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Caracterização histopatológica, imunohistoquímica e determinação molecular de Mycobacterium bovis de lesões sugestivas de tuberculose em bubalinos abatidos para consumo no estado do Amapá

PEDROSO, Silvia Cristina da Silva 26 February 2016 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-05T15:51:42Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_CaracterizacaoHistopatologicaImunohistoquimica.PDF: 2345314 bytes, checksum: c2fd5882b5a286836e6a66b1a85942b1 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-10T16:04:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_CaracterizacaoHistopatologicaImunohistoquimica.PDF: 2345314 bytes, checksum: c2fd5882b5a286836e6a66b1a85942b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T16:04:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_CaracterizacaoHistopatologicaImunohistoquimica.PDF: 2345314 bytes, checksum: c2fd5882b5a286836e6a66b1a85942b1 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / A criação de búfalos é uma importante fonte de renda no Amapá, representando um importante setor na economia local. A tuberculose é uma enfermidade infecto-contagiosa de distribuição mundial, que ocorre em bovinos e bubalinos, causada predominantemente por Mycobacterium bovis. A doença tem caráter crônico debilitante com impacto econômico na produção de carne e leite em diversas regiões do mundo, além de ser uma importante zoonose. Objetivando caracterizar M. bovis em lesões sugestivas de tuberculose detectadas na inspeção de bubalinos no Estado do Amapá, através dos métodos histopatológicos e imunohistoquímicos (IHQ) e análise molecular, realizou-se a coleta de 109 amostras de lesões sugestivas de tuberculose. Para a análise histopatológica, empregou-se técnicas habituais para inclusão em parafina, pela coloração de hematoxilina e eosina, e Fite-Faraco. Para a IHQ utilizou-se o método da peroxidase-antiperoxidase (PAP) com um anti-soro policlonal de coelho contra o M. bovis (Dako B0124). Para a análise molecular, a extração do DNA micobacteriano, foi realizada diretamente do linfonodo e tratado pelo método do fenolclorofórmio, passando por dois protocolos de amplificação (PCR convencional e Nested- PCR). Histologicamente, 94,5% (103/109) apresentaram reação tecidual granulomatosa típica de lesão tuberculoide (LT), enquanto em 5,5% (06/109) sem características de granulomas tuberculoides (p < 0.0001). Os resultados obtidos através da IHQ, dentre os casos positivos pela histopatologia, todos apresentaram algum tipo de lesão classificada em diversos estágios pelo exame histopatológico, sendo observado que a maioria delas 82,2% (74/90; p < 0.0001) estava apenas no estágio IV. Entre os casos negativos, lesões necróticas apresentando-se apenas no último estágio de desenvolvimento (IV) também foram as mais frequentes 52,5% (10/19), e 31,5% (06/19) também foram negativos no histopatológico (p = 0.0030). Das 103 amostras positivas ao exame histopatológico, 73,8% (76/103) apresentaram reação de PCR positiva para o gênero Mycobacterium e 64,1% (66/103) apresentaram amplificação para a região RD4, confirmando a deleção, exclusiva da espécie M. bovis. Os resultados demonstraram que a tuberculose está presente nos rebanhos bubalinos do Amapá e regiões do Marajó no Pará, representando um sério risco de saúde pública. / The creation of buffalo is an important source of income in Amapá, an important sector in the local economy. Tuberculosis is an infectious disease of worldwide distribution, which occurs in cattle and buffaloes caused mainly by Mycobacterium bovis. The disease has debilitating chronic nature with economic impact on the production of meat and milk in different regions of the world, besides being an important zoonosis. Aiming to characterize M. bovis in suggestive of tuberculosis lesions detected in buffalo inspection in the State of Amapá, through histopathological and immunohistochemical methods (IHC) and molecular analysis, there was the collection of 109 samples suggestive of tuberculosis lesions. For histopathological analysis, we used standard techniques for paraffin by hematoxylin and eosin and Fite-Faraco. For IHC was used the method of peroxidase-antiperoxidase (PAP) with a polyclonal rabbit antiserum against M. bovis (Dako B0124). For molecular analysis, mycobacterial DNA extraction was directly performed lymph node and treated by the phenolchloroform method through two amplification protocols (conventional PCR and Nested- PCR). Histologically, 94.5% (103/109) had typical granulomatous tissue reaction tuberculoide injury (LT), while in 5.5% (06/109) without features of tuberculoid granulomas (p <0.0001). The results obtained by IHC among the positive cases by histopathology, all had some kind of injury classified in several stages by histopathology, and observed that most of them 82.2% (74/90; p <0.0001) was only stage IV. Among the negative cases, necrotic lesions presenting only the last stage of development (IV) were also frequently 52.5% (10/19) and 31.5% (06/19) were also negative in the histopathologic ( p = 0.0030). Of the 103 positive samples for histopathology, 73.8% (76/103) were PCR positive reaction to the genus Mycobacterium and 64.1% (66/103) had amplification for the RD4 region, confirming the deletion, exclusive of the species M. bovis. The results showed that tuberculosis is present in buffalo herds of Amapá and regions of Marajó in Pará, representing a serious risk to public health.
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Tuberculinização e aspectos epidemiológicos da tuberculose caprina na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba

Bombonato, Nadia Grandi 23 June 2009 (has links)
Data on caprine tuberculosis in Brazil and its importance for public health are scarce. Therefore, the purpose of this study was to investigate the occurrence and examine epidemiological aspects of tuberculosis in dairy goat herds in the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba mesoregion in the state of Minas Gerais, Brazil. Two hundred and thirty-three goats from seven dairy farms were tuberculinized using the comparative cervical tuberculin test, taking as reference the procedures and interpretation criteria of standard results for this species. Of the animals subjected to the test, 1.29% (3/233) reacted positively, 2.14% (5/233) showed inconclusive reactions, and 96.57% (225/233) showed no reaction. All the goats that tested positive and one showing an inconclusive response were necropsied. Samples of lymph nodes, liver, lung and kidney presenting alterations were collected for a histopathological examination (hematoxylin-eosin). Material removed from abscesses and lymph node fragments were cultured in Stonebrink and Petragnani culture media. An epidemiological inquiry was carried out to analyze risk factors on the farms. The necropsied animals did not exhibit macroscopic lesions suggestive of tuberculosis or any histopathological alterations, nor did the cultures show Mycobacterium sp. growth. The goats prevalence rate to tuberculin reaction was 1.29%, which may represent a zoonotic risk in this mesoregion since these are dairy herds. The interpretation of the epidemiological records, allied to the results of the tuberculinization procedure, indicated positive reagents only on a farm where fresh cow milk was fed to newborn goat kids. / Dados referentes à tuberculose caprina no Brasil e sua importância em saúde pública são escassos. Diante disso, este trabalho teve por objetivos investigar a ocorrência e pesquisar aspectos epidemiológicos da tuberculose em rebanhos leiteiros caprinos na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, MG. Foram tuberculinizados 233 caprinos provenientes de sete propriedades leiteiras, utilizando-se o teste cervical comparativo, tomando-se como referência os procedimentos e critérios de interpretação de resultados padronizados para esta espécie. Dos animais submetidos ao teste, 1,29% (3/233) reagiram positivamente, 2,14% (5/233) apresentaram reações inconclusivas e 96,57% (225/233) não reagiram. Todos os caprinos positivos e um com resposta inconclusiva foram submetidos à necropsia. Amostras de linfonodos, fígado, pulmão e rim que apresentaram alterações foram colhidos para exame histopatológico (Hematoxilina-Eosina). Material proveniente de abscessos e fragmentos de linfonodos foi submetido à cultura em meio de Stonebrink e Petragnani. Um inquérito epidemiológico foi procedido para análise dos fatores relacionados à ocorrência de tuberculose nas propriedades. Não foram encontradas lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose nos animais necropsiados, nem alterações histopatológicas. Também não houve crescimento de micobactérias na cultura. A taxa de reatividade à tuberculina dos caprinos foi de 1,29 %. Por se tratar de rebanhos leiteiros, a ocorrência de tuberculose pode representar risco zoonótico na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, MG. A interpretação dos registros epidemiológicos, associada aos resultados da tuberculinização constatou reagentes positivos somente na propriedade onde se utilizou leite bovino in natura para alimentar cabritos recém nascidos, porém a ocorrência da tuberculose não pode ser confirmada nesses caprinos. / Mestre em Ciências da Veterinárias
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Cadeia produtiva da pecuária de corte do município de Tailândia, estado do Pará: estrutura e caracterização sanitária dos abates

NORONHA, Gerlane Nunes January 2015 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T11:51:49Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CadeiaProdutivaPecuaria.pdf: 1247550 bytes, checksum: f8d553552765c21f48819784d587ffba (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-17T15:42:25Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CadeiaProdutivaPecuaria.pdf: 1247550 bytes, checksum: f8d553552765c21f48819784d587ffba (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-17T15:42:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CadeiaProdutivaPecuaria.pdf: 1247550 bytes, checksum: f8d553552765c21f48819784d587ffba (MD5) Previous issue date: 2015 / Este trabalho tem por objetivo caracterizar a cadeia produtiva da pecuária de corte do município de Tailândia, Pará, Mesorregião Nordeste Paraense, com a finalidade de identificar o estado da arte e ênfase à etapa de abate, bem como prevalência das perdas econômicas por condenações de carcaças e órgãos bovinos e confirmação através de análises microbiológicas de lesões sugestivas de tuberculose bovina. Para as avaliações, foram utilizados dados secundários em sites governamentais e institucionais, dados primários por meio de entrevistas com produtores, dono do matadouro frigorífico, líderes comunitários e técnicos de entidades públicas. Em segundo momento, avaliaram-se os dados primários através de planilhas de registros de abates e condenações de carcaças e vísceras, no período de março de 2010 a outubro de 2014 e constatou-se que a tuberculose bovina foi uma das patologias de maior condenação (2,98%) e a que gerou maior perda econômica (71,48%). Diante desses resultados, buscou-se confirmação através de análises histopatológicas e reação de polimerase em cadeia - PCR, a fim de caracterizar as lesões e identificar a presença do Mycobacterium bovis. A histopatologia mostrou que apenas 1,96% das amostras corresponderam a processo inflamatório característico de tuberculose e 4,25% com perfil de amplificação para a espécie de M. bovis. Os resultados deste estudo permitem concluir que há necessidade de uso de métodos complementares no auxílio do diagnóstico da tuberculose bovina em matadouros frigoríficos, para aumentar o controle epidemiológico da doença, tornar mais eficiente o serviço de inspeção e reduzir as perdas econômicas geradas, o que tornará a cadeia produtiva mais forte. / This work aims to characterize the productive chain of beef cattle in the town of Tailândia, Pará, Mesoregion Northeast Pará, in order to identify the state of the art and emphasize the slaughter stage and prevalence of economic losses carcasses of convictions and cattle organs and confirmation by microbiological analysis of lesions suggestive of bovine tuberculosis. For evaluations, secondary data on government and institutional sites, primary data through interviews with producers, cold slaughterhouse owner, community leaders and experts from public entities were used. In second phase, primary data through spreadsheets slaughtering records and convictions of carcasses and viscera were evaluated, from March 2010 to October 2014 and found that bovine tuberculosis was one of the highest conviction pathologies (2.98%) and generating greater economic loss (71.48%). Given these results, we sought confirmation by histopathological analysis and polymerase chain reaction - PCR in order to characterize the lesions and identify the presence of Mycobacterium bovis. The histopathology showed that only 1.96% of the samples corresponded to the inflammatory process characteristic of tuberculosis and 4.25% with amplification profile for the species of M. bovis. The results of this study allow us to conclude that there is need to use complementary methods to improve diagnostic of bovine tuberculosis in slaughterhouses to increase the epidemiological disease control, streamline the inspection service and reduce economic losses generated, which will make the strongest production chain.

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