Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / La apoptosis o muerte celular programada es la eliminación de células que ya no son necesarias o que están dañadas genéticamente. Es controlada por una variedad de genes, muchos de los cuales presentan mutación y/o disfuncionalidad en su regulación, asociada a cáncer. Cuando esto ocurre, los pacientes presentan tumores más agresivos. La medición morfológica cuantitativa del índice apoptótico, especialmente por microscopía de luz, es difícil ya que los cambios celulares asociados son de corta duración. En la apoptosis ocurre fragmentación del ADN, la que puede ser detectada y marcada enzimáticamente mediante la técnica denominada TUNEL (terminal transferense mediaded dUTP-biotin nick end labelling). Permite detectar estados tempranos de apoptosis, incluso antes que el núcleo experimente los primeros cambios morfológicos. El Tumor Venéreo Transmisible (T.V.T), se caracteriza por presentar una fase de crecimiento progresivo muy acelerado con gran destrucción tisular local. Sin embargo, el tratamiento con sulfato de Vincristina, a diferencia de lo que ocurre en otras neoplasias, induce la regresión de la masa tumoral hasta su completa desaparición En este trabajo se seleccionaron 10 caninos adultos con TVT de ubicación genital en fase progresiva de crecimiento para inducirles regresión tumoral con Sulfato de Vincristina en dosis única de 0.03mg/Kg. Se obtuvieron muestras histológicas para estudiar el comportamiento apoptótico del tumor después del tratamiento, mediante la técnica de inmunotinción TUNEL. Se digitalizaron imágenes que fueron analizadas con un software morfométrico (Image Pro-Plus, Media Cybernetics, USA). Se observó una intensa inmunomarcación para apoptosis en tejidos de TVT en fase regresiva, involucrando muchas células que no presentaban aún cambios morfológicos asociados a apoptosis, contrastando con una inmunomarcación ocasional, de células aisladas, en la fase progresiva de crecimiento. El área promedio de células apoptóticas fue de 51.3±37.9m2 y 1396±828.6m2, por campo de 200X, para fase progresiva y regresiva, respectivamente, indicando una diferencia significativa entre ambas fases (p<0.0001). El tipo celular principal dentro de la población apoptótica, en ambas fases, correspondió a células tumorales con un 80.7% para fase progresiva y 89.4% para fase regresiva. Mientras, que los linfocitos representaban un 16.1% y 8.4%, en las fase progresiva y regresiva, respectivamente. Las epiteliales constituían sólo un 3.2% en fase progresiva y 2.2% en fase regresiva. Dentro de la población apoptótica, las células de T.V.T. mostraron un aumento significativo en fase regresiva (p<0.001). Los linfocitos disminuyeron en forma significativa en regresión (p<0.001). En cambio, la disminución registrada en las células epiteliales en fase regresiva no fue estadísticamente significativa (p ≥0.05). Este estudio indica que la Vincristina induce regresión en T.V.T. a través de apoptosis, llevando al colapso de la masa tumoral. El mecanismo por el cual la Vincristina induciría apoptosis en T.V.T. permanece aún por aclarar, sin embargo se ha demostrado, en otras neoplasias, activación de caspasas 9 y 3, sugiriendo que este tratamiento induce apoptosis por la vía mitocondrial, involucrando mecanismos asociados a la generación de radicales derivados del oxígeno y sobre expresión de gen Bcl-2

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-07-04Bitstream added on 2014-06-13T18:45:08Z : No. of bitstreams: 1 silva_sb_dr_botfmvz.pdf: 1670441 bytes, checksum: a3ebab095a955dd5ab0d977a8cafe405 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O tumor venéreo transmissível (TVT) caracteriza-se por ser uma neoplasia de origem controversa. Baseado nos resultados obtidos anteriormente por nosso grupo de pesquisa, dos três tipos morfológicos do TVT, os de morfologia plasmocitóide são mais agressivos. De acordo com as características morfológicas do TVT, a resposta à terapia é variável e sabendo-se que a utilização da survivina, bem como da caspase-3, do Bcl-6, do Bcl-2, do Ki-67 e da COX-2 são importantes para auxiliar no prognóstico, no manejo do paciente e na monitoração da doença durante e após a terapia, este projeto visou, além de estudos citogenéticos, observar se há diferenças na expressão dos imunomarcadores acima citados, nos TVTs plasmocitóides e linfocitóides. Para tal, foram utilizados 30 cães atendidos no Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, Campus de Botucatu. Devido baixa incidência de TVT linfocitóide no HV-UNESP-Botucatu, não foi possível fazer correlações entre os tipos plasmocitóide e linfocitóide. A positividade da survivina variou de 96,15 a 100% em 200 células contadas e, em dois casos, a marcação da survivina foi citoplasmática e nuclear, nos outros casos a marcação foi apenas citoplasmática. A marcação pelo anticorpo anti-caspase-3 nos 30 casos de TVT foi baixa, variando de 0 a 6,5% de positividade em 200 células contadas, o que sugere um comportamento agressivo do TVT. Neste estudo, o TVT não expressou Bcl-2 nem Bcl-6 nas tentativas de imunomarcação. Dos 30 casos de TVT que foi realizado marcação pelo Ki-67, em 21 casos foi possível a contagem de células e houve uma média de positividade de 15,57%. Houve expressão de COX-2 em todos os casos e os valores variaram de 90,66 a 100% de positividade em 200 células contadas, exceto por um caso que apresentou 24,50% de positividade. A distribuição... / The characterization of transmissible venereal tumor (TVT) as neoplastic in origin is controversial. Based on results obtained previously by our research group, of the three TVT morphological types, those of plasmocytoid morphology are most aggressive. According to morphological characteristics of TVT, response to therapy is variable; and given that using survivin, caspase-3, Bcl-6, Bcl-2, Ki-67 and COX-2 to aid in prognosis, patient management and the monitoring of this disease during and after therapy, this project aimed, besides cytogenetic studies, to observe whether there are differences in expression of the aforementioned immunomarkers, in plasmocytoid TVTs and lymphocytoids. For this, 30 dogs, treated at the Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP, Campus at Botucatu, were utilized without restriction as to sex, breed or age, with cytological diagnosis of transmissible venereal tumor. There was prevalence of males; age varied from 1 to 14 years, the majority were SRD dogs and localization was preferentially genital. Due to low lymphocytoid TVT incidence (5.91%) at HV-UNESP–Botucatu, it was not possible to make correlations between plasmocytoid and lymphcytoid types. Positivity of survivin varied from 96.15 to 100% in the 200 cells counted and, in two cases, marking for survivin was cytoplasmic and nuclear, while in other cases marking was only cytoplasmic. Survivin is associated with more aggressive behavior and shorter lifespan in the majority of tumors. In men, highly aggressive neoplasias present lower cytoplasmic expression of caspase-3 than low-grade neoplasias. Marking by anti-caspase-3 antibody in 30 TVT cases was low, varying from 0 to 6.5% positiviity in 200 cells counted, which suggests aggressive TVT behavior. In our study, TVT did not express Bcl-2 or Bcl-6... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-07T12:19:25Z No. of bitstreams: 1 MIrian Aparecida de Queiroz Barbosa Ferreira.pdf: 1537380 bytes, checksum: 4f7250c772918ad4309b7bc67392342d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-07T12:19:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MIrian Aparecida de Queiroz Barbosa Ferreira.pdf: 1537380 bytes, checksum: 4f7250c772918ad4309b7bc67392342d (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / The transmissible venereal tumor is one of the most frequent cancers in clinical medicine of small animals and exhibits excellent responsiveness to chemotherapy. Against the importance of this disease, the objective was evaluate the clinical, haematological, biochemical and cytopathology dogs with transmissible venereal tumor treated with vincristine sulfate. We selected 10 dogs without distinction of sex, race or age suspected of transmissible venereal tumor, who had their diagnosis confirmed by cytological examination of which were collected blood samples for achievement hemogramy and biochemical levels. The animals were treated with vincristine sulfate at a dose of 0.75 mg / m2 intravenous administration every seven days for six consecutive weeks. The patients received medical discharge after the complete regression of tumor and the absence of neoplastic cells in cytological evaluation. Of affected animals evaluated by TVT, 70% were female and 30% male with a mean age of 4.8 ± 1.3 years, all mixed breed. The main clinical complaints of animals examined was bloody discharge, nasal and / or genital. After chemotherapy, only the vulvar bleeding statistically significant differences (p <0.05) from twenty-one days, and 100% of the animals showed no further bleeding. As for the cytological classification it was observed that 50% of the plasma cell type was 30% and 20% mixed lymphocyte. The hematological abnormalities observed was in relation to the counting rods (p = 0.042) at the beginning and after seven days and phosphorus serum nadosagem (p = 0.024) with statistically significant results (p <0.05). Its conclude that cytological aspiration fine needle is an effective, simple and safe for the diagnosis and classification of transmissible and independent venereal tumor type deTVT was satisfactory response method to chemotherapy treatment Vincristinae Sulfate base a protocol from six applications of chemotherapy, seven days betweenoperations applications intervals was effective for treatment. / O tumor venéreo transmissível é uma das neoplasias mais frequentes na clínica médica de pequenos animais e apresenta excelente responsividade à quimioterapia. Diante da relevância dessa afecção, objetivou-se avaliar os aspectos clínicos, hematológicos, bioquímicos e citopatológicos de cães com o tumor venéreo transmissível tratados com o sulfato de vincristina. Selecionou-se 10 cães sem distinção de sexo, raça ou idade com suspeita do tumor venéreo transmissível, que tiveram seu diagnóstico confirmado pelo exame citopatológico, dos quais foram coletados amostras de sangue para realização de hemograma e dosagens bioquímicas. Os animais foram tratados com o sulfato de vincristina na dose de 0,75mg/m2 com administração intravenosa a cada sete dias, por seis semanas consecutivas. Os pacientes receberam alta médica após a regressão completa do tumor e pela ausência de células neoplásicas na avaliação citopatológica. Dos animais avaliados acometidos pelo TVT, 70% eram fêmeas e 30% machos com média de idade de 4,8±1,3 anos, todos sem raça definida. A principal queixa clínica dos animais examinados foi de secreção sanguinolenta, nasal e/ou genital. Após a quimioterapia, apenas o sangramento vulvar apresentou diferenças estatisticamente significativas (p<0,05) a partir de vinte e um dias, 100% dos animais não apresentaram mais sangramentos. Quanto à classificação citopatológica observou-se que 50% foi do tipo plasmocitário, 30% misto e 20% linfocitário. A alteração hematológica observada foi em relação à contagem dos bastonetes (p=0,042) no inicio e após sete dias e na dosagem sérica de fósforo (p=0,024) com resultados estatisticamente significativos (p<0,05). Conclui-se que a citologia aspirativa por agulha fina foi um método eficaz, simples e seguro para o diagnóstico e classificação do tumor venéreo transmissível e independente do tipo de TVT houve resposta satisfatória ao tratamento quimioterápico a base de Sulfato de Vincristina e um protocolo a partir de seis aplicações do quimioterápico, com intervalos de sete dias entre as aplicações mostrou-se eficiente para o tratamento.

Submitted by Fabrizio Grandi (fgrandivet@gmail.com) on 2016-03-10T14:56:58Z No. of bitstreams: 1 Doutorado.pdf: 5138229 bytes, checksum: cf3859209f1985d48832ef7e89af5b94 (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-03-10T17:08:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 grandi_f_dr_bot.pdf: 5138229 bytes, checksum: cf3859209f1985d48832ef7e89af5b94 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-10T17:08:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 grandi_f_dr_bot.pdf: 5138229 bytes, checksum: cf3859209f1985d48832ef7e89af5b94 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O tumor venéreo transmissível (TVT) canino é uma neoplasia transplantável, considerada um alo-enxerto. Entretanto, pouco se sabe a respeito da origem e processo de cacinogênese. Atualmente, postula-se que alguns tumores originem-se de células iniciadoras tumorais, classicamente descritas nas leucemias mielóide humanas. As características intrínsecas do TVT fornecem indícios de uma possível participação de células iniciadores tumorais no processo de carcinogênese nesse tumor. Foi realizado estudo de fenotipagem do TVT canino para avaliar a marcação das proteínas CD44, CD133, CD90 e CD34, comumente associadas ao potencial iniciador tumoral. Para tanto utilizou-se a citometria de fluxo, imuno-histoquímica e RTq-PCR. Foram analisados também as frações de crescimento pelo Ki-67) e o número de células em apoptose pela caspase-3 clivada. Trinta e oito amostras de TVT foram obtidas de pacientes sem tratamento quimioterápico prévio. As amostras foram classificadas em plasmocitóide ou mistas, de acordo com o subtipo citológico; as células positivas na citometria de fluxo foram representadas em termos percentuais para os marcadores CD44, CD34, CD90 e CD133; a fração de crescimento foi representada pela técnica do H-Score; a quantidade de células apoptóticas foi representada pelo somatório de células positivas para a caspase-3 clivada; as imuno-marcações das proteínas CD44 e CD34 foram representadas por escores semi-quantitativos baseados na intensidade e percentual de células positivas; as expressões de RNAm foram calculadas em termos relativos; ainda, os pacientes foram divididos em grupos resistente e não resistente e comparados quanto a expressão dos marcadores de células iniciadoras supracitados. Não foram observadas diferenças significativas entre os marcadores e os grupos citológicos plasmocitóide e misto; o percentual de células CD44+ comumente foi superior a 90%, enquanto que o percentual de células CD34+, menor que 0,5%; o percentual de células CD90+ e CD133+ variou amplamente; houve uma tendência em termos de diferença estatística entre os grupos quimiorresistente e não resistente; houve correlação forte entre o percentual de células CD133+ e CD90+ na citometria de fluxo. O estudo permitiu verificar diferentes níveis de expressão protéica e gênica nas amostras de TVT canino; ainda, os grupos citológicos aparentam não possuir diferenças com relação a expressão dos marcadores CD44, CD90, CD133 e CD34; os grupos quimiorresistentes e não-resistentes parecem diferir com relação a expressão dos marcadores de células iniciadoras tumorais. / The canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a transplantable neoplasia considered an allograft. Information about the origin and carcinogenesis process is scarcely known. Currently, some neoplasms are believed to arise from a tumor-initiating cell (TIC´s) classically described in human myeloid leukemia. TVT intrinsic characteristics provide evidence of a possible TIC´s participation in carcinogenesis process of this malignancy. Thus, a phenotyping study of CTVT was conducted to assess the immunophenotyping properties of the proteins CD44, CD133, CD90 and CD34, already known to be associated to tumor initiator potential. The use of flow cytometry and immunohistochemistry contributed to this purpose. In addition, growth fractions and cells undergoing apoptosis were examined by Ki-67 and caspase-3 cleaved, respectively. Thirty-eight samples were chosen from patients having no previous chemotherapy and cytological diagnosis of CTVT. Samples were classified into plasmacytoid or mixed according to cytological subtype. Positive cells in the flow cytometry were expressed in percentage for the markers CD44, CD34, CD90 and CD133. H-score technique helped to represent growth fractions. Apoptotic cell quantity was calculated by summing positive cells. Immunohistochemical marking of CD44 and CD34 proteins were determined by semiquantitative scores based on the intensity and percentage of positive cells. Moreover, specimens were divided into resistant and non-resistant groups and compared according cell marker expressions cited before. No significant differences appeared between the markers, and cytological plasmacytoid and mixed groups. The CD44 + cells and CD34 + percentages showed up high and low values, respectively. CD90 + and CD133 + cell percentages presented variable values. Amplitudes of the gene expression values among markers were similar to those observed in flow cytometry with a low expression of CD34, and a high expression of CD44. There was a positive statistical tendence between chemo-resistant and non-resistant groups, as well as a strong correlation between the percentage of CD133 + and CD90 + in flow cytometry. Besides, cytological groups apparently have no differences with the marker expression of CD44, CD90, CD133 and CD34. Resistant and non-resistant groups to chemotherapy seems to differ with respect to the marker expression of TIC´s.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSETACAO_COMPLETA__16_04_09.pdf: 1755631 bytes, checksum: da3df5aaf8868dbddec8a1a0b3481970 (MD5) Previous issue date: 2009-02-13 / The transmissible venereal tumor (TVT) is a contagious neoplasm of round cells of dogs of very frequent casuistry. The standard treatment consists of chemotherapy, and the most effective treatment is the vincristine sulphate alone, however the resistance emergence to this agent has been taking the association with other drugs. Recent studies demonstrated the antitumoral effect of the avermectins when associated to the vincristine in the treatment of some neoplasms. Therefore, the objective of this work was to compare the effectiveness of the standard protocol with vincristine only and the ivermectin + vincristine association through histopathologycal and cytological analysis of the tumor. The samples analyses reveal a more precocious cure of TVT in the associated protocol. These results suggest that the protocol of the vincristine associated to ivermectin can be an excellent therapeutic alternative for the treatment of TVT in the future. / O tumor venéreo transmissível (TVT) é uma neoplasia de células redondas que acomete cães de casuística muito freqüente. O tratamento padrão consiste no uso de antineoplásicos, sendo de eleição a vincristina como agente único, porém o aparecimento de resistência a este fármaco tem levado a associação com outras drogas. Estudos recentes demonstraram o efeito antitumoral das avermectinas quando associadas à vincristina no tratamento de alguns tipos de neoplasias. Portanto, o objetivo deste trabalho foi comparar a eficácia do protocolo padrão com o uso único de vincristina e o protocolo da associação de vincristina e ivermectina através da análise histopatológica e citológica do tumor. As análises histopatológicas e citológicas revelarem uma cura mais precoce do TVT no protocolo associado. Estes resultados sugerem que o protocolo vincristina associada à ivermectina pode ser no futuro uma excelente alternativa terapêutica para o tratamento do TVT.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSETACAO_COMPLETA__16_04_09.pdf: 1755631 bytes, checksum: da3df5aaf8868dbddec8a1a0b3481970 (MD5) Previous issue date: 2009-02-13 / The transmissible venereal tumor (TVT) is a contagious neoplasm of round cells of dogs of very frequent casuistry. The standard treatment consists of chemotherapy, and the most effective treatment is the vincristine sulphate alone, however the resistance emergence to this agent has been taking the association with other drugs. Recent studies demonstrated the antitumoral effect of the avermectins when associated to the vincristine in the treatment of some neoplasms. Therefore, the objective of this work was to compare the effectiveness of the standard protocol with vincristine only and the ivermectin + vincristine association through histopathologycal and cytological analysis of the tumor. The samples analyses reveal a more precocious cure of TVT in the associated protocol. These results suggest that the protocol of the vincristine associated to ivermectin can be an excellent therapeutic alternative for the treatment of TVT in the future. / O tumor venéreo transmissível (TVT) é uma neoplasia de células redondas que acomete cães de casuística muito freqüente. O tratamento padrão consiste no uso de antineoplásicos, sendo de eleição a vincristina como agente único, porém o aparecimento de resistência a este fármaco tem levado a associação com outras drogas. Estudos recentes demonstraram o efeito antitumoral das avermectinas quando associadas à vincristina no tratamento de alguns tipos de neoplasias. Portanto, o objetivo deste trabalho foi comparar a eficácia do protocolo padrão com o uso único de vincristina e o protocolo da associação de vincristina e ivermectina através da análise histopatológica e citológica do tumor. As análises histopatológicas e citológicas revelarem uma cura mais precoce do TVT no protocolo associado. Estes resultados sugerem que o protocolo vincristina associada à ivermectina pode ser no futuro uma excelente alternativa terapêutica para o tratamento do TVT.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NIVIA faria.pdf: 1723183 bytes, checksum: 8c7fa557f1d9e528a75b069ae5bd4fbf (MD5) Previous issue date: 2009-12-18 / The transmissible venereal tumor (TVT) is among the most common cancers in dogs in Brazil. This is a sexually transmitted cancer through a mechanism of transplantation of viable tumor cells, it has high incidence among dogs of both sexes in reproductive age, with high occurrence in areas of high concentration of dogs with poor control of reproduction. The diagnosis made in the routine of clinical medicine is usually based only on clinical symptoms and the chemotherapy of choice has been the vincristine sulfate. This drug has been shown in most cases a good response to treatment with complete regression of the tumor, but there are also cases where the tumor appears resistant to treatment. This study aimed to demonstrate the practicality of using fine needle aspiration cytology as a method of diagnosis and cytomorphologic classification, being effective and safe as well as measuring the response of different cytomorphologic groups forward to treatment with vincristine sulfate. Also evaluating the clinical response, hematologic and biochemical tests using serum liver function (ALT) and renal (creatinine), in the therapy instituted. Were evaluated and treated 18 dogs of both sexes, carrying TVT, which received six consecutive weeks during the administration of vincristine sulfate in the dosage of 0.03 mg / kg administered intravenously. The animals underwent weekly prior to medication, clinical assessment, haematological and biochemical. It was observed in this study that cytological examination is a simple technique, minimally invasive and painless, and a safe method that provides no risk to the patient's life and does not require the use of sophisticated equipment, sedation or anesthesia for their achievement. Animals carrying the TVT plasmacytoid type, had higher rate of tumor resistance to treatment in relation to established groups and linfocytic mixed, showing a greater resistance to treatment with this group of vincristine sulfate. The efficiency of response to treatment was presented by the linfocytic group. The vincristine sulfate showed few side effects, low hematological, hepatic and renal toxicity, it is therefore an effective option in the control of transmissible venereal tumor in not resistant cases. / O tumor venéreo transmissível (TVT) é uma das neoplasias mais freqüentes em cães no Brasil. Trata-se de uma neoplasia sexualmente transmissível, através de um mecanismo de transplantação de células tumorais viáveis, apresenta alta incidência entre cães de ambos os sexos em idade reprodutiva, tendo grande ocorrência em ambientes de alta concentração de cães errantes e com deficiente controle de reprodução. O diagnóstico realizado na rotina da clínica médica geralmente se baseia apenas na sintomatologia clínica e o quimioterápico de eleição tem sido o sulfato de vincristina. Este quimioterápico tem demonstrado na maioria dos casos boa resposta ao tratamento com regressão completa da neoplasia, mas também há casos onde o tumor se mostra resistente ao tratamento. O presente trabalho visou demonstrar a praticidade do uso da citologia aspirativa por agulha fina como método de diagnóstico e de classificação citomorfológica eficaz e seguro, assim como mensurar a resposta dos diferentes grupos citomorfológicos frente ao tratamento com sulfato de vincristina. Avaliando também a resposta clínica, hematológica e por meio de provas bioquímicas séricas a função hepática (ALT) e renal (creatinina), frente à terapia instituída. Foram avaliados e tratados 18 cães de ambos os sexos, portadores de TVT, os quais receberam durante seis semanas consecutivas a administração de sulfato de vincristina na dosagem de 0,03 mg/kg administrado via intravenosa. Os animais foram submetidos semanalmente previamente a medicação, avaliação clínica, hematológica e bioquímica. Observou-se com este estudo que o exame citológico constitui-se em uma técnica simples, minimamente invasiva e indolor, sendo um método seguro, que não proporciona riscos à vida do paciente e não requer o uso de equipamento sofisticado, sedação ou anestesia para sua realização. Os animais portadores do TVT do tipo plasmocitóide, apresentaram maior índice de resistência tumoral ao tratamento estabelecido em relação aos grupos linfocitóide e misto, demonstrando uma maior resistência deste grupo ao tratamento com sulfato de vincristina. A maior eficácia de resposta ao tratamento foi apresentada pelo grupo linfocitóide. O sulfato de vincristina apresentou poucos efeitos colaterais, baixa toxicidade hematológica, hepática e renal constituindo, portanto em opção eficaz no controle do tumor venéreo transmissível em casos não resistentes.