A síndrome da imunodeficiência adquirida é causada pelo vírus da imunodeficiência humana e é caracterizada por provocar depleção física e funcional do sistema imune do organismo, através da infecção citopática de células CD4+. Muitos fármacos anti-retrovirais tem sido desenvolvidos e estão disponíveis comercialmente. Para atuar no controle de qualidade de medicamentos deve-se continuamente estudar o desenvolvimento e a validação de novas metodologias para quantificação de fármacos, para serem aplicadas nos estudos de estabilidade de formulações farmacêuticas e na análise de produtos de degradação. Neste trabalho foram utilizadas duas técnicas analíticas, a espectrofotometria direta no UV/VIS e a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), para a determinação quantitativa de zidovudina (AZT) e estavudina (d4T).em medicamentos. Ambos os métodos foram validados com relação à linearidade, exatidão, precisão, especificidade e limite de detecção e quantificação. O método validado para a CLAE foi também empregado para a determinação quantitativa da timina, produto de degradação do AZT e da d4T. A metodologia validada por CLAE foi utilizada na realização de estudos de estabilidade acelerada dos anti-retrovirais contidos nas diferentes preparações farmacêuticas. Realizou-se o estudo da estabilidade em três diferentes condições: temperatura ambiente, 40 oC / 75% UR e 50 oC / 90% UR. Tanto a zidovudina (Fabricante A) e estavudina (Fabricante B) apresentaram decaimento cinético de zero ordem com prazos de validade a 50 oC / 90% UR de 10, 3 e 2 meses, respectivamente. / The acquired immunodeficiency syndrome is characterized by causing physical and functional depletion of the organism’s immune system, through the cytophatic infection of CD4+ cells. Several antiretroviral drugs has been developed and commercially made available. In order to assure the quality control of drugs it is necessary to develop and validate new analytical methodologies to perform the quantitative determination of drugs and stability studies of pharmaceutical formulations by determining the drug itself and its degradation products. In this research two analytical techniques, direct UV/VIS spectrophotometry and high performance liquid chromatography (HPLC), were used for the quantitative determination of zidovudine (AZT) and stavudine (d4T) in pharmaceutical preparations. Both methods were validated and parameters like linearity, precision, accuracy, specificity, limit of detection and limit of quantification, were determined. The validated HPLC method was also applied for quantitative determination of timine, a degradation product of AZT and d4T. The validated HPLC method was applied to accelerate stability studies of AZT and d4T in different pharmaceutical preparations. The stability studies were performed at three different conditions: room temperature, 40 oC / 75% RH and 50 oC / 90% RH. Both AZT and d4T (Industry A) and d4T (Industry B) pharmaceutical preparations presented a zero order degradation reaction. The three formulations presented a shelf-life of 10, 3 and 2 months, respectively, at 50 oC / 90% RH.

A síndrome da imunodeficiência adquirida é causada pelo vírus da imunodeficiência humana e é caracterizada por provocar depleção física e funcional do sistema imune do organismo, através da infecção citopática de células CD4+. Muitos fármacos anti-retrovirais tem sido desenvolvidos e estão disponíveis comercialmente. Para atuar no controle de qualidade de medicamentos deve-se continuamente estudar o desenvolvimento e a validação de novas metodologias para quantificação de fármacos, para serem aplicadas nos estudos de estabilidade de formulações farmacêuticas e na análise de produtos de degradação. Neste trabalho foram utilizadas duas técnicas analíticas, a espectrofotometria direta no UV/VIS e a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), para a determinação quantitativa de zidovudina (AZT) e estavudina (d4T).em medicamentos. Ambos os métodos foram validados com relação à linearidade, exatidão, precisão, especificidade e limite de detecção e quantificação. O método validado para a CLAE foi também empregado para a determinação quantitativa da timina, produto de degradação do AZT e da d4T. A metodologia validada por CLAE foi utilizada na realização de estudos de estabilidade acelerada dos anti-retrovirais contidos nas diferentes preparações farmacêuticas. Realizou-se o estudo da estabilidade em três diferentes condições: temperatura ambiente, 40 oC / 75% UR e 50 oC / 90% UR. Tanto a zidovudina (Fabricante A) e estavudina (Fabricante B) apresentaram decaimento cinético de zero ordem com prazos de validade a 50 oC / 90% UR de 10, 3 e 2 meses, respectivamente. / The acquired immunodeficiency syndrome is characterized by causing physical and functional depletion of the organism’s immune system, through the cytophatic infection of CD4+ cells. Several antiretroviral drugs has been developed and commercially made available. In order to assure the quality control of drugs it is necessary to develop and validate new analytical methodologies to perform the quantitative determination of drugs and stability studies of pharmaceutical formulations by determining the drug itself and its degradation products. In this research two analytical techniques, direct UV/VIS spectrophotometry and high performance liquid chromatography (HPLC), were used for the quantitative determination of zidovudine (AZT) and stavudine (d4T) in pharmaceutical preparations. Both methods were validated and parameters like linearity, precision, accuracy, specificity, limit of detection and limit of quantification, were determined. The validated HPLC method was also applied for quantitative determination of timine, a degradation product of AZT and d4T. The validated HPLC method was applied to accelerate stability studies of AZT and d4T in different pharmaceutical preparations. The stability studies were performed at three different conditions: room temperature, 40 oC / 75% RH and 50 oC / 90% RH. Both AZT and d4T (Industry A) and d4T (Industry B) pharmaceutical preparations presented a zero order degradation reaction. The three formulations presented a shelf-life of 10, 3 and 2 months, respectively, at 50 oC / 90% RH.

Το Hypericum perforatum φύεται σε όλες τις εύκρατες περιοχές του πλανήτη. Τα υπέργεια τμήματά του συλλέγονται κατά την περίοδο της ανθοφορίας του και αποτελούν τη δρόγη του φυτού, η οποία συνήθως αποξηραίνεται. Υδροαλκοολικά του εκχυλίσματα, βάμματα και ελαιώδη εκχυλίσματα χρησιμοποιούνται κατά ψυχιατρικών παθήσεων και για την επούλωση πληγών και εγκαυμάτων. Η χρήση τους είναι ιδιαίτερα διαδεδομένη, ιδιαίτερα στην κεντρική Ευρώπη. Στην παρούσα εργασία αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε μία χρωματογραφική μέθοδος προσδιορισμού των κύριων βιοδραστικών συστατικών του H. perforatum. Ο χρωματογραφικός διαχωρισμός πραγματοποιήθηκε σε όργανο HPLC συζευγμένο με ανιχνευτή συστοιχίας φωτοδιόδων (DAD) με χρήση χρωματογραφικής στήλης ανάστροφης φάσης C-18 και σύστημα βαθμιδωτής έκλουσης τριών διαλυτών. Διαχωρίστηκαν πλήρως και προσδιορίστηκαν τα επικρατέστερα ποσοτικά συστατικά της δρόγης, δηλαδή: χλωρογενικό οξύ, ρουτίνη, υπεροζίτης, ισοκερσετίνη, κερσετίνη, διαπιγενίνη, ψευδοϋπερικίνη και υπερικίνη. Η επικύρωση της μεθόδου πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με τα διεθνή πρότυπα εμβολιάζοντας ποσότητες προτύπων ενώσεων σε διάλυμα εκχυλίσματος H.perforatum συγκέντρωσης 0,5 mg/mL. Για καθένα από τα συστατικά αυτά (το χλωρογενικό οξύ, τη ρουτίνη, τον υπεροζίτη, την ισοκερσετίνη, την κερσετίνη και την υπερικίνη) κατασκευάστηκε η καμπύλη βαθμονόμησής του και όλες κατέδειξαν εξαιρετική γραμμικότητα. Η ακρίβεια και η επαναληψιμότητα της μεθόδου επικυρώθηκαν με έλεγχο της ικανότητας ανάκτησης των συστατικών (ακρίβεια) και με εκτίμηση της εγγύτητας των αποτελεσμάτων επαναλαμβανόμενων πειραμάτων (επαναληψιμότητα) σε τέσσερα επίπεδα συγκέντρωσης. Ακριβή και επαναλήψιμα αποτελέσματα λήφθηκαν τόσο σε πειράματα εντός της ίδιας μέρας όσο και μεταξύ δύο ημερών για όλα τα συστατικά, με εξαίρεση εκείνων του χλωρογενικού οξέος. Ο έλεγχος της σταθερότητας, διάρκειας 30 ημερών, έγινε σε τρία επίπεδα συγκεντρώσεων υπό διάφορες συνθήκες φύλαξης (θερμοκρασία δωματίου, ψυγείο, κατάψυξη). Κάθε συστατικό παρουσίασε διαφορετική συμπεριφορά, όλα όμως εμφάνισαν αξιοσημείωτη σταθερότητα ακόμη και 30 ημέρες μετά, όταν φυλάσσονταν στους -18 οC. Τέλος, ελέγχθηκε το μέγεθος του φαινομένου της μεταφοράς υλικού (carry over) μεταξύ των αναλυτικών κύκλων. Διαπιστώθηκε ότι η μεταφορά υλικού είναι σημαντική και πρέπει να λαμβάνεται υπόψη στην αναλυτική διαδικασία όταν οι συγκεντρώσεις των συστατικών ξεπερνούν το ήμισυ του ULOQ. Η εφαρμογή της μεθόδου έδειξε ότι στο μεθανολικό εκχύλισμα και το έγχυμα του H. perforatum τα κυριότερα συστατικά που προσδιορίστηκαν ήταν τα φλαβονοειδή, εκ των οποίων ο υπεροζίτης βρέθηκε σε μεγαλύτερες ποσότητες. Στο έγχυμα, αν και γενικότερα προσδιορίστηκαν μικρότερες ποσότητες των διαφόρων συστατικών, εντοπίστηκε και χλωρογενικό οξύ το οποίο απουσιάζει από το μεθανολικό εκχύλισμα. Στο μεθανολικό εκχύλισμα της πόας H.vesiculosum κυριότερη ομάδα συστατικών εμφανίζονται τα φλαβονοειδή, με την ισοκερσετίνη και διαπιγενίνη σε μεγαλύτερες ποσότητες. Όσον αφορά στο έλαιο H. perforatum εξετάστηκαν δύο εκχυλιστικές μέθοδοι οι οποίες και ελέγχθηκαν ως προς την αποτελεσματικότητά τους. Στην πρώτη μέθοδο πραγματοποιήθηκε εκχύλιση με χρήση ενός υδατικού διαλύματος και στη δεύτερη με χρήση οξειδίου του πυριτίου ως προσροφητικό υλικό. Αν και καμία δεν είχε ικανοποιητική απόδοση εκχύλισης όπως εδείχθη με προσδιορισμό της ανάκτησης από εμβολιασμένα δείγματα, τα συστατικά που προσδιορίστηκαν σε δύο διαφορετικά έλαια είναι τα φλαβονοειδή κερσετίνη και διαπιγενίνη καθώς και η ναφθοδιανθρόνη ψευδοϋπερικίνη. / Hypericum perforatum has a cosmopolitan distribution in temperate regions. The aereal parts of the plant are collected during the flowering stage, they are dried and they constitute the drug. The most common preparations are the water-alcohol extracts, tinctures and oily extracts and they are used against psychiatric conditions as well as for wound and burn healing. H. perforatum extracts are so widely used, especially in central Europe, that they are among the most popular formulations against depression. In the current master thesis a chromatographic method for the determination of the major bioactive constituents of H.perforatum was developed and validated. This validated method was applied in methanol extract, infusion and oily extract (Hypericum oil) of the herb. The chromatographic separation was performed using a HPLC instrument coupled with a photo diode array detector (DAD) and a C-18 reverse phase (RP) column in a three solvent multistep gradient program. The identified constituents were: chlorogenic acid, rutin, hyperoside, isoquercetin, quercetin, biapigenin, pseudohypericin and hypericin. All of them were completely resolved. The method was validated in accordance with international standards using spiked quantities of standard solutions of chrorogenic acid, rutin, hyperoside, isoquercetin, quercetin and hypericin in a 0,5 mg/mL H.perforatum extract solution. For each of the above constituents a calibration curve was constructed and all of them have shown great linearity. For each constituent the lower and upper limit of quantification (LLOQ and ULOQ) was estimated. The accuracy and precision of the method were determined in four concentration levels. Accurate and precise results were obtained in both intra and interday (between two days) experiments for every constituent, with the exception of chlorogenic acid. The stability test (30 days duration), was performed in three concentration levels under different storage conditions (room temperature, fridge, refrigerator). Every constituent had a different stability behavior, all of them, though, were found having notable stability even after 30 days, when stored at -18 οC. Finally, the carry over effect between analytical circles was estimated. The carry over effect was significant and should be taken into consideration when concentrations are higher than half the ULOQ. The chemical composition of three H. perforatum preparations (methanol extract, infusion, Hypericum oil) and one H.vesiculosum preparation (methanol extract) was investigated. The major constituents, identified in the methanol extract and the infusion of H. perforatum, were the flavonoids, while hyperoside was found in greater amounts among them. Though, smaller amounts of the constituents were identified in the infusion, chlorogenic acid was present, in contrast with the methanol extract. In the methanol extract of H.vesiculosum the flavonoids were found the major group of constituents, with isoquercetin and biapigenin in larger quantities. Regarding the H. perforatum oil, two kinds of extractions were performed and evaluated for their efficiency. In the first one, the extraction was performed using an aqueous solution and the second one using silicon dioxide as an absorptive material. Even though neither extraction was efficient as was proved by recovery test of spiked samples, the constituents identified in two different oil preparations were the flavonoids quercetin and biapigenin and the naphthodianthrone pseudohypericin.

Ferro bisglicinado (Fe-bis-gli) é um aminoácido quelado, formado pela ligação de duas moléculas de glicina a uma molécula de ferro (II), utilizado para prevenção e tratamento da anemia ferropriva. Não há descrição de métodos analíticos em códigos oficiais para o controle de qualidade do ferro bisglicinado em formas farmacêuticas. É comercializado na forma de cápsulas, produzidas por farmácias magistrais e em forma oral líquida. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi a validação de métodos analíticos para o controle qualitativo e quantitativo do Febis- gli em cápsulas e forma oral líquida. A identificação e caracterização do fármaco foram realizadas através da determinação dos caracteres físicos, solubilidade, aquametria, espectrofotometria na região do infravermelho (IV), reações específicas e espectroscopia de Mössbauer. Para a determinação quantitativa foram validados métodos de espectrofotometria na região do visível (VIS), ordem-zero e primeira derivada (VIS-D¹), e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A análise estatística demonstrou equivalência entre os métodos CLAE / VIS para a determinação do teor das cápsulas e entre os métodos CLAE / VIS-D¹ para a determinação do Fe-bis-gli na forma oral líquida. / Ferrous bisglicycinate (Fe-bis-gli) is an amino acid chelate which is formed by the binding of two molecules of glycine to one molecule of Fe(II), used for prevention and treatment of iron deficiency. There are no analytical methods in official codes for the quality control of Fe-bis-gli in pharmaceutical forms; however it is marketed in the form of capsules , produced by compounding pharmacies and as oral liquid form. The aim of this work was the validation of analytical methods for the qualitative and quantitative analysis of Fe-bis-gli capsules and oral liquid form. The identification and characterization of the drug were performed through the determination of physical characteristics, solubility, water, infrared (IR), specific reactions and Mössbauer spectroscopy. For the quantitative determination VIS spectrophotometry methods have been validated, zero-order and first derivative (VIS-D¹) and high performance liquid chromatography (HPLC). Statistical analysis showed that HPLC / VIS methods were equivalent to assay capsules and HPLC / VIS-D¹ methods were equivalent to assay Fe-bis-gli in oral liquid form.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-21Bitstream added on 2014-06-13T19:32:33Z : No. of bitstreams: 1 correa_jcr_me_arafcf.pdf: 630725 bytes, checksum: 5a65d5833cac2449eb1b9928587306b1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O antifúngico fluconazol é um fármaco sintético, desenvolvido na década de 1980, e o primeiro a integrar a classe dos triazóis. Este trabalho teve como objetivo desenvolver métodos analíticos seletivos e indicativos de estabilidade para fluconazol na forma de cápsulas, incluindo métodos físico-químicos e microbiológicos, realizar estudos de dissolução e de estabilidade. Os métodos de análise quantitativos empregados e validados foram: (i) espectrofotometria derivada de primeira ordem no UV a 268 nm, na faixa de concentração de 150–350 μg/mL, o teor médio nas cápsulas encontrado foi de 96,42 %; (ii) CLAE, coluna de C18 e fase móvel composta por metanol:água (60:40, V/V), o teor médio obtido foi de 97,35 %; (iii) determinação da potência microbiológica, pelo método de difusão em ágar cilindros em placa, utilizando cepas de /Candida albicans/, em que a atividade média do fluconazol em cápsulas foi 88,96%. Todos esses métodos foram validados e apresentaram ótima seletividade, precisão e exatidão. O método por CLAE é capaz de separar o fármaco de seu produto de degradação. O teste de dissolução foi desenvolvido e validado utilizando HCl 0,1 /M/ como meio de dissolução e cesto a 75 rpm. O perfil de dissolução obtido é discriminativo e apresenta ótima precisão e exatidão. O estudo de estresse do fluconazol frente à degradação ácida, alcalina, oxidativa, térmica, fotolítica e em câmara climática (40 ºC/75%) mostrou a oxidação como fator importante, sendo a única condição a apresentar produto de degradação. O decaimento do teor do fármaco em amostras sob estudo de estabilidade conduzido em estufa, câmara climática e luz-UVC, foi determinado por CLAE e por ensaio microbiológico. Os resultados foram muito discrepantes, em que o teor da substância ativa se manteve acima de 90%, mas sua atividade apresentou decaimento significativo... / The antifungal agent fluconazole is a synthetic drug, developed in the 1980s, and first joined the class of triazoles. This study aimed to develop selective analytical methods and stability indicated method for fluconazole in capsules, including physical-chemical, microbiological, dissolution and stability studies. The methods of quantitative analysis employed and validated were: (i) first order derivative spectrophotometry in the UV at 268 nm in the concentration range of 150 - 350μg/mL. The average level found in the capsules was 96.42% (ii ) HPLC, C18 column and mobile phase consisting of methanol: water (60:40, V / V), the mean level obtained was 97.35%, (iii) determining the potency microbiological diffusion method in agar cylinders plate, using strains of Candida albicans ATCC 90028, where the average activity of fluconazole capsules was 88.96%. All these methods were validated and showed good selectivity, precision and accuracy. The HPLC method is able to separate the drug from its degradation product. The dissolution test was developed and validated using 900 mL of 0.1 M HCl as dissolution medium and basket at 75 rpm. The dissolution profile obtained is discriminatory and it has highly precise and accurate. The stress study of fluconazole against the degradation acid, alkaline, oxidative, thermal, photolytic and climate chamber (40 ° C/75%) showed the oxidation as an important factor, being the only condition to show a degradation product. The decrease of the drug in samples submitted to preliminary stability (conducted in stove, climate chamber and UVC-light) was determined by HPLC and microbiological assay. The results were very inconsistent in which the concentration of the drug remained above 90% but its activity had significant decrease showing approximately 30% activity. Fluconazole is an unstable drug and changes in its molecule lead to increased absorption of UV radiation... (Complete abstract click electronic access below)

Ferro bisglicinado (Fe-bis-gli) é um aminoácido quelado, formado pela ligação de duas moléculas de glicina a uma molécula de ferro (II), utilizado para prevenção e tratamento da anemia ferropriva. Não há descrição de métodos analíticos em códigos oficiais para o controle de qualidade do ferro bisglicinado em formas farmacêuticas. É comercializado na forma de cápsulas, produzidas por farmácias magistrais e em forma oral líquida. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi a validação de métodos analíticos para o controle qualitativo e quantitativo do Febis- gli em cápsulas e forma oral líquida. A identificação e caracterização do fármaco foram realizadas através da determinação dos caracteres físicos, solubilidade, aquametria, espectrofotometria na região do infravermelho (IV), reações específicas e espectroscopia de Mössbauer. Para a determinação quantitativa foram validados métodos de espectrofotometria na região do visível (VIS), ordem-zero e primeira derivada (VIS-D¹), e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A análise estatística demonstrou equivalência entre os métodos CLAE / VIS para a determinação do teor das cápsulas e entre os métodos CLAE / VIS-D¹ para a determinação do Fe-bis-gli na forma oral líquida. / Ferrous bisglicycinate (Fe-bis-gli) is an amino acid chelate which is formed by the binding of two molecules of glycine to one molecule of Fe(II), used for prevention and treatment of iron deficiency. There are no analytical methods in official codes for the quality control of Fe-bis-gli in pharmaceutical forms; however it is marketed in the form of capsules , produced by compounding pharmacies and as oral liquid form. The aim of this work was the validation of analytical methods for the qualitative and quantitative analysis of Fe-bis-gli capsules and oral liquid form. The identification and characterization of the drug were performed through the determination of physical characteristics, solubility, water, infrared (IR), specific reactions and Mössbauer spectroscopy. For the quantitative determination VIS spectrophotometry methods have been validated, zero-order and first derivative (VIS-D¹) and high performance liquid chromatography (HPLC). Statistical analysis showed that HPLC / VIS methods were equivalent to assay capsules and HPLC / VIS-D¹ methods were equivalent to assay Fe-bis-gli in oral liquid form.

Ferro bisglicinado (Fe-bis-gli) é um aminoácido quelado, formado pela ligação de duas moléculas de glicina a uma molécula de ferro (II), utilizado para prevenção e tratamento da anemia ferropriva. Não há descrição de métodos analíticos em códigos oficiais para o controle de qualidade do ferro bisglicinado em formas farmacêuticas. É comercializado na forma de cápsulas, produzidas por farmácias magistrais e em forma oral líquida. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi a validação de métodos analíticos para o controle qualitativo e quantitativo do Febis- gli em cápsulas e forma oral líquida. A identificação e caracterização do fármaco foram realizadas através da determinação dos caracteres físicos, solubilidade, aquametria, espectrofotometria na região do infravermelho (IV), reações específicas e espectroscopia de Mössbauer. Para a determinação quantitativa foram validados métodos de espectrofotometria na região do visível (VIS), ordem-zero e primeira derivada (VIS-D¹), e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A análise estatística demonstrou equivalência entre os métodos CLAE / VIS para a determinação do teor das cápsulas e entre os métodos CLAE / VIS-D¹ para a determinação do Fe-bis-gli na forma oral líquida. / Ferrous bisglicycinate (Fe-bis-gli) is an amino acid chelate which is formed by the binding of two molecules of glycine to one molecule of Fe(II), used for prevention and treatment of iron deficiency. There are no analytical methods in official codes for the quality control of Fe-bis-gli in pharmaceutical forms; however it is marketed in the form of capsules , produced by compounding pharmacies and as oral liquid form. The aim of this work was the validation of analytical methods for the qualitative and quantitative analysis of Fe-bis-gli capsules and oral liquid form. The identification and characterization of the drug were performed through the determination of physical characteristics, solubility, water, infrared (IR), specific reactions and Mössbauer spectroscopy. For the quantitative determination VIS spectrophotometry methods have been validated, zero-order and first derivative (VIS-D¹) and high performance liquid chromatography (HPLC). Statistical analysis showed that HPLC / VIS methods were equivalent to assay capsules and HPLC / VIS-D¹ methods were equivalent to assay Fe-bis-gli in oral liquid form.

Este trabalho apresenta estudo sobre o voriconazol, antifúngico de amplo espectro liberado para tratamento de infecções fúngicas invasivas no ano de 2002, focado no controle de qualidade e estudo de estabilidade. Foram realizados testes, ainda não citados na literatura, que visaram à caracterização do fármaco tais como: espectrofotometria na região do infravermelho, espectroscopia de ressonância magnética nuclear de hidrogênio e de carbono. Os seguintes métodos de análise quantitativa do fármaco em comprimidos foram desenvolvidos e validados: espectrofotometria na região do UV, cromatografia a líquido de alta eficiência e ensaio microbiológico - método de difusão em ágar. Todos os métodos foram avaliados frente aos parâmetros de linearidade, exatidão e precisão. A especificidade foi avaliada nos métodos de CLAE e UV, pela análise de placebo (CLAE e UV) e testes de degradação forçada (CLAE). A robustez foi avaliada no método de CLAE. Os resultados obtidos através destes métodos foram comparados estatisticamente por ANOVA, que indicou não haver diferenças estatisticamente significativas entre os mesmos; no entanto, os métodos por CLAE e ensaio microbiológico possibilitam a quantificação do voriconazol em amostras degradadas. Foram estudadas as estabilidades térmica, fotoquímica e química do voriconazol. Quimicamente, o fármaco é degradado intensamente em meio alcalino e em menor extensão em meios ácido, oxidante e neutro. Na temperatura testada (60 ºC), o voriconazol é estável em estado sólido e instável em solução metanólica (teor de 25% em 21 dias). O fármaco é instável às radiações UV-C, em maior grau, e UV-A (degradação menos intensa), tanto em solução quanto em estado sólido. Em ambas, a degradação é favorecida se o fármaco estiver em solução. Também foi estudada a estabilidade da formulação injetável, como produto reconstituído e em soluções para infusão. Verificou-se que o prazo de validade da solução reconstituída de 24 horas, proposto pelo laboratório produtor, pode ser estendido para oito dias. As soluções para infusão do voriconazol em cloreto de sódio 0,9% ou glicose 5%, preparadas em bolsas de PVC, devem ser administradas logo após sua preparação, se mantidas em temperatura ambiente. Mantidas sob refrigeração, são estáveis por 11 e nove dias, respectivamente. Isolou-se e identificou-se o produto de degradação majoritário observado durante os estudos de estabilidade, que corresponde a 1- (2,4-difluorfenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-il)-1-etanona. Foi constatado que os produtos de degradação do voriconazol não apresentam atividade antifúngica; sendo assim, cuidados em relação à temperatura e luz devem ser tomados ao armazenar soluções do fármaco. / This study is focused on quality control and stability evaluation of voriconazole, a broad spectrum antifungal agent, approved for treatment of invasive fungal infections in 2002. The drug was characterized by tests as IV spectrophotometry, nuclear magnetic ressonance spectrometry of hydrogen and carbon, not refered until the moment. The following methods, applied to the assay of voriconazole in tablets were developed and validated: UV spectrophotometry, HPLC assay and microbiological assay, using the cylinder-plate method. All of them were evaluated in the following parameters: linearity, accuracy and precision. The specificity was evaluated in HPLC and UV assays, by analysis of excipients and/or degradated samples. The robustness was evaluated in the HPLC assay. The results obtained in the three methods were compared by ANOVA, which indicated that they are equivalent. However, only HPLC and microbiological assays could be used in the quantitation of voriconazole in degradated samples. The stability of voriconazole under temperature, radiation and different chemical mediums was evaluated. The drug is extensively degradated under alkaline medium, being degradated in less extension under acidic, neutral and oxidant mediums. Voriconazole is stable in the tested temperature (60 ºC) in solid state, but is unstable in solution (loss of 75%, in 21 days). The drug is unstable to UV-C and UV-A radiations, both in solution or in solid state, being the degradation on UV-C more intense. The degradation is higher if the drug is in solution. The stability of the injectable formulation was studied, as reconstituted product and infusion solutions in PVC bags. Voriconazole reconstituted product was stable for eight days, stored at 4-7 ºC. As infusion solution, in 0.9% sodium chloride or in 5% dextrose, stored at room temperature, the drug should be administered only just after preparation. Stored at 4-7 ºC, the infusion solutions were stable for 11 and 9 days, respectivelly. The main degradation product observed in the stability studies was isolated and identified. It corresponds to 1-(2,4-difluorophenyl)-2-(1H-1,2,4- triazol-1-yl)-1-ethanone. It was comproved that the voriconazole degradation xxx products don’t have antifungal activity. So, special care should be taken in relation to temperature and radiation, when solutions of voriconazole are stored.

Este trabalho apresenta estudo sobre o voriconazol, antifúngico de amplo espectro liberado para tratamento de infecções fúngicas invasivas no ano de 2002, focado no controle de qualidade e estudo de estabilidade. Foram realizados testes, ainda não citados na literatura, que visaram à caracterização do fármaco tais como: espectrofotometria na região do infravermelho, espectroscopia de ressonância magnética nuclear de hidrogênio e de carbono. Os seguintes métodos de análise quantitativa do fármaco em comprimidos foram desenvolvidos e validados: espectrofotometria na região do UV, cromatografia a líquido de alta eficiência e ensaio microbiológico - método de difusão em ágar. Todos os métodos foram avaliados frente aos parâmetros de linearidade, exatidão e precisão. A especificidade foi avaliada nos métodos de CLAE e UV, pela análise de placebo (CLAE e UV) e testes de degradação forçada (CLAE). A robustez foi avaliada no método de CLAE. Os resultados obtidos através destes métodos foram comparados estatisticamente por ANOVA, que indicou não haver diferenças estatisticamente significativas entre os mesmos; no entanto, os métodos por CLAE e ensaio microbiológico possibilitam a quantificação do voriconazol em amostras degradadas. Foram estudadas as estabilidades térmica, fotoquímica e química do voriconazol. Quimicamente, o fármaco é degradado intensamente em meio alcalino e em menor extensão em meios ácido, oxidante e neutro. Na temperatura testada (60 ºC), o voriconazol é estável em estado sólido e instável em solução metanólica (teor de 25% em 21 dias). O fármaco é instável às radiações UV-C, em maior grau, e UV-A (degradação menos intensa), tanto em solução quanto em estado sólido. Em ambas, a degradação é favorecida se o fármaco estiver em solução. Também foi estudada a estabilidade da formulação injetável, como produto reconstituído e em soluções para infusão. Verificou-se que o prazo de validade da solução reconstituída de 24 horas, proposto pelo laboratório produtor, pode ser estendido para oito dias. As soluções para infusão do voriconazol em cloreto de sódio 0,9% ou glicose 5%, preparadas em bolsas de PVC, devem ser administradas logo após sua preparação, se mantidas em temperatura ambiente. Mantidas sob refrigeração, são estáveis por 11 e nove dias, respectivamente. Isolou-se e identificou-se o produto de degradação majoritário observado durante os estudos de estabilidade, que corresponde a 1- (2,4-difluorfenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-il)-1-etanona. Foi constatado que os produtos de degradação do voriconazol não apresentam atividade antifúngica; sendo assim, cuidados em relação à temperatura e luz devem ser tomados ao armazenar soluções do fármaco. / This study is focused on quality control and stability evaluation of voriconazole, a broad spectrum antifungal agent, approved for treatment of invasive fungal infections in 2002. The drug was characterized by tests as IV spectrophotometry, nuclear magnetic ressonance spectrometry of hydrogen and carbon, not refered until the moment. The following methods, applied to the assay of voriconazole in tablets were developed and validated: UV spectrophotometry, HPLC assay and microbiological assay, using the cylinder-plate method. All of them were evaluated in the following parameters: linearity, accuracy and precision. The specificity was evaluated in HPLC and UV assays, by analysis of excipients and/or degradated samples. The robustness was evaluated in the HPLC assay. The results obtained in the three methods were compared by ANOVA, which indicated that they are equivalent. However, only HPLC and microbiological assays could be used in the quantitation of voriconazole in degradated samples. The stability of voriconazole under temperature, radiation and different chemical mediums was evaluated. The drug is extensively degradated under alkaline medium, being degradated in less extension under acidic, neutral and oxidant mediums. Voriconazole is stable in the tested temperature (60 ºC) in solid state, but is unstable in solution (loss of 75%, in 21 days). The drug is unstable to UV-C and UV-A radiations, both in solution or in solid state, being the degradation on UV-C more intense. The degradation is higher if the drug is in solution. The stability of the injectable formulation was studied, as reconstituted product and infusion solutions in PVC bags. Voriconazole reconstituted product was stable for eight days, stored at 4-7 ºC. As infusion solution, in 0.9% sodium chloride or in 5% dextrose, stored at room temperature, the drug should be administered only just after preparation. Stored at 4-7 ºC, the infusion solutions were stable for 11 and 9 days, respectivelly. The main degradation product observed in the stability studies was isolated and identified. It corresponds to 1-(2,4-difluorophenyl)-2-(1H-1,2,4- triazol-1-yl)-1-ethanone. It was comproved that the voriconazole degradation xxx products don’t have antifungal activity. So, special care should be taken in relation to temperature and radiation, when solutions of voriconazole are stored.

Este trabalho objetivou o desenvolvimento e validação de métodos analíticos para determinação de fexofenadina em cápsulas e comprimidos revestidos e o estudo de fotoestabilidade do fármaco. A determinação da faixa de fusão e a espectrofotometria no infravermelho permitiram identificar fexofenadina substância química de referência. Os métodos por cromatografia em camada delgada, espectrofotometria no ultravioleta (UV), cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e eletroforese capilar (EC) foram utilizados para análise qualitativa do fármaco nas formas farmacêuticas. A determinação quantitativa foi realizada através da validação dos métodos por UV e CLAE para cápsulas e comprimidos e EC para cápsulas, avaliando-se os parâmetros descritos pelas guias de validação. Os métodos propostos não apresentaram diferença estatística para um nível de significância de 1%. O teste de dissolução foi desenvolvido e validado utilizando HCl 0,01 M como meio de dissolução, cestas a 100 rpm e pás a 75 rpm para cápsulas e comprimidos revestidos, respectivamente. Perfis de dissolução de cápsulas dos medicamentos referência e similar e comprimidos revestidos dos medicamentos referência, similar e genérico foram realizados e comparados através dos fatores de diferença e semelhança e da eficiência de dissolução e não apresentaram-se semelhantes. Estudo preliminar de estabilidade de fexofenadina frente à degradação ácida, alcalina, oxidativa, térmica e fotolítica mostrou a oxidação e a luz como fatores importantes de degradação. A cinética de fotodegradação de fexofenadina em soluções metanólica e aquosa demonstrou cinética de segunda ordem de reação. A estabilidade acelerada da fexofenadina foi realizada utilizando-se soluções metanólicas pH=6 e pH=11, as quais foram expostas às lâmpadas metal haleto e UVC 254 nm, havendo formação dos produtos majoritários, denominados PD-21 e PD-37, os quais foram isolados por cromatografia em coluna e CCD preparativa. A fotólise do pó de comprimidos e de comprimidos demonstrou haver formação dos mesmos produtos de degradação obtidos em solução. Os produtos foram identificados por ressonância magnética nuclear e espectrometria de massas como derivados benzofenona (PD-21) e isopropílico (PD-37) da fexofenadina. / The aim of this study was the development and validation of analytical methods to the determination of fexofenadine in capsules and coated tablets and the photostability study of the drug. The melting range determination and infrared spectrophotometry allowed fexofenadine standard reference identification. Methods of thin-layer chromatography (TLC), ultraviolet spectrophotometry (UV), high performance liquid chromatography (HPLC), and capillary electrophoresis (CE) were employed to the qualitative analysis of the drug in pharmaceutical formulations. The quantitative determination was performed through the validation of UV and HPLC for capsules and coated tablets, and CE for capsules, evaluating the guidances validation parameters. The proposed methods were not statistically different to a 1% significance level. The dissolution test was developed and validated using HCl 0,01 M as dissolution medium, basket at 100 rpm and paddle at 75 rpm to capsules and coated tablets, respectively. Dissolution profiles of reference and similar capsule products and reference, similar and generic coated tablets products were performed and compared using difference factor, similarity factor and the dissolution efficiency, showing not similarity. Preliminary stability study of fexofenadine through acid, alkaline, oxidative, thermal, and photolytic degradation shows sensibility to oxidation and light. The kinetic of photodegradation of fexofenadine in methanol and water solutions show second order kinetic of reaction. The accelerated stability was evaluated using fexofenadine methanolic solutions pH=6 and pH=11, which were exposed to a metal halide lamp and to a fluorescent lamp UVC 254 nm, giving two majority degradation products, assigned PD-21 and PD-37. The separation was carried out by HPLC and TLC. The products were isolated by column chromatography and preparative TLC techniques. The analysis of the powder of tablets and tablets, which were exposed to light, showed the same degradation products presented for solutions. The majority degradation products of fexofenadine were identified by nuclear magnetic resonance and mass spectrometry as a benzophenone derivative (PD-21) and isopropyl derivative (PD-37).