Orientadores: Konradin Metze, Jose Antonio Richa Gontijo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T12:13:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prado_GustavoLigeriPereirado_M.pdf: 2631711 bytes, checksum: 359dd3778087a8cba4a815dfcd8ca672 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Chumbo (Pb) é um dos mais importantes metais pesados que ocorrem naturalmente, com efeitos tóxicos, após exposições agudas e crônicas, no fígado, sistema nervoso, hematopoese e especialmente os rins. O objetivo desse estudo foi analisar o transporte de sódio através dos túbulos proximais renais durante uma intoxicação crônico por chumbo comparando com as alterações morfológicas das células dos túbulos renais proximais. Ratos Wistar Hannover machos foram intoxicados cronicamente com injeções diárias de 2,5 ml/kg de uma solução de acetato de chumbo 1%, intra-peritoneal e sacrificados após 8, 15, 30, 45 e 60 dias. Amostras de tecido dos rins foram examinadas através da microscopia ótica e eletrônica, e também através da análise de textura computadorizada. Clearance renal, aporte proximal e pós-proximal de sódio foram estudados. A reabsorção de sódio no túbulo contorcido proximal renal decaiu após uma semana mas, se recuperou após uma mês e alcançou um nível maior que o dos animais controle antés do fim do experimento. A análise ultra estrutural demonstrou edema mitocondrial com degeneração e perda das microvilosidades (¿brush border¿). porém, nenhuma alteração significativa do núcleo das células dos túbulos contorcidos proximais renais foram observadas nas duas primeira semanas. A cariometria revelou um aumento do tamanho do núcleoentre durante o experimento. A textura da cromatina mudou significativamente entre o décimo quinto e trigésimo dia concomitantemente com o aparecimentos das inclusões nucleares. Os valores de Energia derivados das imagens geradas através da transformada rápida de Fourier foram mais eficientes em detectar diferenças entre os grupos em relação as variáveis derivadas da matrix de co-ocorrência dos níveis de cinza. Alterações nucleares ocorreram entre quinze e trinta dias da intoxicação crônica por chumbo, paralelo a normalização da capacidade fisiológica renal de reabsorção de íons. A formação das inclusões nucleares, regeneração mitocondrial e o aumento da produção de proteínas antioxidantes podem esatar envolvidas em um mecanismo compensatório / Abstract: Lead (Pb) is one of the most important naturally occurring and ubiquitous heavy metals, with toxic effects after acute or chronic exposure on liver, the nervous system, hematopoesis, and, especially the kidneys. The aim was to study the time course of the renal tubular sodium handling during chronic experimental lead poisoning in rats comparing it with the morphologic changes of epithelial cells of the proximal tubule. Male Wistar-Hannover rats were chronically intoxicated with daily i.p. injections of 2.5 ml/kg of 1% lead acetate solution and sacrificed after 8, 15, 30, 45 and 60 days. Kidney samples were examined by light and electron microscopy and by computerized texture analysis. Renal clearance as well as fractional proximal and postproximal renal sodium handling was studied. Sodium reabsorption at the proximal tubule decreased significantly after one week but recovered after one month and achieved a higher level than in controls until the end of the experiment. Ultrastuctural examinations showed mitochondrial swelling with degeneration and loss of microvilli but no striking alterations of the epithelial cell nuclei in the first two weeks. Karyometry revealed an increase in nuclear size during the experiment. The chromatin texture changed significantly between the 15th and 30th day concomitantly with the appearance of inclusion bodies. Energy values derived from Fast-Fourier-transformed images were more efficient in detecting differences between the groups than variables derived from the gray value co-occurrence matrix. Significant nuclear alterations occur between 15 and 30 days of chronic lead intoxication, paralleled by a normalization of the physiological renal ion reabsorption capacity. The formation of inclusion bodies, mitochondrial regeneration as well as an increased production of antioxidant proteins may be involved in this compensatory mechanism / Mestrado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientador: Irene Gyöngyver Heidemarie Lorand-Metze / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T10:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vido_JoyceRico_M.pdf: 733870 bytes, checksum: d5a56d9b376e9b0ddadbf12bf5c2b264 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A contagem de blastos na medula óssea (MO) é um parâmetro essencial para a classificação e prognóstico das síndromes mielodisplásicas (SMD). No entanto, neste grupo de doenças clonais há um alto grau de atipias de células hematopoiéticas da MO podendo ser difícil classificar com precisão os blastos mielóides. Nosso objetivo foi investigar se a análise de imagem computadorizada de esfregaços de citologia de rotina corados com May-Grünwald-Giemsa seria capaz de caracterizar estas células. Precursores mielóides imaturos foram digitalizados e as imagens segmentadas de forma interativa usando esfregaços de MO: 30 casos de SMD recém-diagnosticados (15 RCMD, 11 AREB, 4 AR / ARSA) e 19 casos de MO normal. A classificação morfológica das células foi feita por consenso de dois observadores. A distribuição da cromatina nuclear foi analisada por variaveis de morfometria geomatrica, variáveis derivadas da matriz de co-ocorrência e dimensão fractal (DF) para verificar sua utilidade na classificação destas células. Entre as 15 variáveis estudadas, todas, exceto área nuclear e homogeneidade local foram capazes de distinguir os blastos de promielócitos normais. Precursores atípicos mielóides que morfologicamente lembravam mieloblastos apresentaram valores intermediários entre blastos e promielócitos de acordo com 5 variáveis e foram classificados como promielócitos por mais 7 variáveis. A área nuclear não foi significativamente diferente entre os diversos tipos de células. Precursores mielóides atípicos imaturos da MO podem ser difíceis de classificar corretamente em citologia de rotina. Eles podem ser blastos com maturação anormal ou promielócitos atípicos. Como mudanças de textura da cromatina nuclear refletem a remodelação dinâmica da cromatina, a análise das variáveis obtidas pode ser útil para classificar objetivamente precursores imaturos mielóides nas SMD / Abstract: Bone marrow (BM) blast count is an essential parameter for classification and prognosis of myelodysplastic syndromes (MDS). However, in this group of clonal disorders a high degree of atypias in bone marrow hemopoietic cells may be found so that it may be difficult to quantify precisely myeloid blasts. Our aim was to investigate whether computerized image analysis of routine cytology would be able to characterize these cells. In May-Grünwald-Giemsa stained BM smears of 30 newly diagnosed MDS (15 RCMD, 11 RAEB, and 4 RA/RARS) patients and 19 cases of normal BM, blasts, promyelocytes and atypic myeloid precursors were digitalized and interactively segmented. The morphologic classification of the cells was done by consensus of two observers. Nuclear morphometry and texture features derived from the co-occurrence matrix and fractal dimension (FD) were calculated. Among the 13 variables studied, all except nuclear area and local homogeneity were able to distinguish blasts from promyelocytes. Atypic myeloid precursors that morphologically resembled myeloblasts showed intermediate values between blasts and promyelocytes according to 5 variables and were classified as promyelocytes by another 7 variables. Nuclear area was not significantly different among the cells. BM atypical immature myeloid precursors may be difficult to classify correctly in routine cytology. They could be abnormally maturing blasts or atypical promyelocytes. As nuclear texture changes reflect chromatin remodeling dynamics, the analysis of the variables obtained by image analysis may be useful to objectively classify immature myeloid precursors in MDS / Mestrado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Mestre em Fisiopatologia Médica