5 mgL-1. Nos experimentos III e IV, para T. argentea, os procedimentos foram semelhantes as experimento I, no entanto, no experimento IV, as sementes tiveram seu tegumento retirado. Ap?s a desisnfesta??o, as sementes foram inoculadas e tubos de ensaio com 10 ml de meio de cultura MS. Na fase de multiplica??o, para cultivo inicial, pl?ntulas de T. argentea obtidas no experimento IV da etapa anterior foram segmentadas e seus segmentos nodais foram inoculadas em Meio de cultivo MS acrescidos de 0,03 mgL-1 de ANA e BAP nas concentra??es de 0,1; 0,15; 0,2; 0,4; e 0,6 mgL-1. Para os subcultivos 1 e 2, gemas axilares oriundas das brota??es do cultivo inicial e subcultivo 1, respectivamente, foram inoculadas em tubos de ensaio contendo 10 ml do meio de cultura b?sico adicionado de 0,15 mg L-? de BAP e 0,03 mg L-? de ANA. Na fase de enraizamento, os explantes do subcultivo 2 com comprimento superior a 2 cm, foram inoculados em tudos contendo 10 ml do meio MS acrescido de 0; 1,0; 2,0 e 4,0 mgL-? de AIB. De modo geral, o tempo de armazenamento e os tratamentos pr?-germinativos n?o influenciaram a germina??o de T. fagifolia. Para T. argentea o armazenamento por 60 dias e a imers?o em ?gua por 24 horas proporcionou maiores percentuais de germina??o. Para a desinfesta??o in vitro o hipoclorito de s?dio e o digluconato de clorexidina n?o foram eficientes para promover a descontamina??o das sementes de T. fagifolia, no entanto, a retirada do tegumento e a imers?o das sementes por 25 minutos em solu??o de hipoclorito de s?dio a 2,5% se mostrou eficiente para promover a desinfesta??o e germina??o in vitro de T. argentea. Na fase de multiplica??o, a adi??o de 0,15 mgL-? de BAP favoreceu o surgimento de brota??es em segmentos nodais de T. argentea, enquanto a adi??o de 4,0 mgL-? de AIB ao meio de cultivo favoreceu o enraizamento para a esp?cie. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncia Florestal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT The study aimed to, morphologically characterize fruits, seeds and seedlings of Terminalia fagifolia and Terminalia argentea and evaluate the physiological quality of seeds and develop a method for micropropagation for both species. For morphological, 100 and 100 fruit seeds, including features such as color, texture , length , width and morphological structures were evaluated were sampled . Moisture was determined by oven method at 103 ? C ? 2 . Germination was carried out in a germination chamber BOD using type Gerbox ( 15x15 cm ) boxes containing sterilized sand and distilled water with a temperature of 30 ? C and 16 h photoperiod . , Scarification on Emery , PA scarification with sulfuric acid for 5 minutes, immersion in boiling water for 5 minutes , and soaking in water at room temperature for 24 hours Control : The following treatments to break dormancy were tested. The moisture and germination were performed on freshly harvested and 2 , 4 and 6 months of storage in cold camera seeds . For disinfestation were mounted four experiments . At first, the seeds of T. fagifolia were washed, scarified in sulfuric acid for 5 minutes and then immersed in 70% alcohol for 30 seconds and, subsequently , in a solution of sodium hypochlorite 5 % with added 4 to 5 drops of Tween 20 per 100 ml of solution. Immersion times of 5 , 10, 15 , 20 and 25 minutes in a sodium hypochlorite 5 % , which constitute five treatments were used. In experiment II, the procedures were similar to those described in experiment I, differing with respect to treatments. Immersion times of 5, 10, 15, 20 and 25 minutes in a solution of chlorhexidine gluconate to 5 mgL - ? were tested. In the experiments III and IV, T. argentea, the procedures were similar to the experiment, however, in Experiment IV, the seeds were removed from their integument. After desisnfesta??o seeds were inoculated and test tubes with 10 ml of MS medium. In the multiplication phase, for the first subculture, seedlings of T. argentea obtained in the previous step experiment IV were segmented and their nodal segments were inoculated in MS medium plus 0.03 mg L - ? and BAP at concentrations of 0.1, 0.15, 0.2 , 0.4 and 0.6 mg L- 1. For 1 and 2 subcultures , shoots originating from the initial subculture and 1 , respectively , growing axillary buds were inoculated into test tubes containing 10 ml of the basic culture medium added 0.15 mg L- ? BAP and 0.03 mg L- ? NAA. For rooting , the plantlets subculture of 2 longer than 2 cm were inoculated in studies containing 10 ml of MS medium supplemented with 0 , 1.0, 2.0 and 4.0 mg L - ? IBA . Generally, the storage time and the pre- germination treatment did not affect the germination of T. fagifolia . T. argentea storage for two months and immersion in water for 24 hours resulted in the highest germination percentages. For in vitro disinfection with sodium hypochlorite and chlorhexidine gluconate were not effective to promote decontaminating seeds, however, the removal of the seed coat and soaking the seeds for 25 minutes in a solution of sodium hypochlorite at 2.5% proved to promote efficient disinfection and germination in vitro of T. argentea. In the multiplication phase the addition of 0.15 mg L - ? BAP favored the emergence of shoots in nodal segments of T. argentea while the addition of 4.0 mg L - ? BAP to the culture medium favored rooting for this species.
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Electrospinning de emulsão para a produção de matrizes de nanofibras como uma estratégia para cultivo de células-tronco e incorporação de fatores de crescimento

Rosa, Annelise Ribeiro da January 2012 (has links)
A associação de matrizes produzidas por electrospinning (ES) e células-tronco tem sido apontada como uma alternativa promissora na reconstituição de tecidos. A associação de moléculas bioativas, tais como o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) em nanofibras, permite a libertação controlada do fator incorporado. Isso pode contribuir para a migração e diferenciação celular, tornando-se uma opção interessante para a regeneração de tecidos. Neste trabalho foi analisado a influência da incorporação do VEGF em matrizes de poli(ácido láctico-co-glicólico) (PLGA) produzidas por ES. As análises de adesão, viabilidade celular e citotoxicidade dos biomateriais foram realizadas em três grupos de matrizes: (1) PLGA/BSA/VEGF, (2) PLGA/BSA, (3) PLGA 13%. As análises físico-químicas das matrizes como morfologia, diâmetro da fibra, degradabilidade, solvente residual, ângulo de contato, propriedades mecânicas, eficiência de incorporação e liberação controlada do VEGF foram realizadas. As nanofibras apresentaram superfície lisa sem beads com poros interconectados, semelhantes às da MEC. Observou-se melhora na adesão celular nas matrizes PLGA/BSA/VEGF quando comparadas aos demais grupos. As matrizes foram atóxicas para as células. Portanto, a associação entre matrizes de nanofibras com fatores de crescimento incorporados e células-tronco pode ser uma estratégia útil para a engenharia de tecidos (ET). / The association of matrices produced by electrospinning (ES) and stem cells has been considered as a promising alternative for the recovery of tissue. The association of bioactive molecules, such as vascular endothelial growth factor (VEGF) in nanofibres, allows the controlled release of the incorporated factor. It can contribute to cellular migration and differentiation, becoming an interesting option for tissue regeneration. In this work, the influence of VEGF incorporation on a poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) scaffold produced by ES was analyzed. The analysis of cell adhesion, cell viability and biomaterials cytotoxicity was carried out in three matrice groups: (1) PLGA/BSA/VEGF; (2) PLGA/BSA, (3) PLGA 13%. The physical-chemical analysis assessment of morphology, fiber diameter, residual solvent, degradability, contact angle, mechanical properties, loading efficiency and controlled release of VEGF were performed. Nanofibres showed smooth surfaces without beads with interconnected pores, similar to those of ECM. An improvement in cell adhesion was observed for the matrices of PLGA/BSA/VEGF when compared to the other groups. The matrices were non toxic for the cells. Therefore, the association between nanofibre matrices loaded with growth factors and stem cells may be a useful strategy for tissue engineering.
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Produção de scaffolds contendo células-tronco para uso na engenharia de tecidos através da associação das técnicas de electrospinning e bio-electrospraying

Braghirolli, Daikelly Iglesias January 2012 (has links)
Os scaffolds produzidos por electrospinning (ES) são ferramentas bastante atrativas para a engenharia de tecidos (ET). Mimetizando fisicamente a matriz extracelular natural, esses scaffolds atuam como suportes para o desenvolvimento celular. Contudo, uma ocupação celular uniforme nesses scaffolds permanece sendo um problema a ser resolvido. Neste trabalho, células-tronco foram integradas a scaffolds de PLGA ainda durante a sua produção com o objetivo de se obter uma melhor distribuição celular por toda a estrutura do biomaterial. Para a obtenção desses scaffolds contendo células-tronco (SCCT), as técnicas de ES e bio-electrospraying (BES) foram associadas. Os SCCT foram caracterizados quanto a suas propriedades físico-químicas e biológicas. As fibras produzidas apresentaram-se lisas, bem distribuídas e com características mecânicas e de degradação adequadas a diferentes aplicações na ET. As células integradas aos SCCT mantiveram-se viáveis e foram capazes de se proliferar dentro dessa estrutura ao longo do período de cultivo. Cortes histológicos dos SCCT demonstraram que as células estavam bem distribuídas em toda a arquitetura do biomaterial. Esses resultados sugerem que a associação do ES e BES é uma técnica interessante para a produção de scaffolds tridimensionais integrados a células, tornando-se uma alternativa viável para uso na engenharia de tecidos. / Scaffolds produced by electrospinning (ES) are very attractive tools for tissue engineering (TE). These scaffolds act by mimicking physically the native extracellular matrix as carriers for cell growth. However, a uniform cell occupation of scaffolds remains a problem to be solved. In this study, stem cells were integrated into the PLGA scaffolds during their production in order to obtain better cell distribution throughout the biomaterial structure. The ES and bio-electrospraying (BES) techniques were associated to obtain these scaffolds containing stem cells (SCCT). The SCCT were characterized by their physicochemical and biological properties. Smooth and well distributed fibers, with suitable mechanical and degradation characteristics were obtained which allows different applications in TE. The cells incorporated onto SCCT remained viable and are capable of proliferating in this structure during cell culture. The cells were well distributed throughout the biomaterial architecture as observed in histological sections of SCCT. These results suggest that association between ES and BES is an interesting technique to produce 3D cell integrated scaffolds, making it a viable alternative for tissue engineering.
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Avaliação da qualidade de vida do paciente transplantado hepático / Evaluation of the quality of life of patients transplanted hepatic

Flor, Maria José Nascimento 29 April 2015 (has links)
FLOR, M. J. N. Avaliação da qualidade de vida do paciente transplantado hepático. 2015. 53 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-09-23T11:50:11Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_mjnflor.pdf: 716491 bytes, checksum: dbf6d7f3d8fae413bbf37c5e19cdefe0 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-09-23T11:50:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_mjnflor.pdf: 716491 bytes, checksum: dbf6d7f3d8fae413bbf37c5e19cdefe0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-23T11:50:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_mjnflor.pdf: 716491 bytes, checksum: dbf6d7f3d8fae413bbf37c5e19cdefe0 (MD5) Previous issue date: 2015-04-29 / The increased survival with liver transplantation sparked concern about the quality of life (QOL) of people in the short and long-term postoperative period. Objective: To evaluate the QOL of liver transplanted with donor graft, over the age of 60 years. Method: Prospective, descriptive and analytical, with a quantitative approach. Data were collected in Ceará Liver Transplant Center at Walter Cantídio University Hospital, and the participants were those undergoing liver transplantation in the period 2007 to 2013. It was used for data collection the Short Form-36 questionnaire ( SF-36), generic instrument to assess QOL; and to characterize the subjects, they used the form of call service and surgery of organ harvesting report. They were applied one hundred thirty-seven questionnaires by the researcher and four were answered by the patient, totaling 141 participants. The sample was divided into two groups: Group A (GA) consisting of receivers that received less donor liver grafts or equal to 60 years old, and Group B (GB) formed by receivers receiving liver graft donor above 60 years of age. Results: The mean age of the GA receptor was 52.5 (between 20 and 75 years) and GB was 54 (between 27 and 76 years); He was male in both groups; the domains of the SF-36: physical functioning, social aspect, mental health and role emotional, showed better score (p = 0.001) in the variable time of transplant, score MELD and recipient age in both groups, but no significant difference between they. Conclusion: The donor's age did not influence the quality of life of patients undergoing liver transplantation; the MELD score less than 21 had a positive influence on QOL in both groups; QOL in both groups was not modified after transplantation; post-transplant QOL was similar in the three groups divided by age. Keywords: Quality of Life. Liver transplant. / O aumento da sobrevida com o transplante hepático despertou a preocupação com a qualidade de vida (QV) das pessoas no pós-operatório a curto e longo prazo. Objetivo: Avaliar a QV do transplantado hepático, com enxerto de doador, com idade acima de 60 anos. Método: Estudo prospectivo, descritivo e analítico, com abordagem quantitativa. Os dados foram coletados no Centro de Transplante de Fígado do Ceará, no Hospital Universitário Walter Cantídio, e os participantes foram aqueles submetidos a transplante hepático, no período de 2007 a 2013. Utilizou-se para coleta dos dados o questionário Short Form-36 (SF-36), instrumento genérico para avaliar a QV; e para caracterização dos sujeitos, foram utilizados o impresso de atendimento do serviço e relatório da cirurgia da captação de órgãos. Foram aplicados cento e trinta e sete questionários pelo pesquisador e quatro foram respondidos pelo próprio paciente, totalizando 141 participantes. A amostra foi dividida em dois grupos: Grupo A (GA), composta por receptores que receberam enxerto hepático de doador menor ou igual a 60 anos de idade, e Grupo B (GB), formado por receptores que receberam enxerto hepático de doador acima de 60 anos de idade. Resultados: A idade média do receptor do GA foi de 52,5 (entre 20 e 75 anos) e do GB foi de 54 (entre 27 e 76 anos); predominou o sexo masculino nos dois grupos; os domínios do SF-36: capacidade funcional, aspecto social, saúde mental e limitação por aspectos emocionais, mostraram melhor pontuação (p=0,001) na variável tempo de transplante, score MELD e idade do receptor nos dois grupos, porém sem diferença significativa entre eles. Conclusão: A idade do doador não influenciou na qualidade de vida dos pacientes submetidos ao transplante hepático; o score MELD menor que 21 teve influência positiva na QV nos dois grupos; a QV nos dois grupos não foi modificada após transplante; a QV pós-transplante foi semelhante nos três grupos divididos por idade.
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Células dentríticas condicionadas com rapamicina e pulsadas com aloantígenos na sobrevida de transplantes cutâneos alógenos neurocirúrgicos em ratos

Horibe, Elaine Kawano [UNIFESP] January 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Plastic Surgery Educational Foundation (PSEF) / American Society for Surgery of the Hand (ASSH) / Objetivos: Comparar o fenótipo e capacidade estimulatória in vitro de populações de células dendríticas (DC) de ratos; testar estas populações celulares na sobrevida de retalhos cutâneos alógenos (RcuA); avaliar os mecanismos pelos quais as DC condicionadas com rapamicina e pulsadas com lisado de hospedeiro, em associação a uma curta administração de drogas imunossupressoras e soro anti-linfocitário atuam na sobrevida de RCuA. Métodos: As DC foram condicionadas com rapamicina (DC GM+Rapa) ou IL-4 (DC controle), sendo pulsadas ou não com aloantígenos de doador. O fenótipo e função das células foram comparados in vitro. Testou-se o potencial destas DC de aumentar a sobrevida de RCuA e comparou-se a hiporesponsividade doadoraespecífica dos receptores de RCuA. Avaliou-se e quantificou-se a presença das células T reguladoras Foxp3+CD4+ (Tregs) nos retalhos transplantados e nos órgãos linfóides secundários com citometria de fluxo e imunofluorescência. Resultados: As DC GM+Rapa expressaram níveis menores de MHCII e CD40 e apresentaram menor capacidade para estimular células T em reação mista de linfócitos. Ao estímulo com LPS, as DC GM+Rapa produziram níveis significantemente menores de IL-6 e IL-10. Somente as DC GM+Rapa pulsadas com aloantígenos aumentaram significantemente a sobrevida dos retalhos cutâneos alógenos (>180 dias). Células T periféricas em receptores com sobrevida prolongada de RcuA mostraram hiporesponsividade doadorespecífica. Quantidades significantemente maiores de Tregs foram encontradas nos retalhos com sobrevida prolongada e nos órgãos linfóides secundários destes receptores. Conclusões: As DC GM+Rapa apresentaram fenótipo mais imaturo e menor capacidade de estimulação de células T do que a população controle. A administração de DC GM+Rapa pulsadas com aloantígenos prolongou significantemente a sobrevida dos RCuA, sendo este fato associado à expansão de Tregs. / Introduction: Clinically applicable protocols capable of promoting operational tolerance to vascularized skin allografts (VSA) would contribute towards a more widespread use of composite tissue allografts (CTA). This study compared tolerogeneic properties of different host bone-marrow (BM)-derived dendritic cells (DC) populations in vitro and their potential to prolong survival of VSA across a full MHC mismatch in rats. Methods: DC were generated either with GM-CSF, rapamycin and donor-alloAg-pulsing (GM+Rapa DCp) or GM-CSF and IL-4, with (control DCp) or without alloAg-pulsing (control DC). Phenotype and function were assessed in vitro. We then tested the potential of those DC, combined with transient cyclosporine and anti-lymphocyte serum treatment to mediate prolonged survival of VSA. Graft survival and donor-specific hyporesponsiveness were compared. Presence of Foxp3+CD4+T cells (Tregs) in VSA and secondary lymphoid organs was assessed and quantified by FACS and immunofluorescence. Results: These myeloid DC populations demonstrated LPS stimulation-resistant immature phenotypes. GM+Rapa DC displayed significantly lower T-cell stimulatory capacity and produced less proinflammatory cytokines upon TLR activation. When combined with transient immunosuppresion, GM+Rapa DCp was the only population to significantly prolong VSA survival (>180days), in a donor-specific hyporesponsive milieu. Significantly higher amounts of Tregs were detected in long-term surviving VSA and secondary lymphoid organs of these recipients. Conclusion: Among the DC populations studied herein, GM+Rapa DCp showed the most tolerogeneic profile in vitro and when employed in a clinically applicable protocol in vivo led to operational tolerance of VSA, an unprecedented finding in literature. Furthermore, this is the first report to correlate use of rapamycintreated DC with Tregs expansion in vivo. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

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