Orientador: Antonio José Maria / Resumo: Justificativa: as lesões da mucosa traqueal em contato com o balonete do tubo traqueal são proporcionais à pressão exercida pelo balonete e ao tempo de exposição. Objetivo: estudar as eventuais lesões da mucosa do segmento traqueal em contato com o balonete do tubo traqueal insuflado com volume de ar suficiente para se obter a pressão de "selo" para impedir vazamento durante ventilação artificial, ou com a pressão "crítica" de 25 cm H2O. Método: dezesseis cães foram submetidos à anestesia venosa com pentobarbital sódico e ventilação com fluxo total de gases frescos de 2 L.min-1. Os cães foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a pressão no balonete de grande volume do tubo traqueal (Portex Blue-Line, Inglaterra): G1 (n=8) balonete insuflado até a obtenção da pressão mínima de "selo" necessária para impedir vazamento de ar durante a respiração artificial; G2 (n=8) balonete insuflado até atingir a pressão de 25 cm de H20. A medida da pressão do balonete foi realizada por meio de manômetro digital (Mallinckrodt, EUA) no início do experimento (controle) e após 60, 120 e 180 minutos. Após osacrifício dos cães, foram feitas biópsias nas áreas traqueais adjacente ao tubo traqueal para análise à microscopia óptica (MO) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Resultados: à MO, evidenciaram-se mínimas alterações em ambos os grupos, mais significantemente em G1, em duas áreas da parede anterior da traquéia: uma em contato com o balonete (BB1) e outra abaixo do tubo traqueal (BP1) (p=0,002). À MEV as alterações não foram significantemente diferente nos grupos (p>0,30), mas ocorreram lesões mais intensas nas áreas de contato com o balonete nos dois grupos (p<0,05). Conclusões: no cão, nas condições experimentais empregadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background: The lesions of the tracheal mucosa in contact with the endotracheal tube cuff are proportionally related to the intracuff pressure and to the time of exposition. Objective: the aim of this work was to study the development lesions of tracheal mucosa in contact with the endotracheal tube cuff inflated to reach the "sealing" pressure in order to avoid leaking during the artificial ventilation or with the "peak" inflation pressure of 25 cm H2O. Methods: sixteen dogs were submitted to intravenous anesthesia with pentobarbital sodium and ventilation with total flow of fresh gases of 2 L.min-1. The dogs were randomly distribuited into two experimental groups according to the pressure in the high volume cuff of the endotracheal tube (Portex Blue Line, Inglaterra): G1 (n=8) the cuff was inflated in order to reach the sealing minimum pressure to avoid air leaking during the artificial respiration; G2 (n=8) the cuff was inflated to reach the pressure of 25 cm H2O. The intracuff pressure was measured with a digital manometer (Mallinckrodt, EUA) at the beginning of the experiment (control) and after 60, 120 and 180 minutes. The animals were sacrificied and biopsies were perfomed from the areas of the trachea adjacent the endotracheal tube to be analysed by light microscopy (LM) and scanning electronic microscopy (SEM). Results: The light microscopy showed mild and similar alterations in both groups. However G1 revealed alterations most frequently in two different areas of trachea anterior wall: one lesion in direct contact with the cuff (BB1) and the other lesion just below the tracheal tube (BP1) (p=0.002). The scanning electronic microscopy also showed similar alterations in both groups (P>0.30), with more. Conclusions: In the dog, considering the experimental conditions used... (Complete abstract, click electronic address below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002Bitstream added on 2014-06-13T19:19:33Z : No. of bitstreams: 1 castilho_ec_dr_botfm.pdf: 693976 bytes, checksum: bbfa4da3f523001acac2d23b6b1ac73b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Justificativa: as lesões da mucosa traqueal em contato com o balonete do tubo traqueal são proporcionais à pressão exercida pelo balonete e ao tempo de exposição. Objetivo: estudar as eventuais lesões da mucosa do segmento traqueal em contato com o balonete do tubo traqueal insuflado com volume de ar suficiente para se obter a pressão de “selo” para impedir vazamento durante ventilação artificial, ou com a pressão “crítica” de 25 cm H2O. Método: dezesseis cães foram submetidos à anestesia venosa com pentobarbital sódico e ventilação com fluxo total de gases frescos de 2 L.min-1. Os cães foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a pressão no balonete de grande volume do tubo traqueal (Portex Blue-Line, Inglaterra): G1 (n=8) balonete insuflado até a obtenção da pressão mínima de “selo” necessária para impedir vazamento de ar durante a respiração artificial; G2 (n=8) balonete insuflado até atingir a pressão de 25 cm de H20. A medida da pressão do balonete foi realizada por meio de manômetro digital (Mallinckrodt, EUA) no início do experimento (controle) e após 60, 120 e 180 minutos. Após osacrifício dos cães, foram feitas biópsias nas áreas traqueais adjacente ao tubo traqueal para análise à microscopia óptica (MO) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Resultados: à MO, evidenciaram-se mínimas alterações em ambos os grupos, mais significantemente em G1, em duas áreas da parede anterior da traquéia: uma em contato com o balonete (BB1) e outra abaixo do tubo traqueal (BP1) (p=0,002). À MEV as alterações não foram significantemente diferente nos grupos (p>0,30), mas ocorreram lesões mais intensas nas áreas de contato com o balonete nos dois grupos (p<0,05). Conclusões: no cão, nas condições experimentais empregadas... / Background: The lesions of the tracheal mucosa in contact with the endotracheal tube cuff are proportionally related to the intracuff pressure and to the time of exposition. Objective: the aim of this work was to study the development lesions of tracheal mucosa in contact with the endotracheal tube cuff inflated to reach the “sealing” pressure in order to avoid leaking during the artificial ventilation or with the “peak” inflation pressure of 25 cm H2O. Methods: sixteen dogs were submitted to intravenous anesthesia with pentobarbital sodium and ventilation with total flow of fresh gases of 2 L.min-1. The dogs were randomly distribuited into two experimental groups according to the pressure in the high volume cuff of the endotracheal tube (Portex Blue Line, Inglaterra): G1 (n=8) the cuff was inflated in order to reach the sealing minimum pressure to avoid air leaking during the artificial respiration; G2 (n=8) the cuff was inflated to reach the pressure of 25 cm H2O. The intracuff pressure was measured with a digital manometer (Mallinckrodt, EUA) at the beginning of the experiment (control) and after 60, 120 and 180 minutes. The animals were sacrificied and biopsies were perfomed from the areas of the trachea adjacent the endotracheal tube to be analysed by light microscopy (LM) and scanning electronic microscopy (SEM). Results: The light microscopy showed mild and similar alterations in both groups. However G1 revealed alterations most frequently in two different areas of trachea anterior wall: one lesion in direct contact with the cuff (BB1) and the other lesion just below the tracheal tube (BP1) (p=0.002). The scanning electronic microscopy also showed similar alterations in both groups (P>0.30), with more. Conclusions: In the dog, considering the experimental conditions used... (Complete abstract, click electronic address below)

Orientador: Hélio José Montassier / Banca: Antonio Carlos Alessi / Banca: Ricardo Luiz Moro de Souza / Banca: Luis Francisco Prata / Banca: Antonio Carlos Paulillo / Resumo: O vírus da bronquite infecciosa aviária (VBIG) permanece como um dos principais problemas para a avicultura industrial. Para a imunoprofilaxia dessa virose existem vacinas "vivas" atenuadas ou inativadas, mas elas não são efetivas para o controle dessa doença infecciosa a longo prazo, especialmente contra estirpes variantes desse vírus. A função primordial das vacinas usuais contra o VBIG são estimular as respostas imunes sistêmicas e locais, mediadas por anticorpos ou por células T efetoras. Com a finalidade de investigar os mecanismos envolvidos na imunidade protetora, os níveis de anticorpos locais e sistêmicos e a expressão de genes associados a respostas de linfócitos T citotóxicos, tais como o CD8 e a granzima A foi avaliada na mucosa traqueal, após a imunização primária de pintinhos de 1 dia de idade com vacinas atenuadas contra o VBIG seguida do desafio 42 dias depois. Proteção ao desafio foi avaliada por meio da ciliostase traqueal, histopatologia e detecção de vírus pela técnica de RT-PCR em tempo real na traquéia. Os níveis de anticorpos no soro e na secreção lacrimal foram mensurados pelo Sandwich- Concanavalina A - ELISA. A expressão dos genes de CD8 e de granzima A foram avaliadas pela técnica de RT-PCR em tempo real. Os resultados demonstraram que a proteção contra a infecção pelo VBIG em aves vacinadas se correlacionou com os níveis de anticorpos anti-virais específicos dos isótipos IgG, IgM e IgA na secreção lacrimal e com os níveis de expressão de CD8 e de granzima A. Concluindo, os resultados possibilataram definir o perfil cinético do desenvolvimento das respostas imunes de memória contra o VBIG na mucosa que é o sítio primário de replicação viral e indicaram que os mecanismos de imunidade humoral e celular podem ser muito importantes para a proteção de hospedeiros naturais contra a infecção pelo VBIG. / Abstract: Avian infectious bronchitis (IBV) remains a major problem in the poultry industry. Live and inactivated vaccines are available, but they are not effective long term in controlling IBV infection, specially against variant strains. The essential function of existing IBV vaccines is to elicit, ideally, local and systemic specific antibodies, as well as cell-mediated immunity to this virus. To investigate the mechanisms of protective immunity, the levels of systemic and local specific antibodies and the expression of genes responsible for cytotoxic T cell killing such as CD8-marker and granzyme-A at tracheal mucosa was evaluated after the primary immunization of 1- day-old chicks with an attenuated avian infectious bronchitis virus (IBV) and challenge 42 days later. Challenge protection was evaluated by tracheal ciliostasis, histopathology and virus detection by real time RT-PCR. The serum and lachrymal anti-IBV antibody levels of IgG, IgM and IgM isotypes were measured with a Sandwich-ELISA Concanavalina-A method. The expression of CD8 and granzyme A genes were evaluated by real time RT-PCR. The results showed protection against challenge with the M-41. Lachrymal IgG, IgM and IgA anti-IBV specific antibodies and the levels of expression of CD8 and granzyme A genes correlated significantly with the protection to challenge. Overall, the results provided the kinetics on the development of memory mucosal immune responses against IBV at the primary replication site and indicate that tracheal humoral and cellular immune mechanisms may be very important in protecting natural hosts against IBV infection. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-14Bitstream added on 2014-06-13T20:36:40Z : No. of bitstreams: 1 santos_il_me_jabo.pdf: 445425 bytes, checksum: 8eabdcdd56ae9af7bcf160cad345bd86 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O vírus da bronquite infecciosa aviária (VBIG) permanece como um dos principais problemas para a avicultura industrial. Para a imunoprofilaxia dessa virose existem vacinas “vivas” atenuadas ou inativadas, mas elas não são efetivas para o controle dessa doença infecciosa a longo prazo, especialmente contra estirpes variantes desse vírus. A função primordial das vacinas usuais contra o VBIG são estimular as respostas imunes sistêmicas e locais, mediadas por anticorpos ou por células T efetoras. Com a finalidade de investigar os mecanismos envolvidos na imunidade protetora, os níveis de anticorpos locais e sistêmicos e a expressão de genes associados a respostas de linfócitos T citotóxicos, tais como o CD8 e a granzima A foi avaliada na mucosa traqueal, após a imunização primária de pintinhos de 1 dia de idade com vacinas atenuadas contra o VBIG seguida do desafio 42 dias depois. Proteção ao desafio foi avaliada por meio da ciliostase traqueal, histopatologia e detecção de vírus pela técnica de RT-PCR em tempo real na traquéia. Os níveis de anticorpos no soro e na secreção lacrimal foram mensurados pelo Sandwich- Concanavalina A – ELISA. A expressão dos genes de CD8 e de granzima A foram avaliadas pela técnica de RT-PCR em tempo real. Os resultados demonstraram que a proteção contra a infecção pelo VBIG em aves vacinadas se correlacionou com os níveis de anticorpos anti-virais específicos dos isótipos IgG, IgM e IgA na secreção lacrimal e com os níveis de expressão de CD8 e de granzima A. Concluindo, os resultados possibilataram definir o perfil cinético do desenvolvimento das respostas imunes de memória contra o VBIG na mucosa que é o sítio primário de replicação viral e indicaram que os mecanismos de imunidade humoral e celular podem ser muito importantes para a proteção de hospedeiros naturais contra a infecção pelo VBIG. / Avian infectious bronchitis (IBV) remains a major problem in the poultry industry. Live and inactivated vaccines are available, but they are not effective long term in controlling IBV infection, specially against variant strains. The essential function of existing IBV vaccines is to elicit, ideally, local and systemic specific antibodies, as well as cell-mediated immunity to this virus. To investigate the mechanisms of protective immunity, the levels of systemic and local specific antibodies and the expression of genes responsible for cytotoxic T cell killing such as CD8-marker and granzyme-A at tracheal mucosa was evaluated after the primary immunization of 1- day-old chicks with an attenuated avian infectious bronchitis virus (IBV) and challenge 42 days later. Challenge protection was evaluated by tracheal ciliostasis, histopathology and virus detection by real time RT-PCR. The serum and lachrymal anti-IBV antibody levels of IgG, IgM and IgM isotypes were measured with a Sandwich-ELISA Concanavalina-A method. The expression of CD8 and granzyme A genes were evaluated by real time RT-PCR. The results showed protection against challenge with the M-41. Lachrymal IgG, IgM and IgA anti-IBV specific antibodies and the levels of expression of CD8 and granzyme A genes correlated significantly with the protection to challenge. Overall, the results provided the kinetics on the development of memory mucosal immune responses against IBV at the primary replication site and indicate that tracheal humoral and cellular immune mechanisms may be very important in protecting natural hosts against IBV infection.