Made available in DSpace on 2018-08-02T00:16:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_7832_Dissertação Mariana Morozesk_versão final.pdf: 1130031 bytes, checksum: 09f2949897e00dd8aef95ec97a682502 (MD5) Previous issue date: 2014-02-13 / RESUMO O processo de tratamento biológico dos lixiviados de aterros sanitários resulta na geração de grandes quantidades de lodo, caracterizados por conterem altas taxas de matéria orgânica. Por meio do fracionamento químico da matéria orgânica são obtidos os ácidos húmicos (AH), fração de comprovada eficiência sobre o crescimento vegetal, promovendo melhorias no desenvolvimento das plantas. Este trabalho teve como objetivo caracterizar quimicamente os AH extraídos do lodo de lixiviado de aterro sanitário e avaliar os efeitos da aplicação de diferentes doses dos AH por meio de análises biológicas em plantas, visando minimizar os potenciais riscos da utilização do lodo in natura. Por meio de caracterizações químicas, o ácido húmico apresentou elevados teores de carbono e nitrogênio, podendo constituir uma importante fonte de nutrientes para as plantas. Além disso, foram observadas alterações nas taxas de absorção, na bioconcentração e na translocação de alguns nutrientes. Com relação à análise das enzimas antioxidantes, foi possível observar aumento na atividade de algumas enzimas com a aplicação de diferentes doses de AH. Além disto, foram constatadas alterações citogenéticas por meio da análise de células meristemáticas e F1 de Allium cepa. Influências sobre o crescimento da planta também são reportadas, por meio de aumentos expressivos na área radicular e na altura de Zea mays. Em geral, os dados de crescimento revelaram um maior investimento da planta na parte aérea, provavelmente associado com a melhor eficiência do sistema radicular. Além disso, também foram reportadas alterações na espessura da epiderme. Neste contexto, apesar dos benefícios nutricionais e da comprovada atuação dos AH sobre o metabolismo vegetal, os seus efeitos biológicos sobre enzimas do estresse oxidativo e a sua capacidade citotóxica precisam ser melhor inPalavras-chave: Zea mays; citotoxicidade; teste Allium cepa; análise de crescimento e estresse oxidativo.vestigados. Devido à complexidade do resíduo, a utilização de análises químicas, genéticas, enzimáticas, fisiológicas e anatômicas foi uma importante ferramenta para a avaliação da possível aplicação dos ácidos húmicos em plantas. Palavras-chave: Zea mays; citotoxicidade; teste Allium cepa; análise de crescimento e estresse oxidativo.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Alternanthera brasiliana (L.) Kuntze (Amaranthaceae) is a species known as penicilina, terramicina, doril or carrapichinho. Studies have proved that the extract of the leaves has analgesic, anti-inflammatory and healing. Based on the medicinal use of this species work aimed to propagate vegetatively in vitro and ex vitro A. brasiliana, and to evaluate the genotoxic, anti-proliferative and anti-mutagenic aqueous extract of the leaves of plants from four cropping systems through the Allium cepa test as well as the quantification of the content of polyphenols, flavonoids and chlorogenic acid. Propagation by cuttings of new shoots ex vitro were used, apical, medium and basal cuttings treated medium MS (0 and 20%) with addition of AIB to the liquid medium (0.0 and 2.5 mg L-1). For micropropagation were used apical and nodal segments were inoculated on MS medium with combinations of NAA (0.0 and 0.05 mg L-1) and BAP (0.0 and 0.5 mg L-1). Evaluations of potential genotoxic, anti-proliferative and anti-mutagenic, roots of Allium cepa bulbs were immersed for 24 hours in aqueous extracts by infusion of the dried leaves of A. brasiliana four sources: Campus UFSM; micropropagation, cuttings and greenhouse, all with concentrations of 5 and 20 g L-1. The same extracts were used for the quantification of secondary metabolites, flavonoids and polyphenols, through spectrophotometer and chlorogenic acid by high performance liquid chromatography. Apical cuttings, median and basal can be used for propagation presenting rooting and survival above 62%. In general, plants from middle and basal cuttings show better results than the apical, suggesting that these would be the most suitable for the production of seedlings. In vitro micropropagation apices showed significantly higher results for nodal segments and the use of growth regulators naphthaleneacetic acid (NAA) (0.05 mg L-1) and benzylaminopurine (BAP) (0.5 mg L-1) was not significant. Plants regenerated in vitro acclimatized showed no significant difference between treatments, with the highest survival percentage (72.57%) occurred in plants from the apical medium supplemented with 0.05 mg L-1 NAA and 0, 5 mg L-1 BAP. In Allium cepa was observed that the mitotic index is superior in cell subjected to leaf extracts from the field (5 g L-1) and leaf extract of cuttings (20 g L-1) did not differ from the negative control in distilled water. The other treatments showed potential anti-proliferative with reduced mitotic index did not differ from the positive control in glyphosate 5%. Only the extract of the leaves of the greenhouse (20 g L-1) cells to genotoxic effects of A. cepa, where the number of cells with chromosomal abnormalities did not differ from the positive control. Occurred anti-mutagenic activity of the leaf extract of Campus UFSM (20 g L-1), on the cells of A. cepa, undergoing changes in glyphosate 5%, recovering from the mutagenic effect. Regarding the quantification of metabolites produced higher concentration of polyphenols and flavonoids chlorogenic acid in the samples collected from the field. / Alternanthera brasiliana (L.) Kuntze (Amaranthaceae) é um espécie conhecida como penicilina, terramicina, doril ou carrapichinho. Trabalhos comprovam que o extrato das folhas apresenta atividade analgésica, anti-inflamatória e cicatrizante. Com base no uso medicinal desta espécie o trabalho visou propagar vegetativamente in vitro e ex vitro A. brasiliana, e avaliar o potencial genotóxico, anti-proliferativo e anti-mutagênico do extrato aquoso das folhas de plantas provenientes de quatro sistemas de cultivo, através do Teste Allium cepa, bem como a quantificação do conteúdo de polifenóis, flavonoides e ácido clorogênico. Na propagação por estaquia de ramos aéreos ex vitro foram utilizadas estacas apicais, medianas e basais tratadas em meio nutritivo MS (0 e 20%) com acréscimo de AIB ao meio liquido (0,0 e 2,5 mg L-1). Para a micropropagação foram utilizados segmentos apicais e nodais inoculados em meio MS com as combinações de ANA (0,0 e 0,05 mg L-1) e BAP (0,0 e 0,5 mg L-1). Nas avaliações do potencial genotóxico, anti-proliferativo e anti-mutagênico, raízes de bulbos de Allium cepa foram imersas por 24 horas em extratos aquosos por infusão das folhas secas de A. brasiliana de quatro proveniências: Campus da UFSM; micropropagação; estaquia e casa de vegetação, todos com concentrações de 5 g L-1 e 20 g L-1. Estes mesmos extratos foram utilizados para a quantificação dos metabólitos secundários, polifenóis e flavonoides, através de espectrofotômetro e ácido clorogênico através de cromatografia líquida de alta eficiência. Estacas apicais, medianas e basais podem ser utilizadas na propagação, apresentando porcentagem de enraizamento e sobrevivência acima de 62%. Em geral, plantas provenientes de estacas medianas e basais apresentam melhores resultados que as apicais, sugerindo que estas seriam as mais adequadas na produção de mudas. Na micropropagação in vitro os segmentos apicais apresentaram resultados significativamente superiores aos segmentos nodais e o uso de fitorreguladores Ácido naftalenoacético (ANA) (0,05 mg L-1) e Benzilaminopurina (BAP) (0,5 mg L-1) não foi significativo. As plantas regeneradas in vitro aclimatizadas não apresentaram diferença significativa entre os tratamentos, sendo que a porcentagem de sobrevivência máxima (72,57%) ocorreu em plantas provenientes de segmentos apicais com meio acrescido de 0,05 mg L-1 de ANA e 0,5 mg L-1 de BAP. No teste Allium cepa foi observado que o índice mitótico é superior em células de A. cepa submetidas aos extratos de folhas do campo (5 g L-1) e extrato de folhas da estaquia (20 g L-1), não diferindo do controle negativo em água destilada. Os demais tratamentos apresentaram potencial anti-proliferativo com a redução do índice mitótico, não diferindo do controle positivo em glifosato 5%. Apenas o extrato das folhas da casa de vegetação (20 g L-1) apresentou efeito genotóxico às células de A. cepa, onde o número de células com alterações cromossômicas não diferiu do controle positivo. Ocorreu atividade anti-mutagênica do extrato de folhas do Campus da UFSM (20 g L-1), sobre as células de A. cepa, submetidas à alteração em glifosato 5%, recuperando-se do efeito mutagênico. Quanto à quantificação dos metabólitos ocorreu maior concentração de polifenóis flavonoides e ácido clorogênico nas amostras coletadas do campo.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-13T12:43:57Z No. of bitstreams: 2 TESE Pedro Marcos de Almeida.pdf: 1329330 bytes, checksum: 0a1f5b52d9007cf88ae888ba85035c7c (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T12:43:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Pedro Marcos de Almeida.pdf: 1329330 bytes, checksum: 0a1f5b52d9007cf88ae888ba85035c7c (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / Jatropha gossypiifolia L. (Euphorbiaceae) é um arbusto leitoso conhecido por suas propriedades medicinais. O presente estudo visou avaliar os efeitos tóxico, citotóxico e genotóxico do látex e dos extratos etanólico e aquoso foliares de J. gossypiifolia, utilizando o sistema-teste Allium cepa L. Sementes de A. cepa foram submetidas a diferentes concentrações do látex (1,25; 2,5; 5; 10 e 20 mL/L) e dos extratos foliares (0,001; 0,01; 0,1; 1 e 10 mg/mL), utilizando como controle negativo água destilada e como controles positivos o Metilmetanosulfonato e a trifluralina, para avaliar os parâmetros de toxicidade (crescimento radicular), citotoxicidade (índice mitótico) e de genotoxicidade (alterações cromossômicas). O látex e os extratos apresentaram reduções significativas no comprimento médio das raízes e no índice mitótico na maioria das concentrações quando comparados ao controle negativo. Alterações cromossômicas significativas, como aderências cromossômicas, C-metáfases, pontes cromossômicas foram observadas no látex e nos dois extratos. A presença de brotos nucleares e micronúcleos foram encontrados apenas nos dois extratos foliares, enquanto as perdas cromossômicas foram significativas somente no extrato etanólico. Em geral, os testes realizados indicaram toxicidade, citotoxicidade, mutagenicidade e genotoxicidade do látex e dos extratos foliares de J. gossypiifolia. Possivelmente, os danos provocados foram resultantes da presença de terpenos e/ ou flavonoides no extrato etanólico e de flavonoides e/ ou saponinas no extrato aquoso. Dessa forma, sugere-se que o uso medicinal dessa espécie seja feito com cautela.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Baccharis dracunculifolia is a medicinal species, popularly known as broom, and has its use based on the preparation of infusions of leaves for the treatment of gastric disorders, physical fatigue, lack of appetite, fever diseases and organic weakness. Its essential oil stands out in the perfumery industry as well as in biological studies. The study aimed to evaluate the potential antiproliferative, genotoxic and antigenotoxic of two populations of B. dracunculifolia on the test systems Allium cepa L. and Lactuca sativa L. as well as performs the phytochemical analysis of the aqueous extract and oil obtained from the leaves. The material used in the preparation of infusions and oil consisted of two populations collected in Santa Maria (SM) and São Pedro do Sul (SPS), which part was dehydrated to prepare infusions in 5g.L-1 and 10g.L -1 concentrations, and the other part was frozen for later extraction of essential oil. To determine the antiproliferative, genotoxic and antigenotoxic activities, the effects of aqueous extracts and oil on the A. cepa test and L. sativa systems. The experiment whith A. cepa consisted of twelve groups of four bulbs, each group corresponding to a treatment. The bulbs were rooted in water an than subjected to treatments for 24 hours. The experiment whith L. sativa consisted of nine groups of four Petri dishes. Each plate was soacked whith about 7 mL of extract, which were in contact with the seeds for 72 hours. After this period the roots of A. cepa and L. sativa seeds were collected, fixed in Carnoy 3:1 and stored in refrigerated in 70% ethanol until the preparation of the slides. The determination of phenolic compounds from aqueous extracts was performed by the High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The compounds of the essential oil were determined by Gas Chromatography (GC). The genotoxicity data were subjected to analysis Chi-square test, whereas the data of the chromatographic analysis were subjected to Tukey test (p <0.05). The results of the A. cepa test showed that extracts from B. dracunculifolia have antiproliferative and antigenotoxic potential as well as the essential oil of the SPS population, while the oil SM population induces cell proliferation. For L. sativa test, aqueous extracts of the two populations demonstrated atiproliferativo effect, except the aqueous extract of SPS population at a concentration of 10 g.L-1, in which there was an increase in cell proliferation. Chromatographic analysis indicated as major compounds, p-coumaric acid to the aqueous extracts and E-nerolidol to the essential oil. / Baccharis dracunculifolia DC. é uma espécie medicinal, conhecida popularmente como vassourinha, e tem sua utilização baseada no preparo de infusões das folhas para o tratamento de distúrbios gástricos, cansaço físico, inapetência, afecções febris e debilidade orgânica. Seu óleo essencial se destaca na indústria de perfumaria, bem como em estudos biológicos. O trabalho teve por objetivos avaliar o potencial antiproliferativo, genotóxico e antigenotóxico de duas populações de B. dracunculifolia sobre os sistemas teste de Allium cepa L. e Lactuca sativa L., bem como realizar a análise fitoquímica do extrato aquoso e do óleo obtidos a partir das folhas. O material utilizado no preparo das infusões e do óleo constou de duas populações coletadas em Santa Maria (SM) e São Pedro do Sul (SPS), do qual parte foi desidratado para preparo das infusões nas concentrações 5g.L-1 e 10g.L-1 e outra parte foi congelada para posterior extração do óleo essencial. Para determinação das atividades antiproliferativa, genotóxica e antigenotóxica, foi avaliado o efeito dos extratos aquosos e do óleo sobre os sistemas teste de A. cepa e L. sativa. O experimento com A. cepa constou de doze grupos de quatro bulbos, cada grupo correspondendo a um tratamento. Os bulbos foram enraizados em água e posteriormente submetidos aos tratamentos por 24 horas. O experimento com L. sativa constou de nove grupos de quatro placas de Petri, cada grupo correspondendo a um tratamento, onde foram dispostas 50 sementes por placa. Cada placa foi embebida com aproximadamente 7 mL de extrato, os quais ficaram em contato com as sementes por 72 horas. Após esse período as raízes de A. cepa e as sementes de L. sativa foram coletadas, fixadas em Carnoy 3:1 e armazenadas sob refrigeração em etanol 70% até o preparo das lâminas. A determinação dos compostos fenólicos presentes nos extratos aquosos foi realizada pela técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os compostos do óleo essencial foram determinados pela técnica de Cromatografia Gasosa (CG). Os dados obtidos da análise de genotoxicidade foram submetidos ao teste Qui-quadrado, enquanto que, os dados da análise cromatográfica foram submetidos ao teste de Tukey (p<0,05). Os resultados do teste de A. cepa demonstraram que os extratos de B. dracunculifolia possuem potencial antipoliferativo e antigenotóxico, bem como o óleo essencial da população de SPS, enquanto que o óleo da população SM induziu a proliferação celular. Para o teste de L. sativa, os extratos aquosos das duas populações demonstraram efeito antiproliferativo, com exceção do extrato aquoso da população SPS na concentração de 10 g.L-1, no qual houve um aumento da proliferação celular. As análises cromatográficas indicaram como compostos majoritários, o ácido p-cumárico para os extratos aquosos e o E-nerolidol para o óleo essencial.

The use of medicinal plants in therapy has developed over the years concurrently with the humanity evolution. With the difficulty of access to synthetic drugs, the rich plant biodiversity and the adverse economic situation that represents an obstacle to the use of traditional drugs, make the use of medicinal plants one of the main forms of therapeutic resource used by the population. In this way, studies reporting the effects of medicinal plants in living organisms, the standardization and determination of plants's quality are essential for a safe and effective use of it. The medicinal plant Richardia brasiliensis Gomes is known as white ipecac and is inserted in the Rubiaceae family, native to South America and foundin in tropical and subtropical regions. Secondary metabolites, such as volatile oils, sterols, alkaloids, tannins, flavonoids and coumarins this plant has important pharmacological activities in the treatment of diabetes, hemorrhoids and skin disease. Also, it is reported as having anthelmintic and anti-emetic actions. This study aimed to determine the vegetable parameters of quality, identify and quantify secondary metabolites, analyze the histochemistry of leaves and stems and evaluate the antiproliferative and genotoxic capacity of extracts and fractions at different concentrations on the cell cycle of Allium cepa L. R. brasiliensis was collected on the UFSM campus, in different seasons. The establishment of quality parameters and the obtainment of the extract by maceration were made from the plant drug powder. The extraneous material, percentage of water, swelling index and total and acid insoluble ash were determined by analyzing the plant material. The results showed that our findings are in line with the values recommended by the Brazilian Pharmacopoeia, although the ash contended have been high when compared to other species. The autumn extract had the highest yield (20.44%), and highest concentration of flavonoids (28.9 mg/g) as quantified by spectrophotometer. Rutin and chlorogenic acid were identified by HPLC-DAD and the highest concentration of rutin (26.25 mg/g) was in the autumn extract. Anthocyanin glycosides, tannins, amino groups, steroids and/or triterpenes, alkaloids, coumarins, organic acids and flavonoids have been reported through the characterization reactions. From the histochemistry of leaves and stems, it was determined the presence of storing and structural lipids, as well as phenolic compounds, anthocyanins and alkaloids. From the Allium cepa test concentrations of 10 and 500 μg/mL and positive, negative and diluent controls, it was possible to determined the genotoxicity and antiproliferative capacity of the plant. The crude extract of autumn and the butanol fraction at a concentration of 500 μg/mL had the lowest mitotic index (5.42 and 6.75% respectively). The extracts and fractions showed low number of altered cells (binucleated cells, micronucleus, disorganized chromosomes, chromosomes bridges and break) when compared to the positive control (glyphosate 1%). / O uso de plantas medicinais na terapêutica desenvolveu-se ao longo dos anos concomitantemente à evolução da humanidade. Com a dificuldade de acesso aos medicamentos sintéticos, a rica biodiversidade vegetal e a situação sócio econômica desfavorável, a utilização de plantas medicinais é uma das principais formas de recurso terapêutico utilizada pela população. Estudos que reportem a ação das plantas medicinais aos organismos vivos, a padronização e a determinação da qualidade da droga vegetal são essenciais para a segurança e eficácia no uso destas. A espécie medicinal Richardia brasiliensis Gomes é conhecida como poaia branca e está inserida na família Rubiaceae, nativa da América do Sul e encontrada em regiões tropicais e subtropicais. Devido a presença de metabólitos secundários como óleos voláteis, esterois, alcaloides, taninos, cumarinas e flavonoides possui atividades farmacológicas consideráveis, destacando-se no tratamento de diabetes, hemorróidas, anti-helmíntico, antiemética e em doenças na pele. Esse trabalho objetivou determinar os parâmetros de qualidade da droga vegetal, identificar e dosar metabólitos secundários, realizar a histoquímica das folhas e caules e avaliar a capacidade antiproliferativa e genotóxica dos extratos e frações, em diferentes concentrações sobre o ciclo celular de Allium cepa L. O material vegetal de R. brasiliensis foi coletado no Campus da UFSM, nas diferentes estações do ano. O estabelecimento dos parâmetros de qualidade e a obtenção do extrato por maceração foram a partir do pó da droga vegetal. Na análise da droga vegetal foram determinados os teores de matéria estranha, porcentagem de água, índice de intumescência, cinzas totais e insolúveis em ácido, sinalizando que os valores encontrados estão de acordo com os valores preconizados pela Farmacopeia Brasileira, embora os teores de cinzas tenham sido elevados quando comparados com outras espécies. O extrato de outono apresentou o maior rendimento (20,44%), e maior concentração de flavonoides (28,9 mg/g) quando quantificado por meio de espectrofotômetro. Rutina e ácido clorogênico foram identificados a partir da CLAE-DAD e a maior concentração de rutina (26,25 mg/g) foi no extrato de outono. Heterosídeos antociânicos, taninos, amino-grupos, esteróides e/ou triterpenos, alcaloides, cumarinas, ácidos orgânicos e flavonoides foram reportados através das reações de caracterização. A partir da histoquímica das folhas e caules foram determinados lipídeos de reserva e estruturais, compostos fenólicos, antocianinas e alcaloides. A partir do teste de Allium cepa nas concentrações de 10 e 500 μg/mL e controles positivo, negativo e do diluente, foi determinado a capacidade antiproliferativa e genotóxica. O extrato bruto de outono e a fração butanólica na concentração de 500 μg/mL apresentaram os menores índices mitótico (5,42 e 6,75% respectivamente). Os extratos e frações apresentaram baixo número de células com alterações (células binucleadas, micronúcleo, cromossomos desorganizados, pontes e quebra cromossômicas) quando comparados com o controle positivo (glifosato 1%).

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Native medicinal plants are widely used, but are insufficient scientific information on the spread of some species and cytotoxicity. This study investigated the sexual propagation and vegetative species Solidago chilensis Meyen (Asteraceae) through seed germination, micropropagation, cuttings, evaluate the genotoxic and quantify the accumulation of secondary metabolites of plants obtained. Studies of germination in vitro and ex vitro seeds were developed by testing storage conditions, concentrations of gibberellic acid (GA3), light regimes, soaking times in water to 5ºC ± 1ºC, temperatures and populations. For micropropagation were used apical and nodal segments and combinations of benzylaminopurine BAP (0,0 e 2,0 mg L-1) and naphthalene acetic acid NAA (0,0 e 0,2 mg L-1). In the study of stem cuttings were used cuttings of branches overhead and underground rhizomes. Apical, middle and basal branches were kept in distilled water and nutrient solutions Murashige and Shoog (20%), with or without indole butyric acid (IBA) (5,0 mg L-1). For the cutting of rhizomes, segments thereof were immersed in 0, 600 and 1200 mg L-1 IBA for six hours and after cultured in Plantmax, sand or vermiculite. Apical leaves from four different origins: natural plants growing in wasteland; plants from wasteland and cultivated in the greenhouse, plants from cuttings and rhizomes micropropagated plants were collected for the assessment of genotoxicity and quantification of total polyphenols and flavonoids by spectrophotometry, and chlorogenic acid, quercetin and rutin by High Performance Liquid Chromatography Efficiency. The genotoxicity was assessed using the Allium cepa test, testing concentrations of 5 and 20 g L-1 aqueous extracts of dried leaves. Populations influenced the germination of seeds, and the wasteland of the ones who had averaged 57,2% germination. The seeds germinated under 16h photoperiod (2,4% and 22,3%) and continuous darkness (3,5% and 17,6%). The soaking time of 36 hours favored germination (56% and 24,7%) and germination rate in the experiment 2 and 3, respectively. A temperature of 20°C, in experiment 3, provided the highest percentage of seed germination, 26,6%. In micropropagation, the combination of 2,0 mg L-1 of BAP and 0,2 mg L-1 og NAA, provided 49% of complete plants and 37% survival at acclimatization. In cuttings of new shoots, rooting in the substrate occurred over water with the presence of IBA (29%). The Plantmax® provided 62% rooting in cuttings of rhizomes did not differ from sand (43%). In the evaluation of genotoxicity was detected genotoxic potential of extracts derived from micropropagated plants (5 and 20 g L-1) and grown in a greenhouse (5 g L-1). Polyphenols and flavonoids were found in all the extracts and identified flavonoids quercetin and chlorogenic acid in higher concentrations in plants of wasteland, 441,4 and 95,7 mg g-1, respectively, and rutin in similar concentration in all samples (mean 46,9 mg g-1). / Plantas nativas medicinais são amplamente utilizadas, porém as informações científicas são insuficientes sobre a propagação e a citotoxicidade de algumas espécies. Este trabalho objetivou estudar a propagação sexuada e vegetativa da espécie Solidago chilensis Meyen (Asteraceae), através da germinação de sementes, micropropagação e estaquia, além de avaliar o potencial genotóxico e quantificar o acúmulo de metabólitos secundários das plantas obtidas. Estudos da germinação in vitro e ex vitro das sementes foram desenvolvidos testando-se condições de armazenamento, doses de ácido giberélico (GA3), regimes de luz, tempos de embebição em água a 5ºC ± 1ºC, temperaturas e populações. Para a micropropagação, foram utilizados segmentos apicais e nodais e combinações de benzilaminopurina BAP (0,0 e 2,0 mg L-1) e ácido naftaleno acético ANA (0,0 e 0,2 mg L-1). No estudo da estaquia foram utilizadas estacas de ramos aéreos e de rizomas subterrâneos. Porções apicais, medianas e basais de ramos foram mantidas em água destilada e soluções nutritivas de Murashige e Shoog (20%), contendo ou não ácido indol butírico (AIB) (5,0 mg L-1). Para a estaquia de rizomas, segmentos dos mesmos foram imersos em 0, 600 e 1200 mg L-1 de AIB por seis horas e após cultivados em Plantmax®, areia ou vermiculita. Folhas apicais de quatro procedências: plantas crescendo naturalmente em terreno baldio; plantas oriundas de terreno baldio e cultivadas em casa de vegetação; plantas obtidas das estacas de rizomas e plantas micropropagadas foram coletadas para a avaliação da genotoxicidade e quantificação de polifenóis totais e flavonoides por espectrofotometria, além de ácido clorogênico, quercetina e rutina por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A genotoxicidade foi avaliada através do teste Allium cepa, testando-se concentrações de 5 e 20 g L-1 de extratos aquosos das folhas secas. As populações influenciaram na germinação de sementes, sendo as de terreno baldio as que apresentaram em média 57,2% de germinação. As sementes germinaram sob fotoperíodo de 16 horas (em média 2,4% e 22,3%) e escuro contínuo (em média 3,5% e 17,6%) no experimento 1 e 3, respectivamente. A embebição por 36 horas favoreceu a germinação (56% e 24,7%) e velocidade de germinação no experimento 2 e 3, respectivamente. A temperatura de 20ºC, no experimento 3, proporcionou a maior porcentagem de germinação das sementes, 26,6%. Na micropropagação, a combinação de 2,0 mg L-1 de BAP + 0,2 mg L-1 de ANA, proporcionou 49% de plantas completas e 37% de sobrevivência na aclimatização. Na estaquia de ramos aéreos, ocorreu superior enraizamento no substrato água com a presença de AIB (29%). O substrato Plantmax® proporcionou 62% de enraizamento nas estacas de rizomas, não diferindo da areia (43%). Na avaliação da genotoxicidade, foi detectado potencial genotóxico dos extratos oriundos das plantas micropropagadas (5 e 20 g L-1) e das cultivadas em casa de vegetação (5 g L-1). Polifenóis e flavonoides foram encontrados em todos os extratos, sendo identificados, os flavonoides, ácido clorogênico e quercetina em maior concentração nas plantas de terreno baldio, 441,4 e 95,7 mg g-1, respectivamente, e rutina em concentração semelhante em todas as amostras (em média 46,9 mg g-1).

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JeffersonSB.pdf: 95921 bytes, checksum: fc181517bec40efa1a2dbb0343c7987a (MD5) Previous issue date: 2008-03-10 / The contamination of the waters resources for wastewater from industrial, agricultural, and domestic sources is a serious environment problem, compromising its use for human consumption and agriculture. The Extremoz-RN Lake is an important freshwater source for the supply of the city of Natal, supplying a population of approximately 160,000 habitants. This aquatic body is located near an industrial pole which can be a serious risk factor for quality of its waters. The objectives of this study were examined the genotoxicity of Extremoz Lake between September of 2006 and January of 2008, by a combination of the Allium micronucleus test, piscine micronucleus test and the comet assay in erythrocytes from peripheral blood of Oreochromis niloticus. Additionally, the level of eight different heavy metals was quantified through spectrometry of atomic absorption of flame. The Allium test did not detect increase in the frequencies of micronucleus in none of the analyzed periods, however a strong cytotoxic activity was demonstrated for decrease in mitotic index in the analyses carried in April and July of 2007. Negative results had been detected in the frequencies of micronucleus in O. niloticus. A statistic significant increase was observed in the levels of DNA damage in comet assay carried in July of 2007. The results of the chemical analysis had detected increase in the levels of cadmium, chromium, copper, nickel, lead and zinc in different periods. These results demonstrated an alteration of the water s quality of the Extremoz Lake caused for the contamination for heavy metals and increase of DNA strand breaks. The use of biomonitoring program of the heavy metal and other pollutants with genotoxic potential combinated with genotoxicity assays is recommends. / A contamina??o dos recursos h?dricos, por efluentes de origem dom?stica e industrial, ? um s?rio problema ambiental, que compromete o uso de suas ?guas tanto para o consumo humano quanto para a agricultura. A Lagoa de Extremoz-RN ? uma importante fonte de ?gua para o abastecimento da cidade do Natal, suprindo uma popula??o de aproximadamente 160.000 habitantes. Esse corpo aqu?tico est? localizado pr?ximo a um p?lo industrial o qual pode ser um fator de risco a qualidade de suas ?guas. O presente estudo teve como objetivo analisar o potencial genot?xico das ?guas da lagoa de Extremoz entre os meses de setembro de 2006 e janeiro de 2008, pelo uso combinado do teste Allium cepa, teste micron?cleo e ensaio cometa em eritr?citos do sangue perif?rico de Oreochromis niloticus. Adicionalmente foram quantificados os n?veis de sete diferentes metais pesados pela da t?cnica de espectrometria de absor??o at?mica de chama. O teste A. cepa n?o detectou aumento nas freq??ncias de micron?cleos em nenhum dos per?odos analisados, por?m um forte efeito citot?xico, demonstrado pela diminui??o no ?ndice mit?tico, foi observado nas an?lises realizadas em abril e julho de 2007. Resultados negativos tamb?m foram encontrados nas freq??ncias de micron?cleos em O. niloticus. Uma altera??o estatisticamente significativa foi observada nos n?veis de quebra no DNA pelo teste cometa. Nos resultados da an?lise qu?mica, foi observado aumento nos n?veis de c?dmio, cromo, cobre, n?quel, chumbo e zinco em diferentes per?odos amostrais, acima dos permitidos pela legisla??o brasileira. Em conjunto, esses resultados demonstraram uma altera??o da qualidade das ?guas da Lagoa de Extremoz causada pela contamina??o por metais pesados. Estes metais parecem estar interagindo com o material gen?tico, visto o aumento nos n?veis de quebras no DNA, identificados no teste Cometa. Contudo, os danos n?o est?o sendo fixados pela c?lula. Diante disso, ? importante recomendar um programa de monitoramento da presen?a de metais pesados, bem como de outros poluentes com potencial genot?xico, nessa ?rea de estudo.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThiagoMC.pdf: 54368 bytes, checksum: 8e14c2b4d3fe392bf725d169831359dc (MD5) Previous issue date: 2007-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / A contamina??o de reservat?rios de ?gua ? um dos principais problemas da atualidade. A Barragem Engenheiro Armando Ribeiro Gon?alves (EARG), (06?08 S; 37?07 W) localizada no estado do Rio Grande do Norte, ? a segunda maior barragem do nordeste brasileiro, respons?vel pelo abastecimento dom?stico de aproximadamente 415 mil habitantes do semi-?rido brasileiro. A ?gua da EARG ? captada por um sistema de adutoras, onde ? tratada e distribu?da para a popula??o. O presente trabalho teve o objetivo de avaliar o potencial genot?xico da ?gua da Barragem EARG. Para isso, foram realizados os testes cometa e micron?cleo com eritr?citos de til?pias (Oreochromis niloticus) capturadas nesse reservat?rio. Os testes Allium cepa e muta??o reversa com Salmonela typhimurium foram realizados com ?gua do reservat?rio antes e ap?s o tratamento. Al?m disso, an?lises quantitativa e qualitativa de cianobact?rias, assim como a quantifica??o das microcistinas produzidas pelas cianobact?rias presentes nesse reservat?rio foram realizados, apenas com amostras coletadas na barragem. Os resultados obtidos indicaram aumento significativo na freq??ncia de micron?cleos em eritr?citos de O. niloticus (p<0,05). A m?dia obtida foi de 2,38 ? 3,02 micron?cleos em mil c?lulas analisadas, enquanto que o controle negativo apresentou m?dia de 0,20 ? 0,41 micron?cleos. O ensaio cometa realizado com peixes da EARG foi analisado em uma escala crescente de danos (0 - 4), e mostrou resultados classificados nos n?veis 0, 1, 2 e 3, enquanto que o controle negativo apresentou resultados nos n?veis 0 e 1. Nos par?metros macrosc?picos avaliados no teste A. cepa n?o foi verificado altera??es estatisticamente significativas. Os par?metros microsc?picos indicaram diminui??o significativa no ?ndice mit?tico nos dois pontos estudados. Al?m disso, tamb?m foi detectado aumento na freq??ncia de met?fases e an?fases aberrantes em ambos os pontos, por?m estatisticamente significativo apenas na amostra sem tratamento para an?fases aberrantes. A freq??ncia de micron?cleos no teste A. cepa n?o foi significativo em rela??o ao controle negativo. Para o teste de muta??o reversa com S. typhimurium realizado com ?gua sem extra??o, os resultados n?o demonstraram mutagenicidade para ambos os pontos. Os resultados encontrados com os extratos das amostras coletadas em ambos os pontos apresentaram diferen?as estatisticamente significativa quando foi utilizada a fra??o S9 como ativador metab?lico. Para a ?gua n?o tratada, essas diferen?as foram encontradas apenas para a cepa TA98, enquanto que para a ?gua tratada, as duas linhagens apresentaram diferen?as significativas. A an?lise qualitativa de cianobact?rias demonstrou a exist?ncia de cianobact?rias potencialmente t?xicas tais como Planktothrix agardii, Cylindrospermopsis raciborskii e Microcystis panniformes. O ensaio de HPLC indicou a presen?a de 38,1 &#956;g/L de microcistinas na ?gua da EARG. O teste de muta??o reversa realizado com o extrato contendo microcistinas, n?o apresentou aumento na raz?o de mutagenicidade para TA100. O conjunto dos resultados obtidos no presente trabalho sugere que as ?guas da Barragem EARG podem conter agentes genot?xicos, capazes de alterar a informa??o gen?tica dos indiv?duos. Esses resultados indicam a necessidade de um programa de monitoramento e controle desses poluentes