En la actualidad, según la Organización Mundial de la Salud (OMS) 2008, se calcula que existe entre 16 a 18 millones de personas a nivel mundial afectadas por el parásito Trypanosoma cruzi, cuyo vector principal es Triatoma infestans. En nuestro país, la enfermedad se presenta en forma endémica en la región sur afectando principalmente a los departamentos costeros de Ica, Arequipa, Moquegua y Tacna. La falta de conocimiento del vector y la mala implementación de programas para su control, han dado como resultado altos índices de mortandad en la población y la adaptación cada vez mejor del insecto al ambiente doméstico y por ende al ser humano. En el presente trabajo, utilizando individuos nativos de Triatoma infestans pertenecientes a las localidades de Santa Rita de Siguas y Nazca, se confirmo el número cromosómico, y aplicando la técnica del bandeo “C”, utilizada para identificar los bloques de heterocromatina y usarlos como marcadores cromosómicos diferenciando el genoma andino del no andino en las poblaciones en estudio. Mediante la posición de los bloques heterocromáticos se han detectado polimorfismos cromosómicos en número y posición a nivel de los autosomas de los individuos intra e interpoblacionales, y se ha podido determinar el tipo de genoma (andino o no andino) para las poblaciones estudiadas. Por primera vez se evidencia la presencia de población con genoma del grupo andino (población de Ica) que aparece a baja altitud. Palabras clave: Bandeo C, Santa Rita de Siguas, Nazca, polimorfismos cromosómicos, bloques de heterocromatina. / --- Currently, according to the World Health Organization (WHO) 2008, it is estimated that between 16 and 18 million people worldwide are affected by the parasite Trypanosoma cruzi, which main vector is Triatoma infestans. The path vector of disease transmission is the main cause of the high levels of disease and mortality. In our country, the disease occurs endemically in the southern region, mainly affecting the coastal departments of Ica, Arequipa, Moquegua and Tacna. The lack of knowledge of the vector and poor implementation of programs for its control, result in high mortality rates in the population and the best ever adaptation of the insect to the home environment, consequently to humans. In the present work, using native individuals of Triatoma infestans from endemic areas for Chagas disease, belonging to the villages of Santa Rita de Siguas and Nazca, and applying cytogenetic techniques such as squash technique it was confirmed the chromosome number. The C-banding technique was used to determinate heterochromatic zones along the chromosome fiber, which allowed the identification of heterochromatin blocks so that they could be used as chromosomal markers in order to be able to differentiate the Andean genome from the no- Andean one in the populations studied. By the position of heterochromatic blocks, chromosomal polymorphisms were detected at the number and position of the autosomes of individuals within and between populations, and the type of genome has been detected (Andean or no-Andean) for the populations studied. It is shown, for the first time, the presence of population with the Andean group genome (population of Ica) that appears at low altitude. Key words: C banding, Santa Rita de Siguas, Nazca, chromosomal polymorphisms, heterochromatin blocks.

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Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Se estudió la presencia de Trypanosoma cruzi en roedores silvestres y cosmopolitas (reservorios del ciclo silvestre), en sectores de las comunas de Calera de Tango y Til-Til, ubicados a 16 y 59 Km. respectivamente de la ciudad de Santiago. Se capturó un total de 138 roedores incluyendo ejemplares de Octodon degus, Rattus rattus, Phyllotis darwini, Abrothrix olivaceus y Abrocoma bennetti. Se les extrajo 0,5 ml de sangre mediante punción cardiaca, con el objetivo de determinar la frecuencia de T. cruzi por medio de la reacción de la polimerasa en cadena (PCR). Las muestras fueron sometidas a extracción del ADN contenidas en ellas, amplificación y detección de la región hipervariable de los minicírculos del ADNk de T. cruzi. Con el fin de visualizar el producto de la amplificación, se sometieron a electroforesis en gel de agarosa y se observó en transiluminador de luz ultravioleta. Se detectó la presencia de T. cruzi en 19 (14,84%) de las 128 muestras, diez de R. rattus, (7,25%), siete de O. degus, (5,07%), y dos de P. darwini, (1,45%). Los ejemplares de A. olivaceus y A. bennetti resultaron negativos. Estos resultados demostraron la circulación del parásito en la comunidad de micromamíferos, de lo que se puede concluir que los triatominos usan la sangre de roedores (silvestres y sinantrópicos), como alimento lo que asegura el mantenimiento del ciclo silvestre y peridoméstico del parásito, en las zonas rurales estudiadas en el presente trabajo

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Triatoma infestans es el principal vector de la enfermedad de Chagas en Chile. Tradicionalmente se le ha asociado a ambientes domiciliarios, pero en los últimos años se ha detectado su presencia en ambientes silvestres, en sectores suburbanos de algunas comunas de las regiones Metropolitana y de Valparaíso. Frente a estos nuevos hallazgos, surgió la inquietud de caracterizar morfológicamente estas nuevas poblaciones, y compararlas con triatominos criados en condiciones de laboratorio, los que se asemejan a aquellos que habitan ambientes domiciliarios. Mediante morfometría geométrica se estudiaron las cabezas de ninfas de estadio V de T. infestans provenientes de laboratorio y de los focos silvestres de Calera de Tango, Región Metropolitana y Putaendo, Región de Valparaíso. Se analizaron 49 ejemplares criados en condiciones de laboratorio correspondientes a la generación número cuarenta y ocho de T. infestans, capturados en domicilios de la Región de Coquimbo durante el año 1960 y 50 ejemplares de los focos silvestres, 28 de los cuales de Calera de Tango y los 22 restantes de Putaendo, capturados entre Noviembre del año 2008 y Diciembre del año 2009. No se observaron diferencias significativas de tamaño ni conformación entre las cabezas de los individuos de laboratorio y los individuos de los focos silvestres, ni entre los individuos de Calera de Tango y los de Putaendo. De los resultados del estudio se concluye que las tres poblaciones analizadas no difieren significativamente en cuanto a su morfometría / Financiamiento: Proyecto Fondecyt 1070960

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La enfermedad de Chagas, una zoonosis que afecta al continente Americano, es causada por el protozoo flagelado Trypanosoma cruzi y su principal vía de transmisión es vectorial, a través de insectos hematófagos de la subfamilia Triatominae. Epidemiológicamente, en Chile el vector más importante es Triatoma infestans. La saliva de artrópodos hematófagos tiene propiedades vasodilatadoras e inmunomoduladoras que favorecen la ingestión de sangre, sin daño aparente para el hospedero. Extractos de glándula salival de algunos de estos organismos inhiben la ruta clásica y alterna de activación del sistema del complemento humano. Se ha aislado en la saliva de otros artrópodos hematófagos a calreticulina (CRT), una proteína altamente pleiotrópica que está presente en todos los linajes celulares, excepto eritrocitos. En este estudio se demostró la presencia de CRT en extracto de glándula salival de T. infestans (TiCRT), usando criterios antigénicos y funcionales. Se analizó el extracto completo de glándula salival de T. infestans mediante electroforesis en gel de poliacrilamida al 10% p/v, en presencia de dodecil sulfato de sodio y β2-mercaptoetanol (SDS- PAGE). Una réplica fue sometida a electrotransferencia, donde anticuerpos heterólogos reconocieron TiCRT putativa. Funcionalmente, y de acuerdo a lo esperado, se verificó que la TiCRT putativa presente en el extracto de glándula salival se unió específicamente al componente C1q, módulo de reconocimiento de señales de peligro de la ruta clásica del sistema del complemento humano. Más aún, el extracto de glándula salival, conteniendo TiCRT, inhibió esa ruta de activación, según lo verificado en ensayos inmunométricos. Muy probablemente, la unión de TiCRT a C1q medió una disminución en el depósito a la fase sólida de C4b. Esta es la unidad central de las convertasas de C3 y de C5 del complemento. Tomados en conjunto, estos resultados permiten proponer que el extracto de glándula salival de T. infestans contiene una molécula con peso aparente y propiedades antigénicas y funcionales compatibles con aquellas conocidas para CRT

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / La enfermedad de Chagas existe desde tiempos remotos en el continente americano y constituye un problema de salud pública en países latinoamericanos. En los últimos años, la emigración masiva de personas de América Latina a otras partes del mundo ha hecho que la enfermedad se convierta en un problema mundial. El protozoo flagelado Trypanosoma cruzi, corresponde al agente etiológico de esta zoonosis, que desde el punto de vista médico veterinario, afecta a animales de hábitos intra y peridomiciliarios, los cuales son un factor de mantenimiento en la transmisión vectorial. En Chile, el área de endemia de la enfermedad se extiende desde el paralelo 18° LS por el norte, hasta el paralelo 34,5º LS por el sur. La Secretaría Regional Ministerial (SEREMI) de Salud de la Región Metropolitana aplica el Programa de Control del Triatoma infestans, vector intradomiciliario del parásito de mayor importancia epidemiológica en Chile; gracias a este programa se detectó en viviendas de comunas rurales de Calera de Tango y Til Til, la presencia reiterada de ejemplares adultos de este insecto. Por ello, esta investigación planteó como objetivo principal pesquisar infección chagásica en los integrantes de estos grupos familiares y sus perros mascota. De un total de 269 personas examinadas, (159 de la comuna de Calera de Tango y 110 de Til Til), fueron confirmados cuatro casos provenientes de Til Til serológicamente positivos a T. cruzi que correspondieron a personas adultas del género masculino, cuyas edades fluctuaron entre los 33 y los 73 años. Además, fue detectada infección por T. cruzi en dos perros provenientes de esta misma comuna. Sin embargo, no existió relación de positividad a T. cruzi entre integrantes de estos grupos familiares y los perros positivos detectados / Financiado por el Instituto de Salud Pública de Chile y la Secretaría Regional Ministerial de Salud Región Metropolitana

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / El protozoario Trypanosoma cruzi (T. cruzi) es el agente causal de la enfermedad de Chagas, una zoonosis parasitaria transmitida por insectos triatominos. En Chile, los vectores triatominos Triatoma infestans y Mepraia spinolai se encuentran, respectivamente, asociados a los ciclos doméstico y silvestre de transmisión de la enfermedad. Actualmente existen reportes de la presencia de T. cruzi en Mepraia gajardoi, sugiriendo que esta especie de triatomino participaría en el ciclo de transmisión silvestre. Las poblaciones naturales de T. cruzi estarían compuestas de múltiples clones distribuidos en seis unidades discretas de tipificación (DTUs) o linajes. Se ha reportado que, a diferencia de lo que ocurre en hospederos vertebrados, adaptaciones genéticas en hospederos invertebrados favorecerían en ellos la multiclonalidad de T. cruzi. El objetivo de este trabajo fue identificar los clones de T. cruzi presentes en muestras de contenido intestinal de T. infestans provenientes de Atacama (III), Valparaíso (V) y Región Metropolitana (RM) y determinar si algunos de estos clones corresponden a los detectados previamente en pacientes chagásicos crónicos. Con este fin se aplicó el método de análisis de marcadores microsatélites a muestras de T. cruzi provenientes de 109 triatominos y los resultados se compararon con información ya publicada de 80 muestras de T. cruzi provenientes de sangre y xenodiagnóstico de pacientes chagásicos crónicos de Chile. Las frecuencias alélicas obtenidas permitieron detectar diferencias genéticas significativas. Luego, a partir de un análisis filogenético se constituyeron tres nodos de parentesco: (a) clones provenientes de sangre y xenodiagnóstico de pacientes, (b) clones provenientes de triatominos de las regiones III, V y RM, y (c) clones descritos en literatura; los clones de cada nodo se habrían originado a partir de un ancestro común. En cuanto a frecuencia y distribución de linajes de T. cruzi, la mayor cantidad de muestras, provenientes tanto de triatominos de las tres regiones (59,4%) como de sangre y xenodiagnóstico de pacientes (82% y 84,3%, respectivamente), pertenecían al linaje TcI. El linaje H (híbrido) se detectó en muy escaso porcentaje de muestras de sangre y no se detectó en xenodiagnóstico de pacientes. Respecto de la clonalidad, las muestras de T. cruzi procedentes de triatominos resultaron ser principalmente multiclonales, en cambio aquellas tanto de sangre como de xenodiagnóstico de pacientes chagásicos correspondían principalmente a muestras uniclonales. De acuerdo a los resultados obtenidos, se pudo concluir que las poblaciones de T. cruzi detectadas en los triatominos estudiados eran genéticamente diferentes a las detectadas previamente en pacientes chagásicos crónicos / FONDECYT N° 1070837

Em Triatoma infestans ainda não há pesquisas de isolamento de Peptídeos Antimicrobianas e como têm contato muitos microrganismos acreditamos que eles produzem esses componentes antimicrobianos. Neste estudo identificamos quatro peptídeos antimicrobianos principais. Os Tin-TK-I e Tin-TK-II que são similares com Taquicininas de insetos, não são hemolíticos e ativos contra três bactérias e três fungos, e são capazes de lisar membranas. Tin-TK-I é degradado por aminopeptidases e tem estrutura randômica. Tin-TK-II é degradado por carboxipeptidases e tem estrutura de hélice 310. A Triastina que é similar a uma proteína cuticular de T. infestans, é ativa contra duas bactérias e três fungos, não hemolítica, forma uma hélice 310, lisa membranas, e sofre ação de carboxi e aminopeptidases. E o Triatogênio que é similar ao fibrinopeptideo-A humano, e possui um análogo. É ativo contra três bactérias e seis fungos, e seu análogo contra três bactérias e três fungos. Não são hemolíticos, formam poros em membranas, formam alfa-hélices e são degradados por aminopeptidases. / Regarding new researches with Antimicrobial Peptides in triatomines, none have been developed with T. infestans, and due to its survival in a highly infectious habitat, we believe that it products antimicrobial molecules. On this study, four main AMPs have been identified. Tin-TK-I and II that were similar to Tachykinin-like proteins from insects, they were not hemolytic, and were active against three bacteria and three fungi on the antimicrobial assay. Tin-TK-I presents a random structure and was degraded by aminopeptidases, as Tin-TK-II presents a helix 310 structure and was affected by carboxipeptidases. Both of them can disrupt negatively charged membranes. Triastin that was similar to a cuticular protein from T. infestans, was active against two bacteria and three fungi, had no hemolytic activity, presents a helix 310 structure and can disrupt negatively charged membranes. Triatogen was similar to the human fibrinopeptide A, and it has an analogue. Triatogen was active against three bacteria and six fungi, and its analogue was active against three bacteria and three fungi. They were not active against human erythrocytes, both were degraded by aminopeptidases. They can generate pores on membranes and both have alfa-helix structure.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntonioWilson-2006.pdf: 6802842 bytes, checksum: 8134652d892262dcb956b18b01349113 (MD5) Previous issue date: 2006-03-31 / The Chagas disease occurs from the United States to Patagonia, affecting about 16 million peopleThis disease was always associated with poverty conditions which are represented by the primitive houses made out of wood and mud The incidence of this infection in Brazil was estimated at a hundred thousand annual new cases in the end of the seventies and has a prevalence of 4,2% in the rural population The highest rates were found in Minas Gerais and Rio Grande do Sul with the seroprevalence of 8,8% following by Goiás (7,4%) and Bahia (5,4%) In Goiás within 2000 and 2003 249.868 home units were investigated and 51.570 triatomíneos were captured with 335 specimens infected by T. cruzi The peridomiciliar infestation was significantly bigger than the intradomiciliar by the species Triatoma sordida following by Panstrongylus megistus The inverse was observed with the species Rhodnius neglectus Panstrongylus geniculatus and Triatoma pseudomaculata (p <0,018) There was not significant difference in the infestations intra and peridomiciliar by the species Panstrongylus diasi Triatoma costalimai and Triatoma williami Only one specimen of Triatoma infestans was captured in the year 2000 / A infecção chagásica ocorre desde os Estados Unidos até a Patagônia acometendo cerca de 16 milhões de pessoas Essa doença sempre esteve associada às condições de pobreza representadas pelas casas primitivas construídas de artefatos de madeira e barro A incidência dessa infecção no Brasil foi estimada em 100 mil casos novos anuais no final dos anos 70 e prevalência de 4,2% na população rural Os coeficientes mais elevados dessa doença foram encontrados em Minas Gerais e Rio Grande do Sul com a soroprevalência de 8,8% seguidos por Goiás (7,4%) e Bahia (5,4%) Em Goiás no período de 2000 a 2003 foram investigadas 249.868 unidades domiciliares e capturados 51.570 triatomíneos com 335 espécimes infectados com T. cruzi A infestação peridomiciliar foi significativamente maior do que a intradomiciliar na espécie Triatoma sordida, seguida de Panstrongylus megistus O inverso ocorreu nas espécies Rhodnius neglectus Panstrongylus geniculatus e Triatoma pseudomaculata (p< 0,018) Não houve diferença significativa nas infestações intra e peridomiciliar nas espécies Panstrongylus diasi Triatoma costalimai e Triatoma williami. Apenas um exemplar da espécie Triatoma infestans foi capturado no ano de 2000

BACKGROUND:Interruption of vector-borne transmission of Trypanosoma cruzi remains an unrealized objective in many Latin American countries. The task of vector control is complicated by the emergence of vector insects in urban areas.METHODS:Utilizing data from a large-scale vector control program in Arequipa, Peru, we explored the spatial patterns of infestation by Triatoma infestans in an urban and peri-urban landscape. Multilevel logistic regression was utilized to assess the associations between household infestation and household- and locality-level socio-environmental measures.RESULTS:Of 37,229 households inspected for infestation, 6,982 (18.8% / 95% CI: 18.4 - 19.2%) were infested by T. infestans. Eighty clusters of infestation were identified, ranging in area from 0.1 to 68.7 hectares and containing as few as one and as many as 1,139 infested households. Spatial dependence between infested households was significant at distances up to 2,000 meters. Household T. infestans infestation was associated with household- and locality-level factors, including housing density, elevation, land surface temperature, and locality type.CONCLUSIONS:High levels of T. infestans infestation, characterized by spatial heterogeneity, were found across extensive urban and peri-urban areas prior to vector control. Several environmental and social factors, which may directly or indirectly influence the biology and behavior of T. infestans, were associated with infestation. Spatial clustering of infestation in the urban context may both challenge and inform surveillance and control of vector reemergence after insecticide intervention.