Doctor en Farmacología / Autorizada por el autor, pero con restricción para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas, hasta diciembre de 2014 / La insuficiencia cardiaca (IC) es una enfermedad caracterizada por alteraciones del metabolismo energético y la actividad mitocondrial del corazón, acompañada de una disminución del contenido cardiaco de ATP y alteraciones en los niveles de lípidos plasmáticos, evidenciado por un aumento de la concentración de palmitato, entre otros. Trimetazidina (TMZ) es un fármaco con eficacia antianginosa demostrada que actúa inhibiendo la β-oxidación (βox) de ácidos grasos. Evidencias previas de la literatura sugieren que TMZ es útil en pacientes con IC. Paralelamente, ha sido ampliamente descrito que palmitato ejerce efectos tóxicos a nivel celular en distintos modelos, incluyendo los cardiomiocitos, por mecanismos poco comprendidos actualmente. En vista de lo anterior, el objetivo de este trabajo consistió en evaluar los efectos de palmitato y TMZ sobre la morfología y función mitocondrial de los cardiomiocitos. De manera complementaria se estudió, además, el posible efecto protector de TMZ frente a la toxicidad por sobrecarga de palmitato. Para este fin, cardiomiocitos se aislaron de corazones de ratas neonatas, los cuales que se trataron con palmitato (2 y 25 nM libre entre 0 y 24h) y/o TMZ (0,1-100 μM por 24 h). Para evaluar los cambios morfológicos, las células se tiñeron con la sonda MitoTracker Green-FM y se visualizaron en un microscopio confocal. Para evaluar la función mitocondrial, se determinaron algunos parámetros metabólicos, entre los que se incluyó el consumo celular de oxígeno, mediante oxigrafía de Clark, los niveles intracelulares de ATP, mediante un kit comercial (CellTiter-Glo) y el potencial de membrana mitocondrial mediante citometría de flujo usando la sonda tetrametil rodamina metil éster. Además se evaluó la acumulación intracelular de lípidos con la sonda LipidTOX mediante microscopía de fluorescencia y la producción de ceramidas por medio de inmunofluorescencia indirecta. Los resultados mostraron que palmitato causó fisión mitocondrial, evidenciada como un aumento del 81% número de mitocondrias por célula (p<0,05, n=5) y una disminución del 51% del volumen mitocondrial promedio (p<0,01, n=5). Palmitato, además, causó una disminución del 18% en el consumo basal de oxígeno (p<0,05, n=3) y de un 16% en la producción intracelular de ATP (p<0,05, n=6). Paralelamente, TMZ produjo los efectos contrarios, es decir fusión mitocondrial evidenciada por una disminución del 44% en el número de mitocondrias (p<0,05, n=5) y un aumento en el 40% de su volumen promedio (p<0,05, n=5). Además, TMZ incrementó en un 15% el potencial mitocondrial (p<0,01, n=5), en un 18% el consumo basal de oxígeno (p<0,01, n=3) y el ATP intracelular en un 15% (p<0,01, n=6). De manera interesante, la preincubación con TMZ protegió a los cardiomiocitos de la fisión dependiente de palmitato. Respecto a los resultados de metabolismo, observamos la misma tendencia: palmitato disminuyó todos los parámetros metabólicos, mientras que TMZ los aumentó y la preincubación con TMZ protegió frente a los efectos de palmitato. De manera interesante, la preincubación con TMZ incrementó la acumulación de lípidos neutros al interior de las células evidenciada como un aumento 4,3 veces (p<0,05, n=6) en el número de gotas de lípido por célula de 4,7 veces el área total de lípidos (p<0,05, n=6). Ambos parámetros aumentaron más en presencia de palmitato y TMZ. Por otro lado, TMZ fue capaz de bloquear el aumento del 70% (p<0,01, n=5) en la producción intracelular de ceramidas inducida por palmitato. Del presente trabajo se concluye que palmitato indujo fisión y disfunción mitocondrial, mientras que TMZ sola causa fusión mitocondrial y potenciación metabólica, mientras que el pre tratamiento con TMZ protegió a los cardiomiocitos frente a la lipotoxicidad observada con palmitato. De estos resultados se desprende que el efecto beneficioso de TMZ en el tratamiento de IC podría depender de modificaciones de la función mitocondrial relacionadas al manejo de la sobrecarga celular de lípidos. Sin embargo, el mecanismo de acción específico requiere futuros estudios / Heart failure (HF) is a disease characterized by several alterations in cardiac metabolism and mitochondrial activity. This is accompanied by a decrease in cardiac ATP content and alterations in the levels of plasma lipids, evidenced by an increase in palmitate concentration, among others. Trimetazidine (TMZ) is an antianginal drug that inhibits fatty acid β-oxidation. Previous evidence suggests that TMZ could be helpful in the treatment of HF patients. In parallel, it has been greatly described that palmitate can exert toxic cellular effects in several models, including cardiomyocytes. However, the mechanism is poorly understood. Taking these evidences, the aim of the present study was to evaluate the effects of palmitate and TMZ on the mitochondrial morphology and function in cardiomyocytes. Additionally, we also evaluated the potential protective effect of TMZ on the toxicity induced by palmitate overload. In order to accomplish this, we isolated neonatal rat cardiomyocytes that were treated with palmitate (2 and 25 nM free, 0-24h) and/or TMZ (0.1-100 μM, 24 h). To assess changes in mitochondrial morphology, the cells were treated with MitoTracker Green FM and visualized under a confocal microscope. To analyze the changes in mitochondrial function, we determined some metabolic parameters including cellular oxygen consumption, by Clark oxygraphy, the intracellular levels of ATP, by a commercial kit (CellTiter-Glo) and the mitochondrial membrane potential by flow cytometry with the dye tetramethyl rhodamine methyl ester. Furthermore, the intracellular lipid accumulation was evaluated by fluorescence microscopy with the dye LipidTOX and the production of ceramides was evaluated by indirect immunofluorescence. Among the most relevant findings, we described that palmitate induced a significant mitochondrial fission evidenced by a 81% increase in the number of mitochondria per cell (p<0.05, n=5) and a 51% decrease in mitochondrial mean volume (p<0.01, n=5). Palmitate also induced a 18% decrease in the basal oxygen consumption rate (p<0.05, n=3), together with a 16% decrease in the intracellular ATP levels (p<0.05, n=6). On the other hand, TMZ had the opposite effects; it induced mitochondrial fusion by decreasing the number of mitochondria per cell (44%, p<0.05, n=5) and increasing their mean volume (40%, p<0.05, n=5). Additionally, TMZ increased by 15% the mitochondrial membrane potential (p<0.01, n=5), by 18% the basal oxygen consumption rate (p<0.01, n=3), and by 15% the intracellular ATP levels (p<0.01, n=6). The pretreatment with TMZ had a protective effect from the lipotoxic damage of palmitate by preventing mitochondrial fission. Relative to the metabolic findings, we report that palmitate induced a metabolic collapse evidenced by a decrease in all the parameters assessed, while TMZ had the opposite effects (increased metabolism) and protected from the palmitate-induced damage. Interestingly, the pretreatment with TMZ increased by 4.3 fold (p<0.05, n=6) the number of lipid droplets per cell and by 4.7 fold (p<0.05, n=6) the total lipid area. Both parameters further increased in the presence of palmitate and TMZ. On the other hand, TMZ was also able to blunt the 70% increase (p<0.01, n=5) in the intracellular ceramide production induced by palmitate. From the present report we conclude that palmitate induced mitochondrial fission and dysfunction, while TMZ alone causes mitochondrial fusion and metabolic potentiation. The pretreatment with TMZ protected the cardiomyocytes from palmitate-induced lipotoxicity. From these data we can speculate that the beneficial effects of TMZ on HF treatment could be related to changes in mitochondrial function and the cellular handling of lipid overload. However, the precise mechanism of such protection requires future studies / CONICYT, FONDECYT, FONDAP, MECESUP

PINHEIRO, T. F. M. Estudo dos efeitos neuroprotetores da trimetazidina no modelo de convulsão induzida por pilocarpina em camundongos. 2013. 89 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2013. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-10-24T15:06:54Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_tfmpinheiro.pdf: 1237922 bytes, checksum: 060459f1b426ee7e9898511ef2f49de9 (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-10-24T15:07:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_tfmpinheiro.pdf: 1237922 bytes, checksum: 060459f1b426ee7e9898511ef2f49de9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-24T15:07:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_tfmpinheiro.pdf: 1237922 bytes, checksum: 060459f1b426ee7e9898511ef2f49de9 (MD5) Previous issue date: 2013 / Epilepsy is a neurological disease that affects approximately 1% of the population worldwide. Currently, the conventional antiepileptic drugs available promote seizure control and improvement of only about 75-80% of patients. The biggest limitation to the prolonged use of these agents is related to numerous adverse effects they present. Therefore, the development of new antiepileptic drugs with better efficacy and fewer adverse effects is of paramount importance for medical research. Calcium ions play an important role in the genesis of seizures. Trimetazidine used in the treatment of ischemic diseases preserves the operation of ionic pumps and transmembrane flux of calcium, sodium and potassium while maintaining cellular homeostasis. The literature has shown that trimetazidine anti-inflammatory and antioxidant properties in several experimental animal models. Many studies have shown that trimetazidine had a protective effect on ischemic injury not only in the heart but also in the brain, lung, kidney, intestine and liver. The present work aims to study the effects of trimetazidine alone or associated with phenobarbital on seizure model induced by pilocarpine and determine their effects on neurodegeneration involved in the pathophysiology of this disease. The animals (adult male Swiss mice, 20-30g) were injected with trimetazidine (5, 10 and 20 mg / kg, ip), phenobarbital (10 and 30 mg / kg, ip), clonazepam (0.5 mg / kg ip) or saline - 0.9% NaCl ip for seven days. 60 minutes after the last injection of vehicle or drug under study was administered at a dose pilocarpine 400 mg / kg, ip or 320 mg / kg, i.p. after the animals were subjected to behavioral tests and were then sacrificed and their brains dissected for neurochemical analysis performance. TMZ administration reduced the number of deaths at all doses tested, but the highest dose (20 mg / kg) showed better effect, increased the latency of seizures in 41% (11.76 ± 0.75) compared to control ( 8.36 ± 0.41) led to absence seizures in 10% of animals, reduced the occurrence of status epilepticus in 10% and 29% of animals protected from death. There was an increase of MDA concentration in the hippocampus of animals treated with pilocarpine (Control = 98.8 ± 5.5, 336.5 ± 25.2 = PILO), this effect was partially reversed by pretreatment with the TMZ Doses of 10 and 20 mg / kg (TMZ5 = 284.6 ± 19.7; TMZ10 = 171.3 ± 20.1; TMZ20 = 175.3 ± 20.1). The combination of TMZ at the lowest dose (5 mg / kg) with anticonvulsant dose of sub-PHE (10 mg / kg) caused a reduction in the levels of MDA by 48% (TMZ5 FEN10 + = 174.6 ± 23.0) when compared with the control group. Similar results were observed with the determination of the concentrations of nitrite / nitrate. Also, the TMZ was able to reverse the changes produced by pilocarpine in the levels of glutamate and GABA. The results of this study suggest that trimetazidine possesses anticonvulsant activity in the model of pilocarpine-induced seizures in mice, possibly due to its modulatory action on calcium channels / A epilepsia é uma doença neurológica que afeta aproximadamente 1% da população no mundo todo. Atualmente, as drogas antiepilépticas convencionais disponíveis promovem o controle das crises e a melhora de apenas cerca de 75 - 80% dos pacientes. A maior limitação para o uso prolongado desses agentes está relacionada aos inúmeros efeitos adversos que apresentam. Portanto, o desenvolvimento de novos agentes antiepilépticos com melhor eficácia e menos efeitos adversos é de suma importância para pesquisa médica. Os íons cálcio desempenham um importante papel na gênese da crise convulsiva. A trimetazidina utilizada no tratamento de doenças isquêmicas preserva o funcionamento das bombas iônicas e o fluxo transmembrana de cálcio, sódio e potássio, mantendo a homeostase celular. A literatura tem demonstrado que a trimetazidina apresenta propriedades antioxidantes e antiinflamatórias em vários modelos experimentais em animais. Muitos estudos mostraram que a trimetazidina apresenta efeito protetor em lesões isquêmicas não apenas no coração, mas também no cérebro, pulmão, rim, intestino e fígado. O presente trabalho tem como objetivo estudar os efeitos da trimetazidina sozinha ou associada ao fenobarbital no modelo de convulsão induzida por pilocarpina e determinar seus efeitos sobre a neurodegeneração envolvida na fisiopatologia dessa doença. Os animais (camundongos Swiss adultos machos, 20-30g) receberam injeções de trimetazidina (5, 10 e 20 mg/kg, i.p.), fenobarbital (10 e 30 mg/Kg, i.p.), clonazepam (0,5 mg/Kg, i.p.) ou solução salina - NaCl 0,9%, i.p. durante sete dias. Após 60 minutos da última injeção das drogas em estudo ou veículo, foi administrada pilocarpina na dose 400 mg/Kg, i.p. ou 320 mg/kg, i.p. depois os animais foram submetidos aos testes comportamentais e em seguida foram sacrificados e seus cérebros dissecados para realização das análises neuroquímicas. A administração de TMZ reduziu o número de mortes em todas as doses testadas, todavia a maior dose (20 mg/Kg) mostrou melhor efeito, aumentou a latência de convulsão em 41% (11,76±0,75) comparado ao controle (8,36±0,41), levou à ausência de convulsões em 10% dos animais; reduziu a ocorrência de estado epiléptico em 10% e protegeu 29% dos animais da morte. Foi verificado um aumento das concentrações de MDA no hipocampo dos animais tratados com pilocarpina (Controle = 98,8 ± 5,5; PILO = 336,5 ± 25,2), esse efeito foi parcialmente revertido com o pré-tratamento com TMZ nas doses de 10 e 20 mg/kg (TMZ5 = 284,6 ± 19,7; TMZ10 = 171,3 ± 20,1; TMZ20 = 175,3 ± 20,1). A associação do TMZ na menor dose (5 mg/kg) com a dose sub-anticonvulsivante de FEN (10 mg/kg) promoveu redução dos níveis de MDA em 48% (TMZ5+FEN10 = 174,6 ± 23,0) quando comparado com o grupo controle. Resultados semelhantes foram observados com a determinação das concentrações de nitrito/nitrato. Além disso, o TMZ foi capaz de reverter as alterações produzidas por pilocarpina nos níveis de GABA e glutamato. Os resultados deste estudo sugerem que a trimetazidina possui atividade anticonvulsivante no modelo de convulsão induzida por pilocarpina em camundongos, possivelmente devido a sua ação modulatória nos canais de cálcio

El objetivo del presente trabajo ha sido evaluar la acción de la trimetazidina (TMZ), un fármaco antiisquémico con un mecanismo de acción metabólico, en el deterioro de la función sistólica y en las alteraciones mitocondriales que se producen en el miocardio sometido a isquemia-reperfusión. Para ello se han utilizado 30 perros mestizos, de ambos sexos, distribuidos en 2 protocolos diferentes de isquemia-reprfusión: 1) un protocolo de 20 obstrucciones completas de la arteria coronaria descendente anterior (DA) de 2 minutos de duración y separadas por 3 minutos de reperfusión; y 2) un protocolo de obstrucción única de una rama distal de la DA, de 15 minutos de duración y seguida de 60 minutos de reperfusión. Dentro de cada protocolo isquémico, los animales fueron randomizados, a doble ciego, a tratamiento con Placebo o TMZ, a dosis de 50 mg a las 8:00 horas y 75 mg a las 15:00 horas. Tras una semana de tratamiento, se les aplicó el protocolo isquémico descrito anteriormente. Las variables analizadas a lo largo de todo el procedimiento han sido: parámetros hemodinámicos (frecuencia cardíaca, presión ventricular izquierda y dP/dt), parámetros de función regional de la zona isquémica y de una zona control (diámetros telesistólico y telediastólico y fracción de acortamiento), niveles de troponina T (basales y al final de la experimentación) y análisis mediante microscopía electronica de las mitocondrias de la zona isquémica y control (estudio cualitativo y cuantitativo). / The functional and ultrastructural consequences of the treatment with trimetazidine (TMZ) were analyzed in two canine models of myocardial stunning: One model of very brief coronary occlusion (2 minutes) and repeated (20) followed of 3 minutes of reperfusion (protocol 1), and a 15 minutes long unique ischaemia model and 60 minutes of reperfusion (protocol 2).30 mestize dogs were used, randomized at double blind, with Placebo treatment or TMZ during a week. The examined end points were: haemodynamic parameters (cardiac rate, left ventricular pressure and dP/dt), parameters of regional function of the ischemic and control myocardial areas (telesystolic and teledyastolic diameter and shortening fraction), and ultrastructual study through electronic microscope of mitochondria (injury and size).During performance of protocol 1, it was detected a lesser damage in the regional function of ischemic area at the end of the testing in the group treated with TMZ (93% of basal value) comparing with the Placebo serie (64% of basal value). In the ultrastructural study of ischemic area, differences were not objectified in the mitochondrial damage between both series, but mitochondrias treated with TMZ showed a significant increase in the perimeter and major axis and a decrease in the minor one.During the analysis of protocol 2, the shortening fraction of the ischemic area experienced a drop of its values to figures of acinesia/discinesia during coronary obstruction, with partial recovery of its values after 60 minutes of reperfusion, without significant differences between Placebo series and TMZ ones (50% vs 41% of basal value). In the ultrastructural study of ischemic area no significant differences were noticed between both series, with similar percentages of mitochondrial damage; on the contrary ischemic mitochondrias in the group treated with TMZ were shorter than those presented in the Placebo group.In the control area do not submitted to ischemia in both protocols, the mitochondrias treated with TMZ showed significant morphology changes, with an increase on major axis and a decrease of the minor one, presenting a morphology like "a small cane".

Objetivos: Avaliar a eficácia anti-isquêmica e efeito metabólico da trimetazidina em pacientes com angina refratária e diabete melito (DM) tipo 2, em uso de pelo menos duas medicações de efeito hemodinâmico, sem condições de revascularização. Métodos: Ensaio clínico randomizado, cruzado, duplo-cego, conduzido em 10 pacientes com DM tipo 2 e angina estável, em tratamento com pelo menos 2 anti-anginosos clássicos. Pacientes foram randomizados para receber trimetazidina (20 mg 3 vezes ao dia) ou placebo, por períodos de 6 semanas. Avaliação clínica, laboratorial, ergométrica e monitorização de pressão arterial (MAPA) e Holter de 24 horas foram realizadas no início do estudo e ao término de 6 semanas de cada intervenção. Resultados: Os pacientes em tratamento com trimetazidina apresentaram melhora significativa na classe funcional da angina (p<0,05), com diminuição significativa no número de episódios de crise anginosa por semana e na dose de nitrato sub-lingual utilizada (p<0,05). O tempo de início da isquemia no teste ergométrico foi maior após o uso da trimetazidina (229 ± 126 s no basal, 276 ± 101 s após o placebo e 348 ± 145 s após a trimetazidina; p<0,05). Não houve diferença nos níveis de pressão arterial, freqüência cardíaca e duplo-produto nas 24h, avaliadas concomitantemente com Holter e MAPA, ou no controle glicêmico e lipídico entre as intervenções. Conclusões: O uso da trimetazidina mostrou-se eficaz como tratamento coadjuvante da angina estável de difícil manejo em pacientes com DM tipo 2 em uso de múltiplos anti-anginosos, sem alteração de variáveis hemodinâmicas avaliadas nas 24 h. Estes dados ampliam o espectro de emprego da trimetazidina no manejo de pacientes sintomáticos e com limitadas opções de tratamento. / Aims: To evaluate the anti-ischemic and metabolic effect of trimetazidine in patients with refractory angina and type 2 diabetes (DM2) not eligible for revascularization and using at least two hemodynamic agents. Methods: Randomized, double-blind, crossover clinical trial conducted in 10 patients. Patients were randomized to receive trimetazidine (20 mg 3 times a day) or placebo for 6-week periods. Clinical and exercise evaluations, in addition to 24-h ambulatory blood pressure and Holter monitoring were carried out at baseline and at the end of each 6-week intervention period. Results: The patients receiving trimetazidine presented significant improvement in terms of angina functional class (p<0.05), with decrease in the number of weekly angina episodes at rest and in the sublingual nitrate dose (p<0.05). Time to 1 mm ST-segment depression was increased after trimetazidine use (229.2 ± 126.1 s at baseline, 276.3 ± 100.9 s after placebo and 347.5 ± 144.6 s after trimetazidine; p<0.001). No differences were observed between treatments group in terms of 24h-blood pressure, heart rate and ratepressure product as evaluated concomitantly with ambulatory blood pressure and Holter monitoring, or in terms of glycemic and lipid profile. Conclusions: The combined use of trimetazidine and haemodynamic agents was efficient to treat stable refractory angina in DM2 patients, significantly improving clinical and exercise parameters. The present data support the use of trimetazidine in the management of symptomatic patients with limited treatment options.

Objetivos: Avaliar a eficácia anti-isquêmica e efeito metabólico da trimetazidina em pacientes com angina refratária e diabete melito (DM) tipo 2, em uso de pelo menos duas medicações de efeito hemodinâmico, sem condições de revascularização. Métodos: Ensaio clínico randomizado, cruzado, duplo-cego, conduzido em 10 pacientes com DM tipo 2 e angina estável, em tratamento com pelo menos 2 anti-anginosos clássicos. Pacientes foram randomizados para receber trimetazidina (20 mg 3 vezes ao dia) ou placebo, por períodos de 6 semanas. Avaliação clínica, laboratorial, ergométrica e monitorização de pressão arterial (MAPA) e Holter de 24 horas foram realizadas no início do estudo e ao término de 6 semanas de cada intervenção. Resultados: Os pacientes em tratamento com trimetazidina apresentaram melhora significativa na classe funcional da angina (p<0,05), com diminuição significativa no número de episódios de crise anginosa por semana e na dose de nitrato sub-lingual utilizada (p<0,05). O tempo de início da isquemia no teste ergométrico foi maior após o uso da trimetazidina (229 ± 126 s no basal, 276 ± 101 s após o placebo e 348 ± 145 s após a trimetazidina; p<0,05). Não houve diferença nos níveis de pressão arterial, freqüência cardíaca e duplo-produto nas 24h, avaliadas concomitantemente com Holter e MAPA, ou no controle glicêmico e lipídico entre as intervenções. Conclusões: O uso da trimetazidina mostrou-se eficaz como tratamento coadjuvante da angina estável de difícil manejo em pacientes com DM tipo 2 em uso de múltiplos anti-anginosos, sem alteração de variáveis hemodinâmicas avaliadas nas 24 h. Estes dados ampliam o espectro de emprego da trimetazidina no manejo de pacientes sintomáticos e com limitadas opções de tratamento. / Aims: To evaluate the anti-ischemic and metabolic effect of trimetazidine in patients with refractory angina and type 2 diabetes (DM2) not eligible for revascularization and using at least two hemodynamic agents. Methods: Randomized, double-blind, crossover clinical trial conducted in 10 patients. Patients were randomized to receive trimetazidine (20 mg 3 times a day) or placebo for 6-week periods. Clinical and exercise evaluations, in addition to 24-h ambulatory blood pressure and Holter monitoring were carried out at baseline and at the end of each 6-week intervention period. Results: The patients receiving trimetazidine presented significant improvement in terms of angina functional class (p<0.05), with decrease in the number of weekly angina episodes at rest and in the sublingual nitrate dose (p<0.05). Time to 1 mm ST-segment depression was increased after trimetazidine use (229.2 ± 126.1 s at baseline, 276.3 ± 100.9 s after placebo and 347.5 ± 144.6 s after trimetazidine; p<0.001). No differences were observed between treatments group in terms of 24h-blood pressure, heart rate and ratepressure product as evaluated concomitantly with ambulatory blood pressure and Holter monitoring, or in terms of glycemic and lipid profile. Conclusions: The combined use of trimetazidine and haemodynamic agents was efficient to treat stable refractory angina in DM2 patients, significantly improving clinical and exercise parameters. The present data support the use of trimetazidine in the management of symptomatic patients with limited treatment options.

Objetivos: Avaliar a eficácia anti-isquêmica e efeito metabólico da trimetazidina em pacientes com angina refratária e diabete melito (DM) tipo 2, em uso de pelo menos duas medicações de efeito hemodinâmico, sem condições de revascularização. Métodos: Ensaio clínico randomizado, cruzado, duplo-cego, conduzido em 10 pacientes com DM tipo 2 e angina estável, em tratamento com pelo menos 2 anti-anginosos clássicos. Pacientes foram randomizados para receber trimetazidina (20 mg 3 vezes ao dia) ou placebo, por períodos de 6 semanas. Avaliação clínica, laboratorial, ergométrica e monitorização de pressão arterial (MAPA) e Holter de 24 horas foram realizadas no início do estudo e ao término de 6 semanas de cada intervenção. Resultados: Os pacientes em tratamento com trimetazidina apresentaram melhora significativa na classe funcional da angina (p<0,05), com diminuição significativa no número de episódios de crise anginosa por semana e na dose de nitrato sub-lingual utilizada (p<0,05). O tempo de início da isquemia no teste ergométrico foi maior após o uso da trimetazidina (229 ± 126 s no basal, 276 ± 101 s após o placebo e 348 ± 145 s após a trimetazidina; p<0,05). Não houve diferença nos níveis de pressão arterial, freqüência cardíaca e duplo-produto nas 24h, avaliadas concomitantemente com Holter e MAPA, ou no controle glicêmico e lipídico entre as intervenções. Conclusões: O uso da trimetazidina mostrou-se eficaz como tratamento coadjuvante da angina estável de difícil manejo em pacientes com DM tipo 2 em uso de múltiplos anti-anginosos, sem alteração de variáveis hemodinâmicas avaliadas nas 24 h. Estes dados ampliam o espectro de emprego da trimetazidina no manejo de pacientes sintomáticos e com limitadas opções de tratamento. / Aims: To evaluate the anti-ischemic and metabolic effect of trimetazidine in patients with refractory angina and type 2 diabetes (DM2) not eligible for revascularization and using at least two hemodynamic agents. Methods: Randomized, double-blind, crossover clinical trial conducted in 10 patients. Patients were randomized to receive trimetazidine (20 mg 3 times a day) or placebo for 6-week periods. Clinical and exercise evaluations, in addition to 24-h ambulatory blood pressure and Holter monitoring were carried out at baseline and at the end of each 6-week intervention period. Results: The patients receiving trimetazidine presented significant improvement in terms of angina functional class (p<0.05), with decrease in the number of weekly angina episodes at rest and in the sublingual nitrate dose (p<0.05). Time to 1 mm ST-segment depression was increased after trimetazidine use (229.2 ± 126.1 s at baseline, 276.3 ± 100.9 s after placebo and 347.5 ± 144.6 s after trimetazidine; p<0.001). No differences were observed between treatments group in terms of 24h-blood pressure, heart rate and ratepressure product as evaluated concomitantly with ambulatory blood pressure and Holter monitoring, or in terms of glycemic and lipid profile. Conclusions: The combined use of trimetazidine and haemodynamic agents was efficient to treat stable refractory angina in DM2 patients, significantly improving clinical and exercise parameters. The present data support the use of trimetazidine in the management of symptomatic patients with limited treatment options.