Santrauka Šiame darbe buvo nustatyta [PSI+] priono įtaka K1, K2 ir K28 kilerinių toksinų poveikiui mielių Saccharomyces cerevisiae ląstelėms. Atsparumo kilerinių mielių kamienų išskiriamiems toksinams tyrimais buvo parodyta, kad R+N ir 43/1 kamienai yra jautrūs K1, K2 ir K28 kileriniams toksinams. Pažymėtina, kad R+N tėvinis kamienas yra jautresnis K2 toksinui negu 43/1 kamieno tėvinis variantas. Šių kamienų [PSI+] eliminantų atveju didžiausias lizės zonas suformuoja K2 klasės toksinas. Remiantis šiais duomenimis galima daryti išvadą, kad iš R+N ir 43/1 prionizuotų kamienų gautuose eliminantuose toksino jungimosi receptoriai nėra modifikuojami ir toliau sąveikauja su K2 toksinu. Kileriniai toksinai prionizuotas kamienų formas [PIN+][PSI+] veikia skirtingai negu neprionizuotas [PIN+][psi-] formas: NB13-, R+N ir 43/1 kamieno atveju esant K2 toksinui lizės zonų nėra. NB13- atveju K1 ir K28 kilerinių toksinų poveikyje lizės zonų nėra, o R+N kamieno atveju K28 toksino poveikis priklauso nuo [PSI+] priono stiprumo. Esant [PSI+] prionui R+N kamienas yra atsparus K1 klasės kilerinių toksinų poveikiui. / Summary Viktorija Jefimovaitė Influence of [PSI+] Prion on Cell Wall Structure of the Yeast Saccharomyces cerevisiae In this work the influence of [PSI+] prion on the action of K1, K2 and K28 killer toxins over the cells of yeast Saccharomyces cerevisiae was determined. In studies of resistance to toxins secreted by killer yeast strains it was shown that R+N and 43/1 strains are sensitive to K1, K2 and K28 killer toxins. It should be pointed out that the sensitivity of the parent R+N strain to K2 toxin is higher than the sensitivity of 43/1 strain. In the case of isolated eliminants of these strains K2 toxin forms largest lysis zones. These observations lead to assumption that in the case of eliminants of the strains R+N and 43/1, receptors are not modificated and interact with K2 toxin. The action of killer toxins over prionised [PSI+][PSI-] strains differ from non-prionised [PSI+][psi-] strains: in the case of NB13-, R+N and 43/1 strains, K2 toxin does not form lysis zones. In the case of R+N strain the influence of K28 toxin depends on the variant of [PSI+] prion. In the presence of [PSI+] prion, R+N strain is resistant to the influence of K1 killer toxin.

Out of fruits and berries there was analyzed and prepared around 230 spontaneous fermentations. Out of them was extracted 17 strains, characterised with activated biocidic, evaluated it´s immune and fungicidal properties, comparing it with yeast S. cerevisiae sensitive and killer strains. The temperatures and pH for the best killer toxin secretion of killer yeast strains and bacterial isolates were defined. It shows that toxins of the isolates can be used against plants, animals and humans pathogenic microorganisms: Candida spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Penicillium spp., Verticillium spp., Venturia spp. 1M yeast strain was found, which had features, necessary for wine yeast and fermentated apple juice quality parameters and was used for natural apple wine semimanufactures production in cooperative company „Vaisių sultys“. During this research it was the first time when the K2 killer preprotoxin gene was cloned successfully to plant Nicotiana tabacum L. and analysed its expression. / Iš vaisių – uogų buvo paruošta ir išanalizuota apie 230 spontaninių raugų. Iš jų išskirta 17 kamienų, pasižyminčių biocidiniu aktyvumu, įvertintos jų imuninės ir fungicidinės savybės, lyginant juos su mielių S. cerevisiae jautriais ir kileriniais kamienais. Parodyta, kad izoliatų toksinai gali būti panaudoti kovai su patogeniniais mikroorganizmais. Nustatytos išskirtų kilerinių mielių ir bakterijų izoliatų sekretuojamų toksinų geriausios raiškos temperatūros ir pH sąlygos. Nustatytas rastų bakterinių izoliatų poveikis augalų, gyvūnų bei žmonių patogenams: Candida spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Penicillium spp., Verticillium spp., Venturia spp. Aptiktas naujas mielių S. cerevisiae kilerinis kamienas, kuris pasižymėjo savybėmis, reikalingomis pramoninėms vynų mielėms ir fermentuotų obuolių sulčių kokybės parametrams, ir buvo panaudotas obuolių vyno natūralaus pusgaminio gamyboje kooperatinėje bendrovėje „Vaisių sultys“. Atlikus transformuoto augalo Nicotiana tabacum L., nešančio mielių S. cerevisiae K2 kilerinio preprotoksino geno vektorius, molekulinę analizę, parodytas kilerinio geno buvimas. Įvertinta K2 kilerinio preprotoksino geno, reguliuojamo CaMV promotoriumi, raiška mielėse.

Iš vaisių – uogų buvo paruošta ir išanalizuota apie 230 spontaninių raugų. Iš jų išskirta 17 kamienų, pasižyminčių biocidiniu aktyvumu, įvertintos jų imuninės ir fungicidinės savybės, lyginant juos su mielių S. cerevisiae jautriais ir kileriniais kamienais. Parodyta, kad izoliatų toksinai gali būti panaudoti kovai su patogeniniais mikroorganizmais. Nustatytos išskirtų kilerinių mielių ir bakterijų izoliatų sekretuojamų toksinų geriausios raiškos temperatūros ir pH sąlygos. Nustatytas rastų bakterinių izoliatų poveikis augalų, gyvūnų bei žmonių patogenams: Candida spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Penicillium spp., Verticillium spp., Venturia spp. Aptiktas naujas mielių S. cerevisiae kilerinis kamienas, kuris pasižymėjo savybėmis, reikalingomis pramoninėms vynų mielėms ir fermentuotų obuolių sulčių kokybės parametrams, ir buvo panaudotas obuolių vyno natūralaus pusgaminio gamyboje kooperatinėje bendrovėje „Vaisių sultys“. Atlikus transformuoto augalo Nicotiana tabacum L., nešančio mielių S. cerevisiae K2 kilerinio preprotoksino geno vektorius, molekulinę analizę, parodytas kilerinio geno buvimas. Įvertinta K2 kilerinio preprotoksino geno, reguliuojamo CaMV promotoriumi, raiška mielėse. / Out of fruits and berries there was analyzed and prepared around 230 spontaneous fermentations. Out of them was extracted 17 strains, characterised with activated biocidic, evaluated it´s immune and fungicidal properties, comparing it with yeast S. cerevisiae sensitive and killer strains. The temperatures and pH for the best killer toxin secretion of killer yeast strains and bacterial isolates were defined. It shows that toxins of the isolates can be used against plants, animals and humans pathogenic microorganisms: Candida spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Penicillium spp., Verticillium spp., Venturia spp. 1M yeast strain was found, which had features, necessary for wine yeast and fermentated apple juice quality parameters and was used for natural apple wine semimanufactures production in cooperative company „Vaisių sultys“. During this research it was the first time when the K2 killer preprotoxin gene was cloned successfully to plant Nicotiana tabacum L. and analysed its expression.

Dumbliai – mikroskopiniai planktono organizmai – vienas iš pagrindinių hidroekosistemų komponentų, pirminiai organinės medžiagos producentai. Didėjant vandens telkinių trofiškumui, mažėja dumblių rūšių įvairovė, keičiasi vyraujančių rūšių kompleksas. Dažnai eutrofikuotuose vandens telkiniuose ima dominuoti prokariotiniai autotrofiniai mikroorganizmai – melsvabakterės, kurios sukelia intensyvius vandens „žydėjimo“ procesus ežeruose, jūrinėse lagūnose, jūrose bei vandenynuose. Dėl šios priežasties blogėja vandens kokybė. Pastaraisiais dešimtmečiais išsamių tyrimų objektu visame pasaulyje tampa toksiniai fitoplanktono dumbliai ir melsvabakterės. Tyrimais yra nustatyta, kad pusė iš visų vandens „žydėjimo“ atvejų yra toksiški (RAPALA, LAHTI, 2002). Pasaulyje atliekami monitoringiniai tyrimai, siekiant įvertinti toksinių dumblių ir melsvabakterių vystymosi tendencijas, priklausomybę nuo aplinkos sąlygų, toksinio vandens „žydėjimo“ priežastis. Pasitelkiant cheminius bei genetinius metodus, nustatoma toksinių medžiagų cheminė sudėtis, vertinamas jų poveikis gyviems organizmams. Šiaurinės Kuršių marių dalies vasariniame planktone 2004-2006 m. aptiktos 223 dumblių rūšys, priklausančios 5 klasėms. 97 rūšys (43 %), priklauso Chlorophyceae klasei, 71 rūšis (32 %) – Cyanophyceae, 40 rūšių (18 %) – Bacillariophyceae, 9 rūšys (4 %) – Euglenophyceae ir 6 rūšys (3 %) – Dinophyceae klasei, iš jų aptiktos 26 potencialiai toksinės dumblių ir melsvabakterių rūšys, priklausančios 3 klasėms, 14... [toliau žr. visą tekstą] / Curonian Lagoon is a shallow transitional water basin located in the south-eastern part of the Baltic Sea. The southern and central parts of the lagoon contain freshwater due to discharge from the Nemunas River, while the salinity in the northern part varies from 0 to 8 PSU, depending on winds activity affecting brackish water inflow from the Baltic Sea. The investigation was carried out in the fresh-brackish water mixing zone (Influence zone of Baltic Sea), in the central part and Nemunas River influence zone in July-August 2004 - 2006. Changes in physico-chemical parameters, chlorophyll a concentration, phytoplankton and toxic algae cell density were monitored. Totally 223 species and varieties mainly belonging to Chlorophyceae (43 %) and Cyanophyceae (32 %) were found. 26 algae species from 3 algae classes (Cyanophyceae, Chlorophyceae and Dinophyceae) were identified as potential toxic species in the northern part of Curonian Lagoon during 2004 and 2006 summer time. Dominated toxic species Ahpanizomenon flos-aquae, Microcystis aeruginosa, M. viridis, M. wesenbergii, Woronichinia compacta. Phytoplankton biomass in Curonian Lagoon surface ranged from 12,27 to 50,22 mg/l. The peak of phytoplankton (33,11 mg/l) and potential toxic algae (28,67 mg/l) biomass in 2004 summer time was observed near by Klaipeda Strait, were Aphanizomenon flos-aquae contain 36 % from total biomass. In 2005 summer time the highest phytoplankton (50,22 mg/l) and toxic algae (21.46 mg//l) biomass were... [to full text]